全 文 ：ExperimentalStudyofOleanolicAcidLiquidActingonClimactericRats
LouYan, ChenZhiliang, WangChunxia
(NanfangHospital, SouthernMedicalUniversity, Guangzhou510515)
Abstract　 Objective:TostudywhethertheOleanolicacidhadcurativeefectonclimactericratsasanindependent
factor.Methods:TheexperimentalgroupwasadministratedwithOleanolicacid, whilethepositivegroupwasgivenwithIsoflavniphy-
toestrogeno, andtheclimactericmodelandadolescentcontrolgroupswerefedwith0.9% salinewater.TheeffectofOleanolicacidon
ratswasobserved.IneachgroupthelevelsofserumE2、SOD、MDA、GSH-Pxweretested, themorphologyofovaryandadrenalcortex
werealsostudied.Results:ItwasshowedthatOleanolicacidcouldincreasethelevelsofserumE2 , SOD, GSH-Px(P<0.05), decrease
thelevelofMDA(P<0.01)andimprovethemorphologyandthefunctionsofovaryandadrenalcortex.Conclusions:Itisconcluded
thatOleanolicacidhascurativeeffectindependentlyonclimactericrats.
Keywords　Climacteric;Oleanolicacid;Experimentalstudy
四逆汤制剂中乌头生物碱的药动学相关性研究
肖凤霞　周莉玲　李　锐
(广州中医药大学中药学院 , 510405)
　　摘要　分别用血药浓度法与药物累积法对四逆汤制剂进行药动学相关性研究 , 结果证明在 0 ～ 6 h内 , 血药浓
度-时间曲线与体存量-时间曲线存在较好的线性相关关系。
关键词　四逆汤;药物动力学;乌头生物碱;相关性;药物累积法
　　四逆汤是中医临床急救常用方 ,表现出较好的
强心抗休克 、抗心肌缺氧等作用 〔1〕 , 有学者证明其
君药制附子中的乌头类生物碱既是其强心作用的主
要有效成分亦是其毒性成分〔2〕。笔者曾用血药浓
度法研究了四逆汤制剂中主要有效成分乌头生物碱
在大鼠体内的药动学过程 ,结果表明呈一级动力学
消除〔3〕。本文通过药物累积法研究了四逆汤制剂
中的乌头生物碱的药动学过程 ,并将之与血药浓度
法所得结果进行比较 ,探索不同方法间的相关性。
1 　实验材料
1.1 　实验用药　制附子 、干姜 、炙甘草购自清平市
场 ,并经中药鉴定教研室鉴定为药用正品 。四逆注
射剂由广州中医药大学中药学院制剂工艺研究室研
制 ,并经过初步质量检查及药效学研究 ,证明符合有
关规定 ,具有较好的强心作用。
1.2 　实验动物　SD大鼠 ,体重 180 ～ 220g,雌雄各
半 ,由广东省卫生厅实验动物中心提供。
2 　药物累积法
2.1 　LD50的测定及对数剂量 -死亡机率单位曲线
的制备　经反复预试 ,确定其致全死量 Dm =22000
mg/kg,致全不死量 Dn=17000mg/kg。取 180 ～ 220
g的 SD大鼠 35只 ,雌雄不拘 ,随机分为 7组 ,分别
按 22000 mg/kg、20900 mg/kg、19900 mg/kg、18900
mg/kg、17900 mg/kg(r=1∶0.95)尾静脉注射给药 ,
观察 7天内各组死亡率 ,结果如表 1。
　表 1　　　四逆注射剂不同剂量与大鼠死亡关系
组别 动物数(只) 死亡数(只) 给药量(mg/kg) 含附子量(mg/kg) 剂量对数(D)
1 7 7 22000 6600 3.8195
2 7 6 20900 6270 3.7973
3 7 4 19900 5970 3.776
4 7 3 18900 5670 3.7536
5 7 1 17900 5370 3.72997
　　注:由工艺流程知制剂中含附子量为 30%
　　将表 1中的数据用改良冠氏法进行计算 ,求得
LD50 =19340.27 mg/kg, 其 95%可 信 区间 为
18719.32mg/kg～ 19985.27 mg/kg。以制剂中含附
子药量作剂量对数 -死亡机率单位曲线(D-P直线),
方程为 Y=38.3919X-139.3713, 相关系数 r=
0.982。
2.2　药动学研究　经预试 ,确定实验给药量以附
子生药量计为 5400 mg/kg(相当于 LD15.2 , 制剂
18000 mg/kg)。取 170 ～ 200g的 SD大鼠 49只 ,雌
雄不拘 ,随机分为 7组 ,分别按所确定剂量尾静脉注
射给药 ,在第 1次给药后 ,分别于 1.5h、2h、2.5 h、3
h、4h、6h、8 h第二次给予相同剂量 ,观察 7天内动
物死亡情况 ,计算死亡率 ,查出相应机率单位 ,并由
·587·中药材第 28卷第 7期 2005年 7月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.07.024
D-P直线计算出相当的附子体存量 ,按式(1)计算体
存量:T=D-D0。式中 D为相当剂量;D0为第二次
给药剂量。结果如表 2。
　表 2　　　　药物累积法大鼠体内附子体存量
组别动物数(只)
间隔时间(h)
死亡率(%) 机率(Y) 相当剂量对数 附子体存量(mg/kg)
1 7 1.5 100 7.59 3.8279 1328.5989
2 7 2 85.7 6.0669 3.7883 741.1854
3 7 2.5 57.1 5.1789 3.7652 423.461
4 8 3 50.0 5.0000 3.7605 360.5307
5 7 4 42.9 4.8211 3.7558 299.0525
6 7 6 28.57 4.4319 3.7457 167.5625
7 7 8 14.3 3.9331 3.7327 3.47
2.3 　药动学参数计算　将实验时间及所得对应的
乌头生物碱体存量用 MCPKP药动学软件处理 ,拟
合药时曲线并将各种模型结果进行比较 ,选择其中
相关系数最佳及 AIC值最小者定为四逆注射剂中
乌头生物碱等总成分的正式药时曲线 。结果表明:
该药总成分在大鼠体内呈一级动力学消除 ,符合静
脉注射后的开放一房室模型(R=0.971, S=0.573)
特征 ,所得各项药动学参数如表 3,拟合药物体存量
随时间变化的动力学方程为:C=0.25531e-0.60965t。
　表 3　　　　　药物累积法所测四逆注射剂
在大鼠体内的药动学参数
D# C0 V Kel T1/2 AUC CL
5400mg/kg 3520.062mg/kg 1.53406mg/kg 0.74356h-1 0.93201h 4734.1h· mg/kg 1.14066kg/kg/h
　　注:D为给药量 , #以制剂中所含附子生药量计算
3 　药动学相关性研究
为研究四逆注射剂的药物累积法与血药浓度法
两种方法之间的相关性 ,即乌头生物碱血药浓度与
附子体存量间的关系 ,结合研究结果〔3〕 ,将 0 ～ 6 h
的血药浓度-时间与体存量 -时间曲线进行相关性分
析 ,结果如下:回归直线方程 Y=0.00038642X+
0.0211339 ,相关系数 r=0.9996,式中 Y为附子体
存量 , X为乌头生物碱血药浓度。
回归分析结果表明:在 0 ～ 6 h内 ,四逆注射剂
中乌头生物碱血药浓度与以附子为指标的总成分体
存量之间存在良好的线性相关关系。说明乌头生物
碱是四逆注射剂的主要成分 ,其药动学特征在很大
程度上可反映总成分在体内的变化规律 。
4　讨论
用药物累积法测得的药动学参数 ,反映了四逆
注射剂中附子等总成分体存量的动态变化规律 ,能
体现药物中多种成分的协同效应 ,符合中医整体观
念。用血药浓度法测得的药动学参数 ,是以四逆注
射剂君药制附子中所含乌头碱 、次乌头碱 、新乌头碱
及其水解产物为指标 ,反映乌头生物碱在体内分布 、
消除的量变规律。
本课题的研究结果证明两种方法间存在良好的
相关性 ,同时说明乌头生物碱既是附子的主要成分 ,
也是该方的主要毒效成分 ,与文献报道有关附子的
研究结果一致;另一方面说明 ,四逆注射剂内的其余
成分对乌头生物碱的药动学过程影响较小 ,生物碱
的药动学特征可以在较大程度上反映附子等总成分
毒性效应的体内变化规律;这种相关性说明药物累
积法的实验数据能为临床安全用药提供参考的参
数。
结合课题组对风痛宁片 〔4〕和丁公藤注射液〔5〕
进行的血药浓度法与药物累积法药动学相关性的研
究 ,证明化学成分药动学与毒效药动学之间存在一
定的平行关系 ,将为建立中药的 PK-PD模型提供一
定的理论基础 。
基金项目:广东省自然科学基金课题(编号:980639)
参 考 文 献
1　肖凤霞.四逆汤的药理研究进展.中医药研究 , 1999, 15
(4)∶60
2　张为亮 ,等 .附子毒效关系的实验研究 .广西中医药 ,
1997, 20(3)∶43
3　肖凤霞 , 等 .四逆制剂中乌头生物碱的药动学参数研
究 .广州中医药大学学报 , 2001, 18(3)∶243
4　周莉玲 ,等 .青藤碱制剂药动学试验中药物累积法与血
药浓度法的相关性研究 .中成药 , 1996, 18(9)∶1
5　周莉玲 ,等 .丁公藤注射液的药动学相关性研究 .中成
药 , 1999, 21(9)∶439
(2005-03-14收稿)
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·588· 中药材第 28卷第 7期 2005年 7月