全 文 ：第5 1卷 第 2期
90 14年 9 月
热 带 作 物 学 报 v ol . 15 N o . :
C H I N E S E J O U R N A O F T R O L PI C A LC R O S PS ep
.
i 。。-
香茅花叶病的发生及病原鉴定
黄朝豪 李增平 谢昌平
( 华南热带作物学院植保 系 海南据州 5 7 7 173 )
吴继林 郝秉中
( 华南热带作物研究院 热带作物生物学实验室 海南据州 57 173 7 )
摘典 对香茅花叶病的侵染性 、 病原形态 、 物理性质及寄主范围等进行了研究 。 侧 定 6 科 40 种
( 品种 ) 植物 , 发现禾本科的玉米 4 个品种 、 高粱 3 个品种和甘蔗等被侵染发病 , 表现系统花叶
症状 , 其余 5 科韶种 ( 品种 ) 植物不表现症状 。 病原钝化温度为“ 。 C , 稀释限点为 1。一 名一 1。~ ` ,
体外存活期为 ld 。 用病叶粗提纯液制样 , 在电镜下可观察到许多线状病毒粒子 ,测量其大小为9 . 7
义 7 5。一 80 n m 。 在受侵染的叶肉细胞的细胞质中 ,看到同样的病毒粒 子和风轮状或片状聚集 体的
内含体。 结果表明 , 弓l起我国香茅花叶病的病原属于甘蔗花叶病毒 ( 5 CM V ) 的一个株系 。
关扭词 香茅 花叶病 寄主范围 超微结构
中田法分类号 5 5 7 3 . ` 5 4 35 . 7 3
香茅 ( C y m b o p o g o n w i n t e r i a n u s ) 是我国热带地区广泛栽培的一种重要 香 料 作 物 ,
具有多种工业用途 。 在海南及广东湛江等地都曾发现香茅花叶病为害 。 在 国外此病主 要 分
布于巴西 、 菲律宾 、 马来西亚等热 带国家 。 19 4 9年 L a w a s , 0 . M . 等报道 , 香茅花叶 病 可
能是由甘蔗花叶病毒 ( S C M V ) 引起的 〔 i 〕 。 1 9 5。年 C as at , A . S . 等报道 , 在 巴西圣保罗
发生的香茅花叶病的症状与甘蔗花叶病相似 , 认为香茅花叶病毒与甘蔗花叶病毒相 似 〔 2 〕 。
在我国海南 、 广东植茅区 , 普遍发生花叶病 , 为害相当严重 , 尤其是海南发病更重 , 发
病率达 7 9 , 5%一 1 0 % , 有些重病 区几乎找不到健康的植株 。 国外关于香茅花叶病 的资料报道
甚少 , 国内未见有此病的报道 , 笔者曾在 1 9 8 5年作过初步的调查及电镜观察病原 方 面 的 研
究 。 为了进一步弄清病原的性质 , 又于 19 9 2一 1 9 9 4年开展 了病原生物学 、 寄主范围 、 体外抗
性 、 传播途径及 电镜观察病原等方面的研究 , 以便为生产上防治此病提供科学依据 。
1 材料与方法
1
.
1 毒 派
19 9 1年采自海南省澹州市华南热带作物学院试验场附近的香茅园 。 因未找到理想的繁殖
寄主 , 因而将病株挖回种在网室栽培 , 供各项试验用 。
1
.
2 供试作物品种及其来源
玉米 : 丹玉 1 5、 京杂 6 号 、 辽宁 6 3 1 、 罗丹 2 号 、 掖丹 2 号 、 云南施甸玉米 、 云南 施 甸
本研 究为国家自活科学基金资助课题。
收摘 日朔 : 1日。`一“ 一 2 2 。
热 带 作 物 学 报 1 5卷
糯玉米 , 均由云南武定县种子公司提供 。
广西杂交玉米 、 广西大叶种高粱 、 广西小叶种高粱 , 由广西钟山县种子公司提供 。
玉米 : 4 7 8 、 j g l 一 2 0 、 5 0 3 x j g z一 9 、 2 2 2自交一 2 、 4 7 5 又 j 9 1一 。 , 由吉林省农科院三
亚南繁基地提供 。
甜高梁 91 7 4 4 , 采 自中国农科院品种资源所三亚良种繁殖场 。
其余种子是在市场购买及室内保存的 。
1
。
3 传染性试验
在防虫网室内进行 , 用少量香茅病叶 , 按常规汁液摩擦接种方法 〔 “ 〕 , 分别接种 到 高
粱 、 玉米 、 香芋和甘蔗上 。 供试的广西小叶种高粱 ( 2 / 1 1 、 3 / 1 0 、 4 / 14病株数 /接种数 , 下
同 ) 、 玉米 ( 2 / 5、 4 / 2 4 ) 、 香茅 ( z / 2 0 、 2 / 1 0 ) , 甘蔗 ( o / 9 、 3 / 1 0 ) 。
1
.
4 体外抗性测 定
1 9 9 3一 。 3及 1 9 9 4一 03 进行 , 重复 3 次 , 按常规方法将香茅花叶病接种到小叶种高粱上 。
1
.
5 寄主范围观察
1 9 92 一 1 9纵年在防虫网室内进行人工接种试验 , 按常规人工汁液摩擦接 种 6 科 40 种 植
物 , 重复 2 一 3 次 , 接种后在防 虫网室栽培观察 3d0 后 , 终止观察日期 , 记录发病情况 。
1
.
6 电镜观察病毒样品的制备
以香茅花叶病病叶为部分提纯材料 , 用。 . 2 M磷酸缓冲液 ( p H 7 . 2 ) 捣碎 匀 浆 , 聚乙二
醇 ( P E G分子量为 6 0 0 。 ) 沉淀 , 3 8 。。 r/ m in 离心提纯 , 制备病毒部分提纯液 。 用病毒提纯液
沾铜网 , 经 3 %磷鸿酸钠负染 3 m i n , 蒸馏水冲洗 , 滤纸吸千 , 待凉干后 , 在 J E M 10 o C X一 l
电镜下观察 。
病组织扭薄切片电镜样品的制备 : 取病叶上病伏典型部分切 成 1 m m “ 的小块 , 立 即放
在 6 %戊二醛 ( 。 . 1磷酸缓冲液 p H 7 . 2 ) 中固定 20 h , 然后用 2 % 05 0 ` ( 。 . 1 磷酸缓冲液 p H
7
.
2 ) 固定 6 h , 在乙醇系列脱水过程中 , 用 2 %醋酸铀染色 15 h , 用 环 氧 树 脂 81 2 包 埋 ,
L K B一 V切片机制备超薄切片 , 用泞豢酸铅染色 , J E M I。。C X 一 l 电镜观 察 。
2 试验结果
之。 1 症状特点
香茅花叶嘴株在新长出的嫩叶上花叶症状比较明显 , 初期淡绿色 , 随着叶龄的增加 , 出
现浓淡不匀的花叶症状 , 其间有断断续续与叶脉平行褪绿的短条纹 , 老叶叶片色泽较绿 , 花
叶症状不甚明显 。 其症状 与甘蔗花叶病的症状基本相似 ( 图版 1 . 1 ) 。
2
.
2 传染性试验结果
实验结果丧明 , 香茅花叶肩可通过汁液摩擦接种传染 。 在接种作物上所表现的症状与文
献报道的情况 〔 1 , “ 〕相 同 。
2
.
3 体外抗 注测 定结果
测定 结果表明 , 香茅花叶病病原钝化温度为 5 ℃ , 稀释限点为 1。一 “一 10 一 ` , 体外存活期
为 l d , 与文献报道甘蔗花叶庙毒的物理性质基本相同 〔 魂〕 。
2
。
4 寄主范围
发生系统花叶的试验植物有 : 广西小叶种高梁 ( 1。 / 42 发病株数 /接种株数 , 下同。 后期
2期 黄朝豪等 : 香茅花叶病的发生及病原鉴定
症状在褪绿部位出现紫红色的条斑 ) 、 广西大叶种高粱 ( 2/ 28 ,
红色的条斑 ) , 甜高梁 9 2 7 4 4 ( 2 / 32 ) , 王米罗丹 2 号 ( 4 / 2 4 )
玉米 5 0 3 x j g i一 9 ( z / 2 5 ) , 玉米 12 1自交一 2 ( l八 s ) , 甘蔗
不表现症状的植物有 5 科 32 种 , 即云南施甸高粱 ( 。 / 4 4 ) ,
后期症状 在褪绿部位出现紫
, 玉米广西杂交种 ( z / 2 4 ) ,
( 3八 9 ) 。
玉米丹玉 1 5 ( 。 / 1 8 ) , 玉米
京杂 6 号 ( o / 3 4 ) , 玉米辽宁 5 3 1 ( o / 2 5 ) , 玉米掖丹 2 号 ( o / 2 7 ) , 云南施甸玉米 ( o / 2 5 ) ,
云南施甸糯玉米 ( o / 2 0 ) , 玉米47 5 x J 9 1一 4 ( o / 1 7 ) , 昆诺阿葬 ( C h e n o p o d i u m q u i n o a
o / 2 5 )
, 览色葬 ( C h e n o p o d i u m a m a r a n t i e o l o r o八 2 ) , 普通烟 ( N i e o t i a n a t a b a e u m
。 / 1 5 ) , 心叶烟 ( N . g l时主n o s a o / 22 ) , 番 茄 ( L y e o p e r s i e u m e s e u l e n t o m o / 2 0 ) , 辣
椒 ( C a p s i e u m a n n u m o / s ) , 矮 牵 牛 ( P e t u n i a h y b r i d a o / 22 ) , 白菜 ( B r a s s i e a
C h i
n e n s i s o / 9 )
, 小麦 9 3 0 0 1 ( o / 3 3 ) , 小麦 9 3 1 0 9 ( o / 1 0 ) , 水 稻 ( o / 10 ) , 旱 稻 ( o / 3 0 ) ,
旱稻 S , 。 ( o / 2 0 ) , 旱 稻 2 6 ( o / 2 0 ) , 旱稻 2 0 ( o / 2 0 ) , 象 草 ( P e n n i s e t u m p u r p 。 r e u m
o八 s ) , 狗尾草 ( S e t a r i a s p h a e e l a t a o / 2 5 ) , 鸭蹈草 ( C 。 m m 。 l i n a e 。 m m u r u : o / 2 0 ) ,
菜豆 ( P h a s e o l u s v u l g a r i : o / 20 ) , 黄瓜 ( C u e u m i s s a t i v u s o / 2 0 ) , 千 日 红 ( G o m p h r -
。 n a g l o b a s a o八 。 ) 。
2
.
5 病毒样品的电镜观察结果
病毒粗提液的 电镜观察 : 经过处理的病毒提纯液样品 , 在电镜下观察到许多聚集在一起
或分散的线状病毒粒子 ( 图版 1 . 2 ) , 测量病毒粒子的大小为 9 . 7 x 7 50 一 8 0 o n m , 与甘蔗
花叶病毒的粒子基本相似 〔 4 〕 。
病组织的透射 电镜观察 : 从病叶叶肉细胞中可以看到许多线状病毒粒子无规则地分散在
细胞质中 ( 图版 1 . 3 ) , 这些粒子的直径与提纯液中的病毒粒 子相似 。 有时也能观察到一
单层病毒粒子整齐地排列在细胞质索中 ( 图版 I 。 4 , 5 ) 。 受侵染的细胞内经常能观察到
细胞质内含体 , 它们呈片状聚集体或风轮状 ( 图版 1 . 3 , 图版 卫 . 6 , 7 ) 。 内含体常常
分布在胞间连丝附近 , 并常与细胞壁垂直 。 图版 1 . 7 , 表示在两个相邻病细胞的胞间连丝
附近细胞质中 , 分别含有相互对应的内含体 。 受病毒侵染细胞的细胞质还经常出现空泡或形
成髓鞘状结构 ( 图版 1 . 8 ) 。
3 结论和讨论
试验结果表 明 , 香茅花叶病可通过汁液传染给高粱 、 玉米和甘蔗 , 其症状与甘蔗花叶病
相似 , 这一结果与 C os at , A . 5 . 等报道的一致 〔 2 〕 。 同时我们还发现广西小叶种高粱除表
现系统花叶外 , 还出现紫红色条斑 , 可作为香茅花叶病的一种鉴别寄主植物 。
病毒提纯液 , 在电镜下可观察到许多线状病毒粒子 。 在病组织的超薄切片样品中 , 同样
可看到许多线状病毒粒子 , 这些病毒粒子的形态及大小与 甘 蔗 花 叶 病 毒 的 粒 子 基 本 相
似 〔 4 〕 。 在受侵染的细胞内能观察到风轮状或片状聚集体的内含体 , 这是马铃薯 y病毒组成
员甘蔗花叶病毒引起的内含体的特点。 据病毒粒子和内含体的形态 、 物理性质和寄主范围等
方面的研究结果 , 我们认为我国香茅花叶病病原属于甘蔗花叶病毒 ( s c M v ) 的一个株系 。
香茅生产采用无性繁殖 , 病毒传播蔓延主要通过带病的种苗进行远距离传播 , 对于田间
的传毒介体种类 , 目前尚不清楚 , 有待进一步研究 。 目前防治此病的有效途径是培育和选择
无病种苗 。
96 热 带 作 物 学 报 5 1卷
致谢 : 马遥燕 、 黄贵修 、 李亚宁 、 赵国安 、 刘旭业参加部分试验 。 热带作物生物学实验室谭海
燕 、 湛江加工所电镜室敖宁键给予帮助 ,谨致谢意 。
今 考 文 献
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田位 、 魏芡云编 . 植物病毒研 究方法 . 北京 : 科学 出版社 , 1日8 7 , 2 0 8一 2价
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