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锦带花的生药学鉴别



全 文 :第 28卷 第 8期
2 0 1 0年 8月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 28 No. 8
Aug. 2 0 1 0
中华中医药
1769
学刊
锦带花的生药学鉴别
黄 雯,高 松,潘 燕,孙仁萍
(大连大学医学院,辽宁 大连 116622)
摘 要:根据中药鉴定学的鉴定方法,将传统的鉴别方法与现代技术如薄层层析及高效液相图谱法相结合,
对锦带花来源, 性状特征,显微特征, 理化特征进行鉴别。结果显示其主要的性状特征为暗紫褐色,花冠密被绒
毛,花柱下部有毛;主要显微特征为具两种非腺毛, 花冠具乳头状表皮细胞, 花柱细胞绒毛状; 紫外灯下与绿原酸
相同位置显相同大小斑点, 另外还有两个亮蓝色荧光斑点; HPLC图谱显示在 7 - 8m in时间段绿原酸左侧有一个
单峰,其余峰与金银花的图谱基本相同。
关键词:锦带花;早开锦带花; 中药鉴定
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2010) 08 -1769 - 03
The Pharmacognosy Identif ica tion ofW eige la F lorida
HUANG Wen, GAO Song, PAN Yan, SUN Ren-ping
( Co llege ofM edicine, Dalian University, Dalian 116622, Liaon ing, Ch in a)
Abstrac t: W eigela floridaw as identified in this study, according to the m ethods o f identifica tion and asse ssment of
TCD, from the orig in, charac te r, m ic ro - cha rac te r and chem ica l and phy sica l featu re, app ly ing traditional iden tifym e th-
od comb ined w ith m ode rn technique such as TLC andH PLC. The resu lts suggested thatWe igela flo ridaw as da rk brown -
purp le, the coro l covered w ith dense v illus, the inferior part of sty let w ith ha ir. Th is flow er ha s two k ind nong landu la r
hair, the co ro l has corporam amm illaria epide rm ic cells, the sty let cell looked like villus. TLC show ed this flowe r ha s the
sam e spo t w ith ch lo rogenic acid; H PLC showed the basica lly sam e spec tra w ith honey suckb le.
Keyw ords: W e ige la flo rida; W e ig ela praecox; identifica tion and assessm en t o f TCD
收稿日期: 2010 - 03 - 11
作者简介:黄雯 ( 1987 - ),女,辽宁大连人,本科学生,研究方向: 中
药鉴定与质量控制。
通讯作者:高松 ( 1959 - ),男,辽宁大连人,副教授,研究方向:中药
鉴定与质量控制。
锦带花为忍冬科 ( Cap rifo liaceae )锦带花属 ( W e ige la
Thunh)植物早开锦带花 W eige la praecox ( Lem oine) B ailey、
锦带花W. flo rida( Bunge) A. DC. 的干燥花蕾, 主要分布于
黑龙江 (栽培 )、吉林 (栽培 )、辽宁、河北、山东、山西和江苏
北部地区。传统认为锦带花具有清热解毒, 活血止痛功效,
主要用于瘟病初起, 头疼咽干, 喉痹, 痈肿疔疮, 丹毒, 感冒
发热等症 [1 ]。现代研究表明忍冬科植物在抑菌、抗肿瘤、
保护肝损伤等方面具有较好的疗效, 如金银花临床应用广
泛,需求量很大, 特别在疫情流行时期供不应求。而锦带花
作为金银花的同科植物,经查新其研究仅局限于栽培方面,
在生药学方面没有查到相关的研究文章,为此我们采取传
统的中药鉴别的方法,再结合现代技术探讨其品种、药材性
状、显微特征及理化特征, 为今后研究和开发锦带花打下基
础。
1 实验材料与仪器
1. 1 材料
1. 1. 1 药材 早开锦带花: 5月上旬采于庄河市冰峪沟,
经大连大学中医中药研究室高明教授鉴定为忍冬科植物
Weigela praecox( Lem o ine) Bailey干燥花蕾。
锦带花: 5月下旬采于大连市内, 经大连大学中医中药
研究室高明教授鉴定为忍冬科植物W. florida ( Bunge) A.
DC.的干燥花蕾。
1. 1. 2 试剂
水合氯醛,羧甲基纤维素钠, 硅胶 H, 氯仿均由大连大
学实验室提供。
对照品:绿原酸购自中国药品生物制品检定所提供, 批
号为: 120766 - 200717, 纯度为 99. 7% ;甲醇: 色谱醇,乙腈:
色谱纯,水为重蒸水; 其他试剂均为分析纯试剂。
1. 2 仪器
奥林巴斯常规显微镜 CNK2 -F -GS型,台湾;超声波
清洗器 KH - 100B型, 昆山禾创超声仪器有限公司; 高效液
相色谱仪 H ITACH I L - 2000, 日本日立; 送液泵 H ITACH IL
-2130;检测器 H ITACH I UV - detec to r 2 - 2400; 工作站 N
-2000色谱数据工作站, 浙江大学智达信息工程研究所。
2 锦带花的鉴别
2. 1 来源鉴别
2. 1. 1 来源 忍冬科植物早开锦带花 W eige la praecox
( Lem o ine) B ailey、锦带花W. flo rida ( Bunge) A. DC的干燥
1769
DOI:10.13193/j.archtcm.2010.08.203.huangw.040
第 28卷 第 8期
2 0 1 0年 8月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 28 No. 8
Aug. 2 0 1 0
中华中医药
1770
学刊
花蕾。
分种检索表:幼枝有狭棱,叶通常椭圆形, 叶柄明显;花
萼五全裂, 狭披针形 ) ) ) 锦带花。幼枝无棱, 叶通常倒卵
形,叶柄不明显; 花萼上唇 3浅裂, 下唇 2浅 ) ) ) 早开锦带
花。
2. 1. 2 植物形态 锦带花: 落叶灌木, 长 2~ 3m。树皮灰
色,幼枝有棱及密生 2列短柔毛, 褐灰色。单叶对生, 叶片
呈椭圆形、倒卵形或卵状长圆形 [2 ], 长 5 ~ 10cm, 宽 3 ~
5cm,先端凸尖或渐尖, 基部圆形或楔形, 上面绿色, 下面浅
绿色,边缘有锯齿, 上面生短柔毛,主脉尤明显, 叶柄短,长
约 5mm 或无柄。花两性, 成 2对生于叶腋; 苞片 1对, 叶
状,小苞片离生; 花萼筒无毛, 花萼 5裂,裂片狭披针形;花
冠漏斗状钟形,中部以下突然变狭,长 3~ 4cm, 外面鲜紫玫
瑰色,内面苍白色, 花冠先端 5裂; 雄蕊 5。蒴果, 圆柱形,
长 1. 5~ 2cm, 具柄状喙;种子微小而多数 [ 6]。
早开锦带花:幼枝无棱,叶通常倒卵形, 叶柄不明显;花
萼上唇 3浅裂,下唇 2浅裂, 花冠粉紫色,粉红色或带粉色,
其余同锦带花。
2. 2 性状鉴别
早开锦带花:干燥锦带花呈棒状,长 2. 5 ~ 3. 5cm, 上端
粗下细,上部直径 2. 5~ 4. 5mm, 下部直径约 1. 5cm, 表面暗
紫褐色,密被绒毛。花萼上唇 3裂, 下唇 2裂, 暗绿色或带
紫色,密被绒毛。开放者花冠筒状, 先端 5裂,雄蕊 5枚,黄
色;雌蕊 1枚, 花柱下部有毛。气清香 [7 ],味微苦。水试: 将
早开锦带花干燥花蕾放入温水中, 5~ 10m in水被染成棕黄
色。
锦带花 锦带花与早开锦带花不同处是花蕾表面疏被
绒毛,花筒中下部突然变细; 花萼 5全裂, 裂片狭披针形。
水试:将早开锦带花干燥花蕾放入温水中, 5 ~ 10m in水被
染成浅紫红色。
2. 3 显微鉴别
2. 3. 1 粉末制片方法 将早开锦带花粉碎, 过六号筛,取
少量粉末于载玻片上,加一滴水合氯醛透化,透化完成后加
一滴水合氯醛封片, 用光电生物显微镜观察。
2. 3. 2 粉末特征 早开锦带花 :暗紫褐色 ,花冠上表皮细
胞乳头状突起,非腺毛为单细胞,有两种, 长 45~ 800Lm, 一
种长而平直有的略弯曲,另一种非腺毛短,有的腺毛足部稍
膨大,表面光滑。花药由 3个花粉囊组成, 偏于一侧, 花粉
粒众多,黄色, 球形, 直径 64 ~ 86Lm, 外壁表面有细密短刺
状圆形细颗雕纹 [7 ], 具 3个萌发孔, 有的有裂隙状或有沟
纹。花柱上半部光滑,下端有毛茸,柱头顶端表皮细胞呈绒
毛状,导管为螺纹及网纹导管。薄壁细胞中草酸钙簇晶很
少见,直径 6~ 45Lm。
锦带花:锦带花与早开锦带花不同处是花柱光滑无毛,
锦带花非腺毛少见, 薄壁细胞中草酸钙簇晶众多。
2. 4 理化鉴别
2. 4. 1 薄层层析法
( 1)实验方法 取早开锦带花、锦带花、金银花粉末各
0. 2g, 加甲醇 5mL,放置 12h, 滤过, 滤液作为供试品溶液。
另取绿原酸对照品 ,加甲醇制成每 1mL含 1mg的溶液,作
为对照品的溶液。吸取供试品溶液 10 - 20LL,对照品溶液
10LL, 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 H
薄层板上,以氯仿 -甲醇 -水 ( 12 B7 B2)的上层溶液为展
开剂,展开, 取出,晾干, 至紫外灯 ( 365nm )下检视。
图 1 TLC色谱图
( 2)结果 供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置
上,显相同颜色的荧光斑点。早开锦带花与锦带花在紫外
灯下还有另外两个亮蓝色斑点。
2. 4. 2 高效液相色谱法
根据5中华人民共和国药典6 2005版金银花相关的规
定操作。
( 1)色谱条件与系统适用性试验: 以十八烷基硅烷键
合硅胶为填充剂;以乙腈 - 0. 4%磷酸溶液 ( 13 B87)为流动
相;流速为 0. 8m L /m in;检测波长为 327nm; 进样量: 10LL;
柱温为室温。理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于 1000。
( 2)对照品溶液的制备: 精密称取绿原酸对照品
4. 00mg, 置 100mL棕色量瓶中,加 50%甲醇制成每 1mL含
40Lg的溶液, 摇匀,即得 ( 10e 以下保存 )。
( 3)供试品溶液的制备:早开锦带花超声提取:精密称
取锦带花粉末 (过四号筛 ) 0. 5292g, 置具塞锥形瓶中, 精密
加 50% 甲醇 50mL, 称定重量 108. 0688g, 超声处理 (功率
250W,频率 35kH z) 30分钟, 放冷, 在称定重量 108. 0164g,
用 50% 甲醇补充减失的重量,摇匀,滤过, 精密量取续滤液
5mL, 置 25mL棕色量瓶中, 加 50% 甲醇至刻度, 摇匀, 即
得。
锦带花超声提取: 精密称取锦带花粉末 (过四号筛 )
0. 5096g,置具塞锥形瓶中, 精密加 50%甲醇 50mL, 称定重
量 107. 8688g,超声处理 (功率 250W, 频率 35kH z) 30分钟,
放冷,在称定重量 108. 2688g, 用 50%甲醇补充减失的重
量,摇匀, 滤过,精密量取续滤液 5m ,l置 25mL棕色量瓶中,
加 50% 甲醇至刻度,摇匀, 即得。
金银花回流提取: 精密称取金银花粉末 0. 5g, 50% 甲
醇 50mL,密塞, 浸渍 0. 5h,用浸渍溶液回流提取 1h, 冷却后
过滤,精密量取续滤液 5mL, 置 25m L棕色量瓶中, 加 50%
甲醇至刻度,摇匀, 上清液用 0. 45Lm滤膜滤过即得。
早开锦带花水提取: 精密称取锦带花 10. 0408g, 加
250m L水煎煮, 水提取液,滤过, 精密量取续滤液 5mL置于
100m L容量瓶, 加蒸馏水至刻度,摇匀, 即得。
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金银花水提取: 精密称取金银花 10. 0201g, 加 250mL
水煎煮,得到水提取液, 滤过 , 精密量取续滤液 5mL置于
100mL容量瓶,加蒸馏水至刻度, 摇匀,即得。
( 4)测定法: 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液
各 10LL,注入液相色谱仪, 测定,即得。
图 6 供试品金银花水提液的 HPLC色谱图
( 5)结果:根据 HPLC色谱图分析, 早开锦带花和锦带
花在 7. 5~ 7. 55之间出峰,金银花在该保留时间段没有出
峰,余相似。
锦带花和早开锦带花色谱图基本相同, 不同的是峰面
积,锦带花在 5. 5保留时间的峰为长峰, 早开锦带花在 5. 5
保留时间的峰为短峰。
3 讨 论
锦带花作为民间草药尚未被开发, 处于空白领域。笔
者通过来源、性状、显微、理化四大方法鉴别, 清楚了锦带花
与早开锦带花的鉴别要点,为今后进一步研究打下基础。
早开锦带花和锦带花在辽宁地区各有一个变种, 花冠
均为白色 ,易与原种区别, 另外两个变种均在辽宁的个别地
区栽培,用于观赏, 所以未研究。
薄层层析法实验结果显示,早开锦带花, 锦带花除了与
绿原酸在相同位置上显相同斑点外,还有两个亮蓝色斑点,
是对照品金银花中没有的化合物; 提示我们有待于进一步
研究。
总之,通过来源、性状、显微、理化鉴别, 使我们掌握了
早开锦带花与锦带花的鉴别要点,填补其空白的同时, 也为
进一步开发锦带花的药用资源提供参考。
参考文献
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