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异叶青兰提取物平喘止咳作用的实验研究



全 文 :囊核心的材料尺度要求。以制备的碳酸钙为模板,
成功组装上 10 层结构的聚电解质微囊,ζ 电位的规
律变化证实壳聚糖 /海藻酸钠聚电解质在粒子表面
的层层组装过程。去核过程根据使用核心的不同而
采用不同方法,这一过程中内部核心溶解造成渗透
压的变化有可能对胶囊壁造成破坏,溶解方法需要
谨慎选择。本实验中选择 EDTA 去除碳酸钙,最终
形成空心微囊,为微囊作为给药载体的可能性奠定
提供了基础。
参考文献:
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[收稿日期:2013 - 01 - 21]
·论著·
异叶青兰提取物平喘止咳作用的实验研究
*
袁 勇1 曹 伟2
(1.石河子大学医学院第一附属医院药剂科,新疆石河子,832008;2.石河子大学医学院
第一附属医院中医科,新疆石河子,832008)
【摘要】目的:研究异叶青兰提取物的止咳平喘作用。方法:建立组胺 /乙酰胆碱(HA/Ach)引喘实验模型及氨
雾致小鼠咳嗽模型,将小鼠随机分为正常对照组、阳性对照组及提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组共 5 组,测定
氨雾致咳反应及小鼠引喘潜伏期。结果:与模型组相比,3 种剂量提取物能拮抗 HA/Ach诱发的小鼠药物性哮喘和
延长氨水致咳的潜伏期,咳嗽次数减少。结论:异叶青兰提取物具有明显的止咳平喘作用。
【关键词】异叶青兰;提取物;止咳;平喘
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A
Effect on Antitussive and Antiasthmatic of Extracts from
Dracocephalum heterophyllum B
YUAN Yong1,CAO Wei2
(1. Department of pharmacy,the First Affiliated Hospital,Shihezi University,School of Medicine,Xinjiang Shihezi,832008;
2. Department of traditional Chinese medicine,the First Affiliated Hospital,Shihezi University,School of Medicine,
Xinjiang Shihezi,832008)
【Abstract】Objective:To study the effect of extracts from Dracocephalum heterophyllum B on antitussive and antiasth-
matic.Methods:The mice were randomly divided into 5 group including normal control group,the positive control group
·5·
2013 年 2 月
第 35 卷 第 1 期
农 垦 医 学
Journal of Nongken Medicine
Feb. 2013
Vol. 35 No. 1
* 基金项目:石河子大学医学院第一附属医院科研专项(SS - 2011 - 107)。
model and low-dose group,middle dose group and high dose group of Dracocephalum heterophyllum B three extracts by es-
tablishing experimental model by a histamine and acetylcholine (HA/Ach)induced and ammonia induced cough model in
mice to detect mice asthma incubation and reaction of ammonia induced cough. Results:Compared with model group,three
doses extract can antagonize HA /Ach induced asthma and extend the ammonia induced cough. Conclusion:Dracocephalum
heterophyllum B extracts has obvious effect on antitussive and antiasthma.
【Key words】Dracocephalum heterophyllum B;Extracts;Antitussive;Antiasthmatic
异 叶 青 兰 (Dracocephalum heterophyllum
Benth.)系唇形科(Labiatae)青兰属(Dracoceph-
alum)多年生草本植物,主要分布于新疆、内蒙古、青
海、甘肃、西藏及四川等地,以全草入药。其气味香
甜,是维族、藏族用于治疗咳喘病的传统药物[1],具
有明显的镇咳和平喘作用[2-3]。其主要化学成分为:
挥发油、黄酮类、萜类、氨基酸、微量元素等[4]。目
前有关异叶青兰提取物止咳平喘的药理作用研究尚
未见报道。本实验通过建立组胺 /乙酰胆碱(HA/
Ach)引喘实验模型及氨雾致小鼠咳嗽模型,研究异
叶青兰的止咳平喘作用,为异叶青兰资源的开发及
临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试药
LD5-2A低速离心机(北京医用离心机厂) ;减
压旋蒸仪(北京长安科学仪器厂) ;异叶青兰干燥全
草(购于新疆参茸药业有限责任公司,批号
20100215) ,浓氨水(批号 031125,益林化工厂) ;氨
茶碱注射液(每 2mL 内含氨茶碱 0. 25g,批号
060710,常州兰陵制药有限公司) ;急支糖浆(太极
集团涪陵制药厂,20110708) ,致喘剂(5mg 磷酸组
胺:每 1mL 内含 1mg,批号 670311,中国医药工业
公司上海第十制药厂)加 1g氯化乙酰胆碱(100mg /
支) ,以蒸馏水配成 100mL 混合液(临用时配制)。
95%乙醇(分析纯) ,蒸馏水。
1. 2 动物
昆明种小鼠 290 只,雌雄各半,体重 18 ± 2g,购
自石河子大学动物房。
1. 3 方法
1. 3. 1 异叶青兰干燥全草粗提物的制备 取异叶
青兰干燥全草 5kg,剪碎,过 20 目筛制成粗粉,置渗
辘桶中,用 95%乙醇浸泡(乙醇量须没过药材,一般
用乙醇量为生药的 6 ~ 8 倍) ,放置 24 小时,放出滤
液,相同方法浸泡 3 次,合并提取液,减压浓缩,得浸
膏,置真空冷冻干燥机内制成干粉。将药材干燥,依
次用 70%乙醇与蒸馏水按上述方法提取 3 次,最后
制成干粉备用。
1. 3. 2 异叶青兰对小鼠组胺 /乙酰胆碱(HA/Ach)
引喘实验的影响 取小鼠 70 只,雌雄各半、体重 18
~ 20g,将小鼠放入 1000mL 烧杯中,并使小鼠接受
恒流 0. 4%磷酸组胺∶ 2%氯化乙酰胆碱(1 ∶ 2)刺激
15s,观察引喘潜伏期(从喷雾开始到哮喘发作、呼吸
困难、直至抽搐跌倒的时间) ,挑出潜伏时间在 120s
内的小鼠备用。把筛选出的小鼠随机分为空白对照
组、氨茶碱组、异叶青兰低剂量组(30mg /kg /d)、中
剂量组(60mg /kg /d)、高剂量组(120mg /kg /d) ,共 5
组、每组 10 只,实验小鼠禁食不禁水 10h,然后各组
小鼠灌胃给药,连续给药 6 天,最后一次给药 1h后,
并使豚鼠接受恒流 0. 4%磷酸组胺∶ 2%氯化乙酰胆
碱(1 ∶ 2)刺激 15s,观察小鼠引喘潜伏期。
1. 3. 3 氨雾所致小鼠咳嗽模型实验 取 50 只小
鼠,随机分成 5 组,每组 10 只,分为正常对照组、急
支糖浆阳性对照组 (20mL /kg)。、异叶青兰低
(30mg /kg /d)、中(60mg /kg /d)、高剂量组(120mg /
kg /d)。阴性对照组灌胃给予生理盐水,其余各组
分别给予相应剂量的药液。灌胃给药连续 5d,每天
1 次,灌胃体积均为 0. 2ml /10g。末次给药后 1h,将
小鼠置于 4L 玻璃钟罩内,喷氨雾 5s 引咳,记录
2min内咳嗽次数,计算 0 ~ 2 min内小鼠咳嗽次数。
1. 4 统计学处理
用 SPSS 17. 0 软件进行统计学分析处理,计量
资料数据以均数 ±标准差(珋x ± s)表示,组间比较采
用 t检验,p < 0. 05 表示差异具有统计学意义,p < 0.
01 为差异极显著。
2 结果
2. 1 异叶青兰对小鼠组胺 /乙酰胆碱(HA/Ach)引
喘实验的影响
各给药组小鼠的引喘潜伏时间明显比空白对照
组有所延长,受试药中、高剂量组和阳性药对照组与
空白对照组比较有差异具有统计学意义(p < 0. 05
或 p < 0. 01) ,其中受试药高剂量组有极显著差异(p
< 0. 01) ,且给药前后自身对照也有很大提高(p <
·6·
第 1 期 农 垦 医 学 第 35 卷
0. 01)。说明异叶青兰在整体水平能对抗 HA/Ach
的作用,能对抗 HA/Ach 引起的动物药物性哮喘。
结果见表 1。
表 1 异叶青兰对 HA /Ach引起的药物性哮喘的保护作用(珔x ± s)
组别 动物数(只) 剂量(mg /kg)
6min内引喘潜伏期(s)
给药前 给药后
空白组 10 - 51. 3 ± 6. 2 52. 1 ± 6. 7
阳性对照组 10 15 49. 6 ± 5. 4 111. 7 ± 11. 5★★▲▲△△
低剂量组 10 30 52. 2 ± 6. 3 101. 8 ± 14. 3★★▲▲△△
中剂量组 10 60 50. 8 ± 2. 9 118. 4 ± 19. 4★★▲▲△△
高剂量组 10 120 51. 5 ± 5. 7 124. 30 ± 18. 6★★▲▲
注:与给药前后比较:★p < 0. 05,★★p < 0. 01;与 NS比较:▲p < 0. 05,▲▲p < 0. 01;与阳性对照组比较:△p < 0. 05,△△p < 0. 01。
2. 2 异叶青兰对氨雾致小鼠咳嗽的镇咳作用
表明异叶青兰低、中、大剂量组均减少小鼠咳嗽
次数,与模型组比较有统计学意义(p < 0. 01)。说
明异叶青兰在整体水平能对抗氨雾引起的动物药物
性咳嗽。结果见表 2。
表 2 异叶青兰对氨雾至小鼠咳嗽次数的影响(珔x ± s)
组别 动物数(只) 剂量 咳嗽次数(次)
空白对照组 10 0 51 ± 3
阳性对照组 10 20mg /kg /d 21 ± 4▲▲
低剂量组 10 30mg /kg /d 31 ± 5▲▲△△
中剂量组 10 60mg /kg /d 20 ± 2▲▲△△
高剂量组 10 120mg /kg /d 12 ± 3▲▲△△
注:与 NS比较:▲p < 0. 05,▲▲p < 0. 01;与阳性对照比较:△p
< 0. 05,△△p < 0. 01。
3 讨论
慢性支气管炎在体内外各种有害因素的长期刺
激下,会反复刺激呼吸道粘膜上皮细胞,使之充血水
肿,支气管腺体分泌物增加,大量分泌粘液抑制纤毛
运动,致使纤毛上皮细胞损伤脱落,降低了局部纤毛
系统的防御能力,纤维组织增生,管壁平滑肌和弹力
纤维被破坏,同时炎细胞浸润,激活的炎症细胞产生
大量自由基,攻击肺细胞膜及其胞内生物大分子进
一步加剧炎症反应,出现急慢性炎症、咳喘、痰多等
临床症状。本课题通过建立哮喘、咳嗽动物模型评
价新疆地产植物药异叶青兰的药理作用。结果表
明:能延长组胺引喘及氨雾致咳的潜伏期,减少咳喘
次数,为开发异叶青兰的止咳平喘等药用价值提供
了实验依据。
参考文献:
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[收稿日期:2013 - 01 - 28]
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2013 年 2 月
第 35 卷 第 1 期
农 垦 医 学
Journal of Nongken Medicine
Feb. 2013
Vol. 35 No. 1