全 文 ：［收稿日期］ 20120629(004)
［基金项目］ 广东省科技计划项目(2010B030700019)
［第一作者］ 宋凤兰，硕士，实验师，从事药物新剂型与新技术的研究，Tel:0760-88207977，E-mail:fenglansong@ 126． com
［通讯作者］ * 杨帆，博士，教授，从事药物新剂型与新技术的研究，Tel:020-39352125，E-mail:gzyangfan@ hotmail． com
·工艺与制剂·
白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-环糊精包合物的制备
宋凤兰1，金海杰1，潘育方1，杨轶群2，杨帆1*
(1. 广东药学院，广州 510006;2. 广州白云山天心制药股份有限公司，广州 510300)
［摘要］ 目的:优选白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-环糊精(β-CD)包合物的制备工艺。方法:以挥发油包合率、包合物收得
率及包合物含油率为指标，从饱和水溶液法、超声法、研磨法中挑选最佳制备方法;以挥发油包合率和包合物收得率为综合评
价指标，选取挥发油与 β-CD 投料比、包合温度、包合时间、β-CD 与水的比例为影响因素，采用正交试验优选挥发油包合工艺;
应用 TLC，UV 及显微成像对制备的包合物进行物相鉴别。结果:最佳的包合方法为饱和水溶液法，其最佳包合工艺为挥发油-
β-CD 1∶ 8，包合温度 55 ℃，搅拌时间 3 h，β-CD-水 1 ∶ 10;TLC，UV 及显微成像分析结果均显示挥发油与 β-CD 已形成包合物。
结论:优选的包合工艺简单、稳定可行，适合工业化大生产。
［关键词］ 白纸扇感冒颗粒;挥发油;β-环糊精包合物;正交试验
［中图分类号］ R283. 6 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)23-0009-04
Preparation of β-cyclodextrin Inclusion Compound of
Volatile Oil from Baizhishan Cold Granule
SONG Feng-lan1，JIN Hai-jie1，PAN Yu-fang1，YANG Yi-qun2，YANG Fan1*
(1. Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China;
2. Guangzhou Baiyunshan Tianxin Pharmaceutical Co． Ltd，Guangzhou 510300，China)
［Abstract］ Objective: To optimize preparation technology of β-cyclodextrin inclusion compound of
volatile oil from Baizhishan cold granule． Method:With inclusion rate of volatile oil， yield and oil ratio of
inclusion complex as indexes，optimum technology was selected from saturated aqueous solution method，ultrasonic
method and trituration method;With inclusion rate of volatile oil and yield of inclusion complex as comprehensive
evaluation indexes，orthogonal design was used to optimize inclusion technology of volatile oil with ratio of volatile
oil-β-CD，inclusion temperature，inclusion time and proportion of water-β-CD as factors;Phase of this prepared
inclusion complex was testified by analyses of TLC，UV and microscopic imaging． Result:The best method of
inclusion was saturated aqueous solution method， and optimum inclusion technology conditions were as follows:
ratio of volatile oil-β-CD 1 ∶ 8， inclusion temperature of 55 ℃，mixing time of 3 h，β-CD-water ratio of 1 ∶
10. Analysis results of TLC，UV and microscopic imaging showed that stable inclusion compound has been formed
from volatile oil and β-CD． Conclusion:This optimized technology was simple，stable and feasible， it could be
suitable for large-scale production．
［Key words］ Baizhishan cold granule;volatile oil;β-cyclodextrin inclusion complex;orthogonal test
白纸扇感冒颗粒收载于《国家药品标准》，由白 纸扇、桔梗、鸭脚木皮、桉叶油、薄荷素油等组成，具
·9·
第 18 卷第 23 期
2012 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 23
Dec．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.23.057
有清热解毒、疏风止咳的功效，常用于治疗感冒发
热、头痛咳嗽等症［1］。处方中桉叶油、薄荷素油具
有疏风解表、清热解毒、化痰理气的功效，是处方中
的主要药效成分的来源，但极易挥发。传统制备工
艺是将白纸扇、桔梗等药材干法制粒，喷加桉叶油和
薄荷素油，混匀制得，但在生产、贮存和使用的过程
中，挥发油类成分极易损失，影响其疗效。为增加制
剂的稳定性，提高其疗效，本试验将薄荷素油和桉叶
油按处方比例混合，将此混合挥发油制成 β-环糊精
(CD)包合物，通过正交试验优选包合物的制备工
艺，并对制得的包合物进行物相鉴别。
1 材料
CL-2 型恒温磁力搅拌器(巩义市予华仪器有限
责任公司) ，BK5000 型生物显微镜(重庆奥特光仪
器有限公司) ，UV1102 型紫外分光光度计(上海天
美科学仪器有限公司) ，β-CD(上海博奥生物科技有
限公司) ，薄荷素油(广州致信药业有限公司，批号
091201) ，桉叶油(佛山市南海中南药化厂，批号
20110912) ，硅胶 G(青岛海洋化工有限公司) ，试剂
均为分析纯。
2 方法和结果
2. 1 挥发油 β-CD 包合物的制备
2. 1. 1 包合物制备方法选择 挥发油 β-CD 包合
物的常用制备方法有饱和水溶液法、超声法、研磨法
等［2-5］。本试验分别采用这 3 种方法进行对比研究，
以挥发油包合率、包合物收得率等为指标，以优选制
备方法。
2. 1. 1. 1 饱和水溶液法 称取 β-CD 6 g，加水 60
mL，加热溶解，于磁力搅拌器上 55 ℃恒温搅拌，缓
慢滴加挥发油 1 mL，继续搅拌 1 h，取出，冷却，置 4
℃冰箱冷藏 24 h，取出，抽滤，加无水乙醇 5 mL 洗涤
沉淀，置真空干燥箱中干燥 24 h，即得挥发油 β-CD
包合物，依法平行 3 份。
2. 1. 1. 2 超声法 称取 β-CD 6 g，加水 60 mL，加热
溶解，冷却至 55 ℃，置超声波清洗仪中，边超声边缓
慢滴加挥发油 1 mL，继续超声 1 h，取出，置 4 ℃冰
箱冷藏 24 h，取出，抽滤，加无水乙醇 5 mL 洗涤沉
淀，置真空干燥箱中干燥 24 h，即得挥发油 β-CD 包
合物，依法平行 3 份。
2. 1. 1. 3 研磨法 称取 β-CD 6 g，加水 18 mL，研磨
均匀，边研磨边滴加挥发油 1 mL，继续研磨 1 h，抽
滤，加无水乙醇 5 mL 洗涤沉淀，置真空干燥箱中干
燥 24 h，即得挥发油 β-CD 包合物，依法平行 3 份。
2. 1. 2 包合物质量评价指标 将挥发油 β-CD 包
合物置圆底烧瓶中，加水 300 mL，连接挥发油提取
器，按《中国药典》2010 年版一部附录 XD 挥发油测
定法项下甲法，煮沸 2 h 以上，至油量不再增加，读
取挥发油回收量。同时精密量取挥发油 1 mL，置于
圆底烧瓶中，加水 300 mL，连接挥发油提取器，同法
操作，计算空白回收率。
空白回收率 = 回收油体积
加入挥发油体积
× 100%;
挥发油包合率 = 包和物中挥发油体积
投油体积 ×空白回收率
× 100%;
包合物收得率 = 包合物质量
(β-CD +挥发油)质量
× 100%;
包合物含油率 =包合物中挥发油体积
包合物质量
× 100%;
综合评分 =挥发油包合率
包合率最高值
× 80 +包合物收得率
收得率最高值
× 20。
测得饱和水溶液法、超声法及研磨法制得的挥
发油 β-CD 包合物的挥发油包合率分别为(80. 45 ±
1. 52)%，(72. 05 ± 1. 20)%，(65. 58 ± 3. 12)%;包
合物收得率分别为(93. 73 ± 0. 46)%，(97. 17 ±
0. 43)%，(88. 43 ± 0. 49)%;包合物平均含油率依
次为(11. 44 ± 0. 19)%，(9. 89 ± 0. 19)%，(9. 89 ±
0. 51)%。采用最小显著差数法(LSD)对 3 种方法
的数据平均值两两比较，结果见表 1。
表 1 白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-CD 包合物制备方法分析
方法
(I)
方法
(J)
包合率 收得率 含油率
平均差(| I － J |) P 平均差 P 平均差 P
饱和水溶液 超声 8. 40 0. 002 8 3. 44 9. 75 × 10 － 5 1. 56 0. 001 2
饱和水溶液 研磨 14. 87 0. 000 1 5. 31 7. 99 × 10 － 6 1. 56 0. 001 2
超声 研磨 6. 47 0. 009 6 8. 74 4. 19 × 10 － 7 0 1
结果表明，饱和水溶液法中包合率、含油率最
高，虽然挥发油收得率不是最高，但也接近最高水
平。超声法中挥发油收得率较高，但包合率偏低。
研磨法中挥发油的包合率和收得率均较低。表 1 结
果说明 3 种制备方法各评价指标两两间均有极显著
性差异。综合考察，确定采用饱和水溶液法制备。
·01·
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2012 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 23
Dec．，2012
2. 1. 3 正交试验优选包合工艺 在确定饱和水溶
液法为制备方法基础上，对影响包合工艺的因素，如
挥发油与 β-CD 投料比、包合温度、包合时间、β-CD
与水的比例进行考察，以挥发油包合率和包合物收
得率的综合评分为指标，采用 L9(3
4)正交试验优选
包合工艺。因素水平见表 2，试验安排及结果见表
3，方差分析见表 4。
表 2 白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-CD 包合物的
包合工艺优选正交试验因素水平
水平
A
挥发油-
β-CD
B
包合温度
/ ℃
C
包合时间
/ h
D
β-CD-水
1 1∶ 4 40 1 1∶ 10
2 1∶ 6 55 2 1∶ 15
3 1∶ 8 70 3 1∶ 20
表 3 白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-CD 包合物
的包合工艺优选正交试验安排 %
No． A B C D
挥发油
包合率
包合物
收得率
综合
评分
1 1 1 1 1 44. 74 79. 98 63. 57
2 1 2 2 2 52. 26 82. 7 71. 74
3 1 3 3 3 52. 39 80. 44 71. 33
4 2 1 2 3 56. 62 69. 41 72. 97
5 2 2 3 1 71. 38 85. 01 91. 41
6 2 3 1 2 56. 03 73. 41 73. 32
7 3 1 3 2 79. 97 69. 55 96. 36
8 3 2 1 3 67. 95 59. 07 81. 87
9 3 3 2 1 77. 61 65. 61 93. 07
K1 206． 64 232． 90 218． 76 248． 05
K2 237． 70 245． 02 237． 78 241． 42
K3 271． 30 237． 72 259． 10 226． 17
R 64． 66 12． 12 40． 34 21． 88
表 4 综合评分方差分析
方差来源 SS MS f F P
A 57 601. 69 697. 18 2 28. 08 ＜ 0. 05
C 57 176. 03 271. 51 2 10. 94
D 56 988. 43 83. 92 2 3. 38
B(误差) 56 929. 34 24. 82 2
注:F0. 05(2，2)= 19，F0. 1(2，2)= 9。
由直观分析可知，各因素对试验结果影响的主
次顺序为 A ＞ C ＞ D ＞ B。以极值最小的 B 因素为误
差项进行方差分析，结果因素 A 各水平间有显著性
差异，因素 C，D 各水平间无显著性差异。确定最佳
包合工艺为 A3B2C3D1，即挥发油-β-CD 1 ∶ 8，包合温
度 55 ℃，搅拌时间 3 h，β-CD-水 1∶ 10。
2. 1. 4 验证试验 按优选的最佳工艺 A3B2C3D1 进
行验证试验，制备 3 批挥发油包合物。结果 3 批包
合物的平均挥发油包合率 92. 06%;包合物平均收
得率 89. 41%。说明优选的包合工艺可行。
2. 2 挥发油 β-CD 包合物的物相鉴别
2. 2. 1 薄层色谱法 称取挥发油 β-CD 包合物 0. 1
g，加乙酸乙酯 10 mL，超声 15 min，过滤，滤液于 60
℃水浴中浓缩，加乙酸乙酯定容到 2 mL，得样品 1;
取挥发油 20 mg，加无水乙醇 10 mL 溶解，得样品 2;
称取从挥发油包合物中回收的挥发油 20 mg，加无
水乙醇 10 mL 溶解，得样品 3;称取挥发油与 β-CD
混合物 0. 1 g，加乙酸乙酯 10 mL，超声 15 min，过
滤，滤液于 60 ℃水浴中浓缩，加乙酸乙酯定容到 2
mL，得样品 4。分别取上述样品 1，2，3，4 各 5 μL，
点于同一硅胶 G 薄层板上。以环己烷-乙酸乙酯
(86∶ 14)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 1% 香草
醛硫酸溶液，于 105 ℃烘箱中烘至斑点清晰，取出。
包合物中回收的挥发油、挥发油及挥发油与 β-
CD 物理混合物在同一位置上具有相同颜色的斑
点。而包合物提取液则无相应的斑点，表明挥发油
已包合于 β-CD 内部，形成了稳定的与混合物物相
不同的包合物，包合物表面基本无挥发油附着。且
包合前后挥发油成分未发生变化，包合过程对挥发
油化学成分无影响。见图 1。
1. 挥发油包合物;2. 挥发油样品液;
3. 包合物包合的挥发油;4. 混合物样品液
图 1 白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-CD 包合物 TLC
2. 2. 2 紫外分光光度法 精密量取挥发油 0. 5
mL，加水 40 mL，振摇，静置分层，取下层水液，即得
挥发油饱和水溶液(样品 1) ;取制得的挥发油饱和
·11·
宋凤兰，等:白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-环糊精包合物的制备
水溶液 20 mL，按包合物的投料比加入 β-CD 2 g，振
摇，过滤，为样品 2;按样品 2 比例，取包合物 2. 2 g，
加水 20 mL，振摇，过滤，为样品 3;称取 β-CD 2 g，加
水 20 mL，振摇，过滤，为样品 4。对以上样品分别进
行紫外波长扫描，以水为空白对照，扫描范围200 ～
400 nm，见图 2。
由图 2 可知，挥发油 β-CD 包合物和 β-CD 在
200 ～ 400 nm 均无吸收峰，而挥发油和物理混合物
在 239 nm 处有一明显的吸收峰，表明 β-CD 对测定
无干扰，挥发油已包合于 β-CD 内部，形成了稳定的
与物理混合物物相不同的包合物。
2. 2. 3 显微成像鉴别 分别取适量 β-CD、挥发油
1. 挥发油;2. 混合物;3. 包合物;4. β-CDL
图 2 白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-CD 包合物 UV
β-CD 包合物、挥发油 β-CD 物理混合物，加少量水分
散，在 100 倍显微镜视野下观察，见图 3。
图 3 白纸扇感冒颗粒中挥发油 β-CD 包合物显微成像(10 × 10)
由图 3 可知，未包药物的 β-CD 为半透明柱状
晶体，形状较大;挥发油 β-CD 混合物显微照片可
知，混合油吸附于 β-CD，使 β-CD 粘结在一起成团
状;挥发油 β-CD 包合物中 β-CD 已包含药物，呈不
透明团状，形状较小。在形成的包合物中，原有的
β-CD 半透明柱状晶体显微性状消失。且包合物表
面基本无团块状的油滴附着，由此判断包合物已形
成。比较三者的显微结构，可判断挥发油已进入 β-
CD 空腔，从而被包合成与物理混合物物相不同的
稳定的包合物。
3 讨论
采用饱和水溶液法制备包合物时，包合温度不
宜过高，过高挥发油容易挥发损失，影响包合率;包
合温度也不宜过低，过低导致 β-CD 溶解度降低，分
子热运动减弱，降低挥发油与 β-CD 的接触，从而影
响包合率。本试验优选的包合温度为 55 ℃，与文献
［6］报道一致。
对制得的挥发油 β-CD 包合物进行物相鉴别，
结果显示挥发油在包合前后薄层色谱一致，而包合
物薄层色谱中无相应的斑点;紫外光谱中挥发油和
物理混合物有相同的吸收峰，包合物和 β-CD 均无
吸收峰;包合物、物理混合物、β-CD 显微特征明显不
同。以上结果均说明挥发油已进入 β-CD 空腔，形
成了与物理混合物不同的物相。
［参考文献］
［1］ 薛漓 ．高效液相色谱法测定白纸扇感冒颗粒中盐酸麻
黄碱的含量［J］．广西中医学院学报，2003，6(4) :50．
［2］ 李海亮，崔小丽，仝燕，等 ． 2 种方法制备 4 种中药挥发
油 β-环糊精包合物的规律性探索［J］． 中国中药杂志，
2012，37(7) :908．
［3］ 陈娟，陈文豪，王瑞，等 ． 中药复方愈溃胶囊中挥发油
的 β-环糊精包合工艺［J］． 中国实验方剂学杂志，
2011，17(14) :19．
［4］ 张卫东，邢建国 ． 维感颗粒中挥发油 β-环糊精包合物
制备及稳定性研究［J］．中成药，2005，27(5) :515．
［5］ 徐男，蔡梅超，胡言光，等 ． 白金妇安颗粒中挥发油 β-
环糊精包合物制备工艺［J］． 中国实验方剂学杂志，
2012，18(3) :36．
［6］ 江华，郁巍岳 ． β-环糊精包结乳结消散片中降香挥发油
工艺研究［J］．中南药学，2008，6(1) :37.
［责任编辑 仝燕］
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