全 文 ：［收稿日期］ 20121227(008)
［基金项目］ 国家自然科学基金项目(81073012)
［第一作者］ 尚志春，硕士，从事天然活性物质的研究，Tel:
13998621968，E-mail:shang8102016@ 163. com
［通讯作者］ * 王永奇，教授，博士，从事天然活性物质的研究，
Tel:0411-87403834，E-mail:dalianwyq@ 163. com
西南山茶果皮化学成分
尚志春，宋明明，史丽颖，于大永，唐玲，王永奇*
( 大连大学药物研究所，辽宁 大连 116622)
［摘要］ 目的:研究西南山茶果皮的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20 柱色谱等方法进行分离纯化，
根据波谱学数据和理化性质进行结构鉴定。结果:从西南山茶果皮乙酸乙酯萃取物中分离鉴定了 7 个化合物，分别为山柰酚
(1)、没食子酸(2)、原儿茶酸(3)、齐墩果酸(4)、胡萝卜苷(5)、β-谷甾醇(6)、羽扇豆醇(7)。结论:化合物 1 ～ 7 均首次从西
南山茶果皮中分离得到。
［关键词］ 西南山茶;果皮;化学成分
［中图分类号］ Ｒ284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)17-0085-03
［doi］ 10． 11653 /syfj2013170085
［网络出版地址］ http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /11． 3495． Ｒ． 20130625． 0945． 003． html
［网络出版时间］ 2013-06-25 9:45
Ｒesearch on Chemical Constituents of Peels of Camellia pitardii
SHANG Zhi-chun，SONG Ming-ming，SHI Li-ying，YU Da-yong，TANG Ling，WANG Yong-qi*
(Institute of Madica of Dalian University，Dalian 116622，China)
［Abstract］ Objective:To study the chemical constituents of the peels of Camellia pitardii ． Method:
Chemical constituents were isolated by various chromatographic methods and were identified by physicochemical
characters and spectroscopic analysis or comparison with standard compounds． Ｒesult:From the ethyl acetate
extract of the peels of C． pitardii，seven compounds were isolated and identified as kaempferol (1) ，gallic acid
(2) ，protocatechuicacid (3) ，oleanolic acid (4) ，daucosterol (5) ，β-sitosterol (6) ，lupeol (7)．
Conclusion:Compounds 1-7 were obtained from the peels of C． pitardii for the first time．
［Key words］ Camellia pitardii;peels;chemical constituents
西南山茶 Camellia pitardii Sealy 系山茶科山茶
属红山茶组植物，亦称野山茶，载于《新华草本纲
要》，为《中华本草》和《滇南本草》所收载，具有活血
止血、收敛止泻、解毒敛疮之功能，在云南各地分布
甚广，资源非常丰富。本课题组先后对西南山茶的
叶、花、种子的化学成分［1-2］以及抗 IgE 介导Ⅰ型过
敏的活性［3-4］进行了研究，发现种子醇提物、果皮醇
提物活性最强。为了进一步研究其抗过敏的物质基
础，本文为对西南山茶果皮的化学成分进行了研究。
1 仪器与试剂
XT4A型显微熔点测定仪(温度未校正，上海荆
和分析仪器有限公司) ，BrukerAM-500 型核磁共振
波谱 仪 (瑞 士 布 鲁 克 公 司，TMS 内 标) ，
LABOＲOTA4000 型旋转蒸发仪(德国海道夫公司) ，
ZQ2000 型液相色谱-质谱仪(美国 Waters公司)。
薄层色谱及柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂) ，
Sephadex LH-20型葡聚糖凝胶(美国 GE公司) ，反相
硅胶(日本 YMC公司) ，95%乙醇(工业级，大连)。
西南山茶果皮 2009 年采于云南鹤庆，经中国科
学院昆明植物研究所裴盛基教授鉴定为西南山茶
Camellia pitardii Coh． St．的果皮，标本现存于大连大
学药物研究所，标本号 20090303。
2 提取和分离
取干燥西南山茶果皮 5 kg，粉碎成粗粉，用
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2013 年 9 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 17
Sep．，2013
95%乙醇回流提取 3 次，每次 3 h，过滤后减压浓缩
干燥，得到醇提物 613. 5 g，将取醇提物 319. 5 g 混
悬于适量水中，先用石油醚萃取多次，得石油醚萃取
物 29. 5 g，挥去水层残留的石油醚再经乙酸乙酯萃
取，得乙酸乙酯萃取物 146. 9 g，乙酸乙酯萃取率
达 37. 5%。
乙酸乙酯萃取物(127 g)经硅胶柱(200 ～ 300
目)色谱分离，以三氯甲烷-甲醇系统(40 ∶ 1 ～ 1 ∶ 1)
梯度洗脱，收集流份，TLC检识，合并相同组分，得到
6 个组分(Fr． 1 ～ Fr． 6)。Fr． 1 经硅胶柱色谱分
离，以氯仿-甲醇系统(80∶ 1 ～ 5∶ 1)梯度洗脱，得化合
物 4(20 mg) ，6(10 mg)。Fr． 2 经硅胶柱色谱分离，
以三氯甲烷-甲醇系统(50∶ 1 ～ 5∶ 1)梯度洗脱，再用
甲醇-三氯甲烷重结晶得化合物 3(20 mg) ，7(5
mg)。Fr． 3 经硅胶柱色谱分离，以三氯甲烷-甲醇系
统(20∶ 1)洗脱，甲醇-三氯甲烷重结晶得化合物 5
(30 mg)。Fr． 4 经反向硅胶柱色谱分离，得化合物
1(5 mg)。Fr． 5 经硅胶柱色谱分离，以三氯甲烷-甲
醇系统(10∶ 1)洗脱，再经 Sephadex LH-20 柱色谱纯
化得化合物 2(5 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 黄色粉末(甲醇) ，mp 271 ～ 272 ℃
盐酸镁粉反应显阳性，与三氯化铝反应呈黄绿色荧
光，示为黄酮类化合物。1H-NMＲ (CD3OD，500
MHZ) ，δH:6. 09(1 H，d，J = 2. 1 Hz，H-6) ，6. 32(1
H，d，J = 2. 1 Hz，H-8) ，6. 82(2 H，dd，J = 8. 8 Hz，H-
3，H-5) ，7. 97(2 H，dd，J = 8. 8 Hz，H-2，H-6)。1H-
NMＲ数据与文献［5］对照基本一致，且与对照品山
奈酚共薄层，在 3 种溶剂系统下 Ｒf 值一致，故该化
合物 1 鉴定为山奈酚(kaempferol)。
化合物 2 白色针状结晶(甲醇) ，mp 236 ～
238 ℃。茴香醛-浓硫酸反应显橙红色，NaOH试液反
应显黄色，FeCl3 溶液反应显浅蓝色。
1H-NMＲ
(CD3OD，500 MHZ) ，δH:7. 06(2H，s，H-2，6)。
13 C-
NMＲ(125 MHz，CD3OD) ，δC:170. 3(-COOH) ，122. 1
(C-1) ，110. 5(C-2，6) ，146. 5(C-3，5) ，139. 5(C-4)。
以上数据与文献报道［6］基本一致，故确定化合物 2
为没食子酸(gallic acid)。
化合物 3 白色针状晶体(甲醇) ，mp 192 ～
194 ℃。1H-NMＲ(CD3OD，500 MHz) ，δH:7. 45(1H，
d，J = 2. 0 Hz，H-2) ，6. 81(1H，d，J = 8. 0 Hz，H-5) ，
7. 42(1H，dd，J = 2. 0，8. 0 Hz，H-6)。13 C-NMＲ(125
MHz，CD3OD) ，δC:170. 5(-COOH) ，123. 4(C-1) ，
117. 6(C-2) ，146. 2 (C-3) ，151. 5 (C-4) ，115. 4
(C-5) ，123. 9(C-6)。以上数据与文献报道［7］基本
一致，且与对照品原儿茶酸共薄层，在 3 种溶剂系统
下 Ｒf值一致，故鉴定化合物 3 为原儿茶酸。
化合物 4 白色针状晶体(三氯甲烷) ，mp
308 ～ 309 ℃。Liebermann-Burchard 反应呈阳性。1H-
NMＲ(CDCl3，500 MHz) ，δH:0. 77，0. 79，0. 91，0. 93，
0. 95，0. 97，1. 12 分别为 7 个甲基质子信号，且均为
s峰，δH:3. 24(1 H，brs，H-3) ，5. 26(1 H，t，J = 3. 5
Hz，H-12) ，2. 85(1 H，dd，J = 3. 3，11. 7 Hz，H-18) ，
推测可能为齐墩果酸。13C-NMＲ(125 MHz，CD3OD) ，
δC:42. 2(C-1) ，56. 0(C-2) ，78. 6(C-3) ，39. 4(C-4) ，
46. 6(C-5) ，19. 1(C-6) ，28. 6(C-7) ，34. 4(C-8) ，
46. 4(C-9) ，33. 7(C-10) ，24. 3(C-11) ，123. 6(C-
12) ，145. 5(C-13) ，40. 3(C-14) ，28. 2(C-15) ，23. 7
(C-16) ，42. 5(C-17) ，37. 8(C-18) ，40. 6(C-19) ，
28. 6(C-20) ，33. 4(C-21) ，33. 8(C-22) ，48. 7(C-
23) ，15. 5(C-24) ，16. 6(C-25) ，17. 8(C-26) ，26. 3
(C-27) ，178. 9(C-28) ，31. 5(C-29)23. 9(C-30)。以
上数据与文献报道［8-10］基本一致，且与对照品齐
墩果酸共薄层，在 3 种溶剂系统下 Ｒf 值一致，故确
定化合物 4 为齐墩果酸(oleanolic acid)。
化合物 5 白色粉末(三氯甲烷) ，mp ＞ 300 ℃。
Liebermann-Burchard 反应显绿色，Molish 反应显阳
性，提示为甾苷类化合物。与对照品胡萝卜苷共薄
层，在 3 种不同溶剂系统下 Ｒf 值一致，且混合熔点
不下降，故鉴定化合物 5 为胡萝卜苷(daucosterol)。
化合物 6 白色针状晶体(三氯甲烷) ，mp 146
～ 148 ℃。Liebermann-Burchard 反应显绿色，提示为
甾体类化合物。与对照品 β-谷甾醇共薄层，在 3 种
不同溶剂系统下 Ｒf 值一致，且混合熔点不下降，故
鉴定化合物 6 为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 7 白色针状结晶(丙酮) ，mp 174 ～
178 ℃。Liebermann-Burchard 反应呈阳性。1H-NMＲ
(500 MHz，CDCl3) ，δH:3. 21(1H，m，H-3) ，0. 98(3H，
s，H-23) ，0. 75(3H，s，H-24) ，0. 93(3H，s，H-25) ，1. 14
(3H，s，H-26) ，0. 95(3H，s，H-27) ，0. 85(3H，s，H-28) ，
4. 67(1H，d，J = 2. 2 Hz，H-29) ，4. 55(1H，d，J = 2. 2
Hz，H-29) ，1. 63(3H，s，H-30)。且与羽扇豆醇对照品
共薄层，3 种溶剂系统下 Ｒf 值一致，1H-NMＲ 数据与
文献［11］报道的羽扇豆醇谱图数据基本一致，故确定
该化合物 7为羽扇豆醇(lupeol)。
［参考文献］
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 17
Sep．，2013
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
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［责任编辑 邹晓翠］
［收稿日期］ 20121106(010)
［基金项目］ 国家科技支撑计划项目(2011BAI13B03)
［第一作者］ 何丹，硕士，讲师，从事药物分析研究，Tel:13102347970，E-mail:ildoctor@ 163. com
［通讯作者］ * 张景勍，博士，研究员，从事药物制剂研究，E-mail:zjqrae01@ 163. com，Tel:13308300303
UPLC法测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷的含量
何丹1，杨林2，秦少容3，张景勍1*
( 1. 重庆医科大学药学院，重庆 400016; 2. 重庆市食品药品检验所，重庆 401121;
3. 太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，重庆 408000)
［摘要］ 目的:建立以超高效液相色谱(UPLC)法测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷含量的方法。方法:色谱柱
ACQUITY UPLC BEH Cl8(2. 1 mm × 50 mm，1. 7 μm) ，流动相水-甲醇不同比例梯度洗脱，柱温 30 ℃，流速 0. 5 mL·min
－1，检测
波长 254 nm。结果:尿苷在 2. 033 ～ 20. 33 mg·L －1线性关系良好，回归方程为 Y = 16 788X － 3 556(r = 0. 999 9) ，平均回收率
98. 65%，ＲSD 2. 12%;鸟苷在 1. 098 ～ 10. 98 mg·L －1线性关系良好，回归方程为 Y = 25 378X － 325(r = 0. 999 9) ，平均回收率
98. 21%，ＲSD 2. 32%;腺苷在 0. 201 2 ～ 2. 012 mg·L －1线性关系良好，回归方程为 Y = 30 800X － 59(r = 0. 999 9) ;平均回收率
98. 54%，ＲSD 1. 91%。结论:该方法准确、快速、可靠，能有效地测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷的含量。
［关键词］ 半夏;超高效液相色谱;尿苷;鸟苷;腺苷
［中图分类号］ Ｒ284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)17-0087-03
［doi］ 10． 11653 /syfj2013170087
Determination of Content of Uridine，Guanosine and
Adenosine in Pinellia ternata by UPLC
HE Dan1，YANG Lin2，QIN Shao-rong3，ZHANG Jing-qing1*
(1. College of Pharmacy，Chongqing Medical University，Chongqing 400016，China;
2. Chongqing Institute for Food and Drug Control，Chongqing 401121，China;
3. Taiji Chongqing Fuling Pharmaceutical Group Co． LTD，Chongqing 408000，China)
［Abstract］ Objective:To establish an ultra performance liquid chromatography (UPLC)method for
detecting content of uridine，guanosine and adenosine in Pinellia ternata． Method:ACQUITY UPLC BEH Cl8
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第 19 卷第 17 期
2013 年 9 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 17
Sep．，2013