全 文 ：栀子提取物中栀子苷油水分配系数及大鼠
肠吸收动力学研究
张倩怡１，杜守颖１，陆洋１，饶秀丽２
（１．北京中医药大学 中药学院，北京 １００１０２；
２．江西济民可信集团，江西 南昌 ３３００９６）
［摘要］ 目的：以栀子苷为指标成分测定栀子提取物油水分配系数，研究栀子提取物肠吸收动力学。方法：采用经典摇
瓶法测定栀子提取物中栀子苷的油水分配系数；采用大鼠在体肠吸收模型研究栀子提取物中栀子苷的肠吸收情况，考察其在
小肠各段的吸收情况及药物浓度对吸收的影响。结果：栀子提取物中栀子苷的油水分配系数Ｐ＝０１０７７，ｌｏｇＰ＝－０９６７８；质
量浓度为０２，０８，２ｇ·Ｌ－１的栀子提取物（分别含栀子苷００７８，０３１１，０７８０ｇ·Ｌ－１）吸收速率常数分别为（０１２５±００１２）
ｈ，（００５８±０００４）ｈ，（００３４±０００８）ｈ。药物浓度不同时吸收速率常数有显著性差异（Ｐ＜００１）；栀子苷在十二指肠、空肠、
回肠中的吸收速率常数分别为（００１９±０００３），（００１５±０００２），（００１２±０００２）ｈ，不同肠段吸收速率常数有显著性差异
（Ｐ＜００２）。结论：栀子苷在正辛醇水两相体系中的ｌｏｇＰ为负值，根据经典理论推测为吸收较差物质；栀子苷在大鼠小肠的
吸收速率随浓度的增加而减小，提示药物的吸收机制除了被动扩散外，可能有主动转运和易化扩散因素；栀子苷在大鼠整段
小肠内均有吸收，在十二指肠中吸收速率较大。
［关键词］ 栀子提取物；大鼠在体肠吸收；油水分配系数
［收稿日期］ ２００８１１１０
［基金项目］ “十一五”国家科技支撑计划项目（２００６ＢＡ１０６Ａ１７）
［通信作者］ 杜守颖，博士，教授，博士生导师。研究方向：中药新
剂型与新技术。Ｔｅｌ：（０１０）８４７３８６４５，Ｅｍａｉｌ：ｄｕｓｈｏｕｙｉｎｇ＠２６３．ｎｅｔ
栀子为茜草科植物 ＧａｒｄｅｎｉａｊｉａｍｉｎｎｏｉｄｅｓＥｌｉｓ
的干燥成熟果实，具有凉血解毒、清热利尿、泻火除
烦之功效，可用于热病心烦、黄疸尿赤、血淋涩痛、
血热吐衄、目赤肿痛、火毒疮疡、扭伤。栀子主要含
有环烯醚萜类、有机酸类及色素类等化学成分。栀
子苷属环烯醚萜类成分，是栀子的主要有效成分。
药理研究证明栀子苷具有抗炎、解热、利胆、轻泻作
用，大量研究证实栀子苷单独使用或配伍使用对脑
缺血再灌注损伤有较好疗效［１２］。一般认为，药物以
分子型通过生物膜时，如果脂溶性差则不易通过生
物膜，但脂溶性太好会发生与类脂强烈结合的现象，
不易与水性体液混合再转运，所以理论上只有兼具
一定亲水性和亲脂性的药物在肠道内才有较好吸收
和转运，本实验测定了栀子苷提取物指标成分栀子
苷的油水分配系数，又根据大鼠小肠的生理状况与
人类相似这一性质，采用大鼠在体小肠灌流模型，研
究了栀子苷的小肠吸收动力学，以期体外与体内方
法相结合，共同考察栀子提取物的吸收情况。
１ 材料
１．１ 动物
ＳＤ大鼠，雄性，体重２２０～２５０ｇ［北京维通利华
实验动物技术有限公司提供，动物许可证号 ＳＣＸＫ
（京）２００７０００１］。
１．２ 仪器
ＤＳＨ２３００多用途恒温水浴振荡器；ＤＤＢ３００
电子蠕动泵（上海之信仪器有限公司）；Ａｇｉｌｅｎｔ１１００
系列高效液相色谱仪（美国惠普）。
１．３ 药品及试剂
栀子提取物（实验室自制，栀子苷含量约
３８％）；栀子苷对照品（中国药品生物制品检定所，
批号１１０７４９２００４１０）；乙腈（色谱纯，默克公司）；其
他试剂为分析纯。
２ 方法
２．１ 栀子提取物中栀子苷油水分配系数的测定
２．１．１ 栀子苷油水分配平衡时间曲线的测定
蒸馏水与正辛醇混合后室温搅拌２４ｈ后静置
过夜，分液后得到水饱和正辛醇与正辛醇饱和水。
精密称取栀子提取物０１４２０ｇ于１００ｍＬ量瓶中，
正辛醇饱和水稀释至刻度。移取药物正辛醇饱和水
溶液２ｍＬ于１０个具塞三角瓶中，加入水饱和正辛
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醇使水油比例为 １∶９，水浴恒温振荡（３７℃，１２０
次／ｍｉｎ），于２，４，６，１２，１８ｈ各取 ２份，离心分离，
ＨＰＬＣ测定水相中栀子苷含量［３］。按下式计算油水
分配系数：
油水分配吸收Ｐ＝（Ｗｏ／Ｖｏ）／（Ｗｗ／Ｖｗ）
Ｗｏ：末时油相中药量 ＝初始水相中药量 －末时水相中
药量；Ｗｗ：末时水相中药量；Ｖｏ：油相体积；Ｖｗ：水相体积
２．１．２ 栀子苷油水分配系数的测定
精密称取栀子提取物００７３０ｇ于５０ｍＬ量瓶
中，正辛醇饱和水溶解并稀释至刻度，作为高浓度药
液。将高浓度药液稀释１０倍得到低浓度药液。按
上述方法操作测定２种浓度时的油水分配系数，振
荡时间为６ｈ。
２．２ 栀子苷的大鼠在体肠循环实验
２．２．１ 试液配制
ＫｒｅｂｓＲｉｎｇｅｒ＇ｓ营养液（下文简称 Ｋ试液）：称取
ＮａＣｌ７８ｇ，ＫＣｌ０３５ｇ，ＣａＣｌ２０３７ｇ，ＮａＨＣＯ３１３７
ｇ，ＮａＨ２ＰＯ４０３２ｇ，ＭｇＣｌ２００２ｇ，葡萄糖１４ｇ，加蒸
馏水使成１０００ｍＬ［４］。
肠循环液配制：分别精密称取栀子提取物１０，
４０，１００ｍｇ于５０ｍＬ量瓶中，Ｋ氏液溶解并稀释至
刻度，作为低、中、高３个浓度的药物肠循环液。
２．２．２ 肠循环液中栀子苷的含量测定
色谱条件：ＤｉａｍｏｎｓｉｌＴＭ Ｃ１８色谱柱（４６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈水（１４∶８６）；检测波长
２３８ｎｍ；流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温为室温（图１）。
Ａ．空白肠液；Ｂ．对照品；Ｃ．供试品；１．栀子苷。
图１ 栀子苷的大鼠肠吸收ＨＰＬＣ
标准曲线：栀子苷质量浓度（Ｃ）在 ００３９８～
０３９８μｇ与峰面积（Ａ）线性关系良好，回归方程为
Ａ＝１４０９１５Ｃ－１４９（ｒ＝０９９９９），符合实验要求。
精密度试验：同一对照品溶液重复进样５次，精
密度良好（ＲＳＤ０４６％）。
稳定性试验：含栀子提取物的肠循环液经流动
相稀释后于不同时间点进样测定，栀子苷２４ｈ内稳
定性良好（ＲＳＤ１６３％），符合实验要求。加样回收
率试验：在已知含量肠循环液加入定量的对照品溶
液后测定（ｎ＝５），加样回收率符合要求（ＲＳＤ
０３５％）。
２．２．３ 栀子苷在大鼠空白肠循环液中的稳定性
考察
取空白 Ｋ氏液５０ｍＬ于大鼠肠中循环３ｈ，制
成空白肠液。以空白肠液制备质量浓度为０９ｇ·
Ｌ－１栀子提取物溶液，３７℃水浴恒温，分别于 ０，
０２５，０５，１，２，３ｈ取样测定，考察栀子苷在空白肠
液中的稳定性。
２．２．４ 栀子苷在蠕动泵管路的物理吸附情况考察
以Ｋ氏液制备浓度为０４４ｇ·Ｌ－１栀子提取物
溶液２５ｍＬ，３７℃水浴恒温，于体外空循环３ｈ，在
０，０２５，０５，３ｈ取样测定，考察栀子苷在管路的吸
附情况。
２．２．５ 大鼠在体肠循环实验
大鼠禁食１２ｈ，自由饮水，１０％水合氯醛麻醉，
沿腹中线打开３ｃｍ，在十二指肠上端和回肠下端各
切一小口，十二指肠上端插入硅胶管后，用线扎紧，
３７℃预热的生理盐水以５ｍＬ·ｍｉｎ－１流速冲净小肠
内容物，排净生理盐水，在回肠下端插入硅胶管做成
循环回路。先以５ｍＬ·ｍｉｎ－１循环１０ｍｉｎ，再以２５
ｍＬ·ｍｉｎ－１循环，改变流速时即为０时，以后分别在
０５，１，１５，２，２５，３ｈ取样２ｍＬ，每次取样后都补
加空白Ｋ氏液２ｍＬ。在循环回路中用５０ｍＬ量筒
盛装含药肠循环液，每到取样时间点读取液体体积，
待循环完毕，用空气排净肠内和管路内液体，即为肠
道和管路的死体积。死体积加上每一时间点的量筒
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读数即为该时间点循环液体积。以此方法进行肠循
环液的体积校正。研究栀子苷在不同肠段的吸收情
况时，按如下方法取肠段，十二指肠自幽门下１ｃｍ
处起向下 １０ｃｍ，空肠自幽门下 １５ｃｍ起向下 １０
ｃｍ，回肠自盲肠向上２０ｃｍ起向下１０ｃｍ。
２．２．６ 吸收动力学参数的计算
剩余药量Ｘｎ＝ＣｎＶｎ＋２∑
ｎ－１
ｉ＝１
Ｃｉ
Ｃｎ药物浓度，Ｖｎ肠循环液体积。
以小肠内剩余药量的对数（ｌｎＸ）对取样时间 ｔ
作图，由直线斜率求出吸收速率常数Ｋ（ｈ）。
吸收半衰期 ｔ１／２（ｈ）可由下式计算：ｔ１／２（ｈ）＝
０６９３／Ｋ；
３ｈ累计吸收率＝０剩余药量－３ｈ剩余药量０剩余药量 ×１００％
２．３ 统计方法
采用ＳＡＳ统计软件方差分析，即两两之间多重
比较双侧ｔ检验方法，对实验数据进行统计分析。
３ 结果
３．１ 栀子苷油水分配系数测定
３．１．１ 栀子苷油水分配平衡时间的测定
油水分配平衡时间曲线见图２，结果见表１。观
察时间与油水分配系数关系可知，６，１２，１８ｈ３个时
间点Ｐ值的 ＲＳＤ２０３％，这说明在６ｈ时，栀子提
取物中栀子苷在油水两相中分配已达到基本平衡，
在之后测定油水分配系数时，可以此为依据确定振
荡平衡时间为６ｈ。
表１ 栀子提取物中栀子苷油水分配平衡时间曲线测定
时间
／ｈ
Ｃｗ
／ｇ·Ｌ－１
Ｃｏ
／ｇ·Ｌ－１
Ｐ
２ ０３１０４ ００２４１ ００７７７
０３１２１ ００２３９ ００７６６
４ ０２６７６ ００２８９ ０１０７９
０２７２１ ００２８４ ０１０４２
６ ０２６３７ ００２９３ ０１１１１
０２５７９ ００２９９ ０１１６１
１２ ０２６２２ ００２９５ ０１１２４
０２６２１ ００２９５ ０１１２４
１８ ０２６３４ ００２９３ ０１１１３
０２６６５ ００２９０ ０１０８８
注：Ｃｗ栀子苷在水相中的质量浓度；Ｃｏ栀子苷在油相中的质
量浓度；Ｐ栀子苷的油水分配系数。
图２ 栀子苷油水分配系数时间曲线
３．１．２ 栀子苷油水分配系数测定
高低浓度油水分配系数值见表２，ＲＳＤ２９８％。
一般认为ｌｏｇＰ等于２～３的药物在肠道中较易被吸
收，而当药物的 ｌｏｇＰ＜０时不易被肠道吸收。栀子
苷的ｌｏｇＰ＝－０９６７８，油水分配系数预测其在肠道
内吸收情况不理想。
表２ 栀子苷油水分配系数测定结果
栀子苷浓度
／ｇ·Ｌ－１
Ｃｗ
／ｇ·Ｌ－１
Ｃｏ
／ｇ·Ｌ－１
ｐ 珋ｐ
ＲＳＤ
／％
０５５２０ ０２７４５ ００２９４ ０１０７１
０２７８７ ００２８９ ０１０３８ ０１０７７ ２９８
００５５０ ００２６９ ０００３０ ０１１１６
００２７３ ０００３０ ０１０８３
注：Ｃｗ栀子苷在水相中的浓度；Ｃｏ栀子苷在油相中的浓度；
Ｐ栀子苷的油水分配系数。
３．２ 栀子苷的大鼠在体肠吸收试验
３．２．１ 栀子苷在大鼠空白肠液中的稳定性考察
栀子苷在空白肠液的稳定性考察结果见表３，
ＲＳＤ１４５％，栀子苷在３７℃的空白肠液中３ｈ内基
本稳定。
表３ 栀子苷在空白肠循环液中的稳定性
时间／ｍｉｎ 峰面积 面积均值 ＲＳＤ／％
０ ４８１８
０２５ ４８０３
０５ ４９６１ ４８２９ １４５
１ ４８０７
２ ４８３１
３ ４７５３
３．２．２ 栀子苷在蠕动泵管路的物理吸附情况考察
栀子苷在管路的物理吸附情况见表４，各时间
点样品峰面积 ＲＳＤ２０２％，３ｈ内栀子苷在循环管
路中基本不吸附。
３．２．３ 大鼠在体肠吸收实验结果
３．２．３．１ 药物浓度对栀子苷吸收速率的影响 分
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表４ 栀子苷在蠕动泵管路的物理吸附
时间／ｍｉｎ 峰面积 面积均值 ＲＳＤ／％
原液 ５７８０
０ ５５６０
０２５ ５５３８ ５６７１ ２０３
０５ ５７６９
３ ５７０９
别考察了质量浓度为０２，０８，２ｇ·Ｌ－１的栀子提取
物（分别含栀子苷００７８，０３１１，０７８０ｇ·Ｌ－１）中栀
子苷的Ｋ、吸收半衰期 ｔ１／２和３ｈ累计吸收率。结果
见表５。分别以剩余药量的对数值对时间作图，见
图３。统计结果表明，不同浓度时栀子苷在大鼠小
肠内的吸收速率常数有显著性差异。实验证明药物
浓度对栀子苷吸收有影响，吸收速率随栀子苷浓度
增加而减小。
表５ 不同浓度栀子苷的吸收动力学参数（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４）
剂量
／ｇ·Ｌ－１
Ｋ
／ｈ
ｔ１／２
／ｈ
３ｈ累计吸收率
／％
００７８ ０１２５±００１２ ５６±０６ ３３１±０８
０３１１ ００５６±０００３ １２３±０９ １５９±１１
０７８０ ００３４±０００８ ２０７±４８ ９８±１５
▲．０７８０ｇ·Ｌ－１；■．０３１１ｇ·Ｌ－１；◆．００７８ｇ·Ｌ－１
图３ 不同浓度的竚子苷在大鼠小肠的吸收曲线
３．２．３．２ 栀子苷在不同肠段的吸收速率 以栀子
苷剩余药量的对数值对时间作图，结果见图４。计
算栀子提取物中栀子苷在小肠不同部位的吸收速
率常数 Ｋ，吸收半衰期 ｔ１／２和３ｈ累计吸收率，结果
见表６。统计结果表明，不同肠段间吸收速率有显
著性差异。其中，十二指肠与回肠的吸收速率常
数具有显著性差异，十二指肠吸收速率明显高于
回肠，十二指肠与空肠、空肠与回肠间吸收速率无
显著性差异，但仍可见十二指肠吸收速率稍高于
空肠，空肠吸收速率稍高于回肠。栀子苷在全小
肠均有吸收。
图４ 栀子苷在大鼠不同肠段的吸收曲线
表６ 栀子苷在不同肠段中的吸收动力学参数
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４）
肠段
Ｋ
／ｈ－１
ｔ１／２／ｈ
３ｈ累计吸收率
／％
十二指肠 ００１９±０００３ ３７１±６４ ５４±１０
空肠 ００１５±０００２ ３９６±８２ ４０±０５
回肠 ００１２±０００２ ５５７±１２５ ３５±１０
４ 讨论
在进行大鼠在体肠循环实验中，小肠在吸收药
物的同时也吸收水分，致使循环液的体积减少，所以
必须进行体积校正。在循环液中加入离子型化合物
酚红是经典的校正体积方法，但近年来不断有文献
报道酚红在小肠中也会被吸收，且吸收速率为：十二
指肠＞空肠＞回肠，故其不宜用来标示循环液的体
积变化［５］。本实验初期也进行了用酚红校正体积
的在体肠吸收实验，结果用酚红校正所得的终体积
比实际测得的终体积大１０ｍＬ至１５ｍＬ不等，给实
验结果带来严重误差。故本实验最终采用了用量筒
直接读取体积的校正方法，不但简化了实验步骤，也
排除了酚红对于栀子苷在大鼠小肠吸收中的影响。
实验证明，药物浓度对栀子苷在大鼠小肠中的
吸收速率有影响，说明栀子苷大鼠小肠吸收具有饱
和现象，提示其在体内的吸收机制不仅是单纯的被
动吸收过程，可能存在主动转运和易化扩散因素。
试验中测得栀子提取物中栀子苷ｌｏｇＰ为－０９６７８，
一般认为当 ｌｏｇＰ＜０时，预测药物在肠道的吸收情
况不理想。主要原因为药物水溶性强不易通过生物
膜。而在体肠吸收实验所得累积吸收率，尤其是小
浓度时吸收率并不很低，这也从另一个角度证明了
存在主动转运和易化扩散因素的可能。
油水分配系数是指在溶解达到平衡时，溶质在
两互不相容的液体中的浓度之比。其在特定条件下
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是常数，与加入溶质的量无关。但这一定理只适用
于稀溶液，且溶质在两液体中不能发生缔合、解离和
溶剂化作用。所以在测定栀子苷油水分配系数时，
在同一特定条件下测定了２个栀子苷浓度的 Ｐ值，
其中一浓度为另一浓度的１０倍。测定结果显示２
种浓度的 Ｐ值很接近，证明了在设定的浓度范围
内，浓度因素并没有影响分配系数的测定，实验结果
可靠。在油相选择方面，多种有机溶剂曾被采用，例
如氯仿、橄榄油，试验选择正辛醇作为油相，是因为
正辛醇更接近生物相，其极性和溶解性能比其他惰
性溶剂好，更能模拟药物在体内分配的过程。目前
除特殊情况外，正辛醇已成为测定油水分配系数时
公认的油相选择。实验中设定油水两相体积比为
９∶１，是因为当分配平衡时两相中溶质的量越相近测
得的Ｐ值越准确，而栀子苷水溶性好，所以设定此
比例。
［参考文献］
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缺糖／再灌注损伤的保护作用［Ｊ］．中国药学杂志，２００４，３９
（５）：３４４．
［２］ 朱晓磊，张娜，李澎涛，等．栀子苷阻抑脑缺血损伤级联反应的
作用环节探讨［Ｊ］．中国中药杂志，２００４，２９（１１）：１０６５．
［３］ 中国药典．一部［Ｓ］．２００５：１７３．
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［５］ 胡一桥，郑梁元，钱陈钦，等．离子型药物酚红的小肠吸收研究
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ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＯ／Ｗ ｐａｒｔｉｔｉｏｎｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔａｎｄａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ
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ｔｉｖｅｒａｔｅｃｏｎｓｔａｎｔｓ（Ｋ）ｏｆｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅａｔｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ００７８，０３１１，０７８０ｇ·Ｌ－１ｗｅｒｅ（０１３０±０００７），（００５６±０００３），
（００３１±０００６）ｈ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅＫｏｆｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅｗｅｒｅ（００１９±０００３），（００１５±０００２），（００１２±０００２）ｈａｔｄｕｏｄｅｎｕｍ，
ｊｅｊｕｎｕｍ，ｉｌｅｕｍ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅＰａｎｄｔｈｅｌｏｇＰ，ｉｔｃｏｕｌｄｂｅｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅａｔ
ｓｍａｌｉｎｔｅｓｔｉｎｅｗａｓｐｏｏｒａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ；Ｔｈｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｃｒｅａｓｅｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；Ｔｈｅｉｒａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｗａｓｆｉｒｓｔｏｒｄｅｒｐｒｏｃｅｓｓｂｅｓｉｄｅｓｔｈｅｐａｓｓｉｖｅｄｉｆｕｓｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍ，ａｎｄｆａｃｉｌｉｔａｔｅｄｄｉｆｕｓｉｏｎａｎｄａｃｔｉｖｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｍａｙａｌｓｏｔａｋｅｐａｒｔｉｎｔｈｅ
ｔｒａｎｓｐｏｒｔｐｒｏｃｅｓｓ．Ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅｗａｓａｂｓｏｒｂｅｄａｔａｌｓｍａｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｓｅｇｍｅｎｔｓｏｆｒａｔｓ，ｂｕｔｔｈｅｄｕｏｄｅｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｈｉｇｈｅｒｍｏｒｅｔｈａｎ
ｏｔｈｅｒｓｅｃｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ；ｉｎｓｉｔｕｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｐｅｒｆｕｓｉｏｎｍｏｄｅｌ；Ｏ／Ｗｐａｒｔｉｔｉｏｎｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
［责任编辑 古云侠］
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