全 文 ：葛根黄酮在大鼠肠道的吸收动力学研究
林文慧，朱春燕，陈　卫，石　峰
（中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京 １０００９４）
［摘要］　目的：研究葛根黄酮在肠道中的吸收部位和吸收机制。方法：通过对大鼠的十二指肠、空肠、回肠和
结肠分别进行在体肠吸收实验，用高效液相色谱法测定葛根黄酮主要成分葛根素的含量，计算出葛根素在各部位
的表观吸收速率常数Ｋａ和回流４ｈ的累计吸收药量，从而反映出葛根黄酮的吸收部位和吸收机制。结果：葛根总
黄酮中葛根素在十二指肠、空肠、回肠和结肠的表观吸收速率常数分别为００１３９，００１２８，００１２１，００１３１ｈ－１；４
ｈ的累计吸收药量分别为１３６９３６，１２２７３９，１１５２３０，１２３０１５μｇ；其在十二指肠段的吸收明显高于其他肠段（Ｐ＜
００５）。结论：葛根黄酮在大鼠整个肠道中均有吸收；其吸收呈一级动力学过程。
［关键词］　葛根黄酮；在体肠吸收；高效液相色谱法
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）０２０１６４０４
［收稿日期］　２００７０４２０
［基金项目］　国家高技术研究发展计划（８６３计划）生物与现
代农业技术领域创新药物和中药现代化重大专项（２００３ＡＡ２Ｚ３２４９）
［通讯作者］　朱春燕，Ｔｅｌ：（０１０）６２８９６７１１，Ｆａｘ：（０１０）６２８９６７
１１，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｕｃｈｕｎｙａｎ１６８＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
　　葛根为豆科植物野葛 Ｐｕｅｒａｒｉａｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｄ．）
Ｏｈｗｉ或甘葛藤 ＰｔｈｏｍｓｏｎｉＢｅｎｔｈ．的干燥根，性味
甘、辛、凉，归脾、胃经，具有解肌退热、生津、透疹，升
阳止泻的功效。用于外感发热头痛、高血压颈项强
痛等［１］。现代药理学研究显示，葛根黄酮具有降低
血压、降血脂、改善心脑循环、延缓动脉硬化等作
用［２］，多用于治疗高血压、冠心病、心绞痛和心率失
常［３，４］等心脑血管疾病。葛根中含有多种成分，现
代化学研究表明，其主要的有效成分为异黄酮类化
合物，其中以葛根素含量最高［３］，其水溶性和脂溶
性都比较差，口服生物利用度低［５］。
探讨中药有效成分口服时的吸收部位和吸收机
制是提高中药口服给药的生物利用度和研究开发口
服制剂的基础［６］。肠道是药物吸收的主要部位，研
究药物的肠道吸收特性可以指导剂型选择，从而控
制药物的溶出、释放部位以及在体内的滞留时间，从
而提高其生物利用度。目前，葛根黄酮在肠道的吸
收情况尚无报道，仅有周冬菊等［７］利用紫外双波长
等吸收消去法对葛根素在小肠部位的吸收情况进行
研究，发现葛根素在小肠段的吸收速率常数较小，吸
收较慢，药物在小肠上段比小肠下段有较大的吸收。
本研究选用大鼠在体肠吸收模型，对葛根黄酮在肠
道中的吸收机制进行研究，为剂型的设计提供可靠
的实验依据。
１　材料
１．１　药物
葛根药材经中国医学科学院药用植物研究所林
寿全研究员鉴定为野葛Ｐｌｏｂａｔａ。野葛根用７倍量
稀乙醇提取３次，每次２ｈ，将提取液浓缩，得稠膏，
加２倍于药量的水溶解，过滤，滤液蒸去乙醇，加水
使成每毫升含 １ｇ生药的溶液。将溶液上大孔树
脂，用９０％乙醇洗脱有效成分，洗脱液浓缩后减压
干燥，得葛根黄酮提取物（批号０４０１２０，葛根素含量
１７９３％）。
１．２　试剂
葛根素对照品（中国药品生物制品检定所，批
号０７５２２００２０９）；酚红（北京化学试剂公司，批号
０６０８１１）；乌拉坦 （北京化学试剂公司，批号
０４１１１０）；冰醋酸（北京化学试剂公司，批号０６０３３０）
乙腈（ｆｉｓｈｅｒ试剂公司）为色谱纯，液相用水为双蒸
水，其他试剂均为分析纯 。
ＫｒｅｂｓＲｉｎｇｅｒ试剂（ｐＨ７４，简称“Ｋ氏液”）：称
取 ＮａＣｌ７８ｇ，ＫＣｌ０３５ｇ，ＣａＣｌ２０３７ｇ，ＮａＨＣＯ３
１３７ｇ，ＮａＨ２ＰＯ４０３２ｇ，ＭｇＣｌ２００２ｇ，葡萄糖１４
ｇ，加蒸馏水适量使成１０００ｍＬ。
１．３　动物
雄性ＳＤ大鼠，体重（２５０±２０）ｇ，北京市维通利
华实验动物技术有限公司，动物合格证号：ＳＤＸＫ
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（京）２００７０００１。
１．４　仪器
ＬＣ－１０ＡＴ高效液相色谱仪（日本岛津）：ＳＰＤ－
１０ＡＶＰ紫外检测器，ＳＣＬ－１０ＡＶＰ控制器，ＣＴＯ－
１０ＡＳＶＰ柱温箱，ＣＬＡＳＳ－ＶＰ工作站；７５２型紫外光
分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；ＢＴ００－
３００Ｍ恒流泵（保定兰格恒流泵有限公司）；ＪＡ１００３
型电子天平（上海天平仪器厂）；电热恒温水浴锅
（型号 ＨＨ·ＳＹ１１－Ｎｉ２Ｂ，北京市长风仪器仪表公
司）；ＴＣＱ－２５０超声波清洗器（北京医疗设备二
厂）；ＳＨＢ－８８型循环水式多用真空泵（郑州长城科
工贸有限公司）。
２　方法
２．１　肠循环液中酚红浓度的测定方法
２．１．１　酚红浓度的测定方法　取待测样品溶液
０５ｍＬ置１０ｍＬ具塞试管中，加入 ０１ｍｏｌ·Ｌ－１
ＮａＯＨ溶液 ５ｍＬ［８］，摇匀，显色。０１ｍｏｌ·Ｌ－１
ＮａＯＨ溶液为空白，在 ５５８ｎｍ波长处测定吸光度
（Ａ）。
２．１．２　酚红标准曲线的制备　精密称定酚红 １０
ｍｇ，置于１００ｍＬ量瓶中，用 Ｋ氏液溶解，稀释至刻
度，摇匀，即得１０μｇ·ｍＬ－１的酚红母液。精密吸取
１，２，３，４，５，６ｍＬ置１０ｍＬ量瓶中，用 Ｋ氏液定容，
配成质量浓度分别为 １０，２０，３０，４０，５０，６０μｇ·
ｍＬ－１的酚红标准溶液。按２．１．１项下方法操作，测
定Ａ。以Ａ为纵坐标，浓度（Ｃ）为横坐标进行线性
回归，得标准曲线方程 Ａ＝００１７２Ｃ＋００２６３，ｒ＝
０９９９４（ｎ＝６）。
２．１．３　回收率试验　取高、中、低３种质量浓度分
别为１０，３０，６０μｇ·ｍＬ－１的酚红标准液，按２．１．１
项下方法操作，测定 Ａ。代入标准曲线方程计算浓
度，以测得量与加入量之比计算回收率。结果表明，
酚红低、中、高３种质量浓度回收率分别为（９８９６±
１１７）％，（１００４８±０５６）％，（９９４３±０１３）％。
２．１．４　精密度考察　取高、中、低３种质量浓度分
别为１０，３０，６０μｇ·ｍＬ－１的酚红标准液，按２．１．１
项下方法测定。以１ｄ内测定的５次结果计算日内
精密度，以５ｄ内测定的５次结果计算日间精密度。
结果表明，酚红低、中、高３种质量浓度的日内 ＲＳＤ
分别为 １５５％，０５３％，０１３％，日间 ＲＳＤ分别为
１９１％，０８３％，０３７％。
２．２　葛根黄酮肠循环液中葛根素的高效液相色谱
法测定
空白肠循环液的紫外扫描图谱表明，大鼠的肠
分泌液在葛根素的最大吸收波长２５４ｎｍ处也有吸
收，而且通过既不含药物也不含酚红的空白肠循环
实验可知，随着时间的延长，空白肠循环液中大鼠肠
分泌物浓度增加，其在２５４ｎｍ处的吸光度值也逐渐
升高，从而无法采用紫外分光光度法来准确测定葛
根黄酮肠循环液中葛根素的浓度，所以选用高效液
相色谱法，排除空白肠循环液的干扰，从而准确测定
肠循环液中葛根素的浓度。
２．２．１　色谱条件　色谱柱为 ＳｈｉｍｐａｃｋＣＬＣＯＤＳ
（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相乙腈：００５％冰
醋酸（１３∶８７）；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温３０℃；检
测波长２５４ｎｍ；进样量２０μＬ。
２２２　方法可行性考察　分别取葛根素对照品溶
液、葛根黄酮肠循环液和空白肠循环液，进样，在上
述色谱条件下分离测定（图１）。由图１可见葛根素
对照品溶液的ｔＲ＝７９８１ｍｉｎ，葛根黄酮肠循环液中
葛根素的保留时间与葛根素对照品溶液一致，空白
肠循环液在此条件下没有干扰。
图１　葛根素对照品，葛根黄酮，空白肠色谱图
Ａ葛根素对照品溶液；Ｂ葛根黄酮肠循环液；Ｃ空白肠循环液
２２３　标准曲线的制备　精密称取葛根素对照品
１２７ｍｇ，置于５０ｍＬ量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释
至刻度，摇匀，即得质量浓度为２５４μｇ·ｍＬ－１的葛
根素标准液母液。再精密量取０５，１，２，４，６，８ｍＬ
母液至１０ｍＬ量瓶中，用蒸馏水稀释、定容至刻度，
摇匀，得到质量浓度分别为 １２７，２５４，５０８，
１０１６，１５２４，２０３２μｇ·ｍＬ－１的葛根素标准液。进
样２０μＬ，在上述色谱条件下分离测定，记录色谱图
与峰面积，以浓度 （Ｃ）为横坐标，以葛根素峰面积
（Ａ）为纵坐标，得标准曲线方程 Ａ＝７２２０４Ｃ－
３２０６７，ｒ＝０９９９７（ｎ＝６）。
２．２．４　回收率实验　取低、中、高３种质量浓度分
别为１２７，５０８，２０３２μｇ·ｍＬ－１的葛根素对照品
溶液，进样２０μＬ，在上述色谱条件下分离测定，按
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标准曲线方程计算浓度，以测定浓度与加入浓度之
比计算回收率。结果表明，葛根素低、中、高３种质
量浓 度 的 回 收 率 分 别 为 （１０１３±１４８）％，
（９９８２±１２４）％，（１００１６±１９１）％。
２．２．５　精密度考察　取低、中、高３种质量浓度分
别为１２７，５０８，２０３２μｇ·ｍＬ－１的葛根素对照品
溶液，按样品测定方法测定。以１ｄ内测定的５次
结果计算日内精密度，５ｄ内测定的５次结果计算日
间精密度。结果表明葛根素低、中、高３种质量浓度
的日内 ＲＳＤ分别为 １４３％，１２１％，１７２％，日间
ＲＳＤ分别为１５０％，０８５％，１２４％。
２．３　药物的稳定性实验
取７５ｍＬ质量浓度为８０μｇ·ｍＬ－１的葛根黄酮
供试液置于３７℃水浴中，分别于０，１，２，３，４ｈ取样
１ｍＬ，测定葛根素含量的变化，结果 ＲＳＤ１２％，说
明样品在４ｈ内稳定，可以排除药物稳定性因素对
实验结果的影响。
２．４　葛根黄酮的吸收机制
２．４．１　供试液的制备　精密称取葛根黄酮粉末
００４ｇ与酚红００１ｇ置５００ｍＬ量瓶中，用 Ｋ氏液
溶解定容至刻度，摇匀，得到药物质量浓度为８０μｇ
·ｍＬ－１、酚红质量浓度为２０μｇ·ｍＬ－１的供试液。
酚红液的制备：精密称取酚红００２ｇ置１００ｍＬ
量瓶中，加Ｋ氏液溶解定容至刻度，摇匀，得到质量
浓度为２０μｇ·ｍＬ－１的酚红液。
２．４．２　大鼠在体肠吸收实验［９］　调节恒温水浴温
度为（３７±０５）℃，将 Ｋ氏液、供试液、生理盐水置
恒温水浴槽中预热至３７℃。选取实验前禁食１８ｈ
（自由饮水）的大鼠，腹腔注射 ２０％乌拉坦溶液
（０００８ｍＬ·ｇ－１）麻醉并固定，沿腹中线打开腹腔，
按以下方法取肠道各段，在两端剪切后插管，并用线
扎紧。十二指肠段自幽门１ｃｍ处开始，空肠段自幽
门１５ｃｍ处开始，回肠段自盲肠上行２０ｃｍ处开始，
结肠自盲肠后端开始，各段均取１０ｃｍ。先以５ｍＬ
·ｍｉｎ－１流速用３７℃ Ｋ氏液冲洗肠管内容物至净。
取预热至３７℃的供试液７５ｍＬ，先以５ｍＬ·ｍｉｎ－１
流速循环１０ｍｉｎ后，将流速调为２５ｍＬ·ｍｉｎ－１，立
即自供试液锥形瓶中取样１５ｍＬ，用０４５μｍ微孔
滤膜滤过，取续滤液，作为药物和酚红零时间样品，
同时向供试液中补加酚红液（２０μｇ·ｍＬ－１）２ｍＬ。
按此方法，分别于０５，１，１５，２，３，４ｈ取样，过滤，
补加酚红液。实验结束后，将肠段沿两端切口剪下，
测量肠段长度。实验过程中用灯光照射等法保证肠
组织的温度为３７℃，并用生理盐水浸渍的纱布覆盖
于肠组织表面以保湿。
２．５　吸收速率常数Ｋａ（ｈ
－１）的计算
取各时间点样品溶液０５ｍＬ，按２．１．１项下方
法操作，将测定的吸光度值代入酚红标准曲线，计算
出酚红浓度和肠循环液的体积。同时取样品液进样
２０μＬ，按２．２．１项下色谱条件进行测定，计算出同
时间点肠循环液中葛根素的浓度。
各时间点肠循环液的体积：Ｖ０＝Ｃ×Ｖ／Ｃ０
　　Ｖｉ＝［Ｃｉ－１×（Ｖｉ－１－１５）＋Ｃ补 ×２］／Ｃｉ（ｉ＝１，…６）
　　各时间点肠循环液中的剩余药量：Ｘｉ＝Ｃ′ｉ×Ｖｉ（ｉ＝０，…
６）
　　各时间点的吸收药量：Ｘａｉ＝Ｃ′ｉ－１×Ｖｉ－１－Ｃ′ｉ－１×１５－
Ｃ′ｉ×Ｖｉ（ｉ＝１，…６）
　　累积吸收药量：Ｘａ０－ｉ＝∑Ｘ
ａ
ｉ
　　累积吸收百分率：ＰＡ（％）＝（∑Ｘａｉ／Ｃ′０×Ｖ０）×１００％
　　吸收速率常数Ｋａ：ｌｎＸｉ＝ｌｎＸ０－ｋａｔｉ
　　其中：Ｃ为供试液中酚红的浓度，Ｃ０为０时间时
肠循环液中酚红浓度，Ｃｉ为各取样点时肠循环液中
酚红浓度，Ｃｉ－１为前一次取样点时肠循环液中酚红
浓度，Ｃ′ｉ为各取样点时肠循环液中葛根素的浓度，
Ｃ′ｉ－１为前一次取样点时肠循环液中葛根素的浓度；
Ｃ补为补加液中酚红的浓度，单位：μｇ·ｍＬ
－１；Ｖ为供
试液的体积，Ｖ０为０时间时肠循环液的体积，Ｖｉ为各
取样点时肠循环液的体积；Ｖｉ－１为前一次取样点时
肠循环液的体积，单位：ｍＬ；Ｘｉ为各时间点肠循环液
中的剩余药量，单位：μｇ。
２．６　统计方法
用ＳＰＳＳ１３０的 ＡＮＯＶＡ进行统计分析，采用
ＳｔｕｄｅｎｔＮｅｗｍａｎＫｅｕｌｓ（ＳＮＫ）进行组间的两两比较。
数据采用 珋ｘ±ｓ表示。
３　结果
质量浓度为８０μｇ·ｍＬ－１的葛根黄酮供试液经
大鼠在体肠循环灌流４ｈ后，各肠段的吸收速率常
数Ｋａ，累积吸收药量和累积吸收百分率（ＰＡ％）见
表１。
由表１可知，葛根黄酮中葛根素的吸收速率常
数Ｋａ在小肠段按十二指肠、空肠、回肠顺序依次下
降，在结肠段也有相对较好的吸收。各回归直线的
ｒ值均大于０９，表明在肠道各部位，药物浓度的下
降与循环时间有较好的线性关系，故吸收动力学为
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　　 表１　葛根黄酮中葛根素在不同肠段的吸收动力学参数（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
部位 Ｋａ／ｈ－１ 累积吸收药量／μｇ ＰＡ／％
十二指肠 ００１３９±００００６７２１） １３６９３６±１０４０２１） ０１２７±０００８２７
空肠　　 ００１２８±００００３６７ １２２７３９±１３３７７ ０１１３±００１０４０
回肠　　 ００１２１±００００２５８ １１５２３０±５５５８ ０１０７±０００４７９
结肠　　 ００１３１±００００４３２ １２３０１５±４０７７ ０１１４±０００４２７
　　注：各肠段的Ｋａ值和累积吸收药量进行组间的两两比较１）Ｐ＜００５
一级吸收。统计学分析结果表明，与其他肠段相比，
十二指肠段的吸收较快，其Ｋａ值和累积吸收药量具
有统计学意义（Ｐ＜００５）。
４　讨论
４．１　本试验开始拟用紫外分光光度法测定肠循环液
中葛根黄酮的浓度，以研究葛根总黄酮的肠道吸收特
性，可是由于无法排除肠分泌液的干扰而不能准确测
得肠循环液中的葛根黄酮含量。本室之前曾测得自
制葛根黄酮提取物中葛根素的含量约占１７９３％，是
葛根黄酮的主要成分，所以本实验采用高效液相色谱
法，排除肠分泌液的干扰而准确测定葛根黄酮中主要
有效成分葛根素的含量，考察其在肠道中的吸收机
制，在一定程度上反映葛根总黄酮的吸收。
４．２　实验结果表明，葛根黄酮中葛根素在肠道的吸
收速率常数 Ｋａ和累积吸收百分率 ＰＡ均较小，十二
指肠为吸收的主要部位。这与文献［７］报道的葛根
素在小肠的吸收速率常数较小，吸收较慢，药物在小
肠上段比小肠下段有较大吸收相符。与该报道相
比，本研究采用了灵敏度较高的 ＨＰＬＣ法测定了较
低浓度下葛根黄酮中葛根素的吸收情况，发现药物
在整个肠道中均有吸收且在十二指肠段吸收较快。
４．３　了解药物在胃肠道的吸收特性，可以减少剂型
设计的盲目性，为剂型的开发提供科学依据。本研
究发现葛根黄酮在整个肠道皆有吸收，有较长的吸
收窗。因此可以考虑通过设计能尽可能延长葛根黄
酮在肠道中滞留时间的制剂，如具有生物黏附性的
片剂、胶囊、微球等，以达到增加其吸收，提高生物利
用度的目的。
４．４　研究药物肠吸收的实验方法主要有体内法、在
体法和离体法。在体法实验中不切断血管与神经，
且能避免胃内容物排出及消化管固有运动的生理影
响，因而能够真实地反映药物的吸收。本试验采用
大鼠在体肠吸收模型研究葛根黄酮的吸收机制和药
物动力学参数，方法简便、可行，可为中药制剂的研
究提供参考。
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［２］　潘洪平．葛根总黄酮和葛根素的药理作用和临床应用研究进
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光光度法的测定［Ｊ］．中国现代应用药学杂志，２００１，１８（２）：１２３．
［９］　陆　彬．药剂学实验［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，１９９４：１３１．
Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｐｕｅｒａｒｉａｅｆｌａｖｏｎｅｓｉｎｒａｔｓｉｎｔｅｓｔｉｎｅ
ＬＩＮＷｅｎｈｕｉ，ＺＨＵＣｈｕｎｙａｎ，ＣＨＥＮＷｅｉ，ＳＨＩＦｅｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ａｎｄＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌ
Ｃｏｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｐｕｅｒａｒｉａｅｆｌａｖｏｎｅｓｆｒｏｍｖａｒｉｏｕｓｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｓｅｇｍｅｎｔｓ．
Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎｅｉｎｒａｔｓｗａｓｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｄｕｏｄｅｎｕｍ，ｊｅｊｕｎｕｍ，ｉｌｅｕｍａｎｄｃｏｌｏｎＴｈｅｆｏｕｒｐａｒｔｓｗｅｒｅｃａｎｎｕｌａｔｅｄｉｎｓｉｔｕｒｅｃｉｒｃｕｌａ
ｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＷｉｔｈｔｈｅＨＰＬＣ，ｔｈｅｃｏｎｔａｉｎｏｆｐｕｅｒａｒｉｎｗｈｉｃｈｉｓｔｈｅｍａｊｏｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｏｆｐｕｅｒａｒｉａｅｆｌａｖｏｎｅｓｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｔｈｅａｐ
ｐａｒｅｎｔａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｒａｔｅｃｏｎｓｔａｎｔ（Ｋａ）ａｎｄｔｈｅｕｐｔａｋｅｉｎ４ｈｏｕｒｓｏｆｐｕｅｒａｒｉｎｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｓｅｇｍｅｎｔｓｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｒｅ
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ｓｕｌｔ：Ｔｈｅａｐｐａｒｅｎｔａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｒａｔｅｃｏｎｓｔａｎｔｏｆｐｕｅｒａｒｉｎｏｆｐｕｅｒａｒｉａｅｆｌａｖｏｎｅｓａｔｄｕｏｄｅｎｕｍ，ｊｅｊｕｎｕｍ，ｉｌｅｕｍａｎｄｃｏｌｏｎｗｅｒｅ００１３９，
００１２８，００１２１，００１３０ｈ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｕｐｔａｋｅｏｆｐｕｅｒａｒｉｎｉｎ４ｈｏｕｒｓｗｅｒｅ１３６９３６，１２２７３９，１１５２３０，１２２０１５
μｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｅｏｔｈｅｒｓｅｇｍｅｎｔｓ，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｈｉｇｈｅｒｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｐｕｅｒａｒｉｎｗａｓａｂｓｏｒｂｅｄｆｒｏｍｄｕｏｄｅｎｕｍａｆｔｅｒｂｅｉｎｇ
ｐｅｒｆｕｓｅｄｆｏｒ４ｈｏｕｒｓ（Ｐ＜００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｐｕｅｒａｒｉａｅｆｌａｖｏｎｅｓｃａｎｂｅａｂｓｏｒｂｅｄｉｎｗｈｏｌｅｉｎｔｅｓｔｉｎｅａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔ
ｔｈｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｐｕｅｒａｒｉａｅｆｌａｖｏｎｅｓｃｏｍｐｉｌｅｄｗｉｔｈｔｈｅｆｉｒｓｔｏｒｄｅｒｋｉｎｅｔｉｃｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｐｕｅｒａｒｉａｅｆｌａｖｏｎｅｓ；ｉｎｓｉｔｕａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｆｒｏｍｉｎｔｅｓｔｉｎｅ；ＨＰＬＣ ［责任编辑　古云侠］
［收稿日期］　２００７０５２０
［通讯作者］　曹军，Ｔｅｌ：（０９５１）４０８３２７４，Ｅｍａｉｌ：ｃａｏｊｕｎ＠
ｎｘｍｃ．ｅｄｕ．ｃｎ
氧化苦参碱对心肌损伤大鼠线粒体保护作用的研究
杨晓明，徐　华，张　焱，李桂忠，杨晓玲，王　恬，吴　海，张鸣浩，曹　军
（宁夏医学院，宁夏 银川 ７５０００４）
［摘要］　目的：探讨氧化苦参碱（ｏｘｙｍａｔｒｉｎｅ，ＯＭＴ）对异丙基肾上腺素（ｉｓｏｐｒｏｔｅｒｅｎｏｌ，ＩＳＯ）致心肌损伤大鼠线
粒体（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ，Ｍｉｔ）的保护作用及其机制。方法：健康雄性ＳＤ大鼠２４只，随机分为４组：对照组、模型组、ＯＭＴ
低、高剂量组，每组６只。皮下注射ＩＳＯ５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１复制心肌损伤模型，低、高剂量组分别腹腔注射ＯＭＴ１００，
１５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，连续１０ｄ。差速离心法提取心肌Ｍｉｔ，比色法测定血浆乳酸（ｌａｃｔｉｃａｃｉｄ，ＬＤ）、丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉ
ａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）的含量与乳酸脱氢酶（ｌａｃｔｉｃｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）、超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）、
谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨＰＸ）的活性和心肌Ｍｉｔ中ＭＤＡ的含量与琥珀酸脱氢酶（ｓｕｃｃｉｎｉｃ
ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＳＤＨ），ＳＯＤ，ＧＳＨＰＸ的活性，原子吸收法测定心肌Ｍｉｔ的钙含量。ＨＥ染色观察心肌组织的病理学
改变，电镜下观察Ｍｉｔ超微结构的改变。结果：与模型组相比，低、高剂量ＯＭＴ均可减轻心内膜下心肌缺血性损伤，
保护心肌Ｍｉｔ超微结构的完整性，且二者均可显著降低心肌线粒体ＭＤＡ和钙含量（Ｐ＜００１），增加线粒体ＳＯＤ与
ＧＳＨＰＸ活性（低剂量组Ｐ＜００５，高剂量组Ｐ＜００１），升高 ＳＤＨ活性（Ｐ＜００１），降低血浆 ＬＤＨ活性（Ｐ＜００１）
和ＬＤ含量（低剂量组Ｐ＜００５，高剂量组Ｐ＜００１）。结论：ＯＭＴ可保护ＩＳＯ致心肌损伤大鼠Ｍｉｔ的结构和功能，其
机制可能与抑制脂质过氧化、减轻钙超载、改善心肌细胞的代谢有关。
［关键词］　心肌损伤；心肌线粒体；氧化苦参碱；异丙基肾上腺素
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）０２０１６８０４
　　近年研究表明，线粒体（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ，Ｍｉｔ）膜损
伤是心肌细胞由可逆损伤转化为不可逆损伤的早期
特点和主要标志，胞内钙超负荷是细胞损伤的核心因
素。因此心肌缺血不可逆损伤的关键可能在Ｍｉｔ，通
过保护Ｍｉｔ结构与功能的完整性可为心肌保护机制
的研究提供新的途径［１］。氧化苦参碱（ｏｘｙｍａｔｒｉｎｅ，
ＯＭＴ）是从豆科槐属植物苦参 Ｓｏｐｈｏｒａｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ．、广
豆根 Ｓ．ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａＣｈｕｎｅｔ中提取的四环喹嗪啶
（ｑｕｉｎｏｌｉｚｉｄｉｎｅ）类生物碱。心血管药理研究表明，其
具有多方面的药理活性和临床功能。本室前期研究
工作发现，ＯＭＴ对 ＩＳＯ诱发的心肌缺血损伤大鼠的
心功能降低具有改善作用，并能减轻心肌肥大的程
度。但目前尚缺乏该药对心肌 Ｍｉｔ影响的研究。本
实验通过观察ＯＭＴ对心肌损伤大鼠Ｍｉｔ结构和功能
的影响，进一步探讨其改善心肌缺血的作用机制，为
临床上心肌缺血性疾病的防治提供理论依据。
１　材料
１．１　动物　清洁级健康性ＳＤ大鼠（２２０±２０）ｇ，宁
夏医学院实验动物中心提供，合格证号 ＳＹＸＫ（宁）
２００５０００１。
１．２　药品与试剂　苦参素（主要成分为氧化苦参
碱，纯度９８％，宁夏紫荆花药业股份有限公司提供，
批号１２０４１２１４）；盐酸异丙基肾上腺素 （ｉｓｏｐｒｏｔｅｒｅ
ｎｏｌｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）购于 Ｓｉｇｍａ公司；余为市售分析
纯产品。ＬＤＨ批号 ２００６１２０７，ＬＤ批号 ２００６１１２０，
ＭＤＡ批号２００６１２０７，ＳＯＤ批号２００６１２０７，ＳＤＨ批号
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第３３卷第２期
２００８年１月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８