全 文 ：收稿日期:2012-04-16
作者简介:闵鹏(1983-) ，男(汉族) ，辽宁抚顺人，硕士研究生，E-mail minpeng2009@ hotmail． com;* 通讯作者:赵庆
春(1967-) ，男(汉族) ，辽宁沈阳人，主任药师，博士，博士生导师，主要从事天然药物研究，Tel． 024-28856205，Fax．
024-28856205，E-mail zhaoqc53@ yahoo． com． cn。
文章编号:1006-2858(2013)02-0146-04
常山胡柚汁对辛伐他汀在体肠吸收的影响
闵 鹏1，马阳妹1，2，赵庆春1* ，孙方迪3
(1. 沈阳军区总医院 药剂科，辽宁 沈阳 110840;2. 沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 110016;
3. 沈阳药科大学 中药学院，辽宁 沈阳 110016)
摘要:目的 研究常山胡柚汁对辛伐他汀大鼠在体肠吸收的影响。方法 用大鼠在体小肠段灌流实
验装置，分别采用 HPLC法和紫外分光光度法测定辛伐他汀和酚红在肠循环液中的含量，观察常
山胡柚汁对辛伐他汀的肠吸收特性的影响。结果 未加入常山胡柚汁实验组的肠循环液中辛伐他
汀含量在 0 ～ 2 h呈明显下降趋势;加入常山胡柚汁实验组的肠循环液中辛伐他汀在 0 ～2 h含量无
显著变化。结论 常山胡柚汁可显著影响辛伐他汀在小肠段的吸收，降低辛伐他汀在小肠的吸收量。
关键词:辛伐他汀;在体肠吸收;常山胡柚汁
中图分类号:R 971 文献标志码:A
辛伐他汀(simvastatin)于 1988 年上世，目前
已成为全球应用最广泛的 5 个他汀类药物之
一［1］。小肠是药物吸收的主要器官，开发促进辛
伐他汀经口给药新剂型，研究药物在小肠段的吸
收情况对剂型及释药机制的设计具有一定的理论
意义。
常山胡柚起源于浙江省常山县青石镇低舖村
和澄潭村，为芸香科植物柚与甜橙的杂交品种。
常山胡柚的原产地域为常山，1830 年由葡萄牙人
从浙江衢州府的常山引种到同纬度的美国佛罗里
达州，称为葡萄柚，即西柚。
近年来国外临床上观察到多起柚汁与药物的
相互作用可影响药物疗效并诱发药物不良反应的
案例。国内外文献报道葡萄柚汁能与药物发生相
互作用，提高药物在体内的血药浓度［2］。本文作
者为了探明形态大小和葡萄柚十分相似的常山胡
柚(Citrus changshan-huyou Y． B． Chang)对辛伐他
汀在体肠吸收的影响，采用在体小肠回流装置，对
同时给予常山胡柚汁后辛伐他汀在大鼠小肠中的
吸收进行了初步研究。
1 仪器与材料
Shimadzu LCD-10AD高效液相色谱仪(包括
SPD-10AV检测器)、UV120D电子分析天平(日本
Shimadzu公司) ，N2000 色谱工作站(浙江大学智
能达有限公司) ，Kromasil C18色谱柱(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ，HL-1 恒流泵(上海青浦沪西仪器
厂) ，可控恒温水浴锅(上海锦屏仪器仪表有限公
司)。
辛伐他汀原料药(含量质量分数为 99. 9%，
浙江海正药业有限公司，批号 081011) ，酚红(国
药集团化学试剂有限公司) ，Kreb-Ringers缓冲液
(每 1 000 mL 内含 NaCl 7. 80 g、KCl 0. 35 g、
CaCl2 0. 37 g、NaHCO3 1. 37 g、NaH2PO4 0. 32
g、MgCl2 20 mg、葡萄糖 1. 40 g，简称 K 氏液，自
制) ，甲醇(色谱纯，市售) ，其他试剂(分析纯，
市售)。
药材购自沈阳市文化路水果批发市场，经沈
阳药科大学中药学院孙启时教授鉴定为常山胡柚
(Citrus changshan-huyou Y． B． Chang)。
SD大鼠，雄性，体质量(250 ± 20)g，购自沈阳
药科大学动物房，动物合格证号:辽实动质字
2003-008。
2 方法
2. 1 肠循环液中辛伐他汀浓度测定
2. 1. 1 常山胡柚汁的制备
称取剥皮后胡柚 6. 11 kg，浸泡在体积分数
60%乙醇中 24 h，将其浸泡液在 50 ℃下浓缩。上
述浸泡、浓缩操作重复 3 次，得到浓缩液。将浓缩
第 30 卷 第 2 期
2 0 1 3 年 2 月
沈 阳 药 科 大 学 学 报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol. 30 No. 2
Feb． 2013 p. 146
液配成质量浓度为 1 mg·L －1的液体。
2. 1. 2 色谱条件
色谱柱:Kromasil C18柱(250 mm × 4. 6 mm，
5 μm) ;检测波长:238 nm;流动相:甲醇-水(体积
比 85∶ 15) ;流速:1. 0 mL·min －1;进样量:10 μL。
2. 1. 3 系统适应性试验
分别取用 K 氏液配制空白肠循环液、加入辛
伐他汀的肠循环样品液、加入常山胡柚汁和辛伐
他汀的肠循环样品液，再配置辛伐他汀对照溶液、
常山胡柚汁和辛伐他汀混合的对照溶液，在
“2. 1. 2”条色谱条件下测定，色谱图见图 1。
A—Solution of in situ intestinal loop;B—Solution of in situ
intestinal loop(simvastatin) ;C—Solution of in situ intestinal
loop(simvastatin and juice of Citrus changshan-huyou Y． B．
Chang) ;D—Simvastatin;E—Juice of Citrus changshan-huy-
ou Y． B． Chang and simvastatin
Fig． 1 HPLC chromatograms of simvastatin in the ref-
erence solutions and intestinal loop solutions
图 1 对照溶液及肠循环液中辛伐他汀的 HPLC谱图
图 1 结果表明，辛伐他汀的保留时间约为
7. 382 min，样品液的主峰保留时间与辛伐他汀对
照液一致，空白液对测定无干扰。
2. 1. 4 肠循环液中酚红标准曲线的绘制
精密吸取用 K 氏液配制的质量浓度分别为
10、20、30、40、50、60 μg·L －1的酚红标准溶液各
5 mL，加入 1 mol·L －1NaOH水溶液 5 mL显色，以
1 mol·L －1NaOH 水溶液为空白对照，于波长 558
nm处测定吸光度(A)。以吸光度(A)对酚红质量
浓度(ρ)进行线性回归，得标准曲线方程为A =
0. 155 1ρ － 1. 56 × 10 －2(R2 = 0. 999 8，n = 6)。由
于小肠在吸收药物的同时也会吸收水分，在供试
液中加入酚红是由于酚红不被小肠吸收，通过测
定酚红的浓度矫正供试液的体积变化，以便准确
计算出小肠吸收的药物量。
2. 1. 5 辛伐他汀标准曲线的绘制
精密称取干燥至质量恒定的辛伐他汀对照品
适量，用空白肠回流液配制系列质量浓度分别为
5. 0、1 0、20、40、80、120 mg·L －1的辛伐他汀标准
液。在波长 238 nm处测定峰面积，用测得的峰面
积(A)对辛伐他汀质量浓度(ρ)进行回归，得标准
曲线方程 A = 7. 099 8 × 104ρ + 4. 782 3 × 104(R2 =
0. 999 0，n = 6)。表明辛伐他汀质量浓度在 5. 0 ～
120 mg·L －1内与峰面积呈良好的线性关系。
2. 1. 6 回收率和精密度试验
用空白肠回流液配制 10、40、100 mg·L －1的
辛伐他汀对照溶液，按“2. 1. 2”条色谱条件测定
吸光度，然后与辛伐他汀标准液的吸光度进行比
较，计算回收率。上述 3 种质量浓度的平均回收
率分别为 100. 3%、101. 7%和 99. 4%(n = 3)。将
3 种质量浓度在同一天测定 5 次，考察日内 RSD，
结果日内 RSD 分别为 0. 3%、1. 1%和 0. 29%，表
明该方法适用于测定肠循环液中药物的含量。
2. 2 大鼠在体肠吸收试验
2. 2. 1 供试液的配制
精密称取酚红 20 mg 加至 1 L 的量瓶中，加
K氏液溶解，定容，得空白肠循环液。精密称取辛
伐他汀 10 mg加到 1 L 上述肠循环液中，以体积
分数为 0. 5%吐温-80 为增溶剂，充分搅拌使药物
溶解，得供试液 A，辛伐他汀的质量浓度为
10 mg·L －1;取浓缩胡柚汁 0. 1 mg加到 100 mL上
述对照组肠循环液中，得供试液 B，胡柚汁的含量
为 1. 0 mg·L －1。
741第 2 期 闵 鹏等:常山胡柚汁对辛伐他汀在体肠吸收的影响
2. 2. 2 肠吸收试验方法
选择雄性 SD大鼠，每组 3 只，对小肠全段进
行肠吸收实验［3］。实验前大鼠在自由饮水的条
件下禁食 18 h。实验开始，用 10 g·L －1苯巴比妥
钠溶液腹腔注射将大鼠麻醉后，固定于手术台上，
打开腹腔，在小肠全段两端剪切后插管，结扎。先
用少量 37 ℃的生理盐水冲洗肠段，冲洗 10 min
后，换成 37 ℃ K氏液循环 10 min，再以空气排出
K氏液。接着用 100 mL供试液以 5 mL·min －1的
流速循环 10 min，记为 0 时。后将流速调至
2. 5 mL·min －1，分别于回流 0. 25、0. 5、0. 75、1、
1. 25、1. 5、1. 75、2 h 各取样 2 mL，同时补充 2 mL
循环用 K 氏液。将所得的样品溶液经 0. 45 μm
微孔滤膜过滤，弃去初滤液，分别取 1 mL 续滤液
作为测定剩余辛伐他汀质量浓度样品。
3 结果
每个时间点的样品液重复测定 3 次，分别计
算 RSD值(表 1)。以时间为横坐标，以肠循环液
中辛伐他汀 3 次测定的平均质量浓度为纵坐标，
做出辛伐他汀含量变化曲线，结果见图 2。
Table 1 The content of simvastatin in the test of rat intestinal absorption
表 1 大鼠肠吸收实验辛伐他汀含量
t /h ρ(A)/(mg·L －1) RSD /% ρ(B)/(mg·L －1) RSD /%
0 9. 89 9. 92 10. 1 0. 9 10. 2 9. 99 9. 97 1. 0
0. 25 3. 85 3. 71 3. 80 1. 5 8. 75 8. 69 8. 71 0. 3
0. 50 3. 72 3. 62 3. 60 1. 4 8. 68 8. 76 8. 66 0. 5
0. 75 3. 40 3. 30 3. 45 1. 9 8. 72 8. 90 8. 87 0. 9
1. 00 1. 23 1. 29 1. 26 1. 9 7. 98 7. 82 7. 99 1. 0
1. 25 1. 14 1. 18 1. 15 1. 5 8. 49 8. 37 8. 45 0. 6
1. 50 1. 09 1. 05 1. 08 1. 6 8. 38 8. 30 8. 35 0. 4
1. 75 1. 02 0. 98 1. 01 1. 7 7. 85 7. 78 7. 84 0. 4
2. 00 0. 96 1. 00 0. 99 1. 7 7. 90 7. 99 7. 97 0. 5
Notes:Solution A—Solution of in situ intestinal loop(simvastatin) ;Solution B—Solution of in situ intestinal loop(simvasta-
tin and juice of Citrus changshan-huyou Y． B． Chang) (solution)
◆—Solution of in situ intestinal loop(simvastatin) (solution
A) ;■—Solution of in situ intestinal loop(simvastatin and
juice of Citrus changshan-huyou Y． B． Chang) (solution B)
Fig． 2 The area curve line of the simvastatin in situ in-
testinal loop
图 2 肠循环液中辛伐他汀含量变化曲线
结果显示:供试液 A和供试液 B 中辛伐他汀
的质量浓度随着时间的变化有明显的区别。从图
2 可明显看出，未入常山胡柚汁组的辛伐他汀含
量在 0 ～ 0. 25 h内明显下降、在 0. 25 ～ 0. 75 h 内
缓慢下降、在 0. 75 ～ 1 h 内明显下降、在 1. 0 ～
2. 0 h内没有明显变化;加入常山胡柚汁组的辛伐
他汀含量在 0 ～ 2 h 内无明显变化。即加入常山
胡柚汁组的辛伐他汀的肠吸收量明显下降。说明
常山胡柚汁可以显著减少辛伐他汀在小肠段的吸
收。
4 讨论
4. 1 药物质量浓度的测定
在大鼠在体肠段灌流实验中，由于水分可被
肠壁吸收，可使测得的辛伐他汀质量浓度产生误
差。在供试液中加入酚红，由于酚红不被肠壁吸
收，以测定小肠对水分的吸收量。采用紫外分光
光度法测定肠循环液中酚红的质量浓度，计算出
水分吸收量，以准确计算肠循环液中辛伐他汀的
质量浓度。
4. 2 影响药物吸收的机制
相关研究表明，葡萄柚汁可以抑制有机阴离
子转运多肽(organic anion transporting polypep-
tide，OATP)的作用［4］，又能抑制 P-糖蛋白(P-gp)
841 沈 阳 药 科 大 学 学 报 第 30 卷
的外排作用。OATP在胃、小肠、肝、肾、脑等多个
器官中都有表达，是组织细胞摄取内源性和外源
性物质的关键性因素，如果 OATP功能受到抑制，
将影响药物的肠吸收量。Shirasaka Y 等研究表
明，葡萄柚汁可以影响普伐他汀及匹伐他汀肠吸
收，其原因在于普伐他汀和匹伐他汀都是 OATP
的底物，而匹伐他汀同时还是 P-gp的底物［5］。
作者通过大鼠在体肠吸收实验，证实了常山
胡柚汁可以明显减少辛伐他汀在小肠段的吸收
量。为进一步探讨常山胡柚汁对药物肠吸收的影
响奠定了基础。形态大小和美国产葡萄柚十分相
似的常山胡柚的果汁是否通过抑制 OATP及 P-gp
的功能，影响药物的肠吸收，还有待进一步的研
究。
4. 3 对临床用药的指导意义
药物-食物之间的相互作用非常普遍，也日益
受到医药学行业工作人员的关注。当食物明显影
响到药物吸收量时就需要密切关注，避免同时使
用。本文作者已证实了常山胡柚汁可以减少辛伐
他汀的肠吸收，服用此类药物的时候应该拒食胡
柚或葡萄柚。进一步研究胡柚汁影响药物肠吸收
的成分及机制，对指导临床合理用药将有更深一
层的意义。
参考文献:
［1］孙忠实．辛伐他汀的评价［J］．中国药学杂志，2003，
38(9) :711 － 712．
［2］ DIACONU C H，CUCIUREAN M，VLASE L． Food-drug
interactions:grapefruit juice［J］． 2011，115(1) :245 －
50．
［3］赵丽华，王玉鹏．辛伐他汀在大鼠中在体肠吸收动力
学的研究［J］．药学服务与研究，2008，8(1) :49 － 51．
［4］黄救救，李楠． 有机阴离子转运多肽及其对药物吸
收、分布和排出的影响［J］．今日药学，2010，12(20) :
1 － 4．
［5］ SHIRASAKA Y，SUZUKI K，NAKANISHI T． Differential
effect of grapefruit juice on intestinal absorption of st-
atins due to inhibition of organic anion transporting poly-
peptide and /or P-gp［J］． J Pharm Sci，2011，100(9) :
3843 － 3853．
Effect of Citrus changshan-huyou Y． B． Chang juice
on the intestinal absorption of simvastatin
MIN Peng1，MA Yang-mei1，2，ZHAO Qing-chun1* ，SUN Fang-di3
(1． Department of Pharmacy，General Hospital of Shenyang Military Area Command，Shenyang 110016，
China;2． School of Pharmacy，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China;3． School of
Traditional Chinese Materia Medica，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China)
Abstract:Objective To explore the absorption of simvastatin at segments of intestine in rats．Methods The
absorption kinetics was investigated using in situ perfusion method in rats． HPLC and UV were used to deter-
mine the concentrations of simvastatin and phenol sulfonphthalein in circulating solution，respectively． The
impact of Citrus changshan-huyou Y． B． Chang juice on intestinal absorption characteristics of simvastatin
was studied． Results The content of simvastatin in intestinal loop solutions decreased significantly in 0-2 h in
the group without Citrus changshan-huyou Y． B． Chang juice． However，the content of simvastatin did not
change significantly in 0-2 h in the group with Citrus changshan-huyou Y． B． Chang juice． Conclusions The
result demonstrates that Citrus changshan-huyou Y． B． Chang juice can significantly affect the intestinal ab-
sorption kinetics of simvastatin and then reduce its intestinal absorption amount．
Key words:simvastatin;intestinal absorption in vivo;Citrus changshan-huyou Y． B． Chang juice
941第 2 期 闵 鹏等:常山胡柚汁对辛伐他汀在体肠吸收的影响