全 文 ：文章编号:1000-1573(2006)04-0041-03
生长调节物质对黑果腺肋花楸试管苗
增殖和生根的影响
李冬杰1 , 　张进献2 , 　魏景芳1
(1.河北科技大学 生命科学与工程学院 , 河北 石家庄 050018;2.河北省林业局 , 河北 石家庄 050081)
摘要:研究了不同种类植物生长调节物质对黑果腺肋花楸试管苗增殖和生根的影响 , 结果表明:KT 对黑果腺肋
花楸试管苗的增殖无效果;MS+0.5 mg L 6-BA+0.2 mg L IBA 对黑果腺肋花楸试管苗的增殖 、继代培养效
果最好;IBA的生根效果优于 NAA ,尤其是 1 2 MS+0.4 mg L IBA表现最好。
关　键　词:生长调节物质;黑果腺肋花揪;试管苗;增殖;生根
中图分类号:S 792.25　　　　　　　　文献标识码:A
Effects of plant growth regulators on proliferation and
rooting of Aronia melanocarpa in vitro culture
LI Dong-Jie1 , ZHANG Jin-Xian2 , WEI Jing-Fang1
(1.Department of Biological Science and Engineering , Hebei University o f Science and Technology ,
Shijiazhuang 050018 , China;2.Forestry Bureau of Hebei P rovince , Shijiazhuang 050081 , China)
Abstract:To study effects of different kinds of plant g row th regulators on proliferation and rooting
of Aronia melanocarpa in vi tro culture different kinds and combinations of plant grow th regulators
were compared of their ef fects.The results show ed that KT could no t improve the g row th prolifera-
tion when the test-tube seedings of Aronia melanocarpa were cultured.MS+0.5 mg L 6-BA+
0.2 mg L IBA could improve proliferating , and the ef fect w as the best.The effect of IBA was bet-
ter than that of NAA , and 1 2MS+0.4 mg LIBA was the most eff icient.
Key words:plant g row th regulato rs;Aronia melanocarpa ;test-tube seedings;proliferation;ro-
o ting
　　黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)原产美
国 ,属蔷薇科腺肋花楸属落叶小灌木 ,高 1.5 ～ 3 m ,
羽状单叶 、复伞状花序 、入秋叶色变红 ,抗旱抗病耐
寒;果实黑色球形 ,直径 1.5 cm 左右 ,果肉富含维生
素 、类黄硐化合物等多种营养成分 ,果实及加工制品
对心脑血管疾病防治有特殊功效 ,果实还可加工果
汁 、果酱 、罐头 。黑果腺肋花揪是集食用 、药用 、园
林 、生态于一身的珍贵树种[ 1] 。由于该树种从国外
引进 ,数量有限 ,随着需求量增加 ,仅靠传统的育苗
方法远不能满足市场需要[ 2] 。因此 ,黑腺肋花楸的
组织培养和快速繁殖可大大提高苗木的繁殖系数 ,
弥补传统育苗手段的不足[ 3-4] 。本试验主要从生长
调节物质调控的角度探讨黑腺肋花楸试管苗的增殖
和生根 ,为其组织培养与快速繁殖提供参考。
　收稿日期:2006-05-01
基金项目:河北省科技厅资助项目(04220111D)
作者简介:李冬杰(1966-),女 , 河北平泉人 ,硕士 ,副教授 , 主要从事植物细胞工程方面的教学与科研工作.
通讯作者:魏景芳(1957-),男 , 河北黄骅人 ,博士 ,副教授 , 主要从事植物细胞工程方面的教学与科研工作.
第 29卷第 4期
2 0 0 6年 7月
河 北 农 业 大 学 学 报
JOURNAL OF AGRICU LT URAL UNIVERSI TY OF HEBEI
　 　 Vol.29 No.4
Jul .2 0 0 6
1　材料与方法
1.1　材料
选取无病虫害 、生长健壮的黑果腺肋花楸带芽
嫩枝为供试材料 。
1.2　方法
将试材剪掉叶片后用自来水冲洗干净 ,在超净
工作台上 , 剪成 0.5 ～ 1.0 cm 的茎段或茎尖 , 在
75%酒精中浸泡 20 sec ,无菌水冲洗 3 ～ 4遍 , 0.1%
升汞灭菌 10 min ,无菌水冲洗 5次。将茎段或茎尖
分别接种在添加不同激素配比的 MS增殖培养基中
(表 1)。每处理 10 瓶 ,每瓶 4 个茎段 ,重复 3 次。
生根培养采用 1 2M S培养基 。观测生长 、叶色深浅
变化 、丛生芽增殖 、根的萌发及伸长 情况 , 20 d后 ,
统计分析苗高 、增殖系数 、生根率等[ 6 , 7] 。
培养基中 ,蔗糖浓度为 3%(W V),琼脂浓度为
0.8%(W V), pH 5.8 。培养温度为 24(±2)℃,光
照时间 12 h d ,光照度 2 000 lx左右。
表 1　生长调节物质处理及组合
Table 1　Treatments and combination of growth regulators
培养基类型
Types of culture medium
编号
Number
基本培养基
Basic culture medium
生长调节物质浓度 (mg·L-1)
Grow th regulators concentration
KT 6-BA IBA NAA
增殖培养基 A1 MS 0.2 0.2
A2 MS 0.5 0.2
A3 MS 1.0 0.2
B1 MS 0.2 0.2
B2 MS 0.5 0.2
B3 MS 1.0 0.2
生根培养基 C1 1 2MS 0.3
C2 1 2MS 0.4
C3 1 2MS 0.5
D1 1 2MS 0.3
D2 1 2MS 0.4
D3 1 2MS 0.5
2　结果与分析
2.1　KT对试管苗增殖生长的影响
分别将茎段或茎尖接种添加有不同浓度 KT 的
培养基中 ,比较 KT 浓度对试管苗增殖生长的影响
(表 2)。结果显示:培养基 A1 、A2和 A3培养的茎
段或茎尖均无丛生芽发生 ,说明 KT 对果腺肋花楸
试管苗的增殖无影响 。试管苗生长表现为:约 5 d
后茎基部膨大 ,出现浅红色愈伤组织 ,茎段稍有伸
长 , 叶片略见增大 , 10 d后 ,愈伤组织生长迅速 ,到
20 d愈伤组织达到 1.5 cm ,茎段无明显生长 ,且无
丛生芽发生。
表 2　KT对试管苗的增殖生长的影响
Table 2　Effects of the KT on the proliferation
of test-tube seedings
处理
Treatments
平均分化单
芽数 个
No of buds
per explant
生长状况
Grow th state
A1 0 单芽 ,弱 ,茎段基部产生大量愈伤组织
A2 0 单芽 ,弱 ,茎段基部产生大量愈伤组织
A3 0 单芽 ,弱 ,茎段基部产生大量愈伤组织
2.2　6-BA对试管苗增殖生长的影响
在添加有不同 6-BA 浓度的 MS 培养基上 ,比
较了 6-BA浓度对试管苗增殖的影响 ,结果表明 ,
在 6-BA 培养基上接种的茎段约 7 d茎尖伸长 ,长
出小叶片 ,茎段腋芽萌发 , 15 d 后 ,茎段已长至 1.5
cm ,茎基部产生绿色愈伤组织 ,并出现许多芽苞;20
d以后产生不定芽并逐渐形成丛生芽(图 1)。这与
及华等[ 4] 报道的结果相类似 。表 3中可以看出 ,不
同浓度的6-BA(0.2 、0.5 、1.0 mg L)对黑果腺肋花
楸芽增殖的效果明显。在培养基 B3中 ,芽的增殖
系数最高 ,继代 20 d后 ,平均每个带芽茎段可产芽
4.81个 ,但苗长势差 、弱小 ,不适于生根培养;培养
基 B2增殖效果略低于培养基 B3 ,平均每个带芽茎
段产芽 4.02 个 ,但苗长势好 、健壮 ,适宜生根培养;
培养基 B1 苗长势好 、健壮 ,但增殖率较低 ,平均为
1.87个 ,不适合快繁体系 。综上所述 ,培养基 B2的
芽增殖效果好于 B1 、B3组合。
42　　　　　 河 北 农 业 大 学 学 报 第 29卷
表 3　6-BA对试管苗增殖生长的影响
Table 3　Effects of the 6-BA on the proliferation
of test-tube seedings
处理
T reatments
平均分化单芽数 个
No of buds per explant
生长状况
Grow th state
B1 1.87 b 丛芽 ,壮
B2 4.02 a 丛芽 ,壮
B3 4.81 a 丛芽 ,弱
　　注:不同字母表示显著性差异 P<0.05.
左:1.0 mg L;中:0.5 mg L;右:0.2 mg L
图 1　6-BA浓度对试管苗增殖生长的影响
Fig.1　Effects of 6-BA concentrations on the
proliferation of test-tube seedings
2.3　不同生长素对试管苗生根的影响
将增殖培养生成的丛生芽进行切割 ,保留基部
2 cm切断 ,接种到单独添加有不同浓度 IBA或 NAA
的生根培养基(1 2M S)上诱导生根 ,比较了 IBA 和
NAA对黑果腺肋花楸试管苗的生根的影响(表 4)。
结果表明 ,培养基 D2生根率最高 ,达 95.52%,显著
高于其他培养基 , 培养基 C1 生根率最低 , 为
79.81%。每株生根条数 ,培养基 D2 最高 ,为 4.85
条 ,培养基 D1最低 ,为 3.83条 ,不同培养基间差异
不显著 。在生根速度上 , IBA 比 NAA 平均早发根
7 d左右 ,生根 20 d后 ,添加 IBA 的培养基中平均根
长达 1.5 ～ 2 cm ,添加 NAA的培养基中平均根长为
0.5 ～ 1 cm 。从根的形态上 ,添加 IBA的培养基 ,根
细长;添加 NAA的培养基 ,根粗短(图 2)。
表 4　NAA和 IBA对试管苗生根的影响
Table 4　Effects of the NAA and IBA on the rooting
of test-tube seedings
培养基
Culture Medium
生根率 %
Roo ting rates
每株根数 条
Roo ts amounts
C1 79.81 c 4.13 a
C2 89.23 b 4.68 a
C3 81.42 c 4.34 a
D1 86.17 b 3.83 a
D2 95.52 a 4.85 a
D3 87.34 b 4.22 a
　　注:不同字母表示显著性差异 P<0.05.
上:IBA;下:NAA
图 2　培养基中单独添加不同浓度 IBA或 NAA
对生根的影响(生根 20 d)
Fig.2　Effects of dif ferent concentrations of IBA or NAA on
rooting of explants(the 20th day from rooting)
3　讨论
试管苗能否不断增殖并进行继代培养 ,是植物
组织培养能否成功的关键。植物生长调节物质是组
织培养中必不可少的关键物质[ 7] 。选配适宜的生长
调节物质 ,是加快试管苗繁殖速度的最有效方法之
一 。本研究通过生长调节物质的配比实验 ,获得了
黑果腺肋花楸试管苗适宜的增殖和继代培养基 MS
+0.5 mg L 6-BA+0.2 mg L IBA ,为黑果腺肋花
楸试管苗组培快繁提供了重要的参考资料 。
生根培养属试管繁殖的第 3个阶段 ,关系到试
管苗能否健壮生长 ,以及移栽后的成活率[ 7] 。因此 ,
生长调节物质在调控生根这一环节至关重要。通过
对比实验 , IBA 在生根率 、生根条数 、生根速度上都
优于 NAA , 尤其是培养基 1 2MS +0.4 mg L IBA
表现最为突出 。但是 ,同时添加 IBA 和 NAA 对黑
果腺肋花楸试管苗生根的影响如何有待进一步
研究。
(下转第 56页)
43　第 4期　　　 李冬杰等:生长调节物质对黑果腺肋花楸试管苗增殖和生根的影响
收速率和运输速率[ 5] 。试验结果发现 ,植株中 N 和
P在各营养器官中分布不均 ,叶片含量最多 ,根次
之 ,茎中含量最少。这是由于叶片是光合作用的主
要器官 ,对 N 、P 等无机物的需求量大 ,根是吸收无
机营养的器官 ,也有大量 N 、P 存在 ,茎是运输营养
物质的器官 ,因此 N 、P 含量较少 。
参考文献:
[ 1] 　赵之伟.VA 菌根共生的起源和进化[ J] .生态学杂志 ,
1998 , 17(3):37-41.
[ 2] 　方治国 ,陈欣.丛枝菌根在退化土壤恢复中的生态学作
用[ J] .生态学杂志 , 2002 , 21(2):61-63.
[ 3] 　贺学礼 ,李生秀.泡囊—丛枝菌根生态学研究进展[ J] .
干旱地区农业研究 , 1996 , 14(1):35-42.
[ 4] 　刘润进 ,裘维蕃.内生菌根菌 VAM 诱导植物抗病性研
究的新进展[ J] .植物病理学报 , 1994 , 24(1):1-4.
[ 5] 　贺学礼 ,赵方贵 ,赵丽莉 , 等.AM 真菌与施磷量对不同
叶位烟叶生长和化学成分的交互效应[ J] .应用生态学
报 , 2001 , 12(5):761-764.
[ 6] 　贺学礼 , 李英鹏 ,赵丽莉.NaCl胁迫下 AM 真菌对棉花
生长和叶片保护酶系统的影响[ J] .生态学报 , 2005 ,
25(1):188-193.
[ 7] 　潘超美 ,郭庆荣 , 邱桥姐 ,等.VA 菌根真菌对玉米生长
及根际土壤微生态环境的影响[ J] .土壤与环境 , 2000 ,
9(4):304-306.
[ 8] 　PHILLIPS J M , HAYMAN D S.Improved procedures
for clearing roots and staining parasitic and vesicular-ar-
buscular mycorrhizal fungi for rapid assessment of infec-
tion[ J] .T ransactions of the British Mycological Society ,
1970 , 55 , 158-161.
[ 9] 　高俊凤.植物生理学实验技术[ M] .西安:世界图书出
版社 , 2000.
[ 10] 　李酉开.土壤农业化学常规分析方法[ M] .北京:科学
出版社 , 1983.
[ 11] 　齐国辉 ,陈贵林 , 吕桂云 , 等.丛枝菌根菌在草莓上的
应用试验[ J] .河北果树 , 2001(1):14-16.
[ 12] 　齐国辉 ,陈贵林 , 吕桂云 , 等.丛枝菌根真菌对重茬草
莓产量和品质的影响[ J] .果树学报 , 2001 , 18(6):341
-344.
[ 13] 　JOHANSEN A , JAKOBSEN I , JENSEN E S.Hyphal
transport of 15N-labelled nitrogen by a vesicular-ar-
buscular mycorrhizal fungus and its effect on depletion of
inorganic soil N[ J] .New Phy tol , 1992 , 122 , 281-285.
[ 14] 　AMES R N , REID CPP , PORTER L K , et al.
Hyphal uptake and transport of nitrogen from two 15N
-labelled sources by Glomus mosseae(a vesicular-ar-
buscular mycor rhizal fungus)[ J] .New Phytol , 1983 , 95 ,
381-396.
(编辑:祁振声)
(上接第 43页)
参考文献:
[ 1] 　张海波 , 孙毅 ,周丹.黑果腺肋花楸的培育技术与开发
利用[ J] .林业科技 , 2002 , 27(3):56-57.
[ 2] 　王占龙 , 李然 ,姜镇荣 , 等.黑果腺肋花楸试管苗移栽技
术[ J] .林业科技开发 , 2003 , 17(4):34-35.
[ 3] 　王志 , 王淑华 ,李鑫 , 等.黑果腺肋花楸的组织培养繁
殖[ J] .北方果树 , 2002(1):10-11.
[ 4] 　及华 , 张红梅 ,张海新.黑果腺肋花楸的组织培养和快
速繁殖[ J] .植物生理学通讯 , 2004 , 40(1):67.
[ 5] 　李然 , 姜镇荣 ,王占龙 , 等.黑果腺肋花楸的离体快繁技
术[ J] .植物生理学通讯 , 2003 , 39(6):630.
[ 6] 　徐启江 ,李玉花 ,陈典.PP333对分蘖洋葱试管苗增殖和生
根的影响[ J] .植物生理学通讯, 2004 , 40(3):314-316.
[ 7] 　袁维风 ,金万梅 , 尹淑萍.生长调节物质对草莓叶片再
生不定芽的影响[ J] .植物生理学通讯 , 2004 , 40(4):
447-449.
[ 8] 　曹孜义 ,刘国民 , 王蒂 ,等.实用植物组织培养技术教程
[ M] .兰州:甘肃科学技术出版社 , 1996.
(编辑:梁　虹)
56　　　　　 河 北 农 业 大 学 学 报 第 29卷