全 文 ：云南大学学报 (自然科学版) 　2001 , 23 (植物学专辑):109～ 110 CN 53-1045/N　ISSN 0258-7971
Journal of Yunnan University
滇牡丹花粉贮存方法的探索
王兵益 , 王　伟 , 丁开宇
(云南大学 生物系 , 云南昆明　650091)
摘要:以采自云南狮子山牡丹园的成熟花粉为材料 , 研究了贮存温度和湿度对花粉活力的影响.发现低温
有利于花粉活力的保持;贮存前不经干燥处理 , 花粉极易丧失活力.冷冻(-18℃)贮存室温自然干燥的花粉是
解决牡丹杂交育种花期不遇简便易行之方法.
关键词:牡丹;花粉;活力
中图分类号:Q 944.42
　　牡丹是原产我国的世界著名花卉.她雍荣华
贵 、富丽端庄 ,自古以来就被尊为“国色天香” 、“花
中之王” .又称为“富贵之花” ,寓意“幸福吉祥” .此
外 ,其根皮为常用中药 ,称丹皮 ,有活血调经的功
效[ 1] .故近年来 ,牡丹成为许多科研工作者和商人
们的青睐对象 ,牡丹杂交育种的研究更为热门.然
而 ,花期不遇却成为杂交育种的主要障碍 ,如果采
取适当的方法保存花粉 ,维持其活力 ,将为育种工
作提供极大的方便.本文以滇牡丹(Paeonia
delavayi Franch)花粉为材料 ,比较了它们在不同
温 、湿条件下的活力的变化.
1　材料和方法
实验材料为移栽于云南武定县狮子山牡丹园
的滇牡丹(Paeonia delavayi Franch),在 4月初采
集初绽花朵的花粉.将来自不同植株的新鲜花粉混
匀后 ,分为 2份 ,其一再分装在 3个指状瓶 ,分别于
-70℃, -18℃, 8℃保存 ,其二在室温下干燥 12 h
后 ,装在 4个指状瓶中 ,分别于-70℃, -18℃,8℃
保存和室温下保存.活力检查采用液体培养基(w
=5%蔗糖 , w =100×10-6硼酸水溶液 ,此为经实
验测定最适培养基),滴于栽玻片上 ,用牙签搅匀 ,
至于垫有湿润滤纸的培养皿中室温培养 12 h 后镜
检 ,同一载玻片上任选 5个视野记数 ,每一视野中
萌发与未萌发花粉共 100粒左右.萌发的标准为花
粉管的长度约大于花粉粒直径的 2倍 ,一般每隔 5
d进行 1次检测 ,由于室温下保存花粉活力下降迅
速 ,因此每天做 1次检测.以萌发的花粉数除以花
粉总数作为萌发率.
2　结果与讨论
表 1　经 12 h干燥后的花粉在不同温度下保存的萌发率
Tab.1 The germinating ratio of po llen preserved in different
temperature after drying fo r 12 h　　　　　　　%
贮藏时间 t/ d -70℃ -18℃ 8℃
0 74.89 73.88 70.45
10 84.92 84.16 47.22
15 83.55 87.99 63.67
20 95.75 88.68 62.48
25 88.46 92.00 61.29
30 75.33 89.77 55.11
35 82.46 89.19 63.98
40 85.11 89.13 65.60
45 85.24 82.05 71.68
50 73.08 82.35 78.94
55 77.11 76.48 70.93
60 80.56 77.73 62.08
67 90.00 73.12 64.89
77 88.11 86.23 70.72
86 70.55 83.98 45.30
收稿日期:2001-06-28
　作者简介:王兵益(1976-　),男 ,陕西人 ,硕士生,主要从事植物分子进化方面研究.
表 2　未经干燥的花粉在不同温度条件下保存的萌发率
Tab.2 The germinating ratio of undried pollen preserved in
different temperature　　　　　　　　　　　　%
贮藏时间 t/d -70℃ -18℃ 8℃
0 74.89 76.88 72.45
5 10.98 9.02 7.14
10 9.26 7.72 1.72
15 8.74 5.20 0
20 8.86 5.40 0
25 8.24 4.72 0
30 7.50 0 0
35 2.74 0 0
　　表 3　室温下花粉的萌发率
Tab.3 The vigor of pollen that preserved in no rmal tem-
perature
贮存时间 t/ d 1 2 3 4 5
萌发率/ % 75.69 63.25 32.80 18.70 11.70
实验结果见表 1 , 2 和 3.经 12 h 干燥后冷冻
(-18℃, -70℃)、冷藏(8℃)保存的花粉保持较高
的萌发率 ,其中以-70℃超低温冰箱和-18℃冰箱
效果最佳 ,经过 86 d萌发率变化不大 ,而 8℃冰箱
冷藏的花粉 ,其萌发率略有降低的趋势 ,经过 86 d
其萌发率仍保持在 45%以上(表 1).
未经干燥处理的 ,直接冷冻 、冷藏保存的花粉 ,
其萌发率下降较快 ,其中-70℃保存者经过 5 d其
萌发率从 74.89%降到 10.98%,经过 35 d已接近
全部死亡 ;-1 8℃保存者经过 5d其萌发率从
76.88%降到 9.02%,经过 25 d已接近全部死亡;
而8℃保存的花粉 ,经过 5 d 其萌发率从 72.45%
降到 7.14%,只经过 10 d ,已无萌发的花粉(表 2).
室温干燥存放放花粉 , 其萌发率经过 5 d从
72.45%降至 11.70%, 较未干燥直接冷冻(-
18℃, -70℃)保存的花粉下降快 , 而近似冷藏
(8℃)花粉的下降速率.
同其它许多植物(水稻 、狼尾草 、玉米[ 2])一
样 ,温度和湿度也是影响滇牡丹花粉活力的重要因
素 ,一般来说低温 、低氧和低湿是种子和花粉贮藏
中的 3个重要条件[ 3] .首先 ,低温有利于花粉活力
的保持.实验表明:常温下滇牡丹很快就失去活力
(表 3),而未干燥冷藏保存的花粉 ,至少到 10 d后 ,
仍有微弱的活性;保存效果最好的是冷冻贮存 ,即
使未干燥 ,经过 30 d ,仍然保持微弱的活性.其主要
原因可能是低温使得细胞得呼吸减弱 ,避免了能量
的过多消耗.其次 ,贮存前对花粉进行适当时间(12
h)的室温干燥处理是必要的.花粉经过干燥后保
存 ,其活力在相当长时间(2 ～ 3个月)内基本保持
不变(表 1),而不经干燥直接贮存 ,花粉活力在较
短时间迅速下降(表 2),其主要原因可能是冷冻
(-18℃, -70℃)过程中 ,过多的水分在花粉内形
成冰晶 ,破坏了细胞的内部结构;冷藏(8℃)过程
中 ,未能抑制细胞的呼吸作用 ,导致花粉大量死亡.
同时 ,可能由于大量水分的存在 ,稀释了花粉中某
些关离子的浓度 ,如 Ca2+[ 4] ,而这些关键离子却是
花粉萌发所必须的.
综上所述 ,为解决牡丹花卉育种过程中花期不
遇的问题 ,冷冻贮存室温干燥的花粉是一简便易行
的办法.其中以-18℃冰箱冷冻保存最为经济 、有
效.
[参　考　文　献]
[ 1] 　曹涤环.古俗今潮食花热[ J] .植物杂志 , 2000(5):
16—18.
[ 2] 　李要民 , 陈良碧.不同温湿条件下贮藏的 3 种禾本科
植物花粉活力变化(简报)[ J] .植物生理学通讯 ,
1998 , 34(2):35—37.
[ 3] 　STANLEY R G , L INSKENS H F.Pollen-biology bio-
chemistry management [ M ] .Berlin , Heideberg , New
York:Springerverlag , 1974.
[ 4] 　CAROL , KEARNS , DAVID WILLIAM INOUYE.
Techniques for pollination biolo gists[ M] .Colorad:U-
niversity P ress Colo rado , 1993.
(下转第 112 页)
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行扩大繁殖 ,在短期内可获得大量的芽苗 ,繁殖系
数较大 ,对种质资源的保护和大规模栽培利用提供
了新的可行途径.紫斑百合的组培快繁国内外尚未
见报道.
[参　考　文　献]
[ 1] 　中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(14
卷)[ M] .北京:科学出版社 , 1980.
[ 2] 　王红霞 , 胡琼华 ,陈小兰.通江百合的组织培养[ J] .植
物生理学通讯 , 1999 , 36(2):132.
Tissue Culture of Lilium nepalense D.Don
LI Biao , HU Qiong-hua , HE Xian-jing
(Laboratory of Eco-genetics , Yunnan University , Kunming 650091 , China)
Abstract:The explants which are obtained from the cataphy lla of Li lium nepalense D.Don can directly
g row the shoo ts by dif ferentiation on the M S+6BA 1 mg/ L+NAA 0.2—0.5 mg/ L culture medium.On an-
other culture medium , the M S+6BA 1mg/L+NAA 0.1—0.2mg/L medium , they can propagate quickly and
the multiplicat ion rate will reach 4 —5.Meanwhile , the differential shoots w ill g row roo ts prompt ly on the MS
+IBA 1 mg/L medium .As anticipated , the radicant rate can reach a high level.
Key words:Li lium nepalense;bud scale;tissue culture
＊＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊
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Advanced in S tudying of Plant Hormone
CAI Chuan-jie , CHEN Shan-na
(Department of Biological Technology , Yunan University , Kunming 650091 , China)
Abstract:The recent advances in biosyntheses ,phy siological actions and act ion mechanisms of 5 types of
plant hormones and a new type of plant hormone brassinolide by molecular biology and genetics.
Key words:plant hormone;mutant;signal t ransduct ion;molecular biology
＊＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊
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A S tudy on Preserving the Pollen of Paeonia Delavayi
WANG Bin-yi , WANG Wei , DING Kai-yu
(Department of Biolog y , Yunnan University , Kunming 650091 , China)
Abstract:The ef fect of preservation temperature and humidity on the pollen vigor of Paeonia delavayi
Franch w as investigated on the mature pollen collected from f low ers in Shizishan Mudan Garden , Wuding
county Yunnan.It results in follow s:(1)Low temperature is beneficial to maintaining Pollen vigor;(2)If the
pollen is no t dried at normal temperature befo re preservation , it s vig or must be lost rapidly.(3)Drying the
pollen of P.delavayi and then preserving them at low temperature(-18℃)is an easy and effective method
to keep pollen vigor.It is useful for the art if icial pollinating of different flowers at different time , and provide
convinence fo r the breeding of Paeonia.
Key wards:Paeonia delavayi;pollen;vigo r
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