全 文 ：激素对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果
刘和平 ,林剑波　(阳江职业技术学院 ,广东阳江 529566)
摘要　[目的 ]寻求诱导也门铁叶片愈伤组织的最佳激素配方。[方法]以也门铁无菌苗叶片为外植体 ,以 MS为基本培养基 , 分别添加
不同浓度的 2, 4-D、BA和NAA,配制成 24种激素组合 ,通过离体组织培养 ,探讨不同激素配比对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果。 [结
果]当NAA为 0mg/L, 2, 4-D与BA2种激素以不同浓度组合 ,在 2, 4-D浓度是 BA浓度的 1.0～ 1.5倍时 ,也门铁愈伤组织诱导效率较
高 ,但质量较差。当 2, 4-D为 0mg/L时 , BA与NAA2种激素组合的诱导率为 0。当 2, 4-D、NAA与BA3种激素组合且 2, 4-D与NAA的
浓度比值为 1时 ,也门铁愈伤组织的诱导时间短 ,愈伤组织质量较好。也门铁叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS+0.5mg/L
2, 4-D+0.5mg/LNAA+1.0mg/LBA,诱导率为 44.4%。 [结论 ] 该研究为探索高效的也门铁组培快繁新方法提供科学依据。
关键词　也门铁;愈伤诱导;组织培养
中图分类号　S188　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2011)05-02546-02
StudyonEffectsofHormonesonCallusInductionofDracaenafragransKer-GawlLeaves
LIUHe-pingetal　(YangjiangVocationalandTechnicalColege, Yangjiang, Guangdong529566)
Abstract　[ Objective] ThestudyaimedtoseekfortheoptimumhormoneformulaforinducingDracaenafragransker-Gawlleafcallus.
[ Method] WiththeleavesofDracaenafragransKer-GawlasepticseedlingsastheexplantsandMSmediumasthebasicmedium, the2, 4-D,
NAAandBAwithdiferentconcn.wereaddedintothebasicmediumtomakeinto24kindsofhormonecombinationsandtheefectsofthehor-
moneswithdiferentmatchingratesoncalusinductionofD.fragrans.werediscussthroughthetissuecultureinvitro.[Result] WhenNAA
was0 mg/L, in2kindsofhormonecombinationsincluding2, 4-DandBAwiththeconcn.of2, 4-Dbeing1.0-1.5timesofBA, thecalus
inductionofD.fragranswashigher, butthecalusqualitywaspoor.When2, 4-Dwas0 mg/L, thecallusinductionof2kindsofhormone
combinationsincludingBAandNAAwas0.In3kindsofhormonecombinationsincluding2, 4-D, BAandNAAwiththeconcn.ratioof2, 4-
DandNAAbeing1, thecalusofD.fragranswasshortininductiontimeandbeterinthequality.Theoptimumhormoneformulaforinduc-
tionofD.fragranscalluswasMS+0.5mg/L2, 4-D+0.5mg/LNAA+1.0mg/LBA, withtheinductionrateof44.4%.[ Conclusion] The
studyprovidedthescientificbasisforexploringthenewandeficientmethodoftissuecultureandrapidpropagationofD.fragrans.
Keywords　DracaenafragransKer-Gawl;CallusInduction;Tissueculture
作者简介　刘和平(1976-),男 ,湖南衡阳人 ,讲师 ,博士 ,从事园林植
物生物技术 、园林设计等方面的研究 , E-mail:hortliu@yahoo.
com.cn。
收稿日期　 2010-11-26
　　也门铁(DracaenafragransKer-Gawl.)为龙舌兰科(Aga-
vaceae)龙血树属(Dracaena)常绿乔木 ,又名香龙血树 、千年
木等 ,原产于热带几内亚和埃塞俄比亚等。也门铁自 20世
纪 80年代初由广东省率先引种栽培以来 ,已发展成为我国
重要的盆栽植物 ,广东尤其是珠江三角洲地区已成为也门铁
的生产中心 ,每年种苗的需求量在 2 000万株以上。也门铁
在栽培状态下需经过多年才进入开花期 ,其分枝又极少 ,因
此生产上不适合使用种子繁殖和扦插繁殖 ,其大规模育苗是
通过组织培养途径获得 [ 1-5] 。
笔者以也门铁叶片为外植体 ,对影响愈伤组织诱导的植
物激素进行了研究 ,探索一条高效的组织培养快速繁殖新方
法 ,以期推动也门铁种苗的工厂化生产 ,并为通过基因转化
等生物技术手段进行也门铁育种奠定基础。
1　材料与方法
1.1　材料　普通也门铁(DracaenafragransKer-Gawl.)无菌
苗 ,取无菌苗植株叶片带白色叶基部分。
1.2　方法　基本培养基为 MS培养基 ,琼脂浓度为 0.7%,
蔗糖浓度为 3.0%, pH值 5.8;激素 NAA、BA、2, 4-D在灭菌
前按不同配比加入培养基中(表 1)。121 ℃下高压蒸汽灭菌
18min,待用 。
接种后黑暗培养 ,温度为 20 ～ 28 ℃。观察愈伤组织生
长情况 ,以接种数为基数 ,计算愈伤组织诱导率。
愈伤组织诱导率 =(形成愈伤组织材料数 /接种数)
×100%
2　结果与分析
MS为基本培养基 ,以不同浓度 2, 4-D、BA、NAA的激素
组合对也门铁叶片愈伤组织诱导效果见表 1。
表 1　培养基不同激素配比对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果
Table1　Effectofdifferenthormonecombinationsofmediumonthe
callusinductionrateofDracaenaarboreaLeaves
编号
No.
NAA
mg/L
BA
mg/L
2, 4-D
mg/L
愈伤组织诱导率∥%
Calusinductionrate
1 0 1.0 2.0 0
2 0 1.0 3.0 33.3
3 0 1.0 4.0 22.2
4 0 1.0 5.0 10.0
5 0 2.0 2.0 50.0
6 0 2.0 3.0 45.5
7 0 2.0 4.0 22.2
8 0 2.0 5.0 0
9 0 3.0 2.0 0
10 0 3.0 3.0 0.6
11 0 3.0 4.0 0
12 0 3.0 5.0 11.1
13 0.5 1.0 0 0
14 0.5 2.0 0 0
15 1.0 1.0 0 0
16 1.0 2.0 0 0
17 0.5 1.0 0.5 44.4
18 0.5 2.0 0.5 28.6
19 1.0 1.0 0.5 0
20 1.0 2.0 0.5 10.0
21 0.5 1.0 1.0 12.5
22 0.5 2.0 1.0 11.1
23 1.0 1.0 1.0 33.3
24 1.0 2.0 1.0 22.2
2.1　2, 4-D与 BA的组合对也门铁叶片愈伤组织的诱导效
果　分析表 1中编号 1 ～ 12的激素配比的愈伤组织诱导效
果 ,可知不同浓度 BA与 2, 4-D的组合对也门铁叶片愈伤组
织的诱导效果相差很大。
责任编辑　李菲菲　责任校对　傅真治安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2011, 39(5):2546-2547
当 NAA浓度为 0 mg/L时 , 2, 4-D浓度是 BA浓度 1.0 ～
1.5倍的配方诱导效率较高。但 BA浓度太高(3.0 mg/L)
时 ,不利于愈伤组织的诱导 , 2, 4-D浓度太高(5.0 mg/L)也
不利于愈伤组织的诱导 ,诱导率很低甚至为 0。
结果表明 , NAA为 0 mg/L时 ,最好的培养基配方是 MS
+2.0 mg/L2, 4-D+2.0 mg/LBA,愈伤组织诱导率达
50.0%;其次是 MS+3.0 mg/L2, 4-D+2.0 mg/LBA,诱导率
为 45.5%。
2.2　2, 4-D、BA与 NAA的不同组合对叶片愈伤组织的诱导
效果　分析表 1中编号 13 ～24的激素配比的愈伤组织诱导
效果 ,可知当 2, 4-D的浓度为 0 mg/L时 ,只用 BA与 NAA2
种激素 ,叶片的愈伤组织诱导率都为 0。
当 2, 4-D的浓度与 NAA的浓度相差较大时 ,即当 2, 4-D
的浓度为 0.5 mg/L、NAA的浓度 1.0mg/L时 ,诱导效率低;
当 2, 4-D的浓度为 1.0mg/L、NAA的浓度为 0.5 mg/L时 ,诱
导效果也不好;当 2, 4-D的浓度与 NAA的浓度比值为 1时 ,
诱导效果较好 。
结果表明 ,最好的培养基配方是 MS+0.5mg/L2, 4-D+
0.5 mg/LNAA+1.0mg/LBA,诱导率为 44.4%;其次为 MS
+1.0 mg/L2, 4-D+1.0 mg/LNAA+1.0 mg/LBA,诱导率
为 33.3%。
2.3　几种培养基配方诱导的愈伤组织质量　当 NAA为 0
mg/L时 , 2, 4-D与 BA2种激素不同浓度的组合诱导也门铁
叶片愈伤组织的效果不好 。有的组合不能诱导出愈伤组织 ,
有的组合诱导率较高 ,但是诱导时间较长 ,超过 40d以上 ,且
诱导的愈伤组织数量少 、质量差 ,大部分是几个小圆粒。
采用 2, 4-D与 BA、NAA的 3种激素组合 ,诱导愈伤组织
快 ,一般只要 30 d左右 ,且诱导的愈伤组织数量多 、质量好 、
呈团状 。综合比较可知 ,诱导也门铁叶片愈伤组织最好的培
养基配方是 MS+0.5 mg/L2, 4-D+0.5 mg/LNAA+1.0
mg/LBA。
3　结论
(1)当 NAA浓度为 0mg/L时 , 2, 4-D与 BA2种激素不
同浓度组合诱导也门铁叶片愈伤组织结果表明 ,当 2, 4-D浓
度是 BA浓度的 1.0 ～ 1.5倍时 ,诱导效率较高 ,但诱导的愈
伤组织质量不高 。
(2)当 2, 4-D浓度为 0 mg/L时 , BA与 NAA2种激素对
也门铁叶片的愈伤组织诱导效率为 0。
(3)当用 2, 4-D、BA与 NAA3种激素不同浓度组合 ,且
2, 4-D与 NAA的浓度比值为 1时 ,诱导效果较好 ,愈伤诱导
的时间短 ,愈伤的质量好 、产量高。
(4)诱导也门铁叶片愈伤组织最好的培养基配方是 MS
+0.5 mg/L2, 4-D+0.5 mg/LNAA+1.0mg/LBA。
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(上接第 2545页)
复杂性 、种属特异性以及菌株产酶能力低下 、发酵工艺不成
熟等原因 ,真正应用于生产实际的并不多见。因此 ,筛选产
酶量高 、酶学性质优良的菌株 ,寻找合适的发酵工艺 ,是酶解
法制备壳寡糖研究的前提条件。
该研究结果显示 ,从新疆吐鲁番温泉地区分离得到的嗜
热芽孢杆菌 HU1具有较强的几丁质降解及脱乙酰基酶合成
能力 ,以几丁质粉末为碳源诱导 ,即可产生高活性的几丁质
降解及脱乙酰基酶 ,这在国内还是首次发现。同时这 2种酶
在不同培养条件下 ,其产酶活性表现出明显的一致性。初步
推断 ,这 2种酶可能是一种酶蛋白表现出来的 2种功能 ,具
体可从酶的纯化及酶学性质等方面研究加以证实。
对粗酶液的水解产物分析发现 ,延长酶解时间即可得到
分子量在六糖以下的小分子壳寡糖 。利用粗酶液制备壳寡
糖工艺过程简单 ,为后期进一步开发保健品 、生物农药 、饲料
添加剂 、食品添加剂等产品奠定了良好的基础。
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