全 文 ：· 914· China Pharmacy 2008 Vol.19 No.12 中国药房 2008年第 19卷第 12期
*副教授。研究方向:药物分析与质量控制。电话:0454-8611274。
E-mail:rsq540306@163.com
紫苏叶挥发油 GC -MS 与直观推导式演进特征投影法分析
任淑清 1 *,孙长海 1 ,方洪壮 1 ,赵晨曦 2(1.佳木斯大学化学与药学院 ,佳木斯市 154007;2.长沙大学应用化学
与环境科学系 ,长沙市 410003)
中图分类号 R284.1;R927.2;O657.72 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2008)12-0914-03
摘 要 目的:定性分析紫苏叶的挥发油 。方法:利用气相色谱-质谱(GC-MS)法分离鉴定 ,同时用直观推导式演进特征投影法
解析重叠色谱峰的二维色谱MS 数据 , 获取组分的色谱曲线和M S 。再根据组分的 MS 和保留时间进行库相似性检索以实现定
性 。结果:共分离解析出 76种组分 ,其中 19种组分在紫苏的相关 GC -M S分析中未见报道 。结论:GC-M S与直观推导式演进特
征投影法分析紫苏叶挥发油成分可提供更多的信息 。
关键词 紫苏叶;挥发油;气相色谱-质谱联用技术;直观推导式演进特征投影法;定性分析
Analysis of the Volatile Oil in Peril la Leaves by GC-MS and Heuristic Evolving Latent Projections Met_
hod
REN Shu -qing ,S UN Chang-hai ,FANG Hong -zhuang(College of Chemist ry and Pharmacy , Jiamusi Univer-
sity , Jiamusi 154007 , China)
ZHAO Chen-xi(College of Chem ist ry and Environmental Science , Changsha Unive rsity , Changsha 410003 ,
China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To analyze qualitatively t he volatile oil in Perilla leaves.METHODS:T he chemical constituents
in volatile oil of Perilla stem w ere isolated and identified by GC-MS.The 2D MS data of the over lapped peaks w ere reso lved
with heuristic evo lv ing la tent p rojections(HELP)to obt ain the chromatog raphic curve and M S(mass spect ra), and a qualita tive
analysis w as per fo rmed by similar sea rch in NIS T library w ith the obt ained MS and re tention time.RESU LTS:A t otal of 76
constituents w ere identified , of which , 19 had no t been reported in the relative GC-MS analysis of Perilla frutescens.COM-
CLUSION :M ore info rmation o f volatile oil in Perilla leaves w as obtained by GC-MS analysis combined w ith HELP resolution
method.
KEY WORDS Perilla leaves;Volatile oil;GC -M S;Heur istic evo lv ing la tent projections;Qualitative analysis
表 1 加样回收率试验结果(n=6)
Tab 1 Results of recovery test of samples(n=6)
样品含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/% x/ % RSD/%
1.044 1.284 2.306 98.33
0.943 1.284 2.198 97.85
1.029 1.284 2.394 106.36
1.065 1.284 2.405 104.45 99.63 4.69
0.931 1.284 2.157 95.57
0.788 1.284 2.010 95.21
均含量为 0.21mg ·g -1。
4 讨论
黄芪 TLC鉴别中的药材及样品处理方法参考了 2005年
版《中国药典》“黄芪”项下的处理方法 , 但为了提高洗涤效果 ,
试验中改用氨水代替水洗涤正丁醇萃取液 。在试验过程中发
现 , 如不用中性氧化铝柱纯化 , 黄芪甲苷的棕褐色斑点附近有
较多干扰 ,不能清晰可见 。采用上述处理方法后 ,斑点附近干扰
较少 ,显色较为明显 。
含量测定项下供试品溶液的制备方法是对 2005年版 《中
国药典》黄芪“含量测定”项下有关内容进行了改进 ,省去了“正
丁醇蒸干 , 残渣加水 5 mL 使溶解 , 放冷 , 通过 D101型大孔吸
附树脂柱(内径 1.5 cm , 长 12 cm),以 50 mL 水洗脱 , 弃去水
液 ,再用 40%乙醇 30 mL 洗脱 ,弃去洗脱液 ,继用 70%乙醇 80
mL 洗脱 ,收集洗脱液 ,蒸干部分 。试验结果证明 ,不通过大孔
吸附树脂柱纯化 , 在色谱图上仍可以有较好的分离效果 , 且操
作更为简便 。
参考文献
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(收稿日期:2007-05-15 修回日期:2007-07-07)
紫苏叶为唇形科紫苏属植物紫苏 Peri lla f rutescens(L.)
Brit的干燥叶 ,是一种常用的辛温解表药 ,具有解表散寒 、行气
和胃等功效 , 用于治疗风寒感冒 、咳嗽呕恶 、妊娠呕吐 、鱼蟹中
毒等症 [1 ] 。紫苏叶中含有丰富的挥发油 ,不仅具有药用价值 ,而
且可以作为香料添加到食品 、烟草 、化妆品中 [2 ] 。近年来对紫苏
叶挥发油研究较多 ,已鉴定出 50余种化学物质 ,其中以紫苏醛
中国药房 2008年第 19卷第 12期 China Pharm acy 2008 Vol.19 No.12 · 915·
的含量较高 [3 ,4 ] 。中药挥发油成分分析一般采用气相色谱-质
谱(GC-MS)法 , 但由于中药是一个复杂的分析体系 , 其中性
质相似的组分保留时间较为接近 , 色谱峰重叠严重 , 在色谱峰
的识别和定量上常会遇到较大的困难[ 5 ]。直观推导式演进特征
投影(HELP)法是一种化学计量学多元分辨方法 [6 ] 。该方法已
成功地用于原油中非烃物质和中药挥发油成分的分析 [7 , 8 ] 。基
于紫苏叶挥发油成分复杂 , 性质相似的成分较难分离 , 多呈现
重叠峰 ,使定性困难 ,本试验先采用 HELP 法解析GC-MS 二
维数据 , 获取纯组分MS , 再经MS 库相似性比对进行定性 , 结
果在紫苏叶挥发油中共分离解析出 76种组分 , 其中有 19种组
分在紫苏的相关 GC-MS 研究中尚未见报道 。
1 仪器与试药
6890/5973型 GC-MS 仪 、G1701DA 型M S工作站(美
国安捷伦公司);N IS T02版M S数据库 (美国安捷伦公司提
供)。紫苏叶药材购自佳木斯大仁堂药店 ,经佳木斯大学生药教
研室钟希明高级实验师鉴定为唇形科植物紫苏 Perilla
fr utescens(L.)Brit的叶;正己烷 、无水硫酸钠均为分析纯 。
2 方法与结果
2.1 挥发油的提取
称取约 50 g 紫苏叶 , 置于 2 000 mL 圆底烧瓶中 , 加蒸馏
水 400 mL ,浸泡 6 h ,用水蒸气蒸馏法蒸馏 5 h 。将提取的挥发
油用无水硫酸钠干燥 ,放入冰箱中 ,备用 。
2.2 挥发油的测定条件
2.2.1 色谱条件:S E54石英毛细管柱 (30 m ×0.25 mm ×
0.25 μm), 载气为氦气(He), 流速为 1 mL ·min -1 , 程序升温
为起始温度 60 ℃, 以 4 ℃·min -1升至 280 ℃, 进口温度为
260 ℃,溶剂切断时间为 3 m in 。
2.2.2 M S条件:标准电子轰击(EI)电离源 , 离子源温度为
230 ℃, 接口温度为 280 ℃, 电子能量为 70 eV , 扫描范围为
20 ～ 500 amu ,扫描速度为 3.12次·s -1 ,分离比为 20∶1 。
2.3 GC-MS分析
紫苏叶挥发油的总离子
流图见图 1。
将获取的数据在色谱工
作站上进行分析鉴定 , 记录匹
配度> 90的色谱峰的对应物
质 。余下的色谱峰在计算机上
用 HELP 法进行解析 ,所分辨
的M S 在标准 M S 数据库中
检索 ,进行相似性比对。
例如 , 对于总离子流图中
的 8.99 ～ 9.31 min 保留时间
段(即 1 095 ～ 1 155色谱点范
围)的色谱峰 A 峰(其总离子
流图见图 2),通过M S库直接
检索 , 前半部分为 4-甲基-
1 , 4-己二烯 ,匹配度为 55 ,后
半部分为水芹烯 , 匹配度为
68 , 色谱峰中的组分定性无法
实现。从图 2可知 , 该峰处存
在背景漂移 , 因此在解析前应
先作相应的背景扣除 。用
HELP 法进行分析 , 先得到 A
峰的演进特征投影图 (见图
3), 从中可知 , 该色谱峰含有
3种组分;进而进行分辨 , 即
可得到这 3种组分的纯色谱
曲线和 MS 的唯一解 , 再在
M S 库中对组分进行 MS 相
似性检索 。 3种组分分别是:
①苯并环丙烯(C7H 6),与标准
M S的匹配度为 94;②二烯丙
基醚(C6H 6O),匹配度为 96;③4-炔环壬酮(C 9H 12O), 匹配度
为 96 。HELP 法解析出的标准化色谱见图 4;其相应的MS 见
图 5 ～图 7 。
与以上过程相似 ,逐步解析其它保留时间段的组分 ,得到解
析出的组分纯MS ,继而比对M S数据库对分辨出的组分进行定
性检索 。GC-M S法分析得到紫苏叶挥发油中新的化学成分见
表1 。
3 讨论
紫苏叶的挥发油是一个复杂的分析体系 , 其 GC约有 50
个色谱峰 ,部分色谱峰发生重叠 , 特别是在 15 ～ 30 min保留段
的色谱峰十分复杂 。用MS 库直接检索 ,可鉴别出匹配度>90
的化学成分 27种 。其它色谱峰中化学成分相似度较低 ,无法鉴
定 。用 HELP 法对直接检索不能鉴定的色谱峰的二维数据进
行逐个解析可知 , 总离子流图中的许多色谱峰是重叠峰 , 一些
看似纯峰的色谱峰也是由混合组分重叠而成 。用 HELP 法可
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通关藤浸膏中绿原酸的稳定性考察
王云峰 *,陆兔林 # ,毛春芹 ,徐佳佳(南京中医药大学 ,南京市 210046)
中图分类号 R283.66;R927.11 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2008)12-0916-03
摘 要 目的:考察通关藤浸膏中绿原酸稳定性的影响因素 。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定通关藤浸膏在不同溶剂 、不
同光线以及不同受热时间下绿原酸的含量变化 。结果:通关藤浸膏中的绿原酸在有机溶剂中更稳定;光照和受热温度是影响绿原酸
稳定性的重要因素 。结论:通关藤浸膏中的绿原酸在不同条件下稳定性不同 ,该结果可为通关藤浸膏的制备 、贮存 、分析及其相关制
剂的生产提供参考 。
关键词 绿原酸;稳定性;通关藤浸膏;高效液相色谱法
Stabi lity of Chlorogenic Acid in Marsdenia Tenac issima Extract
WANG Yun-feng , LU Tu-lin , MAO Chun-qin , XU Jia-jia(N anjing U nive rsi ty of Tradi tional C hinese
Medicine , Nanjing 210046 , China)
ABSTRACT OBJECTIV E:To study t he fac tor s influencing the stability of Chlo rogenic acid in Marsdenia tenacissim a ex-
tr act.M ETHODS:The contents of Chlo rogenic acid in Marsdenia tenacissima ex trac t in different solvent s , diffe rent lighting
and diffe rent time under the heat w ere determined by HPLC.RESULTS :T he Chlo rogenic acid in Marsdenia tenacissima ex-
tr act in o rganic so lvents w as more stable , in addition , lighting and heating tem pera ture w ere impor tan t fac tor s affec ting t he
stability o f the Chlo rogenic acid.CONCLUS ION :The stability o f the Chlo rogenic acid in Marsdenia tenacissim a ex t ract
changes in dif ferent conditions;and the study results serve as a refe rence fo r the preparation , sto rage , analysis and production
of M arsdenia tenacissima ex tract.
KEY WORDS Chlo rogenic acid;Stability ;M arsdenia tenacissima ex tract;HPLC
*硕士研究生。研究方向:中药炮制与质量标准。E-mail:nzy-
wyf@sina.com
#通讯作者:副教授 , 硕士研究生导师。研究方向:中药炮制与质
量标准。电话:025-85811513。E-mail:lt l63@sina.com
表 1 紫苏叶挥发油中新的化学成分
Tab 1 New chemical constituents in volat ile oil of Perilla
leaves
序号 化合物名称 分子式 分子量 保留时间/min 匹配度
1 2-己醛 C6 H 1 0 O 98 4.72 95
2 苏合香烯 C8 H 8 104 5.63 95
3 苯并环丙烯 C7 H 6 90 9.09 94
4 二烯丙基醚 C6 H 6 O 94 9.15 96
5 4-炔环壬酮 C9 H 1 2 O 136 9.21 96
6 内金酮 C10 H 1 2 O 2 164 18.90 97
7 波旁烯 C1 5 H 24 204 21.09 95
8 丙烯基藜芦醚 C11 H 1 4 O 2 178 21.99 98
9 别香树烯 C1 5 H 24 204 22.82 98
10 双环吉马烯 C1 5 H 24 204 24.59 92
11 榄香素 C12 H 1 6 O 3 208 26.60 97
12 芹菜脑 C12 H 1 4 O 4 222 28.55 93
13 异丙基肉豆蔻酸酯 C17 H 3 4 O 2 270 33.54 95
14 6 , 10 , 14-三甲基十五
烷酮
C1 8 H 36 O 268 34.16 99
15 棕榈酸甲酯 C17 H 3 4 O 2 270 36.17 98
16 10 , 13-十八烷二烯酸
甲酯
C19 H 3 0 O 2 294 40.27 99
17 9 , 12 , 15-十八烷三烯
酸甲酸
C19 H 3 2 O 2 292 40.43 96
18 9, 12-十八烷二烯酸 C18 H 3 2 O 2 290 40.67 99
19 植醇 C2 0 H 40 O 296 42.83 98
解析出另外 49种化学成分 。
由此可见 , 采用 HELP 法解析紫苏叶挥发油化学成分
GC-MS 的二维色谱光谱数据 ,可获取更多的信息 。
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(收稿日期:2008-03-01 修回日期:2008-04-05)