全 文 ：热带农业科学
ChineseAgriculturalScienceBuletinVol.24No.52008May
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田基黄，民间别名有小元宝草、雀舌草、七层塔、地
耳草、黄花草等，为藤黄科植物田基黄（Hypericum
japonicumThunb）的全草，广泛分布于中国南方，华北
地区也有产出。民间用其全草治疗肝炎，疗效确切。其
性味苦、甘、平，能清热解毒、渗湿利水、消肿止痛。现已
有制剂生产，《中华本草》就记载有田基黄注射液制剂
[1]。田基黄的化学成分、药理作用及临床应用注射液等
都有较深入的研究[1-5]，其组织培养与快速繁殖则尚未见
报道。田基黄主要用种子来繁殖，但因其种子较小且
轻，易被风吹落，种子成熟也没有固定的季节，难以收
集。因此本研究进行了田基黄组织培养快速繁殖技术
的研究，为生产出高产、优质的田基黄种苗提供科学依
据。初步建立了田基黄的组培快繁体系，为中草药田基
黄的快速繁殖奠定基础，使工厂化生产田基黄种苗成为
可能。
1材料与方法
1.1试验时间、地点
本试验于2006年2月～11月，在中国热带农业
基金项目：农业部科技教育司“农业生物资源保护与利用项目”。
第一作者简介：黎明，男，1982年出生，湖南省张家界人，硕士，研究方向为植物分类与植物资源开发利用。通信地址：571737海南省儋州市中国热带
农业科学院 热带作物品种资源研究所 南药研究中心。E-mail：liming0898@163.com。
通讯作者：莫廷辉，男，1964年出生，广西贺州市，副教授，研究方向为作物遗传育种。通信地址：571737海南大学儋州校区农学院生物技术，Tel：
089823300162，E-mail：31112409mth@163.com。
收稿日期：2008-03-17，修回日期：2008-03-27。
药用植物田基黄的组织培养与快速繁殖
黎 明 2,苏墩豪 3,王祝年 2,莫廷辉 1
（1海南大学儋州校区农学院，生物技术系，海南儋州571737；2中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，
海南儋州571737；3海南中和药业股份有限公司，海口570216，）
摘 要:以田基黄为材料,应用组织培养和快速繁殖技术,对适于活血丹增殖分化的培养基、培养方式进
行了系统的研究。试验是以田基黄的茎尖为外植体,采用MS为基本培养基,附加不同植物生长调节剂
进行试验;结果表明采用 MS+6-BA3.0mg/L的培养基能成功地诱导愈伤组织的分化;MS+6-BA
2mg/L+NAA0.5mg/L能成功地诱导芽的分化,对于芽增殖,以此培养基也比较好;诱导生根以
1/2MS+NAA0.2mg/L培养基较好,培养20d后生根率可达90%以上。
关键词:田基黄;组织培养;快速繁殖;植物生长调节物质
中图分类号:S566.9 文献标识码:A
TissueCultureandRapidPropagationofMedicinalPlantsHypericumjaponicumThunb
LiMing2,SuDunhao3,WangZhunian2,MuTinghui1
（1BiotechnologyofAgriculturalColegeofHainanUniversityDanzhouCampus,DanzhouHainan571737;
2TropicalCropsGeneticResourcesInstituteofCATAS,DanzhouHainan571737;
3HainanZhonghePharmaceuticalCo.,LTD.,Haikou570216;）
Abstract:TissuecultureandrapidpropagationofHypericumjaponicumThunb.weresystematicalystudied
inordertoexploresuitablemediumandcultureconditions.Theleafasexplantscouldinducethecaluson
theMSwithdiferentplantgrowthregulator.Theresultsshowedthat:Thebestmediumfortheinductionof
tissueculturewasMS+6-BA3.0mg/L;andtheoptimummediumforclusterbudwasMS+6-BA2mg/L+
NAA0.5mg/L;andtheoptimummediumfortheinductionofrootswas1/2MS+NAA0.2mg/L,therootingrate
couldbeupto90%after20dculture.
Keywords:HypericumjaponicumThunb.,tissueculture,rapidpropagation,plantgrowthregulator
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热带农业科学
中国农学通报 第24卷 第5期 2008年 5月
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科学院热带作物品种资源研究所组织培养中心完成。
1.2试验材料
供试材料采自海南东方。以种子、茎尖、叶片为外
植体。
1.3试验方法
1.3.1外植体的处理 植体先用洗衣粉溶液浸泡约
5min，然后用自来水冲洗干净，再在超净工作台内进行
无菌操作。先用75%的酒精泡约6s，再用0.1%升汞泡
10min，3瓶无菌水依次冲洗3次[6]，最后将此3种外植
体分别接种于人工培养基中。
1.3.2基本培养基的选择 本试验是以MS为基本培养
基，因为MS培养基适合固体培养，无机盐的数量和比
例适中，能满足大多数植物的生长[6]。
1.3.3培养条件 以MS为基本培养基，附加不同浓度
6-BA及NAA[7]。蔗搪用量为30g/L，琼脂7g/L，pH值为
5.3-5.8。培养基分装后在121℃下灭菌30min，培养温度
20～29℃之间，光照强度1200lx，光照时时间为10～12h/d。
2结果与分析
2.1外殖体的消毒
对外植体的消毒主要采用75%的酒精和1‰的升
汞来消毒[6]，酒精消毒时间为5～7s，种子可加长时间，
升汞消毒时间约为10min最适合，结果见（表1）。
2.2诱导愈伤组织的分化
试验主要通过选用种子、茎尖和叶片来进行，结果
表明采用茎尖作为外植体来诱导愈伤组织比较适合，
结果见（表2）。因为种子在培养2个月后虽然也能长
成愈伤组织，但时间比较长，而叶片最后都褐化。采用
MS+6-BA3.0mg/L的培养基进行田基黄的茎尖培养[8]，
接种1个星期后，茎尖整体膨大，且有愈伤组织形成，
并逐渐伸长。培养2个星期后愈伤组织直径已有1cm
大，颜色为鲜绿色。3个星期后组织表面全为小块状突
起的胚状体，有的突起分化为小芽，但经以后观察，这
些小芽不能长高。在诱导愈伤组织的分化的试验中，有
使用过MS+6-BA+IBA的不同浓度的培养基[9]，但诱导
的愈伤组织几乎都是红褐色而不是绿色的，此愈伤组
织也不好诱导使它分化成芽。
2.3诱导芽的分化
6-BA和 NAA不同梯度对田基黄愈伤组织分化
出芽的影响，结果见（表 3）。从表中可以看出，
MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基较为适合诱导
芽的分化。把接种3个星期后表面全为小块状突起胚
状体的组织转接入 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L
表1不同酒精和升汞梯度消毒对外殖体的影响
酒精消毒
时间/(s)
升汞消毒
时间/(min)
接种瓶数 种子 茎尖 叶片
5～7
5～7
5～7
8
10
12
5
5
5
一瓶污染
无污染
无污染
一瓶污染，无褐化
无污染，无褐化
无污染，一瓶褐化
无污染，无褐化
无污染，无褐化
无污染，两瓶褐化
表2不同外殖体在6-BA3mg/L中的生长情况
培养基类型
外殖体类型
2周生长情况
4周生长情况
MS+6-BA3mg/L
种子
无明显变化
无明显变化
MS+6-BA3mg/L
茎尖
茎尖基部或整体膨大，且有愈伤组织生成
愈伤组织表面呈块状突起的胚状体，颜色为鲜绿色
MS+6-BA3mg/L
叶片
无明显变化，有的褐化
基本上褐化
表36-BA和NAA不同梯度对田基黄愈伤组织分化出芽的影响
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
6-BA/（mg/L）
1
2
2
2
2
2
2
2
NAA/(mg/L)
0.2
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
接种瓶数
5
5
5
5
5
5
5
5
2周后分化芽情况
愈伤组织和胚状体部分死亡
愈伤组织正常生长，但胚状体退化，无分化芽
愈伤组织正常生长，但胚状体退化，无分化芽
分化出芽，少量
分化出大量的芽，芽长1-2cm
分化出芽，少量
个别胚状体分化出芽，但芽不能正常生长
愈伤组织不生长，无芽分化
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热带农业科学
ChineseAgriculturalScienceBuletinVol.24No.52008May
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(续表3)
编号
9
10
11
12
13
14
15
6-BA/（mg/L）
3
3
3
3
3
3
3
NAA/(mg/L)
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
接种瓶数
5
5
5
5
5
5
5
2周后分化芽情况
愈伤组织不能正常生长，无芽分化
愈伤组织不能正常生长，无芽分化
愈伤组织不能正常生长，无芽分化
愈伤组织生长缓慢，无芽分化
愈伤组织颜色比较深，表面胚状体退化，无芽分化
愈伤组织不能正常生长，个别有褐化现象
愈伤组织不能正常生长，有褐化现象
培养基中培养[10]，2个星期后分化出大量的芽，芽生长
较快，3个星期后已都高达2cm以上。
2.4诱导芽的增殖
诱 导 田 基 黄 芽 苗 增 殖 的 培 养 基 仍 为
MS+6-BA3mg/+NAA0.5mg/L基本培养基。因其分化的
芽数量较多，可把其芽块分成小块后转接到新的
MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L培养基中，其基部外围
可产生大量的不定芽，随后不断有新的不定芽产生。此
培养基也可以做为继代培养基。
2.5壮芽
因芽增殖是数量较多，芽长的较细长，因此在让芽
生根之前比须壮芽。壮芽和增殖一样，也须把芽块分成
小块，一瓶约10棵芽较好。培养基采用MS培养基，不
加任何生长调节剂，2个星期后即可让芽生根。
2.6诱导芽生根
以1/2MS为基本培养基，附加0.2mg/L的NAA，
在室温下，生根效果均不理想。生根的速度也慢，根
系较短，有许多网状毛细根生长于培养基表面。在所
进行的处理中，1/2MS+IBA2.0mg/L的培养基对根的
诱导效果最好 [11]，但 20d后才可生根，生根率达
90%。但根生长较慢。生根速度慢，可能的原因是激
素浓度不适宜或培养温度偏低，低于植物生长所需
要的最适温度。在所进行的处理中，1/2MS培养基加
有不同浓度的NAA对生根的诱导效果影响很大，浓
度越高效果越差，甚至使芽死亡，但根却长的很好，
结果见（表4）。
2.7田基黄的生根苗移栽
把移栽苗用清水洗干净经过根部消毒后，直接移
入沙中即可，沙土疏松，透气与保水性能较好，对根系
的生长有利。没有经过根部消毒的，根有的会腐烂。组
培苗的移栽是一个由无菌的环境转向有菌环境的过
程，刚开始植株对环境的适应能力较弱，如果通过消毒
处理，可减少细菌对植株的危害、能提高植株对环境的
适应能力，从而提高植株的成活率。瓶盖不能一次性地
揭开，应该逐渐地揭开，让植株慢慢地适应周围恶劣的
环境。因杂菌感染而死亡的植株都是生长较细，叶片数
较少的植株。因此，在移栽时选择生长健壮、具有绿叶
片数较多的壮苗进行移栽也是移栽成活的关键。
3小结
3.1MS+6-BA3.0mg/L+IBA0.3mg/L为田基黄愈伤组
织 分 化 较 佳 的 培 养 基 ；MS+6-BA3.0mg/L+NAA
0.5mg/L为芽分化较佳的培养基；生根以培养基
1/2MS+NAA0.2mg/L生根效果较好。
3.2田基黄移栽基质，以细沙较好；移栽前，如用多菌
灵等消毒液消毒有根苗，可能会明显提高移栽的成活
率。移栽苗的环境如温度和湿度也决定着苗的成活率，
温度以室温较好，更不能日照，环境的相对湿度要达到
85%以上。
表4NAA不同梯度对田基黄根分化的影响
编号
NAA
/(mg/L)
接种瓶数 3周后记录 3周后记录
1
2
3
4
5
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
5
5
5
5
5
无主根，毛细根也较少，芽生长最好
有2-4条主根不等，较短，毛细根较少，芽生长良好
有2-5条主根不等，毛细根明显增多，芽生长不太好
主根3-7条，毛细根多，芽不生长
主根4-9条，毛细根太多，芽不生长，有枯萎现象
少量有主根，毛细根也较少，芽生长最好
大多主根都在5条以上不等，毛细根也较少，芽生长良好
主根增加较快，毛细根明显增多，芽生长不好，甚至不生长
主根和毛细根生长较快，芽有死亡现象
毛细根太多，芽不生长，有枯萎现象
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热带农业科学
中国农学通报 第24卷 第5期 2008年 5月
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参考文献
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致谢:感谢组织培养中心的徐立,李志英等几位老师的
热心帮助。
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