全 文 ：2015 年 1 月 第 17 卷 第 1 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jan. 2015 Vol. 17 No. 1
·中药农业·
△［基金项目］ 国家科技支撑计划(2013BAK13B04) ;云南省科技计划重点项目(2012CG022)
*［通信作者］ 刘大会，Tel:(0871)65033441;E-mail:juhuacha2007@ sohu. com
不同等级昭通乌天麻与其他产地天麻的
天麻素含量测定及比较
△
刘旭燕1，张公信1，田孟华1，张昌飞1，余显伦1，郭友刚2，刘大会2，3*
(1. 昭通市天麻研究院，云南 昭通 657000;2. 昭通市天麻特产局，云南 昭通 657000;
3. 云南省农业科学院 药用植物研究所，云南 昆明 650205)
［摘要］ 目的:测定不同等级、不同产地天麻中天麻素的含量。方法:采用 HPLC 测定天麻中天麻素含量。
Inert Sustain C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流动相:乙腈 － 0. 05%磷酸(3∶97) ;流速:1. 0 mL·min
－1;检测
波长:220 nm;柱温为室温。结果:不同等级的乌天麻中，天麻等级越高天麻素含量越高。一等乌天麻中天麻素含
量为 0. 82%，而四等乌天麻含量仅为 0. 32%。而不同产地同一等级的红天麻中天麻素含量差异较大。其中，安徽大
别山天麻中天麻素含量最高，为 0. 94%;湖北宜昌、陕西洋县两个产地天麻中天麻素含量分别为 0. 66%、0. 60%，
云南丽江和大姚天麻中天麻素含量较低，仅为 0. 45%和 0. 44%。结论:不同的等级和不同的产地对天麻中天麻素的
含量均有影响。
［关键词］ 天麻;天麻素;HPLC法;含量测定
Determination of Gastrodine in Ｒhizoma Gastrodiae of Different Grades and Orgins
LIU Xuyan1，ZHANG Gongxin1，TIAN Menghua1，ZHANG Changfei1，YU Xianlun1，GUO Yougang2，LIU Dahui2，3
(1. Zhaotong Tianma Ｒesearch Institute，Zhaotong 657000，China;
2. Zhaotong Tianma Specialty Bureau，Zhaotong 657000，China;
3. Institute of Medicinal Plants，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650205，China)
［Abstract］ Objective:To determine gastrodine content in Ｒhizoma gastrodiae of different grades origins. Methods:
Inert Sustain C18(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)was used. The mobile phase consisted of acetonitrile and 0. 05% phosphoric acid
with isocratic elution . The flow was 1. 0 mL·min －1 . The detective wavelength was 220 nm. Column temperature was room
temperature. Ｒesults:The cotnent of gastrodine obtained the good linear correlation with different grades of Gastrodia elata
f. glauca. The results showed the highest content of gastrodin in G. elata f. glauca was 0. 82%，and the lowest was only
0. 32% ． In addition，our research analyzed the content of gastrodin in the same grade of G. elata f. elata which were from
different habitats’regions. The results indicated significant difference between five habitats’regions. The highest content of
gastrodin in sample from Dabie Mountain Anhui province was 0. 94% . The content of gastrodin were 0. 66% and 0. 60% for the
samples from Hubei province and Shanxi province，respectively. The gastrodin content of G. elata f. elata from Lijiang and
Dayao，Yunnan province were only 0. 45% and 0. 44%， respectively. Conclusion:Both different grades and habitats’
regions have effect on the content of gastrodin in Ｒhizoma gastrodiae.
［Keywords］ Ｒhizoma gastrodiae;gastrodin;HPLC;Determination of content
doi:10． 13313 / j． issn． 1673-4890． 2015． 1． 009
天麻(Gastrodia elata Bl. )为兰科植物，又名赤
箭、离母、鬼督邮。依据天麻花及花茎颜色的不同
可将栽培种天麻分为乌天麻、红天麻、绿天麻、黄
天麻 4 个变型［1］。其中，乌天麻花呈蓝绿色、花茎
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2015 年 1 月 第 17 卷 第 1 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jan. 2015 Vol. 17 No. 1
灰棕色、带白色纵条纹，主要分布在我国云南省东
北部及西北部，贵州、四川、吉林的部分地区;红
天麻花呈橙红色、淡黄、蓝绿或黄白色，花茎赤色，
主要在我国湖北、陕西、安徽等地种植。而乌天麻
和红天麻也是我国目前天麻的主要栽培种。天麻作
为我国传统名贵中药材，入药已经有 2000 多年的历
史。天麻气微、味甘，其功能是平肝息风止痉。在
中医中天麻主要用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、小
儿惊风、癫痫抽搐等症状［2］。现代药理研究表明，
天麻中的有效成分为天麻素。天麻素除对中枢神经
系统有作用外，还可以有效的起到扩张血管、降低
血压、改善微循环及增加机体缺血缺氧的作用［3］;
另外，有研究表明天麻素具有增加机体免疫、促智
抗衰老的作用［4］。因此，天麻中天麻素含量的高低
是评价天麻质量优劣的重要指标。本实验主要采用
高效液相色谱法对不同等级云南昭通乌天麻和不同
产地的红天麻中天麻素进行测定，为探寻不同等级
及不同产地天麻与天麻素含量的相关性提供科学依
据，并为昭通天麻的质量控制提供技术支撑。
1 实验材料与仪器
1. 1 实验材料
不同等级云南昭通乌天麻来源于云南省昭通市
彝良县小草坝天麻种植基地。不同产地的红天麻来
源于昆明菊花村药材市场。鲜天麻样品经清洗、高
温蒸至中间无白心、烘干、粉碎备用，具体操作参
考袁崇文方法［5］，烘干后的天麻按照徐锦堂方法［6］，
分为 4 个等级，天麻素对照品购于山东省中药化学
对照品研究中心。乙腈为色谱纯，其他试剂均为国
产分析纯。
1. 2 实验仪器
岛津 LC-20AT 型高效液相色谱仪(SPD-20A 型
紫外检测器) ，奥豪斯 CP124C 电子分析天平，上海
一恒 HWS28 型水浴锅，上海亚荣 ＲE-3000A 型旋转
蒸发仪。
2 实验方法
2. 1 色谱条件
色谱柱为 InertSustainC18柱(4. 6 mm × 250 mm，
5 μm) ;流动相为乙腈 － 0. 05%磷酸(3 ∶97) ，检测
波长 220 nm;柱温为室温;进样量 10 μL。理论塔
板数按照天麻素峰计算应不低于 5000。
2. 2 对照品溶液的制备
取天麻素对照品适量，精密称定，置于容量
瓶中，用乙腈 ∶水(3 ∶97)溶解稀释至刻度，摇匀，
配制不同浓度梯度的对照品溶液，浓度依次为:
12. 5 μg·mL － 1、 25 μg·mL － 1、 50 μg · mL － 1、
100 μg·mL － 1、250 μg·mL － 1、 500 μg·mL － 1
备用。
2. 3 供试样品溶液的制备
精密称取样品天麻粉末 2 g，置具塞锥形瓶中，
精确加入稀乙醇 50 mL，称重，加热回流 3 h，放
冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，
滤过，精密量取滤液 10 mL，浓缩至近干，残渣加
乙腈-水(3 ∶97)混合溶液溶解，转移至 25 mL 量瓶
中。用乙腈-水(3 ∶97)混合溶液稀释至刻度，摇匀，
滤过，取滤液，即得样品溶液备用。实验用样品编
号见表 1。
表 1 实验用样品编号
样品 供试材料 产地 等级
1 乌天麻 云南昭通 一等
2 乌天麻 云南昭通 二等
3 乌天麻 云南昭通 三等
4 乌天麻 云南昭通 四等
5 乌天麻 云南昭通 四等
6 乌天麻 云南丽江 一等
7 乌天麻 云南大姚 一等
8 红天麻 陕西洋县 一等
9 红天麻 湖北宜昌 一等
10 红天麻 安徽大别山 一等
2. 4 线性关系考察
将 2. 2 中制备的不同浓度的对照品溶液(12. 5、
25、50、100、250、500 μg·mL －1)各取 10 μL 注入
色谱仪，进行测定。以天麻素峰面积 Y 对天麻素含
量 X进行线性回归，线性回归方程:Y = 20 530. 1X
+9 345. 87，r = 0. 999 9。依据实验结果，天麻素进
样量在 12. 5 ～ 500 μg·mL －1之间，峰面积与进样量
呈良好的线性关系。见图 1。
2. 5 精密度实验
精密吸取样品溶液 10 μL，连续进样 6 次，以天
麻素的峰面积计算 ＲSD为 0. 36%，以天麻素保留时
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2015 年 1 月 第 17 卷 第 1 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jan. 2015 Vol. 17 No. 1
A:天麻素对照品 HPLC图(保留时间 10. 501 为天麻素) ;
B:1 号样品 HPLC图(保留时间 10. 520 为天麻素)。
图 1 天麻素 HPLC图
间计算 ＲSD为 0. 50%。
2. 6 稳定性实验
吸取样品供试液，分别于 0、2、4、7、24 h 进
样检测，记录色谱图。以天麻素的峰面积计算 ＲSD
为 0. 43%，以天麻素保留时间计算 ＲSD为 0. 89%。
2. 7 回收率实验
精确称取天麻样品 2 g，共 4 份，分别精密加入
天麻素对照品溶液(500 μg·mL －1)10 mL，按照供试
品溶液方法处理，测定天麻素含量如表 1。
表 2 天麻药材中天麻素回收率(n = 4)
样品重量
/ g
样品中含
量 /mg
实测量
/mg
回收率
(%)
平均值
(%)
ＲSD
(%)
2. 041 1 6. 602 9 11. 180 6 96. 4 95. 1 2. 9
2. 026 5 6. 555 7 11. 316 4 97. 9
2. 056 3 6. 652 1 11. 013 8 94. 5
2. 019 0 6. 531 4 10. 556 5 91. 5
2. 8 不同等级及不同产地样品含量测定
精密称取各样品天麻粉末 2 g，按 2. 3 的方法制
备成供试液，准确吸取各样品供试液 10 μL 注入色
谱仪，进行含量测定。
3 结果
3. 1 不同等级云南昭通乌天麻中天麻素含量比较
分析
实验测定了云南昭通 4 个不同等级乌天麻中的
天麻素含量。其中，一等乌天麻中天麻素含量达到
0. 82%，二等、三等、四等(两份样品)乌天麻的天
麻素含量分别为 0. 53%、0. 41%、0. 35%、0. 32%
(表 3)。且一等乌天麻中天麻素含量是四等含量的
2. 56 倍，其含量分别为另外 3 份乌天麻样品中天麻
素含量的 1. 55 倍、2 倍和 2. 34 倍。同时，相邻等级
天麻中天麻素含量差异分别为 0. 29%、0. 12%、
0. 06%和 0. 03%。由实验结果可得，不同等级乌天
麻中天麻素含量均有差异，且等级越高天麻素含量
越高，而对相邻等级乌天麻中天麻素含量的比较中
发现，一等与二等间天麻素差异最为明显，而等级
内不同天麻样品中天麻素差异最小。
3. 2 不同产地红天麻中天麻素含量比较分析
实验测定 5 个不同产地一级红天麻中天麻素的
含量。结果表明，安徽大别山样品中天麻素的含量
最高，达 0. 94%，而云南大姚的样品中天麻素含量
最低，为 0. 44%，仅为安徽大别山样品中含量的
47%，陕西洋县和湖北宜昌样品中天麻素含量分别
为 0. 60%和 0. 66%，两者差异仅为 0. 06%。研究结
果表明，安徽大别山所产红天麻中天麻素产量明显
高于其他产地，陕西洋县和湖北宜昌所产红天麻中
天麻素含量居中，云南丽江和大姚所产红天麻中天
麻素含量均较低。
表 3 不同等级及产地天麻样品中天麻素含量
样品号 供试材料 产地 等级 含量(%)
1 乌天麻 云南昭通 一等 0. 82 ± 0. 01
2 乌天麻 云南昭通 二等 0. 53 ± 0. 02
3 乌天麻 云南昭通 三等 0. 41 ± 0. 01
4 乌天麻 云南昭通 四等 0. 35 ± 0. 01
5 乌天麻 云南昭通 四等 0. 32 ± 0. 03
6 红天麻 云南丽江 一等 0. 45 ± 0. 02
7 红天麻 云南大姚 一等 0. 44 ± 0. 02
8 红天麻 陕西洋县 一等 0. 60 ± 0. 02
9 红天麻 湖北宜昌 一等 0. 66 ± 0. 02
10 红天麻 安徽大别山 一等 0. 94 ± 0. 04
4 讨论
目前，天麻素是天麻的主要活性成分已被学者
普遍认可，国家药典也把天麻素含量作为衡量天麻
质量优劣的重要参考指标［7］。但是，由于天麻中还
含有大量的淀粉、蛋白质和多糖等成分，所以如何
简单高效地提取天麻素一直是学者研究的重点。早
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在 2004 年吴春敏等用 50%乙醇回流提取 3 h，平均
加样回收率为 97. 1%，说明天麻素提取充分。本实
验依据药典(2010 版)天麻素乙醇回流提取方法，平
均加样回收率 95. 1%与前人研究结果一致［8］。同时
有研究者使用纯水回流等方法提取天麻素［9］，加样
回收率都在 90%以上。这些结果说明虽然提取方法
不同，但是各方法均达到要求。
云南昭通天麻虽为道地药材，但由于天麻研究
基础薄弱，天麻质量控制体系还尚未完全建立，严
重影响了天麻产业的发展。本研究首先对云南昭通
不同等级乌天麻中天麻素含量进行了测定，确定乌
天麻等级越高天麻素含量越高，说明天麻素含量与
天麻等级有一定的相关性。且在相邻等级乌天麻天
麻素含量比较中发现，一等乌天麻中天麻素含量要
远远高于二等乌天麻含量，等级内不同乌天麻样品
间天麻素含量相差最小。本研究将天麻的外观等级
与内在天麻素含量建立了一定的相关性。除此之外，
本研究还对不同产地红天麻中天麻素含量进行了测
定，同为一级红天麻样品，来自于安徽大别山区样
品天麻素含量最高，湖北宜昌和陕西洋县的天麻中
天麻素含量差距不大，分别为 0. 66%和 0. 60%，而
云南丽江和大姚红天麻中天麻素含量较低，分别为
0. 45%和 0. 44%。这说明不同产地对天麻中的天麻
素含量有一定的影响。天麻在我国的药材市场中占
有重要地位，因此天麻的质量控制一直是我们中药
研究者关注的焦点。本研究不仅从外观等级与天麻
素含量对各等级天麻样品进行了质量评价，同时也
调查了国内天麻主要道地产区红天麻中天麻素的含
量，本研究结果为进一步建立完善的天麻质量评价
体系提供了一定的依据。
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(收稿日期 2014-07-30
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
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(上接第 34 页)
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