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人心果果肉及胚乳的组织培养



全 文 :年内在田 间几个试验点和温室中 , 利用受害
程度或群体测定筛选了抗单爪蜿的品系 , 在
荫棚里筛选 了抗棉红蜘蛛和在 田间筛选了抗
秘鲁小爪蟠的木薯品系 。 自参试的 2 1 2 0个品
系中 , 最后选出 79 个 抗 棉 红 蜘 蛛 的 品 系
和 2 50 个抗秘鲁小爪蛾的品系 。
在热带农业国际中心进行的抗性筛选包
括以下三个阶段 : ①大量筛 选一一 初 步 筛
选 。 包括 : a 、 田间一一在种质库里经 自然
感染 ; b 、 温室一一用盆栽植株并作人 .工 感
染 。 ②对热带农业国际中心选出的品系再重
复作田间评价试验 。 ③在其它试验点作重复
田间评价试验 。
在田间是评价 3 ~ 7 月龄受自然感染户
至多次的植株 。 在温室则是通过放置受 .害木 .
薯叶使六英寸盆中的 4 ~ 6 周龄植株感染单
爪瞒 。 当受害叶干枯后 , 靖便迁移到盆栽植
株上 。 在侵染后 , 连续 2 一 4 周每周评价植
株的危害程度 。 在所有评价中 , 淘汰了生长
不良的植株 。 经鉴定大约有 3 %的供试种质
材料是极有希望的 。
( 《 T r o P i亡a l P .e t M a n . 石e m e n t 》
2牙卷 4期 1 9 8 3年 陈俊学译
蓝婉秋 、 骆维校 )
人心果果肉及胚乳的组织培养
v
.
A
。 肠p at 等
本文报道用人心果果肉和胚乳做培养材
料时 , 它们对营养的需要及其生长情况 。
材抖和方法
从孟买的特 朗贝田 间实验站种植园中 ,
采收接近成熟的人心果果实和种子 。 果实用
O

1%的氯化汞溶液表面消毒 15 分钟 , 然 后
用无菌水冲洗 , 用灭菌的不锈钢钻孔器从果
实上钻下直径约 8 毫米 、 厚 2 毫米的圆块 ,
接种于制备好的培养基上 。 种子消毒的措施
如下: 把种子放在酒精中浸蘸 , 燃 烧 消 毒
后 , 在无菌条件下除去种子坚硬的外壳 , 切
取三种不同的培养材料 : ①带胚乳的胚 , ②
不带胚的胚乳碎片 , ③胚 。 基本培养基是含 .
维生素 B的M S培养基并添加铬合铁盐 ( eF 一
E D T A ) 2
.
5毫升 /升 , 蔗糖 2% , 生长素 、 激
动素及适量的生长调节物质 , 再加 入 O。 8%
琼脂 。将培养基 p H值调至 5 。 8 。培养条件是 :
在照明度 9 50 勒克斯的萤光灯下连续 照 明 ,
温度为肠士 2℃ , 相对湿度为 侣0~ 70 % , 每
处理 8 或 12 次重复 。 培养 4 周后 , 称取培养
物鲜重或干重 , 计算增长值 。 压片制备胚乳
愈伤组织 , 以鉴定染色体的倍性 。 为进行组
织学研究按常规方法将材料用 甲醛一醋酸一
酒精固定 , 切片后用番红一固绿染色 。 计算
各实验中平均数的标准误差 。
结 果
果肉组织培养 基本 培 养 基 中 附 加
2
.
4

D Z毫克 / 升 , 激动素 ( K n ) 1毫克 /
升 , 椰子水 ( C M ) 10 % ( 容积比 ) 和酪阮
水解物 ( C H ) 处理的 , 培养 4 周后 , 果肉
外植体表面出现了未分化的小疙 状 愈 伤 组
织 。 由于花青试的存在 , 愈伤组 织 呈 粉红
色 。 在分离和继代培养中 , 愈伤组织迅速增
殖成松脆的组织块 。 从稍硬的 、 将近成熟的
果实上取重量约 30 士 50 毫克的果肉做外植
体时 , 增殖更快 。
l
、 愈伤组织增殖中 , 2 , 4 一 D , K n , C H
和 CM的相互作用 : 果内圆片外植体在M S培
养基和附加 2 , 4 一 D ’ ( 2 毫克 / 升 ) , K n ( 1
毫克 / 升 ) C H ( 4 0 0毫克 / 升 ) C M ( 1 0% )
的 M S培养基上的增殖情况列于表 1 , 添 加
椰子水明显提高了愈伤组织的增殖率 ( 鲜重
增加 ) , 不加酪阮水解物的 , 愈伤组织增殖
较慢 。
表 1 不同激素和营养成份对果 肉愈伤组织的增殖效应
( 数位为 10 个重复的平均值 士标准误差 )
最 初 鲜 重 最 后 鲜 重培 养 增 殖 值 .
( 毫克 ) ( 毫克 )
M S
M S + 2
,
4

D
M S + 2
一 4一 D + K n
M S + 2
,
4

D + C M
M S + K n + CM
M S
+
2
,
4

D
+ K n + CM
M S + 2
,
4

D + K 几
+ C H + C M
3 0 2

8士 1 4 。 8
2 9 3

7士 1 3。 0 2
3 3 5

3士 1 3。 5 7
3 5 1

1土 2 7 。 5 2
3 6 2

O士 2 7 。 7 3
3 5 5

9士 1 3。 17
3 6 6

2士 2 1。 2 4
2 8 8

1士 1 3。 0 7
3 18

8士 1 4。 1 6
5 2 5

0士 1 8。 4
6 6 9

2士 2 9 。 3 5
4 7 4

2士 2 0。 3 6
8 6 7

0士 2 8。 7 8
9 4 1

0士 0 。 3 1
0

9 7 7土 0 。 0 1
1

3 2 1士 0 。 1 4
1

5 7 9士 0。 0 6
1

9 5 5士 0 。 0 7
1

3 4 4士 0。 0 5
2

4 6 6士 O。 0 9
2

6 1 1士 0 。 1 3
* : 最后 鲜重 / 最初鲜重 。
关 * : 浓度为C M 10 % ( V / V ) ; K 凡 1 毫克 / 升 ; 2 , 4一 D Z 毫克 / 升 ; C H 40 0 毫克 / 升 。
2
、 蔗糖的效应 : 试管培养中 , 蔗糖是
大多数植物组织迅速生长的最有效的碳源 。
本实验在不改变培养基其它成份的情况下 ,
双察了蔗糖浓度为 0 一 10 %的生长效应 。 结
果表明 , 2 %的液度最适于愈伤组织生长 ,
超过 6 %时 , 则生长受抑制 ( 表 2 ) 。
3
、 生 长 素 的 效 应 : 在 附 加 C M
( 1 0% )
, K n ( 1毫克 / 升 ) , e H ( 4 0 0毫克
/ 升 ) 的 M s 培养基中 , 分别加入 2 毫克 /
升叫噪乙酸 ( I A A ) 、 叫噪丁酸 ( BI A ) 、
蔡乙酸 ( N A A ) 蔡 氧 乙 酸 ( N o A ) ,
2
,
4
一 D , 以比较不同生长素对愈伤组织生长
的效果 。 结果以添加 2 , 4一 D 处理的效 果 最
好 , 增长值远远高于其它四种生长素处理的
( 表 2 ) 。
果 肉愈伤组织在广泛的营养和激素条件
下继续培养 , 没有观察到器官发生 , 根和枝
芽的诱导也没有成功 。
胚乳的组织培养 将除去种壳的种子放
在 C M + 2 , 4 一 D的培养基上培养 , 4 0一 5 0 天
后 , 形成了愈伤组织 。 单用胚乳作外植体 ,
也很容易形成愈伤组织 。 经染色体 计 数 证
实 , 胚乳愈伤组织是三倍性组织 。 胚 培 养
中 , 愈伤组织在子叶边缘增殖 。 最适于胚乳
裹 2 蔗箱和生长素对果肉愈伤组织生长的效应
( 数值为 8 个重复平均士标准误幕 )
最初鲜重 ( 毫克 ) 最后 鲜重 ( 毫克 ) 增 长 位 .
蔗糖 ( % )
5 2 5 士 1 9 。 5 5 9 6 士 2 2
5 2 3 士 2 1
5 3 2 士 1 1 。 1
1 6 9 1 士 5 4 。 1
1 3 2 8 士 5 2
5 1 5 士 2 5 。 2
5 6 6 士 1 6 。 0
9 5 8 士 3 0 。 2
7 6 5 士 4 7.
5 4 1士 1 1 。 1 5 9 3 士 1 6 。 3
1

13 9 士 0 。 0 3
3

2 6 3 士 0 。 1 3
2

5 1 0 士 0 。 1 1
1

8 9 2 士 0 。 0 9
1

3 5 1 士 0 。 0 8
1

1 0 0 士 0 。 0 2
生 长 素 ( 2 隆克 / 升 )
一— ~ 勺厂 - 一一一—— — - 一— 一下— 一0
2

, 4

D
I A A
N A A
5 3 9士 14 。 0 7
5 4 2士 17 。 1 2
1

6 9 6 土 0 。 2 8
3

3 5 3 士 0 。 1 4
5 4 8士 2 2 。 3 6 1。 9 7 4 士 0 。 1
5 6 3士 1 5 。 0 5 2 。 2 5 4士 0 。 1 7
N O A 5 3 1士 2 4 。 8 3 2 。 4 3 1士 0 。 15
I B A 5 6 3士 1 4 。 5 8
9 0 5士 4 3 。 5 1
1 8 0 0士 3 9 。 0 6
1 0 7 8士 6 7 。 0 3
1 2乙1 士 9 1 。 3 6
1 2 7 6士 7 9 。 7 5
1 1 6 1士 6 4 。 8 4 2 。 C 8 3士 0 。 1 1
辛 : 最后鲜重 / 最初鲜重 。
愈伤组织生长的培养基为 : 附加 C M ( 15 写 ) ,
2 , 4 一 D ( 2 毫克 / 升 ) , K n ( 5 毫克 / 升 )
和 C H ( 4 0。毫克 / 升 ) 的 M S培养基 。 用 其
它物质如麦芽浸提物 , 膝或酪蛋白氨基酸来
代替 C H , 对愈伤组织的生长都影响不大 。 通
过定期继代培养 , 胚乳愈伤组织虽能维持生
长 , 但没有从中观察到器官的分化 。
讨 论
本研究的特殊意义在于确立了人心果胚
乳和胚 的组织培养 。 在基本培养基中添加椰
子水 、 生长素和细胞激动素并减少有机氮物
质 , 对愈伤组织的增殖和继续生长很重要 ,
果肉和胚乳愈伤组织的形成和继续生长都不
能缺少椰子水和 2 , 4 一 D , 任何其它生长调 节
物质都不能取代它们 。
果肉外植体的重量在 3 0 士 50 毫克 时 ,
有利于愈伤组织的形成 。 如果接种的组织块
太小 , 愈伤组织就不能增殖 。 这可能是 由于
缺乏生长中心的缘故 。 生长中心在组织中的
分布是不均匀的 。 例如取幼嫩未成熟的果实
作外植体培养 , 则不能产生愈伤组织 ; 而从
即将完全成熟的果实取下的外植 体培 养 ,
愈伤组织生长较好 。 从成熟种子中取出胚乳
培养 , 也容易形成愈伤组织 。
人心果果实组织培养表明 , 愈伤组织的
快速增殖需要椰子 水 和 2 , 4 一 D 。 苹 果 、 香
蕉、 番荔枝 、 番石榴的果实组织培养也获得
同样结论 。 人心果无胚的胚乳具 有 增 殖 能
力 , 且不受胚萌发的影响 , 不象其它作物的
胚乳和胚有密切联系 。
在试管中能无限增殖 ,
虽然人心果胚乳组织
但未能形成器官 。
( 《 I n d盖a n J o u r n a l o 企 E x p e r 定m妞亡a l
B i o l o g了 》 1 5卷 4 期 19 7 7年
傅萍译 黄婉秋 、 骆维校 )
四棱豆作为热带多用途豆科覆盖的可行性研究
A n j a n 口 加移即 j e 等
近年来 , 四棱豆的价值巳被人们广泛认
识 。 但目前只是在少数地区将四棱豆用作较
为次要的蔬菜种植 。 之所以如此 , 是因为种
植四棱豆通常要设支柱 , 这种方法既费钱 ,
劳动强度又大 。 不过产量要比不 设 支 柱 的
高 。
1 9 5 0年 K o r l k 。 r 一 曾在加纳指 出 , 具 多
年生 习性的四校豆可用作覆盖作物 , ;为此 ,
本试验研究了四棱豆植株不同部位的生长 、
产量和营养潜力。 另设栽培管理试验 , 调查
设支柱对四棱豆生 一长的效应 。 在这两个试验
中, 各安排三个收获期 , 以佑价最犬的生产
潜力并确定合适的收获时阎 。
材杆和方法
试验在位于功日尔各答的印度统计研究所
连续进行两年 。 试区土壤为冲 积 壤 土 , p H
值7 . 2 , 有效氮含量低 , 有效磷和有效 钾 含
量中等或较高 。 环境通常湿热 。
试验 1 种子来 自勒克瑙国家植物园 ,
l o e o年 6 月” 日播种 。 未接种根瘤菌 , 不浇
水 , 也不施肥 。 仅有的培栽管理措施是除几
次杂草。 每个小区种两行 6 株四校豆 , 行距
1米 , 株距 0。 5米 。 技随机区组排 列 , 重 复
三次 , 共有 18 个小区 。 每年收获三次 。
分别在播种后的2 2周 , 2 6周和 3 0周 , 即
嫩英期 ( H : ) , 熟荚期 ( H : ) 和种子 成 熟
期 ( H : ) , 从各重复内取两株四棱 豆 测 定
其生长量和其它统计数据 。 用作第二年规测
的小区第一年只收植株的豆荚和种子犷 其余
部分不动 。 工” “入年乡, 3 月成爹种 子 收 获
后 , t植株顶端的部分枝叶枯黄凋萎 。 但 由于
西北氛流引起降雨 , 一个月内就从块茎重新
长出大量枝叶。 将样株洗净晾千 , 然后称重
并在 1 1 0乞的烘箱里烘干以测是千物质含盘
和分析含抓量 。 在此高温下` 。 些蛋自质会
变性。
试验 2 1 991 年 6 月 s1 日播种 , 采用设
立 2 米支柱和不设文柱两矛护誉理错施 , 同样
有三个收获期 ( H 污 H : 和H 、 ) 。 设三个重
复 , 按随机区组排列 。 小区面积 3 3 . 7 `米 , ,
株行距同试验 1 。 用每个收获期 7 `夭中 6 次
采集的豆荚和种子累计鲜重产量 来 迸 行 产
量分析 。 每个收获期的豆荚和种 子 采 集 完
后 , 测之位件校川决和块茎约鲜重 。 并根据千
物质百分含畏计算各收获期枝叶的干重 。
两个试脸中植株含氮量用凯氏微量定藏