全 文 ：收稿日期:2014-04-28
基金项目:重庆市科技惠民项目(CSTC2013jcsf1009) ;重庆市卫生局中医药科技项目(ZY20132070) ;四川省科技成果转化项目
(2013SC0021) ;国家科技惠民计划项目(2013GS500102)
* 通讯作者:李隆云，E-mail:lilongyun8@ 163. com。
蚜虫危害对灰毡毛忍冬药材产量和质量的影响
张 应1，2，李隆云1，2* ，马 鹏1，崔广林1
(1. 重庆市中药研究院 /重庆市中药良种选育与评价工程技术中心，重庆 400065;2. 重庆市银花工程技术
中心，重庆 409900)
摘要 目的:探讨蚜虫危害对灰毡毛忍冬药材产量和质量的影响。方法:测定同一植株上蚜虫不同危害等级的
花枝鲜花和干花的产量，采用 HPLC-ELSD法，分别测定蚜虫不同危害等级的花蕾中绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、3，5-
二咖啡酰奎宁酸、川续断皂苷乙和灰毡毛忍冬皂苷乙 6 种有效成分的含量。结果:蚜虫危害显著影响灰毡毛忍冬的
产量，极显著影响木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量(P ＜ 0. 01) ，显著影响绿原酸的含量(P ＜
0. 05) ，对咖啡酸和 3，5-二咖啡酰奎宁酸含量无显著影响。结论:灰毡毛忍冬 GAP生产中应规范蚜虫的防治。
关键词 蚜虫;灰毡毛忍冬;药材质量
中图分类号:Ｒ282. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2015)01-0008-03
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2015. 01. 003
Effects of Aphid Occurring on Lonicera macranthoides Bud Yield and Quality
ZHANG Ying1，2，LI Long-yun1，2，MA Peng1，CUI Guang-lin1
(1. Chongqing Academy of Chinese Materia Medica /Chongqing Ｒesearch Center of Techniques and Engineering for Chinese Materia
Medica Fine Variety Breeding and Evaluation，Chongqing 400065，China;2. Chongqing Ｒesearch Center of Lonicera Flos，Chongqing
409900，China)
Abstract Objective:To study the effects of aphid occurring on the quality of Lonicera macranthoides bud. Methods:The fresh and
dry bud yields of different aphid damage in the same plant were caculated. Contents of chlorogenic acid，caffeic acid，luteolin-7-O-gluco-
side，isochlorogenic acid A，macranthoidin B and dipsacoside B in Lonicera macranthoides bud damaged by aphid were determined by
HPLC-ELSD. Ｒesults:Aphid significantly affected the contents of luteolin-7-O-glucoside，macranthoidin B，dipsacoside B，and chloro-
genic acid(P ＜ 0. 01 or P ＜ 0. 05) ，but had no obvious effect on the content of caffeic acid and isochlorogenic acid A in the bud of Loni-
cera macranthoides. Conclusions:It is supposed to regulate prevention and control of aphids in Lonicera macranthoides GAP base.
Key words Aphid;Lonicera macranthoides Hand. -Mazz.;Quality
灰毡毛忍冬 Lonicera macranthoides Hand. -Mazz.
是我国重要大宗药材山银花的基原植物之一，花蕾
或带初开的花具有清热解毒、疏散风热的功效〔1〕。
蚜虫以刺吸汁液危害灰毡毛忍冬叶片和花蕾，使叶
片卷缩发黄，花蕾畸形变色，是危害灰毡毛忍冬生产
的重要害虫，研究发现危害的种类有胡萝卜微管蚜
Semiaphis heraclei、中华忍冬圆尾蚜 Amphicercidus si-
nilonicericola、忍冬皱背蚜 Trichosiphonaphis lonicerae
等，其中，胡萝卜微管蚜是重庆地区危害的优势种
群〔2-4〕。本研究主要分析胡萝卜微管蚜危害对灰毡
毛忍冬药材产量和质量的影响，以期为灰毡毛忍冬
的规范化种植和质量管理提供依据。
1 材料与方法
1. 1 材料 实验用灰毡毛忍冬样品取自重庆市秀
山县孝溪乡复兴村大尖坡灰毡毛忍冬种植基地，选
取未施用任何农药的 5 年生“渝蕾 1 号”栽培品种
单株 3 株，单株冠弧约 3 m × 3 m，花枝受胡萝卜微
管蚜不同程度危害。分别按以下标准将花枝分为 4
个类别:0 级:蚜虫未危害(整个花枝未见蚜虫危
害) ;Ⅰ级:蚜虫轻度危害(花簇平均有蚜量小于 30
头，花蕾基本未出现畸形、变色等现象) ;Ⅱ级:蚜虫
中度危害(花簇平均有蚜量 30 ～ 100 头，花蕾少量畸
形、变色) ;Ⅲ级:蚜虫严重危害(花簇平均有蚜量
100 头以上，花蕾大量畸形、变色)。每 1 单株为 1
重复，设 3 次重复。于 2011 年 6 月 2 日常规采收，
并称取单花枝鲜重，蒸气杀青烘干后称重，备用。
绿原酸、咖啡酸和木犀草苷对照品购自中国食
品药品检定研究院(批号分别为:110753-200413、
110885-200102 和 111720-200602)。3，5-二咖啡酰
奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙对照品购
自成都曼思特生物科技有限公司(质量分数 ＞
98%)。流动相为色谱纯，其余试剂为分析纯。
·8· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 1 期 2015 年 1 月
1. 2 仪器 Agilent 1200 高效液相色谱仪(美国，
Agilent 公司) ;DAD 检测器 G1315B(德国，Wald-
bronn公司) ;ChemStation 工作站(美国，Agilent 公
司) ;Alltech ELSD 2000ES 蒸发光散射检测器(美
国，Alltech公司)。
1. 3 色谱条件 Phenomenex Synergi Hydro-ＲP 80A
C18(250 mm ×4. 6 mm，4 μm)色谱柱;流动相为乙腈
(A)-0. 4%醋酸溶液(B) ，梯度洗脱(0 ～ 10 min，
11. 5% ～15%A;10 ～ 12 min，15% ～ 29% A;12 ～ 18
min，29% ～33% A;18 ～ 30 min，33% ～ 45% A;30 ～
35 min，45% ～ 11. 5% A) ;流速:1. 0 mL /min;柱温:
35℃;进样量:10 μL;绿原酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸
检测波长为 326 nm，咖啡酸检测波长为 322 nm，木
犀草苷检测波长为 347 nm;皂苷用蒸发光散射检测
器检测，漂移管温度为 110℃，载气流速为 3. 1 L /
min。
1. 4 对照品溶液的制备 精密称取对照品适量，
加入 50%甲醇制成绿原酸 0. 5 g /L、咖啡酸 0. 1 g /
L、木犀草苷 0. 02 g /L、3，5-二咖啡酰奎宁酸 0. 5 g /
L、灰毡毛忍冬皂苷乙 0. 6 g /L、川续断皂苷乙 0. 2 g /
L的对照品溶液。
1. 5 供试品溶液的制备 精密称取供试品粉末
(过 60 目筛)约 0. 5 g，置具塞 50 mL锥形瓶中，加入
50%甲醇 50 mL，称定重量，超声处理 40 min，放冷，
再用 50%甲醇补重，药液经微孔滤膜(0. 45 μm)过
滤。
1. 6 线性关系考察 分别精密吸取以上 6 种对照
品溶液各 1、2、5、10、15 μL，进样分析。以进样量
(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，进行线性回
归。结果见表 1。
表 1 线性关系考察结果
成分 回归方程 r 线性范围 /μg
绿原酸 y = 12257x － 27. 467 0. 9996 0. 0504 ～ 0. 7520
咖啡酸 y = 3144. 5x + 5. 2423 0. 9995 0. 0097 ～ 0. 1455
木犀草苷 y = 8854. 2x － 6. 5708 0. 9995 0. 00199 ～ 0. 02985
3，5-二咖啡酰奎宁酸 y = 8854. 2x － 6. 5708 0. 9997 0. 0501 ～ 0. 7515
灰毡毛忍冬皂苷乙 y = 1. 7211x + 13. 615 0. 9996 0. 0598 ～ 0. 8970
川续断皂苷乙 y = 1. 6904x + 13. 833 0. 9995 0. 0204 ～ 0. 3060
1. 7 精密度试验 取同一样品制备的供试品溶
液，依法测定，连续进样 6 次，计算得绿原酸、咖啡
酸、木犀草苷、3，5-二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂
苷乙、川续断皂苷乙峰面积的 ＲSD(n = 6)依次为
0. 39%、0. 78%、1. 21%、1. 17%、0. 02%、0. 82%。
1. 8 稳定性试验 取同一样品制备的供试品溶
液，分别于室温避光放置 0、2、4、8、12、24 h 进样，计
算绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、3，5-二咖啡酰奎宁酸、
灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙峰面积的 ＲSD(n
= 6)依 次 为 0. 11%、1. 29%、2. 32%、0. 37%、
0. 01%、1. 07%，表明供试品溶液于室温避光放置
24 h内稳定。
1. 9 重复性试验 取同一样品粉末(过 60 目筛)6
份，每份约 0. 5 g，精密称定，制备供试品溶液，依次
测定，外标法计算绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、3，5-二
咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙质
量分数的 ＲSD(n = 6)依次为 0. 56%、1. 64%、
1. 88%、1. 76%、0. 04%、0. 99%。
2 结果
2. 1 蚜虫危害对灰毡毛忍冬药材产量及外观的影
响 蚜虫以刺吸汁液危害灰毡毛忍冬叶片和花蕾，
导致叶片卷缩变黄，花蕾畸形停止增长，严重时还会
导致花蕾变色，呈红褐色，严重影响药材的外观品
相。胡萝卜微管蚜不同危害等级的灰毡毛忍冬花枝
样品药材产量见表 2。随蚜虫发生程度提高，灰毡
毛忍冬单一花枝的鲜花、干花产量逐渐降低，折干率
提高。危害程度Ⅰ级的花枝与不发病花枝鲜花和干
花产量无显著差异。危害程度达Ⅱ级花枝的鲜花和
干花产量显著降低，产量损失达 23. 44%、17. 63%。
危害程度达Ⅲ级花枝的鲜花和干花产量最低，产量
损失达 47. 79%、36. 95%。不危害、危害Ⅰ级和危
害Ⅱ级的药材折干率无显著差异，分别为 22. 20%、
22. 58%和 23. 95%，危害Ⅲ级的药材折干率显著提
高，达 27. 02%。
2. 2 蚜虫危害对灰毡毛忍冬药材内部质量的影响
胡萝卜微管蚜不同危害等级的灰毡毛忍冬药材样
品质量见表 3。蚜虫危害极显著影响木犀草苷(P =
0. 006)、灰毡毛忍冬皂苷乙(P = 0. 000)和川续断皂
苷乙(P = 0. 000)的含量。其中木犀草苷含量在蚜
虫Ⅰ级危害样品最高，达 1. 54 mg /g，随危害程度的
加重含量逐渐降低，但均高于蚜虫未危害样品，蚜虫
未危害样品含量最低为 1. 06 mg /g;灰毡毛忍冬皂
苷乙含量在Ⅰ级危害样品中最高为 73. 33 mg /g，随
危害程度加重含量显著下降，Ⅲ级危害样品中仅为
·9·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 1 期 2015 年 1 月
表 2 蚜虫不同危害等级对灰毡毛忍冬花枝样品药材产量的影响(珔x ± s，n =3)
危害程度 花枝鲜花产量 /g 花枝干花产量 /g 折干率 /%
0 级 61. 19 ± 1. 670Aa 13. 56 ± 0. 415Aa 22. 20 ± 0. 450Aa
Ⅰ级 57. 29 ± 1. 876Aa 12. 93 ± 0. 547ABa 22. 58 ± 0. 618Aa
Ⅱ级 46. 85 ± 2. 044Bb 11. 17 ± 0. 413Bb 23. 95 ± 0. 491Aa
Ⅲ级 31. 95 ± 2. 199Cc 8. 55 ± 0. 571Cc 27. 02 ± 0. 764Bb
注:同一指标不同小写字母表示显著差异(P ＜ 0. 05) ，不同大写字母表示极显著差异(P ＜ 0. 01)
30. 97 mg /g;川续断皂苷乙含量在蚜虫未危害样品
中最高为 7. 68 mg /g，随危害程度加重含量显著降
低，Ⅲ级危害样品中仅为 2. 12 mg /g。
蚜虫危害显著影响灰毡毛忍冬药材中绿原酸
(P = 0. 025)的含量。绿原酸含量在蚜虫Ⅰ级危害
样品最高，达 75. 18 mg /g，随蚜虫危害程度加重含
量逐渐降低，蚜虫Ⅲ级危害样品中含量最低，为
64. 09 mg /g。
蚜虫危害对灰毡毛忍冬药材中咖啡酸(P =
0. 625)和 3，5-二咖啡酰奎宁酸(P = 0. 093)含量影
响不显著。咖啡酸含量在蚜虫Ⅲ级危害样品中最高
为 0. 33 mg /g，与其他危害程度样品含量无显著差
异;3，5-二咖啡酰奎宁酸含量在蚜虫未危害样品中
最高为 84. 98 mg /g，随蚜虫危害程度加重含量逐渐
降低，在蚜虫Ⅲ级危害样品中含量最低为 73. 34
mg /g。
表 3 蚜虫不同危害等级对灰毡毛忍冬药材样品质量的影响(珔x ± s，n =3，mg/g)
危害程度 绿原酸 咖啡酸 木犀草苷 3，5-二咖啡酰奎宁酸 灰毡毛忍冬皂苷乙 川续断皂苷乙
0 级 74. 76 ± 2. 987Aa 0. 31 ± 0. 003Aa 1. 06 ± 0. 020Bb 84. 98 ± 5. 564Aa 71. 69 ± 0. 684Aa 7. 68 ± 0. 731Aa
Ⅰ级 75. 18 ± 0. 888Aa 0. 31 ± 0. 010Aa 1. 54 ± 0. 114Aa 77. 10 ± 1. 805Aa 73. 33 ± 4. 006Aa 6. 56 ± 0. 265Aa
Ⅱ级 68. 30 ± 2. 263Aab 0. 31 ± 0. 011Aa 1. 26 ± 0. 033ABab 74. 09 ± 1. 246Aa 69. 66 ± 5. 829Aa 5. 50 ± 0. 569Aa
Ⅲ级 64. 09 ± 2. 551Ab 0. 33 ± 0. 021Aa 1. 16 ± 0. 071Bb 73. 34 ± 1. 233Aa 30. 97 ± 3. 011Bb 2. 12 ± 0. 153Bb
注:同一指标不同小写字母表示显著差异(P ＜ 0. 05) ，不同大写字母表示极显著差异(P ＜ 0. 01)
3 讨论
本研究通过产量测定和质量检测，明确了蚜虫
优势种群胡萝卜微管蚜危害对灰毡毛忍冬产量和质
量的影响，蚜虫危害达到Ⅱ级后产量显著降低。蚜
虫危害显著影响绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷
乙和川续断皂苷乙的含量，对咖啡酸和 3，5-二咖啡
酰奎宁酸无显著影响，蚜虫危害Ⅲ级样品不符合药
典对灰毡毛忍冬药材的质量要求〔1〕。农业生产中，
通常采用产量损失和防治成本来制定病虫害的防治
指标，但是中药材 GAP生产中还应综合考虑病虫对
药材质量的影响，目前尚未见相关的研究报道，急需
进一步研究制定适宜于中药材病虫害防治指标制定
的数学模型。
过去灰毡毛忍冬药材的质量评价主要参照金银
花，以绿原酸和木犀草甘为检测对象。2010 年中国
药典增加专属性较强的灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断
皂苷乙〔1〕，本文还增选了咖啡酸和 3，5-二咖啡酰奎
宁酸作为灰毡毛忍冬药材质量鉴定的指标性成分，
两种生物活性物质具有抗炎、抗微生物等药理作用，
是抗 HIV 活性化合物研究的热点〔5〕。本文采用
HPLC-ELSD检测法同时测定山银花中 6 种指标性
成分，结果表明此法准确，精密度高、重现性好，为灰
毡毛忍冬药材的质量评价提供了快速、准确的测定
方法。
本试验结果表明，蚜虫轻度危害后有利于提高
灰毡毛忍冬绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙的
含量，而Ⅱ级、Ⅲ级危害上述成分含量显著降低。灰
毡毛忍冬受虫害损伤后的次生代谢变化还需要进一
步研究。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］．一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:28-29.
［2］张应，吴叶宽，刘雨升，等 . 秀山县灰毡毛忍冬蚜虫及主
要天敌消长规律与药剂筛选研究［J］． 中国中药杂志，
2012，37(21) :3219-3222.
［3］张应，李隆云 . 秀山灰毡毛忍冬病虫害发生及防治情况
［J］．植物医生，2011，24(6) :20-21.
［4］张应，崔广林，李隆云 . 胡萝卜微管蚜在灰毡毛忍冬上
的空间分布格局［J］．植物保护，2012，38(6) :77-79.
［5］赵昱，赵军，李湘萍，等 . 咖啡酰奎宁酸类化合物研究进
展［J］．中国中药杂志，2006，31(11) :869-874.
·01· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 1 期 2015 年 1 月