免费文献传递   相关文献

昭通乌天麻共生萌发菌优良菌株筛选试验



全 文 :园艺学 现代农业科技 2016年第 6期
昭通乌天麻共生萌发菌优良菌株筛选试验
程立君 1 赵艳娟 1 胡志芳 2 李世辉 1 段相程 1
(1昭通学院化学与生命科学学院,云南省高校昭通高原特色农产品工程研究中心,云南昭通 657000; 2昭通苹果研究院)
摘要 研究了自昭通本地分离获得的 4株天麻共生萌发菌的生长特性和对昭通乌天麻产量的影响,并与一株外地优良天麻共生萌发
菌 8103 进行了对比。结果表明:各菌株间存在明显差异,菌丝平均生长速率和生物量依次为 8103>MH-013>MY-001>XCB017>MY-002;室
内萌发试验显示拌种乌天麻种子后萌发效果依次为 MY-001>MH-013>8103>MY-002>XCB017,拌种 MY-002 后种子的生长势最好,MY-
001 次之;大田栽培试验表现最好的是 MH-013,其次为 MY-001 和 8103,MY-002 和 XCB017 较差。4 株昭通天麻共生萌发菌中 MH-013
和 MY-001 较适合在昭通乌天麻有性繁殖生产中大面积推广。
关键词 天麻;萌发菌;菌株筛选
中图分类号 S567.23+9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2016)06-0066-01
Screen of Gastrodia Elata Seed-germinating Strains in Zhaotong
CHEN Li-jun 1 ZHAO Yan-juan 1 HU Zhi-fang 2 LI Shi-hui 1 DUAN Xiang-cheng 1
(1 College of Chemistry and Life Sciences,Zhaotong University,Zhaotong Characteristic Agricultural Products Research Center,Zhaotong Yunnan
657000; 2 Zhaotong Apple Institute)
Abstract 4 Gastrodia elata seed-germinating strains were separated in Zhaotong.We studied their growth characteristics and their effect on
gastrodin production. The results showed that significant differences existed among these strains ,average growth rate and the biomass of hypha followed
as 8103>MH-013>MY-001>XCB017>MY-002. In indoor experiment,the effect of seed germination followed as MY-001>MH-013>8103>MY-002>
XCB017,MY-002 seed growth potential was the best;the second was MY-001. In the field trials,MH-013 was the best strain,the second were MY-
001 and 8103,MY-002 and XCB017 were poorer. From 4 Gastrodia elata seed-germinating strains,MH-013 and MY-001 were suitable for Zhaotong
gastrodia sexual reproduction and large area promotion in the production.
Key words Gastrodia elata;germinating strains;screen
天麻(Gastrodia elata Blume)为属兰科多年生共生草本
植物,无根,无绿色叶片,不能进行光合作用营自养生活。天
麻种子细小如粉尘,无胚乳及其他营养贮备,无外源营养供
给种子不能发芽,必须依靠小菇属(Mycena)一类真菌侵染后
才能正常发芽,其后的生长又需要蜜环菌菌索的侵入提供营
养才能继续生长完成其生活史 [1]。前期笔者及研究者对昭通
乌天麻共生蜜环菌资源进行了调查,对优良菌株进行了分离
筛选、生物学特性及 DNA分子鉴定[2-4],并分离得到过 2株萌
发菌菌株[5]。为进一步提高和稳定天麻产量,需要对促进乌天
麻种子发芽的本地萌发菌进行研究,大量研究表明不同萌发
菌所提供的营养对天麻种子萌发和种子发芽后形成的原球
茎生长均有较大影响,并且不同地域分离得到的萌发菌对天
麻种子的发芽率影响也各不相同 [6-8]。因此,筛选出昭通本地
的优良萌发菌菌株,对提高和稳定天麻产量具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
4株昭通本地萌发菌 MY-001、MY-002、MH-013、XCB017
分别自昭通小草坝野生蕨草根及野生天麻原球茎上分离获
得,8103 从陕西汉中植物研究所获得。
1.2 试验方法
1.2.1 生长速度的测定。在 PDA 平板培养基上接入 5 mm
(直径)的萌发菌圆形菌种块,25℃下静止暗培养,每 24 h 观
察一次生长情况,并记录菌丝的生长速度,每组设 5个重复。
1.2.2 生物量的测定。将 100 mL PD 培养基装入 250 mL三
角瓶中,棉塞封口,121 ℃灭菌 30 min,冷却后备用。每瓶挑
取 8块直径 5 mm的菌种块放入培养基中,在转速 120 r/min,
培养 12 d后,抽滤、干燥称取菌丝体的重量,每组设 5个重复。
1.2.3 萌发试验。①室内萌发试验:参照徐锦堂和郭顺星 [8]
的方法进行。②大田栽培试验:大田试验于 2014 年 6 月至
2015 年 11 月在云南昭通学院实验地进行,采用箱栽的方
法,箱大小为 80 cm×60 cm×40 cm,参照徐锦堂 [1]乌天麻种子
拌萌发菌套蜜环菌播种的方法进行。2 个月后(2014 年 8 月
下旬 )分别开箱检查乌天麻种子的萌发状况 ,一年半后
(2015年 11 月)分别开箱检查白头麻的生长情况。每组处理
设 5个重复,统计方法参照彭述敏 [9]的方法进行。
2 结果与分析
2.1 生长速率对比
由表 1 可知,5 株萌发菌在相同生长条件下,对照优良
菌株 8103 的菌丝生长速度最快,平均达 0.73 cm/d。4株昭通
本地萌发菌中菌丝生长速度最快的是 MH-013,平均生长速
率为 0.60 cm/d,仍比 8103 的平均生长速度相差 0.13 cm/d;
其后依次是 MY-001 和 XCB017,平均生长速率分别为
0.57、0.54 cm/d。经方差分析,MH-013与 MY-001生长速率之
间差异不显著,MY-001 与 XCB017 生长速率之间差异不显
著。MY-002 菌株的生长速度最慢,平均仅为 0.27 cm/d,仅为
8103 和 MY-001 菌丝生长速度的 0.37 倍和 0.47 倍。5 个菌
株菌丝生长速度经方差分析,F=165.76>F0.01,P<0.01,说明各
萌发菌菌株间菌丝的生长速度存在显著差异。
2.2 生物量对比
由表 2可知,5株萌发菌菌株在相同的条件下培养同样
的时间后生物量存在明显差异,8013 的菌丝生物量最大,达
0.716 8 g。4 株本地萌发菌中生物量最大的 MH-013 仍较
8103 低约 20%,生物量最小的 MY-002 较 8103 低约 60%。
(下转第 70页)
作者简介 程立君(1986-),男,湖南岳阳人,助教,硕士,从事食用菌
与中草药资源开发等研究工作。
收稿日期 2016-02-25
66
园艺学 现代农业科技 2016年第 6期
66666666666666666666666666666666666666666666666
菌株 MH-013 和 MY-001 之间的生物量差异不大。5 个菌株
菌丝生物量经方差分析,F=207.125>F0.05,P<0.05,差异显著,
说明各菌种之间的生物量存在着显著差异。
2.3 室内条件下不同萌发菌菌株对乌天麻种子发芽的影响
由表 3可知,5株萌发菌菌株中 MY-001 最早促进乌天
麻种子的萌发,仅用 24 d;种子萌发最晚的是 XCB017,需要
39 d。萌发菌与乌天麻种子拌播 45 d后,MY-001的萌发率最
高,达到 77.62%,其次为 MH-013,萌发率为 72.77%,XCB017
萌发效果最差,仅为 4.38%。种子萌发后生长势最好的为
MY-002,原球茎大小达到 3.54 mm×2.48 mm,MY-001 次之
原球茎大小为 3.10 mm×2.32 mm,XCB017 的效果最差。
2.4 不同萌发菌菌株对乌天麻产量的影响
由表 4 可知,不同萌发菌菌株对乌天麻种子萌发后原
球茎的数量和生长势都有显著影响。拌播 2 个月后,菌株
MY-001 和 MH-013 与乌天麻种子拌种后的原球茎数量最
多,8103 次之,XCB017 最差;拌播 16 个月后,MH-013 产量
最高,白头麻平均数量达到 205 个/箱,重量达到 1.35 kg/箱,
其次为 MY-001 和 8103,平均产量分别为 0.97、0.82 kg/箱,
MY-002和 XCB017效果较差,平均产量仅有 0.35、0.04 kg/箱。
3 讨论
天麻有性繁殖中使用萌发菌能显著提高天麻产量,随
着天麻种植技术的推广 ,传统的三下窝播种方法逐步淘
汰,而使用拌萌发菌套蜜环菌播种必须要有优良的萌发菌
菌种,本研究筛选出的 2 株萌发菌 MY-001 和 MH-013 表
现优良,对提高和稳定昭通天麻产量,促进天麻产业发展
意义重大。
选育促进天麻种子萌发的优良菌株是天麻有性繁殖栽
培成败的关键所在 [10],由于天麻产区的不同,萌发菌菌株的
性状也存在差异。本研究对分离获得的 4 株昭通本地萌发
菌进行生长特性研究和萌发试验结果显示,在 PDA 平板培
养基上菌丝的生长速率与在 PD 培养液中的菌丝的生物量
成正相关,生长速率越快其生物量越大,菌株中 MY-001 和
MH-013 表现优良,生长速率分别达到 0.57、0.60 cm/d,菌丝
生物量达到 0.546 4、0.576 0 g,但均低于菌株 8103 的生长速
率(0.73 cm/d)和菌丝生物量(0.716 8 g)。拌种乌天麻种子后
的发芽效果和乌天麻产量较好的是 MY-001 和 MH-013,均
高于菌株 8103(48.45%、0.82 kg/箱),且差异显著,适合在昭
通乌天麻有性繁殖生产中大面积推广。
4 参考文献
[1] 徐锦堂.中国天麻栽培学[M].北京:北京医科大学中国协和医科大学
联合出版社,1993:1-233.
[2] 冯云利,程立君,陈玉惠,等.云南昭通天麻共生蜜环菌优良菌株筛选
[J].西南林学院学报,2009,29(2):37-39.
[3] 彭述敏,陈玉惠,程立君,等.2 株优良天麻共生蜜环菌生长条件筛选
[J].中国食用菌,2010,29(4):22-25.
[4] 彭述敏,陈玉惠,敖新宇.蜜环菌与菌材不同组合对昭通乌天麻种子
萌发及生长的影响[J].西南林业大学学报,2012,32(3):47-50.
[5] 程立君,陈玉惠,徐畅,等.昭通天麻种子萌发菌的筛选 [J].安徽农业
科学,2009,37(28):13600-13602.
[6] 徐锦堂,郭顺星,范黎,等.天麻种子与小菇属真菌共生萌发的研究
[J].菌物系统,2001,20(1):137-141.
[7] 郭顺星,王秋颖.促进天麻种子萌发的石斛小菇优良菌株特性及作用
[J].菌物系统,2001,20(3):408-412.
[8] 徐锦堂,郭顺星.供给天麻养种子萌发营养的真菌紫萁小菇[J].真菌
学报,1989,8(3):221-226.
[9] 彭述敏.昭通天麻共生优良蜜环菌的筛选及特性研究[D].昆明:西南
林业大学,2011.
[10] 郭顺星,王秋颖.促进天麻种子萌发的石斛小菇优良菌株特性及作
用[J].菌物系统,2001,20(3):408-412.
菌株号 平均生物量
MY-001 0.5464±0.0117 bB
MY-002 0.2878±0.0104 dD
MH-013 0.5760±0.0121 bB
XCB017 0.4594±0.0104 cC
8103 0.7168±0.0102 aA
(g)
表 2 不同萌发菌菌株菌丝的生物量
菌株号 平均生长速度
MY-001 0.57±0.02 bcB
MY-002 0.27±0.01 dC
MH-013 0.60±0.02 bB
XCB017 0.54±0.01 cB
8103 0.73±0.01 aA
注:菌丝的日均生长速率由平均值±标准误差(SE)表示;不同小写字
母表示差异显著(P<0.05);不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。
下同。
(cm/d)
表 1 不同萌发菌菌株在 25℃条件下菌丝的生长速度
菌株号 原球茎数
原球茎大小
mm×mm
白头麻数
个/箱
白头麻重量
kg/箱
MY-001 +++++ 3.10×2.32 198±15 aA 0.97±0.20 abB
MY-002 ++ 3.54×2.48 58±10 cC 0.35±0.11 cC
MH-013 +++++ 2.94×2.30 205±13 aA 1.35±0.32 aA
XCB017 + 1.0×0.87 18±7 dD 0.04±0.02 dD
8103 ++++ 2.21×1.03 129±13 bB 0.82±0.15 bB
表 4 拌种 2 个月和 16个月后乌天麻种子生长效果
的比较
注 :+表示 0~200 粒原球茎 ,++表示 200~400 粒原球茎 ,+++表示
400~600 粒原球茎 ,++++表示 600~800 粒原球茎 ,+++++表示
800~1 000 粒原球茎。
菌株号
种子发芽开始
时间∥d
45 d 后种子平均
发芽率∥%
原球茎大小
mm×mm
MY-001 24 77.62±4.82 3.10×2.32
MY-002 26 23.24±6.29 3.54×2.48
MH-013 25 72.77±1.40 2.94×2.30
XCB017 39 4.38±1.58 1.0×0.87
8103 28 48.45±3.81 2.21×1.03
表 3 拌种 45 d后乌天麻种子萌发效果比较
(上接第 66页)
雾,如用 10%蚜虱一遍净可湿性粉剂 1 000倍液,连喷 2 次。
6 收获
1月底、2 月初,当叶色转黄褪色,肉质根直径膨大至 8~
10 cm、长度在 25~30 cm,基部圆钝,即达到商品标准时,即
可收获。
7 参考文献
[1] 孙玉江,朱洪涛,门文革.北方秋茬白萝卜高产栽培技术[J].现代化农
业,2010(7):25-26.
[2] 叶林金,尹前卫,刘爱国,等.华玉春白萝卜高产栽培技术[J].长江蔬
菜,2005(9):17-18.
[3] 舒毅.白萝卜的高产栽培技术[J].农技服务,2014(8):61.
[4] 朱明先.温室白萝卜的高产栽培技术[J].农村实用科技信息,2004(10):
14.
[5] 马杰,周平,王嵩,等.毕节大白萝卜夏季栽培技术[J].上海蔬菜,2015
(5):37-38.
[6] 张志强.夏季白萝卜高产栽培技术[J].现代农村科技,2009(11):17.
70