全 文 ：华西药学杂志
W C J P S　2007, 22(2):186 ～ 188 　　
1. 2. 9　生物等效性分析　复方氨酚烷胺胶囊受试
与参比药物中对乙酰氨基酚及咖啡因的 AUC0 -24 、
Cmax分别未经对数转换及对数转换后方差分析和单
双侧 t检验结果显示 ,两药间无显著性差异;受试
与参比药物的对乙酰氨基酚和咖啡因的 Tmax分别用
实测的 Tmax经非参数统计 W ilcoxo法进行检验 ,两药
表 3　对乙酰氨基酚和咖啡因的主要药动学参数
Table 3　The m a in pharm acokinetics o f paracetamo l and caffeine
Sam p les Param eter Test capsu les S tandard capsu les
Paracetm olT1 /2k a /h 0. 24±0. 23 0. 15±0. 14
T1 /2k e /h 2. 31±0. 67 2. 48±0. 63
Tm ax /h 0. 97±0. 47 0. 86±0. 39
Cmax /μg m l- 1 8. 40±2. 99 8. 62±5. 00
MRT(0- 24) /h 7. 16±1. 28 7. 86±1. 90
AUC(0 - 24) /m g h L- 1 35. 42±9. 54 33. 84±10. 37
F /% 107. 9±26. 1
C affeine T1 /2k a /h 0. 16±0. 11 0. 12±0. 07
T1 /2k e /h 5. 56±1. 60 5. 69±2. 24
Tm ax /h 0. 94±0. 24 0. 90±0. 19
Cmax /μg m l- 1 1. 22±0. 31 1. 26±0. 42
MRT(0- 24) /h 9. 47±2. 21 9. 96±3. 44
AUC(0 - 24) /m g h L- 1 8. 80±2. 01 8. 43±2. 23
F /% 105. 3±11. 0
间无显著性差异。具有生物等效性;对乙酰氨基酚
的相对生物利用度为 107. 9%±26. 1%,咖啡因的
相对生物利用度为 105. 3%±11. 0%。受试者服药
后有轻微的嗜睡不良反应外 ,未见其他不良反应 。
2　讨论
在同一色谱条件及血样处理方法下 ,同时测定
血样中对乙酰氨基酚和咖啡因的血药浓度 ,该方法
简便 、快捷 、灵敏 、重复性好 ,能满足药物动力学研究
的需要。
参考文献:
[ 1] 　 邓子 ,华剑. HPLC测定测定人血清中咖啡因浓度 [ J] .中国
现代应用药学杂志 , 1994, 17(2):121 -123.
[ 2] 　 杨俊毅 ,蒋学华 ,林舒 ,等. RP -H PLC同时测定血浆中对乙
酰氨基酚和咖啡因浓度 [ J] .华西药学杂志, 2003, 18(2):110 -
112.
[ 3] 　 王玉 ,张秸 ,陈西敬 ,等. 高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚
的血药浓度及其生物利用度 [ J] .中国临床药学杂志 , 2002,
11(2):97 -99.
收稿日期:2006 - 06
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (批准号:30500636)
作者简介:秦 ,女 ,正攻读药剂学专业的硕士学位。
*通讯作者(Corresponden t au thor), E -m ail:huangyuan0@163. com
岩白菜素的大鼠在体肠吸收动力学
秦　 ,周　丹 ,张志荣 ,黄　园*
(四川大学华西药学院 , 四川 成都 610041)
摘要:目的　研究岩白菜素在大鼠肠道中的吸收机理。方法　采用 HPLC测定大鼠在体肠实验中岩白菜素的含量 , 从吸收部
位 、药物浓度 、pH三方面研究岩白菜素在大鼠小肠中的吸收特性。结果　岩白菜素在全肠段均有吸收 , 但不同肠段的吸收存
在差异。药物浓度和循环液的 pH对吸收均有影响。结论　岩白菜素在大鼠肠道内吸收较少 , 吸收机制可能为被动扩散。
关键词:岩白菜素;在体肠吸收;吸收速率常数;高效液相色谱法
中图分类号:R96　 　文献标识码:A　 　文章编号:1006 -0103(2007)02 - 0186 -03
The absorption k inetics of bergen in in intestines of rat
Q IN Xuan, ZHOU D an, ZHANG Zhi - rong, HUANG Yuan*
(West China S chool of Pharmacy, S ichuan University, Chengdu 610041, China)
Abstrac t:OBJECTIVE　To investig ate the abso rption characteristics and m echanism of be rgenin in ra t intestine. METHODS　The
concentra tion o f be rgen in was de te rm ined byHPLC, and the abso rption m echanism w as determ ined using in situ perfusion. The effects
o f pH va lue, abso rption site and d rug concentration on be rgenin abso rp tion w ere investiga ted. RESULTS　Bergen in showed abso rption
behaviour in the w ho le intestine, but the am oun ts we re differen t at duodenum, je junum , ileum and co lon. The concentra tion and the
pH o f drug so lution had e ffec t on the absorption kine tics. CONCLUSION　Be rgenin w as absorbed badly at all segments o f in te stine in
ra ts. The absorp tion o f the drug conform s to the pa ssive transport mechanism.
K ey words:Be rgen in;In situ absorp tion from in te stine;Absorption ra te constan t;HPLC
CLC num ber:R96　 Docum ent code:A Article ID:1006 - 0103(2007)02 -0186 - 03
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牪牣牥牪牰
　　岩白菜素 (bergenin)为虎耳草科植物岩白菜
Purple bergenia、落新妇 Astilbe chinensis的有效成分 ,
属异香豆精类化合物 ,主要分布于植物的根 、茎 、花 、
叶等部位 ,具有镇咳 、祛痰 、抗炎 、解热 、抗病毒和促
进病变组织修复等作用。临床用于治疗慢性支气管
炎 [ 1] 。岩白菜素在体内不易溶出 ,稳定性差 ,不易
吸收。因此 ,国内上市的岩白菜素剂型普遍生物利
用度较低 ,其体内过程包括肠吸收动力学的研究尚
无报道 。现采用大鼠在体肠循环方法研究岩白菜素
在肠道中的吸收情况 ,为剂型设计提供生物药剂学
依据。
1　实验部分
1. 1　仪器 、试剂及动物
LC - 10A高效液相色谱仪(日本岛津 );BT00 -
100M型恒流蠕动泵 (保定兰格恒流泵有限公司);
pHS - 3C酸度计 (成都方舟科技开发中心 )。岩白
菜素原料药 (四川滇红医药开发有限公司 );Kerbs -
Ringer试液 ( K - R液 );甲醇为色谱纯;水为重蒸
水 。W ista r大鼠 (四川大学动物实验中心 ,实验前未
用任何药物 ), ♂, 200±10 g。
1. 2　肠循环液中酚红浓度的测定
用 K - R液配制 10、15、20、25 、30、35 μg m l-1
的酚红液 ,分别吸取 0. 5 m l,加入 5 m l 0. 2 mo l L -1
N aOH溶液混匀 ,显色。以 0. 2 mo l L -1 NaOH溶液
为参比溶液 ,在 559 nm测定吸光度 (A),以 A对酚
红浓度 C 进行线性回归 , 标准曲线方程为:A =
0.016C +0.0169(r=0.9999, n =3)。 30、20、10 μg
m l
-1的平均回收率分别为 101. 00%、 99. 47%、
98.98%, RSD分别为 0. 18%、0. 26%、0. 33%(n =
5)。
1. 3　肠循环液中药物浓度的测定
1. 3. 1　溶液的配制　将空白 K - R液对大鼠进行
小肠循环灌注 2 h,即得空白肠循环液 。精密称取岩
白菜素对照品 0.5 mg至 25 m l量瓶中 ,用 K - R液
溶解并定容 ,即得对照液 。精密称取岩白菜素原料
药 0.5 mg至 25m l量瓶中 ,用 K - R液溶解并定容 ,
即得供试液 。
1. 3. 2　色谱条件　Diamonsil C18色谱柱 (150mm ×
4. 6mm , 5μm);流动相为甲醇 -水 (20：80,磷酸调
pH2. 50);流速 1m l m in-1;检测波长 275 nm;柱温
30℃;进样量 10 μl。分别取空白肠循环液 、对照液
及供试液 ,在此色谱条件下测定 ,色谱图见图 1。岩
白菜素的保留时间约 9. 6 m in, 供试液主峰保留时
间与岩白菜素对照液一致 ,空白液无干扰 。
图 1　空白循环肠液(A)、对照液(B)和供试液(C)的 HPLC色谱
图
F ig 1　Chrom a tog ram s o f b lank solution (A), reference substance
solu tion(B) and sam ple so lution(C)
1. 3. 3　标准曲线的制备　精密称取岩白菜素1 mg,
至 10 m l量瓶中 ,加甲醇超声溶解 ,定容 ,得约 100
μg m l-1的贮备液。精密吸取适量贮备液 ,用 K - R
液稀释 ,配成 5. 30、 10. 60、 15. 90、 21. 20、 26.50、
31.80、37. 10μg m l-1的溶液。取 10μl进样 ,按 “1.
3. 1”项下条件测定。岩白菜素在 5. 30 ～ 37.10 μg
m l
- 1范围内 ,峰面积 Y 与浓度 C间呈线性关系 ,回
归方程为:Y =7. 147 ×103C - 3. 063 ×103 (r =
0.9999)。 37. 10、21. 20、5. 30 μg m l-1的平均回收
率分别为 99. 60%、98. 95%、100. 16%(n =5);日内
RSD分别为 1. 29%、1. 66%、2. 01%(n =5);日间
RSD分别为 2. 97%、1. 89%、0. 96%(n=5)。
1. 4　大鼠在体肠循环实验
1. 4. 1　试验方法 　取岩白菜素原料药适量 ,加入
50m l 20μg m l-1的酚红液 ,超声使溶解。选择实验
前禁食一夜 (自由饮水 )的大鼠 , ip戊巴比妥钠 40
mg kg- 1 ,麻醉后固定。沿腹中线切开腹腔 ,在实验
肠段两端各切一小口 ,在上 、下两端小口处各插入玻
璃管并用手术线固定。用 37℃的生理盐水缓缓注
入肠管 ,洗净肠段内容物 。将肠段两端的玻璃管与
蠕动泵的胶管连接 ,形成回路。开动蠕动泵 ,以 5m l
m in
- 1流速循环 10 m in, 将流速调整为 2. 5 m l
m in
- 1 ,立即自灌注液瓶中取样(0. 5m l,共 2份),分
别作为测定零时间药物浓度和酚红浓度的样品。另
向锥形瓶中补加酚红液 1 m l,其后每隔 15 m in同法
取样并补加酚红液 ,循环 2 h后中止。取样品液 0. 5
m l置洁净试管中 , 8×103 r m in-1离心 5 m in,取上
清夜 10μl进样 ,测定岩白菜素的含量。按 “ 1. 2”项
下条件测定灌注液中酚红浓度 ,由酚红浓度的改变
校正循环液中岩白菜素的剩余药量。以剩余药量的
对数和取样时间 t作图 , 求出表观吸收速率常数
Ka、吸收半衰期 t1 /2等参数 。并计算每小时校正吸
收率 P(%)=(零时间剩余药量 - 1 h剩余药量 ) /
零时间剩余药量 ×100% -降解率。
187第 2期 秦　 ,等。岩白菜素的大鼠在体肠吸收动力学 　　　
1. 4. 2　稳定性考察　分别取不同条件下的空白循
环肠液 ,加入一定量的岩白菜素 ,置 37℃水浴中 ,分
别于 0、0. 25、0. 50、0. 75、1. 00、 1. 25、 1. 50、1.75、
2.00 h取样 ,测定含量 。结果表明 , 2 h内岩白菜素
在空白循环肠液中均不稳定 ,且不同条件下降解率
不同(表 1 ～ 3)。
1. 4. 3　岩白菜素在大鼠小肠全肠段的吸收 　照
“ 1. 4. 1”项下方法 ,自十二指肠上部及回盲肠末端
插管 ,进行实验。比较以不同浓度药物溶液整肠段
回流 2 h后的药物吸收量和吸收速率常数 (表 1)。
经统计学分析 ,在不同药物浓度时 ,吸收速率常数间
无显著性差异 ,吸收机制为被动扩散吸收 。
表 1　不同浓度岩白菜素在大鼠小肠内的吸收参数(n=5)
Table 1　Absorp tion param eters of bergenin in sma ll intestine of ra t
at different drug concentra tions(n=5)
O rigina l /mg m l- 1Ka /h - 1 t1 /2 /h Decrease /% P /%
0. 07 0. 033±0. 002 21. 07±1. 04 2. 06±0. 48 3. 04
0. 14 0. 039±0. 003 18. 00±1. 48 2. 35±0. 63 3. 24
0. 21 0. 040±0. 007 18. 01±3. 09 2. 45±0. 25 3. 26
1. 4. 4　岩白菜素在大鼠小肠分肠段的吸收　实验
观察的各肠道区段皆取 10 cm ,十二指肠段从幽门
开始 ,空肠段离幽门 15 cm处开始 ,回肠段自盲肠上
行 20 cm开始 ,结肠段从盲肠后端开始。在循环液
为 0. 14mg m l- 1的条件下 ,比较各大鼠在不同肠段
对岩白菜素吸收的情况 (表 2)。可见 ,岩白菜素在
大鼠全肠段均有吸收 ,但以十二指肠和结肠较显著 ,
而在空肠和回肠的吸收较少。
表 2　岩白菜素在大鼠小肠内不同部位的吸收参数(n=5)
Table 2　Absorption parameters o f bergenin in ra t a t d ifferent in-
testinal segm ents(n=5)
Segments Ka /h - 1 t1 /2 /h Decrease /% P /%
Duod enum 0. 064±0. 013 11. 39±2. 40 3. 81±1. 01 3. 47
Jejunum 0. 072±0. 009 9. 73±1. 28 5. 62±1. 82 1. 38
Ileum 0. 094±0. 054 7. 44±0. 44 8. 44±1. 82 1. 14
C olon 0. 103±0. 003 6. 74±0. 22 8. 63±1. 86 3. 09
1. 4. 6　pH对岩白菜素吸收的影响　分别以稀磷酸
调节岩白菜素循环液 (0. 14 mg m l-1)的 pH为 5.4、
6.8、7.8,进行整肠段回流实验 ,考察 pH对药物吸
收的影响 (表 3)。结果表明 , pH对岩白菜素吸收有
较显著的影响 , pH越低 ,吸收越大。
表 3　不同 pH的岩白菜素肠循环液在大鼠小肠内的吸收参数(n=5)
Tab le 3　Absorption param eters of bergen in in ra t sm a ll intestine at
different pH va lues(n=5)
pH Ka /h - 1 t1 /2 /h Decrease /% P /%
5. 4 0. 038±0. 009 19. 18±4. 51 0. 59±0. 11 3. 87
6. 8 0. 044±0. 001 15. 73±0. 24 1. 88±0. 35 2. 95
7. 8 0. 048±0. 006 14. 57±2. 36 5. 42±1. 17 2. 35
2　讨论
岩白菜素在碱性条件下不稳定 ,其降解率随 pH
增大而增加 ,计算出的 Ka比实际偏大 ,因此测定结
果仅为表观吸收速率 [ 2] 。药物在肠循环液中的减
少可能是一部分降解 ,另一部分则被吸收入血。在
计算吸收率时 ,用药物在循环液中减少的总量减去
降解量 ,经校正后的结果更接近真实吸收值 。
实验结果显示 ,岩白菜素在大鼠全肠段均有吸
收 ,以十二指肠和结肠吸收较多 ,十二指肠的酸性环
境(pH5. 0 ～ 7. 0)能维持药物的稳定性 ,可能为岩白
菜素的理想吸收部位。结肠 pH 较高 (约 8.3 ～
8.4),而吸收却较大 ,表明岩白菜素在肠道内的吸
收不仅受 pH 影响 ,可能还存在其他吸收机制。由
于岩白菜素的吸收量很低 ,药物的降解程度对吸收
参数的计算影响很大 ,影响了结论的正确性 ,应该尽
量探索增加稳定性的方法。制备有效的岩白菜素口
服剂型 ,可考虑将其制成液体制剂 ,避免溶出过程缓
慢对吸收的影响。若能采用合适的辅料保护药物不
被降解 ,或加入合适的吸收促进剂 ,促进药物在肠道
内的吸收 ,则可提高其生物利用度 。
参考文献:
[ 1] 　 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典 [ S] .一部.北京:
化学工业出版社 , 2005. 278.
[ 2] 　 袁媛 ,蒋学华.丹参酮 Ⅱ A大鼠在体肠的吸收机理 [ J] .华西
药学志 , 2002, 17(4):246 - 248.
收稿日期:2006 - 09
188 　 华 西 药 学 杂 志　　　 第 22卷