全 文 ：环 境 昆 虫 学 报 Journal of Environmental Entomology，July 2014，36 (4):543 － 548 ISSN 1674-0858
doi:10. 3969 / j. issn. 1674 － 0858. 2014. 04. 12
三叶蔓荆提取物对几种害虫的生物活性研究
高 燕1，陈 婷1，齐国君1，于永浩2 *
(1. 广东省农业科学院植物保护研究所，广东省植物保护新技术重点实验室，广州 510640;
2. 广西农业科学院植物保护研究所 /广西作物病虫害生物学重点实验室，南宁 530007)
摘要:在实验室条件下研究了三叶蔓荆 Vitex trifolia L. 叶片提取物对甘蓝蚜 Brevicoryne brassicae L. 的拒食、对菜
粉蝶 Pieris rapae L. 幼虫的生长发育抑制以及对家蝇 Musca domestica的毒杀活性。试验结果表明:10 mg /mL的乙
酸乙酯提取物在 24 h和 48 h对蚜虫的拒食率分别为 88. 89%和 86. 36%，拒食效果明显。几种溶剂提取物对 5 龄
菜粉蝶幼虫的生长发育均有不同程度的影响，其中乙酸乙酯提取物的体重增长抑制率第 1 天达 75. 35%。各溶剂
提取物在高浓度下对家蝇 2 龄幼虫均有一定的毒杀作用，低浓度下效果较差。乙酸乙酯提取物 48 h 的 LC50为
22. 78 mg /mL，远高于拒食和生长发育抑制试验设定的浓度。结果表明乙酸乙酯提取物拒食活性和生长发育抑制
活性显著。
关键词:三叶蔓荆;甘蓝蚜;菜青虫;家蝇;生物活性
中图分类号:Q965. 9;S482. 99 文献标识码:A 文章编号:1674 － 0858 (2014)04 － 543 － 06
基金项目:广东省科技计划项目 (2011B031500020、2012B020309007);广东省农业科学院院长基金 (201406);广西农科院项目 (桂农科
2013YZ05)
作者简介:高燕，女，1977 年生，博士，研究方向为入侵害虫防控研究，E － mail:beauty － gaoyan@ 163. com
* 通讯作者 Author for correspondence，E － mail:yxp1127@ 163. com
收稿日期 Ｒeceived:2013 － 11 － 19;接受日期 Accepted:2014 － 02 － 09
Study on the biological activity of extracts from Vitex trifolia against
several insect pests
GAO Yan1，CHEN Ting1，QI Guo-Jun1，YU Yong-Hao2* (1. Guangdong Provincial Key Laboratory of
High Technology for Plant Protection，Plant Protection Ｒesearch Institute，Guangdong Academy of
Agricultural Sciences，Guangzhou 510640，China;2. Guangxi Key Laboratory for Biology of Plant
Diseases and Insect Pests / Institute of Plant Protection，Guangxi Academy of Agricultural Sciences，
Nanning 530007，China)
Abstract:Antifeeding， inhibiting and contact activity of extracts from V. trifolia leaves against
Brevicoryne brassicae，Pieris rapae and Musca domestica were examined under laboratory conditions.
10 mg /mL ethyl acetate extracts had bioactivity against B. brassicae with antifeeding rate of 88. 89% and
86. 36% after 24 hours and 48 hours，which was conspicuous than other three extracts. Four extracts had
inhibiting effect against the fifth instar larvae of P. rapae. The activity of the ethyl acetate extract was
significantly higher than that of other extracts with weight gain inhibitory rate of 75. 35% after 1 day.
Four extracts had insecticidal effect against the 2nd instar larvae of M. domestica at high concentration.
After 48 hours，the LC50 of ethyl acetate extracts were 22. 78 mg /mL. The results suggested that the ethyl
acetate extracts of V. trifolia leaves had high antifeeding and inhibiting activity to be studied in the
future．
Key words:Vitex trifolia;Brevicoryne brassicae;Pieris rapae;Musca domestica;insecticidal activity
环境昆虫学报 Journal of Environmental Entomology 36 卷
三叶蔓荆 Vitex trifolia L. 为马鞭草科牡荆属植
物，是多年生落叶小灌木，在我国主要分布于福
建、山东、江西、浙江、广东、广西及云南等地
(张丽梅等，2007)。其干燥成熟果实称之为蔓荆
子，具有疏散风热、清利头目等功效，在临床应
用较广 (国家药典委员会，2010)。研究表明，蔓
荆子中含有多种挥发油，主要含有黄酮、苷类、
萜类等成分 (闫利华等，2009，2010)。目前对三
叶蔓荆主要作为药用植物和防风固沙植物进行研
究与开发 (左长清等，2003)。三叶蔓荆的茎、
叶、果实都能入药，有消炎止痛的功效，用于外
感头痛、眩晕、目痛、跌打损失、风湿疼痛等多
种疾病的治疗 (里二等，2010)。近年来发现，三
叶蔓荆除具有较强的药理活性外，还具有杀虫活
性。三叶蔓荆粗提物对草地贪夜蛾 Spodoptera
frugiperda和小菜蛾 Plutella xylostella 具有拒食活性
(Hernández et al. ，1999;高燕等，2012)，对尘污
灯蛾 Spilosoma oblique Walker 幼虫具有生长调节作
用 (Shishir et al. ，2008)，对棉蚜 Aphis gossypii
Glover (Devi et al. ， 2003)、致 倦 库 蚊 Culex
quinquefasciatus和伊蚊 Aedes aegypti 幼虫具有毒杀
活性 (Kannathasan et al. ，2008，2011)等。另外，
三叶蔓荆对水稻纹枯病菌 Ｒhizoctonia solani、镰刀
菌 Fusarium sp. 、番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea 等
具 有 不 同 程 度 的 抑 菌 活 性 (Ansari 1995;
Hernández et al. ，1999;朱立成等，2007)。为了系
统评价三叶蔓荆在农业方面的应用前景，本文采
用不同的生物活性测定方法，研究了三叶蔓荆对
甘蓝蚜的拒食、对菜粉蝶幼虫的生长发育抑制以
及对家蝇的毒杀活性，以期为开发三叶蔓荆植物
源农药及复配农药提供一定的基础数据。
1 材料与方法
1. 1 供试植物
三叶蔓荆采自云南省德宏州。蔓荆叶片自然
阴干后粉碎，过 60 目筛。
1. 2 供试昆虫
甘蓝蚜 Brevicoryne brassicae L. 和菜粉蝶 Pieris
rapae L. 幼虫:个体一致的室内盆栽甘蓝苗上长期
饲养，未接触过药剂。
家蝇 Musca domestica:采用人工饲料于光照培
养箱内饲养的敏感品系，温度为 25 ± 1℃、ＲH
(80 ± 5)%、光周期 L∶D =14∶10。
1. 3 试验方法
1. 3. 1 样品制备
称取 50 g 干粉放入 1000 mL 三角瓶中，加入
500 mL有机溶剂 (分别为石油醚、氯仿、乙酸乙
酯和乙醇)室温下静置 8 小时，再经超声波提取
30 min，过滤，滤液用旋转蒸发仪浓缩，得不同溶
剂膏状提取物，如此重复 3 次，称重，保存于 4℃
冰箱中备用。
1. 3. 2 生物活性测定方法
1. 3. 2. 1 对甘蓝蚜的拒食作用 (张钟宁等，
1993)
将供试样品用 95%的乙醇配制成一定质量浓
度的药液。用与提取物等体积的 95%乙醇作为对
照，取未受污染、新鲜干净的甘蓝叶片，制成直
径为 9 cm的叶碟。以叶碟中间叶脉为界，用毛笔
将配好的药液均匀涂于叶背面一侧，另一侧涂
95%乙醇作为对照，自然条件下晾干。在直径为
9 cm的培养皿中添加一定量的蒸馏水保湿，将处
理叶片放入培养皿内，然后将蚜虫接到叶碟中部，
盖上培养皿盖，置于室温下 (23 ± 2)℃观察。挑
选大小一致的无翅蚜进行生物测定。每处理蚜虫
120 头，重复 4 次。分别于处理 24 h、48 h后统计
对照和处理的蚜虫栖息量，根据下式计算拒食率:
拒食率 = 对照栖息蚜虫数 －处理栖息蚜虫数
对照栖息蚜虫数
× 100%
1. 3. 2. 2 对菜粉蝶幼虫生长发育抑制活性的测定
用浸渍叶碟饲喂法测定提取物对菜粉蝶幼虫
生长发育的影响。带药叶碟制作同 1. 3. 2. 1。挑选
大小一致、饥饿 4 h的 5 龄菜粉蝶幼虫，每皿内放
置 3 头。不间断用带药叶碟饲喂，供试幼虫在温
度 27 ± 1℃、ＲH (80 ± 5)%、光周期 L∶D = 14∶
10 的光照培养箱内下饲养。每处理虫数 30 头，重
复 4 次。处理前称试虫体重，处理后每隔 24 h 称
一次试虫体重。观察记录试虫的取食、化蛹情况。
根据下式计算幼虫体重增长抑制率:
体重增长抑制率 = 对照体重增加量 － 处理体重增加量
对照体重增加量
× 100%
1. 3. 2. 3 对家蝇幼虫的毒杀作用
参照骆焱平等 (2008)方法加以改进。以 2
龄家蝇幼虫为试虫，采用浸渍法进行测定。将各
提取物用蒸馏水稀释成 50、25、12. 5、6. 25、
445
4 期 高 燕等:三叶蔓荆提取物对几种害虫的生物活性研究
3. 125 mg /mL 5 个浓度梯度，把虫龄一致的家蝇幼
虫分别放进装有不同浓度药液的烧杯中，浸泡1 h，
然后用清水洗净虫体表面的残液，转移到含新鲜
饲料的 500 mL三角瓶中，杯口用纱布密封，置于
光照培养箱内 (温度 27℃ ± 1℃，相对湿度 75%
－85%，L∶D =14∶10)，对照用蒸馏水。每处理
80 头虫，设 4 个重复，于 24 h、48 h 检查试虫死
亡率。
校正死亡率 = 处理组死亡率 － 对照组死亡率1 － 对照组死亡率
× 100%
1. 4 数据处理
采用 SPSS11. 0 和 EXCEL2003 对试验数据进行
系统分组分析，数据之间的差异采用邓肯氏新复
极差检验。
2 结果与分析
2. 1 提取物对甘蓝蚜的拒食作用
三叶蔓荆叶片的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和
乙醇提取物对甘蓝蚜的拒食作用结果见表 1。4 种
不同溶剂提取物在浓度为 10 mg /mL时，对甘蓝蚜
均有一定程度的拒食活性。其中乙酸乙酯的效果
最好，24 h 和 48 h 的拒食率分别为 88. 89% 和
86. 36%;石油醚提取物的拒食率分别为 69. 06%、
55. 58%;氯仿和乙醇提取物的效果较差。结果还
表明，4 种提取物 24 h 对甘蓝蚜的拒食活性均高
于 48 h。
表 1 三叶蔓荆叶片提取物对甘蓝蚜的拒食作用
Table 1 Antifeeding activity of extracts from Vitex trifolia leaves against Brevicoryne brassicae
处理
Treatment
24 h 48 h
对照组虫量 (头)
(x
－
± SE)
Number of control
group (head)
处理组虫量
(x
－
± SE) (头)
Number of treatment
group (head)
拒食率 (%)
Antifeeding
rate
对照组虫量 (头)
(x
－
± SE)
Number of control
group (head)
处理组虫量 (头)
(x
－
± SE)
Number of treatment
group (head)
拒食率 (%)
Antifeeding
rate
石油醚
Petroleum ether
21. 75 ± 2. 02 6. 73 ± 0. 25 69. 06 19. 00 ± 1. 91 8. 44 ± 0. 41 55. 58
氯仿
Chloroform
22. 00 ± 0. 91 9. 11 ± 0. 45 58. 59 18. 25 ± 2. 29 11. 75 ± 0. 48 35. 62
乙酸乙酯
Ethyl acetate
22. 50 ± 2. 18 2. 50 ± 0. 29 88. 89 22. 00 ± 1. 78 3. 00 ± 0. 28 86. 36
乙醇
Ethanol
22. 50 ± 1. 18 18. 02 ± 0. 26 19. 91 22. 00 ± 2. 11 20. 16 ± 0. 26 8. 36
2. 2 提取物对菜粉蝶幼虫生长发育的抑制
用浓度为 10 mg /mL 不同溶剂提取物浸渍叶
碟，连续饲喂 5 龄菜粉蝶幼虫，每日称重，测定
结果见表 2。从表 2 可以看出，第 1 天各溶剂提取
物处理的昆虫体重之间有明显差异，其中乙酸乙
酯提取物平均体重最小，其次为石油醚提取物。
第 2 天各提取物体重变化趋势和第一天相同。幼
虫从处理后第 2 天开始陆续化蛹，第三天始平均
体重下降。对照在第 3 天达到化蛹高峰，乙酸乙
酯和石油醚提取物处理组化蛹高峰在第 5 天，乙
醇和氯仿提取物组的化蛹高峰分别出现在第 4 天、
第 5 天。通过计算得知，4 种不同溶剂提取物对 5
龄菜粉蝶幼虫的生长发育均有影响。其中乙酸乙
酯提取物对幼虫的影响最大，体重增长抑制率第 1
天达 75. 35%，第 2 天降为 61. 05%。石油醚提取
物在第 1 天抑制率为 54. 74%，第 2 天降到
39. 52%。其它两种提取物体重增长抑制率较低。
同时乙酸乙酯提取物处理组幼虫的活动能力较差，
取食量较少。4 种不同溶剂提取物处理的校正死亡
率以乙酸乙酯提取物处理最高 50. 00%，其次是石
油醚 和 氯 仿 41. 67%，乙 醇 提 取 物 的 最 低
为 20. 83%。
545
环境昆虫学报 Journal of Environmental Entomology 36 卷
表 2 三叶蔓荆叶片提取物对 5 龄菜粉蝶幼虫体重增长的影响
Table 2 Inhibiting effect of extracts from Vitex trifolia leaves to weight gain of Pieris rapae
处理 Treatment
幼虫体重 (mg /头) (x
－
± SE)Average weight of larvae (mg /head)
＜ 1h 1 d 2 d 3 d
石油醚 Petroleum ether 73. 67 ± 0. 19 98. 35 ± 3. 21d 113. 21 ± 1. 23d 92. 38 ± 1. 67
氯仿 Chloroform 75. 33 ± 0. 64 103. 21 ± 0. 99c 119. 27 ± 1. 07c 102. 45 ± 2. 11
乙酸乙酯 Ethyl acetate 74. 35 ± 0. 73 87. 79 ± 2. 67e 97. 36 ± 2. 33e 83. 24 ± 1. 67
乙醇 Ethanol 73. 56 ± 0. 56 119. 34 ± 1. 06b 136. 12 ± 2. 11b 122. 32 ± 1. 23
CK 74. 14 ± 0. 36 128. 67 ± 1. 65a 153. 24 ± 2. 21a 130. 22 ± 1. 03
注:表中数据是 4 个重复的平均数，同列数据后带有不同字母者表示在 0. 05 水平差异显著 (Duncan 氏多重比较，P ＜
0. 05)。Note:Data in the table is the average of four repeats，the data in the same column followed by different letters are significantly
different by Duncans multiple range test (P ＜ 0. 05)．
2. 3 提取物对家蝇幼虫的毒杀作用
三叶蔓荆叶片不同溶剂提取物对家蝇幼虫的
毒杀结果见表 3。从表 3 可以看出，随着处理浓度
的增大，三叶蔓荆叶片不同溶剂提取物对家蝇幼
虫的毒杀死亡率随之增大;另外，随着处理时间
的增加，家蝇 2 龄幼虫的死亡率也随之增大。24 h
结果可以看出，各提取物在 50 mg /mL 的浓度下，
乙酸乙酯提取物的校正死亡率最高为 66. 67%，其
次是石油醚提取物的 54. 67%，其他两种溶剂提取
物的校正死亡率均低于 50%。48 h 各处理各浓度
的校正死亡率均较 24 h 的校正死亡率有所提高，
乙酸乙酯提取物最高为 82. 46%，石油醚为
73. 68%，氯仿和乙醇分别为 68. 42%和 61. 40%。
处理 48 h时计算三叶蔓荆叶片提取物对家蝇 2
龄幼虫的杀虫毒力方程，并计算 LC50，结果见表
4。可以看出，三叶蔓荆叶片不同溶剂提取物对家
蝇 2 龄幼虫均具有毒杀效应，在 48h时对家蝇幼虫
的致死中浓度在 22. 78 － 35. 01 mg /mL。48 h 各溶
剂提取物中的乙酸乙酯提取物的 LC50 最低为
22. 78 mg /mL，其次是石油醚、氯仿和乙醇;表明
乙酸乙酯提取物对家蝇幼虫触杀效果较好。
表 3 三叶蔓荆叶片提取物对家蝇 2 龄幼虫的毒杀作用的校正死亡率
Table 3 Corrected mortality of contact effect of extracts from Vitex trifolia leaves to Musca domestica
时间
Time
处理
Treatment
校正死亡率 (%)Corrected mortality
50 mg /mL 25 mg /mL 12. 5 mg /mL 6. 25 mg /mL 3. 125 mg /mL
24 h
石油醚 Petroleum ether 54. 67 32. 00 18. 67 6. 67 3. 51
氯仿 Chloroform 49. 33 34. 67 21. 33 5. 33 1. 33
乙酸乙酯 Ethyl acetate 66. 67 37. 33 24. 00 10. 53 3. 51
乙醇 Ethanol 46. 67 30. 67 17. 33 12. 28 3. 51
48 h
石油醚 Petroleum ether 73. 68 42. 11 33. 33 10. 53 5. 33
氯仿 Chloroform 61. 40 38. 60 26. 32 12. 28 7. 02
乙酸乙酯 Ethyl acetate 82. 46 45. 61 26. 32 13. 33 5. 33
乙醇 Ethanol 68. 42 38. 60 26. 32 13. 33 4. 00
645
4 期 高 燕等:三叶蔓荆提取物对几种害虫的生物活性研究
表 4 三叶蔓荆叶片提取物对家蝇 2 龄幼虫的毒杀效应
Table 4 Contact effect of extracts from Vitex trifolia leaves to Musca domestica
处理 Treatment
回归方程 (y = ax + b)
Virulence equation
相关系数 (r)
Correlation coefficient
LC50 (mg /mL)
石油醚 Petroleum ether y = 1. 9754x + 2. 2207 0. 9803 25. 52
氯仿 Chloroform y = 1. 4622x + 2. 7421 0. 9908 29. 80
乙酸乙酯 Ethyl acetate y = 2. 2046x + 2. 0067 0. 9811 22. 78
乙醇 Ethanol y = 1. 8111x + 2. 3300 0. 9878 35. 01
3 结论与讨论
通过对甘蓝蚜的拒食作用研究可以看出，三
叶蔓荆叶片用不同溶剂进行提取的提取物对甘蓝
蚜的拒食率明显不同，其中乙酸乙酯提取物的效
果最好。乙酸乙酯提取物对甘蓝蚜具有显著的拒
食作用，且 24 h 的拒食活性明显大于 48 h，这与
三叶蔓荆叶片提取物对小菜蛾的拒食活性结果一
致 (高燕等，2012)，原因可能是有效成分不稳
定，持效期较短 (秦小萍等，2008)。
三叶蔓荆叶片提取物对菜粉蝶幼虫生长发育
的抑制试验表明，几种溶剂提取物对 5 龄菜粉蝶
幼虫的生长发育均有不同程度的影响，其中以乙
酸乙酯提取物和石油醚提取物效果较好。幼虫取
食处理过的叶碟后，活动能力较差，取食量减少，
在体重、化蛹等方面都有明显的降低。校正死亡
率以乙酸乙酯提取物处理最高 50. 00%，其次是石
油醚和氯仿均为 41. 67%，差异不显著。
对家蝇 2 龄幼虫的毒杀作用试验结果表明，
随着处理浓度以及处理时间的增大，对家蝇幼虫
的触杀死亡率逐渐增大。另外各溶剂提取物在高
浓度下对家蝇幼虫有一定的毒杀作用，低浓度下
效果较差。48 h 的 LC50，乙酸乙酯提取物最低为
22. 78 mg /mL，这个浓度远高于拒食和生长发育抑
制试验设定的浓度，说明三叶蔓荆对家蝇幼虫的
毒杀活性较低。
植物源农药因其低毒、环保、高效而备受人
们关注，成为农药发展的一个新方向。本文对三
叶蔓荆叶片提取物的杀虫活性进行了研究，发现
乙酸乙酯提取物拒食活性以及生长发育抑制活性
作用显著，有必要开展进一步研究。试验中的供
试样品质量浓度为粗提取物质量浓度，而植物中
有效的杀虫活性成分含量很低，若进一步纯化，
其杀虫活性可能会进一步提高。目前，国内外关
于蔓荆子在农业方面的研究应用较少，且主要集
中在粗提物和黄酮类成分的分离纯化方面，而对
特征性成分的生物活性研究不够深入。蔓荆子在
我国传统中药中具有悠久的应用历史，因此，有
必要深入研究其有效成分、生物活性以及作用机
理等，为该植物的综合开发利用提供理论依据。
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