免费文献传递   相关文献

芦荟凝胶汁对便秘小鼠结肠肌电生理变化的影响



全 文 :收稿日期:2011-09-14; 修订日期:2012-02-08
基金项目:国家自然科学基金(No. 31070938) ;
新乡医学院大学生科研基金项目(No. 2007) ;
新乡医学院高学历人才科研启动项目(No. 2006)
作者简介:姜洪波(1980-) ,女(汉族) ,黑龙江哈尔滨人,现任新乡医学院
第三附属医院医师,硕士学位,主要从事神经内科临床工作.
* 通讯作者简介:路承彪(1966-) ,男(汉族) ,美藉华人,现任新乡医学院
教授,硕士研究生导师,博士学位,主要从事神经网络振荡研究工作.
芦荟凝胶汁对便秘小鼠结肠肌电生理变化的影响
姜洪波1,2,杜爱林2,3,郭红云1,2,卢智敏1,2,刘晓丽2,3,李素芳1,2,仲丽丽1,4,路承彪2,3*
(1.新乡医学院第三附属医院,河南 新乡 453003; 2.新乡医学院三全学院,河南 新乡 453003;
3.新乡医学院,河南 新乡 453003; 4.黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150030)
摘要:目的 观察芦荟对便秘小鼠的结肠肌电生理变化的影响。方法 用复方地芬诺酯混悬液对小鼠进行灌胃建立便秘
模型,后用芦荟凝胶汁对小鼠进行灌胃,从而探讨芦荟凝胶汁对便秘小鼠结肠肌电生理变化的影响。结果 三组小鼠的
结肠慢波表现为近似于正弦波样曲线。对照组频率(43. 48 ± 0. 76)次 /min,便秘组频率(48. 01 ± 2. 72)次 /min,与对照组
比较,便秘组小鼠的结肠慢波频率增快,两组相比较有极显著差异;芦荟组频率(44. 84 ± 1. 34)次 /min,与便秘组比较,芦
荟组小鼠的结肠慢波频率减慢,两组比较有极显著差异(P < 0. 01) ;对照组频率变异系数(1. 84 ± 0. 37)%,便秘组频率变
异系数(5. 96 ± 0. 30%) ,与对照组比较,便秘组小鼠的结肠慢波频率变异系数增大,两组相比较有极显著差异(P < 0.
01) ;芦荟组小鼠的结肠慢波频率变异系数(2. 81 ± 0. 18)%,与便秘组比较,芦荟组小鼠的结肠慢波频率变异系数减慢,
两组相比较有极显著差异(P < 0. 01) ;对照组振幅(0. 17 ± 0. 02)mV,便秘组振幅(0. 05 ± 0. 03)mV,与对照组比较,便秘
组小鼠的结肠慢波振幅减少,两组比较有极显著差异;芦荟组振幅(0. 13 ± 0. 03)mV,与便秘组比较,芦荟组小鼠的结肠
慢波振幅升高,两组相比较有极显著差异(P < 0. 01) ;对照组振幅变异系数(10. 08 ± 0. 58)%,便秘组振幅变异系数(62.
83 ± 1. 63)%,与对照组比较,便秘组小鼠的结肠慢波振幅变异系数增大,两组相比较有极显著差异;芦荟组小鼠的结肠
慢振幅率变异系数(25. 23 ± 2. 01)%,与便秘组比较,芦荟组小鼠的结肠慢波振幅变异系数减小,两组相比较有极显著差
异(P < 0. 01)。结论 芦荟凝胶汁能有效地改善便秘小鼠结肠运动功能。
关键词:便秘; 芦荟; 小鼠; 肌电; 结肠
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 06. 061
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)06-1456-02
便秘为临床常见症状,发病率高,常以排便间隔延长、大便干
结、大便艰涩不畅为主要表现。而传统医学认为芦荟具有温和的
导泻作用,促进受损的细胞再生,方便易得,副作用少等特点[1]。
芦荟凝胶汁中主要含有芦荟多糖,我们通过建立小鼠便秘模型,用
芦荟凝胶汁进行灌胃,观察其结肠肌电生理变化情况,从而探讨芦
荟凝胶汁治疗便秘的机制,为其临床防治便秘提供理论依据。
1 材料
健康昆明小鼠 30 只,体质量为 20 ~ 28 g,雌雄各半。复方地
芬诺酯片为江苏平光制药有限责任公司产品(批号:0805221,2. 5
g /片) ,1∶ 1 库拉索芦荟凝胶汁为云南元江万绿生物(集团)有限
公司产品(编号:R - QC02801) ,曙红 Y 为上海永叶生物科技有
限公司(CAS 号:17372 - 87 - 1) ,医用缝合针,铜丝,直径为0. 5
mm,BL - 410 生物机能实验系统。
2 方法
2. 1 便秘模型的建立
2. 1. 1 分组 取小鼠 30 只,雌雄兼用,称重后随机分成 3 组:对
照组、便秘组、芦荟组,每组 10 只。
2. 1. 2 药剂的配制 取 2 片复方地芬诺酯片加蒸馏水 5ml 配成
混悬液。取 2 g曙红加 10 ml蒸馏水配成混悬液。
2. 1. 3 建模 实验前 24 h停食给水,各实验组按 10 mg /kg 复方
地芬诺酯混悬液灌胃复制便秘模型。对照组则给水和淀粉的混
悬液替代。每天记录小鼠粪便粒数、粪便的形态及小鼠的体质
量,并根据粪便及体重变化适当增减给药剂量。饲养时间为 30
d[2]。
2. 1. 4 实验指标 建模 30 min后各组按 10 mg /kg曙红混悬液对
小鼠进行灌胃。灌胃后小鼠首粒红便的时间,粪便的性状、粒
数[3]。
2. 2 芦荟凝胶汁对便秘小鼠结肠肌电活动的测定 成功建模 30
d后,用库拉索芦荟凝胶汁对芦荟组小鼠按 0. 1 ml /只进行灌胃。
持续芦荟凝胶汁灌胃 1 周后,测各实验组和对照组小鼠的结肠肌
电[3]。小鼠禁食 24 h,20%乌拉坦腹腔注射麻醉(0. 3 ml /只) ,而
后仰卧于手术台上,常规消毒,沿下腹正中纵行切开腹部 1. 5
cm,显露回盲部,于结肠近段(距盲肠约 1 cm)安置一对铜丝电极
(两电极相距 0. 5cm,插入浆肌层内) ,导线经切口引出接 BL -
410 生物机能实验系统。30 min后开始记录。灵敏度选择:增益
放大倍数 500,时间常数 0. 001 s,高频滤波为 30 Hz,连续记录 45
min,重复记录 3 次[4]。
2. 3 结肠肌电活动参数分析 将每组的记录结果以 3 min 作为
一个时间段的频率和振幅的均值、标准差及变异系数进行比
较[5]。
慢波频率变异系数(%)= 慢波频率标准差 /慢波频率均值 ×
100%
慢波振幅变异系数(%)= 慢波振幅标准差 /慢波振幅均值 ×
100%
2. 4 统计学处理 数据以 珋x ± s表示,采用 Excel 2007 软件进行 t
检验。
3 结果
3. 1 小鼠排便情况 建模后,便秘组及芦荟组小鼠的粪便较对照
组小鼠的粪便细小、干硬。便秘组及芦荟组小鼠 6 h内排便的粒
数较对照组明显减少,首粒红便排出的时间长。结果见表 1。
3. 2 小鼠结肠肌电变化的影响 三组小鼠的结肠慢波表现为近
似于正弦波样曲线。对照组频率(43. 48 ± 0. 76)次 /min,便秘组
频率(48. 01 ± 2. 72)次 /min,与对照组比较,便秘组小鼠的结肠慢
·6541·
时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 6
波频率增快,两组相比较有极显著差异;芦荟组频率(44. 84 ±
1. 34次 /min) ,与便秘组比较,芦荟组小鼠的结肠慢波频率减慢,
两组相比较有极显著差异(P < 0. 01) ;对照组频率变异系数
(1. 84 ± 0. 37)%次 /min,便秘组频率变异系数(5. 96 ± 0. 30)%,
与对照组比较,便秘组小鼠的结肠慢波频率变异系数增大,两组
相比较有极显著差异(P < 0. 01) ;芦荟组小鼠的结肠慢波频率变
异系数(2. 81 ± 0. 18)%,与便秘组比较,芦荟组小鼠的结肠慢波
频率变异系数减慢,两组相比较有极显著差异(P < 0. 01) ;对照
组振幅(0. 17 ± 0. 02)mV,便秘组振幅(0. 05 ± 0. 03)mV,与对照
组比较,便秘组小鼠的结肠慢波振幅减少,两组相比较有极显著
差异;芦荟组振幅(0. 13 ± 0. 03)mV,与便秘组比较,芦荟组小鼠
的结肠慢波振幅升高,两组相比较有极显著差异(P < 0. 01) ;对
照组振幅变异系数(10. 08 ± 0. 58)%,便秘组振幅变异系数(62.
83 ± 1. 63)%,与对照组比较,便秘组小鼠的结肠慢波振幅变异系
数增大,两组相比较有极显著差异;芦荟组小鼠的结肠慢振幅率
变异系数(25. 23 ± 2. 01)%,与便秘组比较,芦荟组小鼠的结肠
慢波振幅变异系数减小,两组相比较有极显著差异(P < 0. 01)。
结果见表 2 及图 1。
表 1 小鼠排便情况的测定(珋x ± s)
组别 第 1 次排红便时间 /min 6 h排便粒数
对照 173. 56 ± 7. 77 74. 67 ± 6. 40
便秘 381. 56 ± 21. 43# 30. 22 ± 4. 99#
芦荟 378. 78 ± 15. 19# 31. 44 ± 6. 06#
与对照组比较,# P < 0. 01;n = 10
表 2 三组小鼠结肠慢波频率、振幅(珋x ± s)
组别
频率 /
次·min -1
频率变异系数
(%)
振幅 /
mv
振幅变异系数
(%)
对照 43. 48 ± 0. 76# 1. 84 ± 0. 37# 0. 17 ± 0. 02# 10. 08 ± 0. 58#
便秘 48. 01 ± 2. 72 5. 96 ± 0. 30 0. 05 ± 0. 03 62. 83 ± 1. 63
芦荟 44. 84 ± 1. 34# 2. 81 ± 0. 18# 0. 13 ± 0. 03# 25. 23 ± 2. 01#
与便秘组比较,#P < 0. 01;n = 10
A -对照组 B -便秘组 C -芦荟组
图 1 三组小鼠结肠肌电图
4 讨论
随着人们生活水平的提高、工作节奏的加快 ,便秘的发病率
逐年上升。便秘作为一种常见的临床症状,目前确切病因不明。
据研究显示,便秘患者结肠推进性收缩波数目减少,收缩幅度减
低,导致粪便在结肠通过减慢。由于结肠在有效地促使粪便排出
体外方面具有重要作用,因此便秘常被认为是结肠动力异常所
致[6]。结肠的肌电动作电位产生于慢波之上,与平滑肌收缩相
一致,是推进性运动的主要动力,因而结肠肌电活动作为一项客
观的电生理指标,可间接反映结肠动力状况。慢波是相对规律的
一种周期性电活动,控制着肠道收缩节律,无论收缩与否始终存
在[7]。本实验用复方地芬诺酯复制小鼠的便秘模型后,用芦荟
凝胶汁对小鼠进行灌胃,1 周后测小鼠的结肠肌电活动。结果显
示,便秘组与对照组小鼠相比慢波频率增快,慢波频率变异系数
增大,同时慢波振幅减少,慢波振幅变异系数增大,皆有极显著差
异,提示便秘组小鼠的慢波频率增快及振幅减低,慢波频率变异
系数及慢波振幅变异系数均增大,可能导致动作电位不易发生,
致使肠道传输能力减弱,导致便秘;而芦荟组与便秘组小鼠相比,
其慢波频率减少,慢波振幅有所升高。我们应用变异系数这一参
数来反映同组内不同时间段频率和振幅的差异,用于衡量节律的
稳定性[8]。结果显示,便秘小鼠的慢波频率变异系数及慢波振
幅变异系数均较对照组的增大,提示着便秘小鼠的结肠肌电生理
活动存在着紊乱。芦荟作用于便秘小鼠使便秘小鼠的慢波频率
变异系数及慢波振幅变异系数均降低,提示芦荟能使便秘小鼠的
结肠推进性收缩波数目增加,收缩幅度升高,致使粪便在结肠通
过加快,有效地改善了结肠的动力异常。但芦荟在有效缓解便秘
的同时,是否将长久持续地增加收缩波的数目而导致肠道收缩节
律紊乱,尚需进一步研究。
参考文献:
[1] 梁巧珍.鲜芦荟外用防护甘露醇所致静脉损伤 75 例分析[J].山东
医药,2004,44(11) :53.
[2] 王朝晖,赵延红,肖美芳,等. 大鼠便秘模型制作的初步实验研究
[J].现代中医药,2004,3:53.
[3] 林子洪,吴敬勋,肖梓栋,等.芦荟对小鼠便秘的作用及其机制初探
[J].广东医学,2005,10:1336.
[4] Dickson EJ,Heredia DJ,McCann CJlynnetwwwdagriorglynnet. The
mechanisms underlying the generation of the colonic migrating motor
complex in both wild - type and nNOS knockout mice[J]. Am J Physiol
Gastrointest Liver Physiol,2010,298(2) :222.
[5] Ross GR,Gabra BH,Dewey WLlynnetwwwdagriorglynnet. Morphine tol-
erance in the mouse ileum and colon[J]. J Pharmacol Exp Ther,2008,
327(2) :561.
[6] Chandrasekharan BP,Kolachala VL,Dalmasso Glynnetwwwdagriorglyn-
net. Adenosine 2B receptors (A(2B)AR)on enteric neurons regulate
murine distal colonic motility[J]. FASEB J,2009,23(8) :2727.
[7] Bayguinov PO,Hennig GW,Smith TK. Calcium imaging of myenteric
neurons and ICC during local mucosal reflexes and the colonic migrating
motor complex in the murine colon (Abstract) [J]. Neurogastroenterol
Motil,2009,21:319.
[8] Dickson EJ,Hennig GW,Heredia DJ,Lee HT,Bayguinov PO,Spencer
NJ,Smith TK. Polarized intrinsic neural reflexes in response to colonic
elongation[J]. J Physiol,2008,86:4225.
·7541·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 6 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期