全 文 ：第３０卷第５期
２０１２年１０月
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版）
ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＳＨＡＮＧＨＡＩ ＪＩＡＯＴＯＮＧ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥ）
Ｖｏｌ．３０Ｎｏ．５
Ｏｃｔ．２０１２
文章编号：１６７１－９９６４（２０１２）０５－００２４－０６ ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７１－９９６４．２０１２．０５．００５
收稿日期：２０１２－０１－０４
基金项目：上海市科技兴农重点项目（沪农科引字２０１１年第１号）
作者简介：董易（１９８５－），女，硕士生，研究方向：球根花卉，Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｏｎｇｙｉ－ｄ－ｙ＠１６３．ｃｏｍ；
史益敏（１９５５－）为本文通讯作者，男，博士，教授，研究方向：球根花卉，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈｉｙｉｍｉｎ＠ｓｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
荷兰水仙花粉萌发和花粉贮藏性
董 易１，马晓红１，沈 强２，顾俊杰２，史益敏
（１．上海交通大学 农业与生物学院，上海２００２４０；２．上海鲜花港企业发展有限公司，上海２０１３０３）
摘 要：研究以Ｄｅｌｉｂｅｓ为实验材料，采用ＴＴＣ法确定了荷兰水仙花粉最佳采集时期，并采用正交
试验法对温度、蔗糖、硼酸、ＣａＣｌ２ 和聚乙二醇－４０００（ＰＥＧ－４０００）等５个因素进行筛选，得到荷兰水
仙花粉萌发的最佳培养条件。采用１４个品种的荷兰水仙花粉，研究不同贮藏温度和时间对花粉活
力的影响。结果表明，最佳花粉采集时期为花药开裂未散粉时，此时花粉活力可以达到８３．４％。
最佳培养基条件为５％蔗糖、０．０１％硼酸、０．０５％ＣａＣｌ２、５％ＰＥＧ－４０００、温度２０℃的条件下培养２
ｈ，花粉萌发率可以达到８５．７％，其中蔗糖是影响花粉萌发的最重要因素。所有供试的荷兰水仙花
粉经过１５℃贮藏１个月之后完全丧失活力，短期贮藏（１～３个月）可采用４℃进行贮藏，长期贮藏
（６～１２个月）应采用－１８℃进行贮藏；供试的１４个品种中，贮藏１年后Ｓｐｅｌｂｉｎｄｅｒ花粉活力最
强，Ｍｏｎｄｒａｇｏｎ和 Ｍｏｕｎｔ Ｈｏｏｄ花粉活力最弱。
关键词：荷兰水仙；花粉活力；花粉萌发；花粉贮藏
中图分类号：Ｓ６８２．２１ 文献标识码：Ａ
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｐｏｌｅｎ Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｓｅｕｄｏｎａｒｃｉｓｓｕｓ
ＤＯＮＧ Ｙｉ１，ＭＡ Ｘｉａｏ－ｈｏｎｇ１，ＳＨＥＮ Ｑｉａｎｇ２，ＧＵ Ｊｕｎ－ｊｉｅ２，ＳＨＩ Ｙｉ－ｍｉｎ１
（１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００２４０，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｆｌｏｗｅｒ Ｐｏｒｔ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１３０３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｄｕｔｃｈ ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ＴＴＣ
ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｏｌｅｎ ｗｉｔｈ Ｄｅｌｉｂｅｓ ａｓ ｔｈｅ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍａｔｅｒｉａｌ，ａｎｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｓｕｃｒｏｓｅ，ｂｏｒｉｃ ａｃｉｄ，ＣａＣｌ２ａｎｄ ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ
（ＰＥＧ）－４０００（ＰＥＧ－４０００）ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ａｎｄ ｔｉｍｅ ｏｎ ｐｏｌｅｎ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ １４ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ
ｐｏｌｅｎ ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ ｐｅｒｉｏｄ ｗａｓ ｗｈｅｎ ａｎｔｈｅｒ ｗａｓ ｃｒａｃｋｉｎｇ ｂｕｔ ｎｏｔ ｐｏｗｄｅｒｅｄ ｗｉｔｈ ａｓ ｈｉｇｈ ａｓ ８３．４％ ｐｏｌｅｎ
ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｆｏｒ ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｗａｓ ５％ｓｕｃｒｏｓｅ，０．０１％ Ｂｏｒｉｃ ａｃｉｄ，０．０５％
ＣａＣｌ２ａｎｄ ５％ＰＥＧ－４０００ｆｏｒ ２ｈｏｕｒｓ ａｔ ２０℃ ｗｉｔｈ ８５．７％ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ．Ｓｕｃｒｏｓｅ ｗａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ
ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ｏｆ ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．Ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｏｌｅｎ ｈａｄ ｌｏｓｔ ｖｉｔａｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ ｗｈｅｎ ｓｔｏｒｅｄ
ａｔ １５℃ｆｏｒ ｏｎｅ ｍｏｎｔｈ．Ｉｔ ｗａｓ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｆｏｒ ｐｏｌｅｎ ｓｈｏｒｔ－ｔｅｒｍ （１～３ｍｏｎｔｈｓ）ｓｔｏｒａｇｅ ａｔ ４℃ａｎｄ ｌｏｎｇ－
ｔｅｒｍ（６～１２ｍｏｎｔｈｓ）ｓｔｏｒａｇｅ ａｔ－１８℃．Ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ １４ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ，ｔｈｅ ｐｏｌｅｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ
Ｓｐｅｌｂｉｎｄｅｒ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｓｔ，ａｎｄ ｔａｈｔ ｏｆ Ｍｏｎｄｒａｇｏｎ ａｎｄ Ｍｏｕｎｔ Ｈｏｏｄ ａｆｔｅｒ １ｙｅａｒ ｏｆ ｓｔｏｒａｇｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｓｅｕｄｏｎａｒｃｉｓｓｕｓ；ｐｏｌｅｎ ｖｉｇｏｒ；ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｗｅｒｅ ｌｏｗｅｓｔ ｐｏｌｅｎ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ
第５期 董 易，等：荷兰水仙花粉萌发和花粉贮藏性
荷兰水仙（Ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｓｅｕｄｏｎａｒｃｉｓｓｕｓ）又名洋
水仙、西 洋 水 仙、欧 洲 水 仙，是 石 蒜 科 水 仙 属
（Ｎａｒｃｉｓｓｕｓ Ｌ．）多年生观赏草本植物［１］。水仙属植
物全世界约有３０个原种，主要原产在地中海沿岸与
中欧、北非等地区［２］。荷兰水仙是国际上著名的球
根花卉之一，相比中国水仙，荷兰水仙花色有红、黄、
橙、白等色彩，花形有大杯、喇叭、蝶形、红口等，其品
种较多，而且可以连年开花，观赏价值很高。目前，
荷兰水仙在世界各国得到广泛的栽培和应用［３］。
在花卉常规育种工作中，为了进行人工辅助授
粉和杂交授粉，通常需要早期采集和储藏花粉［４］。
授粉前确定花粉的活力对保证人工授粉的成功率十
分重要［５］。有研究表明，低温有助于花粉贮藏［６－８］。
但大部分花卉不同品种适合的温度及时间不尽相
同［９－１１］。在杂交育种工作中，遇到亲本花期不遇或
远距离杂交等问题时，则需要先采集花粉，以贮藏备
用，因此，保存具有生活力的花粉尤为重要［１２］。
罗凤霞［１３］等采用花粉液体培养法研究温度和培
养液（蔗糖、硼酸、ＣａＣｌ２ 浓度）对３个栽培水仙品种花
粉萌发的影响。李继爱［１４］等为探寻测定洋水仙花粉生
活力测定的最佳方法，选取３个品种洋水仙的新鲜花
粉为试材，采用ＴＴＣ染色法、醋酸洋红染色法和离体
萌发测定法测定其生活力。王振民［１５］等以洋水仙７个
品种为试材，进行不同花发育时期花粉及不同贮藏条
件下花粉生活力的研究。本实验以１４个荷兰水仙栽
培品种为研究对象，期望通过花粉离体萌发测定法，了
解不同培养条件对荷兰水仙花粉萌发和花粉管生长的
影响，以及不同贮藏温度及时间对花粉生活力的影响，
从而找出花粉萌发及贮藏的最优条件，为荷兰水仙杂
交育种工作提供依据。
１ 材料和方法
１．１ 实验材料
荷兰水仙花粉均采自上海交通大学农业与生物
学院实验农场，有极强（Ｆｏｒｔｉｓｓｉｍｏ）、滨莎（Ｐｉｎｚａ）、
苗条 惠 特 曼 （Ｓｌｉｍ Ｗｈｉｔｅｍａｎ）、爱 因 斯 坦 教 授
（Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ Ｅｉｎｓｔｅｉｎ）、粉美人（Ｐｉｎｋ Ｃｈａｒｍ）、德拉勃
（Ｄｅｌｉｂｅｓ）、巨 星 （Ｇｉｇａｎｔｉｃ Ｓｔａｒ）、头 巾 （Ｍｏｕｎｔ
Ｈｏｏｄ）、玛 丽 特 （Ｍａｒｉｅｋｅ）、橙 衣 美 少 女
（Ｍｏｎｄｒａｇｏｎ）、迷人 （Ｓｐｅｌｂｉｎｄｅｒ）、黄 衣 美 少 女
（Ｖａｌｄｒｏｍｅ）、上农早春（课题组选育）、上农蝶影（课
题组选育）等共１４个品种。选取周径在１２ｃｍ以上
的各个品种健康种球，于１１月初露地种植，于翌年
盛花期采集花粉，花粉均采自健康花朵。
１．２ 实验方法
１．２．１ ２，３，５－氯化三苯基四氮唑（ＴＴＣ）法确定花
粉采集时期
以Ｄｅｌｉｂｅｓ为实验材料，分别采集花药开裂前、
开裂（未散粉）、开裂后（已散粉）３种状态下的花粉。
取少数花粉于载玻片上，加１～２滴ＴＴＣ溶液，盖上
盖玻片，置于３５℃恒温箱中放置１５ｍｉｎ，然后在低
倍（４０×）显微镜下观察。凡被染为红色的为花粉活
力强（ａ），淡红的次之（ｂ），无色者为没有活力的花
粉或不育花粉（ｃ）［１６］。每个状态的花粉重复制片３
次，每次重复取３个视野，每个视野选取花粉１００粒
进行统计，然后计算花粉的活力百分率［（ａ＋ｂ）／
１００×１００］，根据统计结果确定最佳花粉采集时期。
１．２．２ 离体培养法筛选花粉萌发的培养条件
以Ｄｅｌｉｂｅｓ当天采集的新鲜花粉为材料，进行
花粉萌发最适培养条件筛选实验。采用正交设计法
Ｌ１６（４５）进行实验设计，共选择５个因素，分别为温
度、蔗糖、硼酸、ＣａＣｌ２ 和聚乙二醇－４０００ （ＰＥＧ－
４０００），每个因素设４个水平，如表１。取配置好的
不同组合的培养液适量，滴于单孔玻璃上，放置少量
花粉于培养液中，盖上盖玻片，将处理好的材料于培
养箱中黑暗保湿培养。分别培养２、４、６、９和２４ｈ
后于显微镜下（４０×）观察，每个条件重复制片３次，
每次重复选择３个视野，每个视野选取花粉１００粒
进行统计，统计标准同１．２．１。统计萌发率后反正
弦处理并进行正交统计分析［１７］，根据结果筛选最佳
的实验培养条件。
１．２．３ 花粉贮藏性实验
将采集后１４个品种的花粉置于１．５ｍＬ离心
管中，并用ｐａｒａｆｉｌｍ封口，分别在１５、４、－１８℃３种
温度条件下中贮藏。不同的贮藏时间（１、２、３、６和
１２个月）处理后，采用最佳培养条件进行花粉离体
培养（按照１．２．２实验得出的最佳培养方法进行培
养），统计结果后分析比较各处理间花粉的萌发率。
离体培养前对４℃和－１８℃处理过的花粉先进行
室温解冻法解冻［１８］。
２ 结果与分析
２．１ 不同采集时期的花粉活力研究
以品种Ｄｅｌｉｂｅｓ为材料，通过ＴＴＣ染色法对花
药开裂前、开裂（未散粉）、开裂后（已散粉）３种状
态下的花粉进行活力测定，结果表明，花药开裂时花
５２
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版） 第３０卷
表１ 正交试验表Ｌ１６（４５）
Ｔａｂ．１ Ｔａｂｌｅ Ｌ１６（４５）ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
组合
Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ
温度／℃（Ａ）
Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ＣａＣｌ２／％ （Ｂ） 硼酸／％ （Ｃ）
Ｂｏｒｉｃ ａｃｉｄ
蔗糖／％ （Ｄ）
Ｓｕｃｒｏｓｅ ＰＥＧ－４０００
／％ （Ｅ）
１ ２０ ０．０５ ０．０１ ５ ５
２ ２０ ０．１０ ０．０５ １５ １５
３ ２０ ０．１５ ０．１ ２０ ２０
４ ２０ ０．２０ ０．２ ２５ ２５
５ ２５ ０．０５ ０．０５ ２０ ２５
６ ２５ ０．１０ ０．０１ ２５ ２０
７ ２５ ０．１５ ０．２ ５ １５
８ ２５ ０．２０ ０．１ １５ ５
９ ３０ ０．０５ ０．１ ２５ １５
１０ ３０ ０．１０ ０．２ ２０ ５
１１ ３０ ０．１５ ０．０１ １５ ２５
１２ ３０ ０．２０ ０．０５ ５ ２０
１３ ３５ ０．０５ ０．０１ １５ ２０
１４ ３５ ０．１０ ０．０５ ５ ２５
１５ ３５ ０．１５ ０．１ ２５ ５
１６ ３５ ０．２０ ０．２ ２０ １５
粉活力最高，达到 ８３．４％；开裂后花粉活力为
８０．１％；开裂前的花粉活力最低，只有７４．６％。采
用新复极差法对花药不同开裂程度时花粉活力数据
进行分析，Ｄｅｌｉｂｅｓ花药的３种状态下的花粉活力均
为极显著差异（表２）。因此，荷兰水仙花粉采集的
最佳时期应该是花药开裂时。
表２ Ｄｅｌｉｂｅｓ花药不同开裂程度花粉活力
Ｔａｂ．２ Ｖｉｇｏｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｎｔｈｅｒ ｄｅｈｉｓｃｅｎｃｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｄｅｌｉｂｅｓ
花药状态
Ａｎｔｈｅｒ ｓｔａｔｕｓ
花粉活力／％
Ｐｏｌｅｎ ｖｉｇｏｒ Ｘ
—
ｉ－ Ｘ
—
３ Ｘ
—
ｉ－ Ｘ
—
２
开裂Ｄｅｈｉｓｃｅｎｃｅ ８３．４ ０．０８８＊＊ ０．０３３＊＊
开裂后Ａｆｔｅｒ ｄｅｈｉｓｃｅｎｃｅ ８０．１ ０．０５５＊＊
开裂前Ｂｅｆｏｒｅ ｄｅｈｉｓｃｅｎｃｅ ７４．６
注：＊＊表示差异极显著（Ｐ ＜０．０１）。
Ｎｏｔｅ：＊＊ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ ＜０．０１）．
２．２ 花粉离体培养最佳条件的筛选
以品种 Ｄｅｌｉｂｅｓ为材料，分别将花粉按照表１
中的１６个培养条件进行培养，于２、４、６、９、２４ｈ后
观察花粉萌发情况，统计分析花粉萌发率（表３、表
４）。
对各个处理不同处理时间后的花粉萌发率进行
正交统计分析发现，在花粉萌发整个过程中，蔗糖对
花粉萌发率影响最大（表３）。在２和４ｈ的处理中，
ＰＥＧ－４０００对花粉萌发率的影响率仅次于蔗糖；在
６、９和２４ｈ的处理中，温度对花粉萌发率的影响位
居第２（表３）。通过正交分析对不同时期最优组合
的预测可知，在不同培养时间内花粉萌发的最优组
合是不同的，因此培养时间不同应选择相应的最优
组合进行培养。
从表４可以看出，在培养一段时间后，所有处理
的花粉均可以萌发，但是各个处理间萌发率差异较
大。其中处理１的萌发率明显较高，２４ｈ后达到
９７．８％；处理１１和处理１２萌发率也达到了９０％以
上。而处理９和处理１５萌发率则较低，经过２４ｈ
培养也仅为５％左右。大部分处理在６～９ｈ后萌发
６２
第５期 董 易，等：荷兰水仙花粉萌发和花粉贮藏性
率达到高峰，之后缓慢增长。对培养２４ｈ不同时间
花粉活力进行统计分析，结果说明，处理１是对荷兰
水仙花粉萌发最有利的组合。实际实验中花粉管经
过长时间的培养部分破裂，所以选择培养２ｈ比较
合适，综合表３、表４得到荷兰水仙花粉萌发的最优
组合为温度２０℃，ＣａＣｌ２ 浓度为０．０５％，硼酸浓度
为０．０１％，蔗糖浓度为５％，ＰＥＧ－４０００浓度为５％，
培养时间为２ｈ。
表３ 各因子对Ｄｅｌｉｂｅｓ花粉萌发率影响次序和最优培养基组合
Ｔａｂ．３ Ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｅａｃｈ ｆａｃｔｏｒ ｏｎ ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ Ｄｅｌｉｂｅｓ
培养时间／ｈ Ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ
２ ４ ６ ９ ２４
各因子影响次序
Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｅａｃｈ ｆａｃｔｏｒ
ＤＥＡＢＣ ＤＥＡＢＣ ＤＡＥＣＢ ＤＡＥＣＢ ＤＡＥＣＢ
最优培养基组合
Ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ
Ａ１Ｂ１Ｃ１Ｄ１Ｅ１ Ａ１Ｂ１Ｃ２Ｄ１Ｅ１ Ａ３Ｂ１Ｃ１Ｄ１Ｅ２ Ａ３Ｂ３Ｅ３Ｄ１Ｅ１ Ａ３Ｂ１Ｃ１Ｄ１Ｅ２
表４ Ｄｅｌｉｂｅｓ花粉培养２４ｈ萌发率比较
Ｔａｂ．４ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｄｅｌｉｂｅｓ ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｅａｃｈ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｔ ２４ｈ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
萌发率／％Ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
２ｈ ４ｈ ６ｈ ９ｈ ２４ｈ
１ ８５．７Ａ ８９．２Ａ ９１．５Ａ ９４．３Ａ ９７．８Ａ
２ ２３．９Ｅ ５８．３Ｄ ８０．２ＢＣ ８４．６Ｂ ８７．１Ｄ
３ ３．０ＧＨＩ ８．８Ｉ １５．７Ｉ ６１．１Ｃ ７９．４Ｅ
４ ０Ｉ １．１Ｋ １．３Ｋ １３．４Ｇ ５．８Ｌ
５ ０Ｉ ７．２ＩＪ １０．６Ｊ ２１．７Ｆ ５１．５Ｉ
６ ０Ｉ ９．１Ｉ １１．２Ｊ ５．３Ｈ ６３．５Ｈ
７ ６２．３Ｂ ６９．４Ｂ ７９．１Ｃ ８３．６Ｂ ８９．２Ｃ
８ ３２．５Ｄ ５３．２Ｅ ６１．９Ｅ ８５．４Ｂ ８９．６Ｃ
９ ５．２ＧＨ １９．４Ｆ ３３．６Ｇ ５３．６Ｄ ７７．４Ｆ
１０ ５．４Ｇ １８．１Ｆ ４０．３Ｆ ６２．６Ｃ ６８．７Ｇ
１１ １．３Ｉ １２．４Ｈ ６４．７Ｄ ８２．８Ｂ ９０．３Ｃ
１２ ４３．９Ｃ ６５．８Ｃ ８１．４Ｂ ８５．５Ｂ ９４．１Ｂ
１３ ９．６Ｆ １５．３Ｇ １６．２Ｉ ２０．４Ｆ ４８．１Ｊ
１４ １１．８Ｆ １３．１ＧＨ １９．５Ｈ ４１．６Ｅ ４４．８Ｋ
１５ ２．７ＧＨＩ ２．８Ｋ ３．１Ｋ ３．８Ｈ ５．７Ｌ
１６ ２．１ＨＩ ５．９Ｊ ９．９Ｊ １３．６Ｇ ５２．７Ｉ
注：α＝０．０５，同一培养时间内相同字母处理间差异不显著。
Ｎｏｔｅ：α＝０．０５，ｔｈｅ ｓａｍｅ ｌｅｔｔｅｒ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ．
２．３ 不同贮藏温度和贮藏时间对花粉活力的影响
采用最佳的培养条件对贮藏后的花粉进行萌发
实验（即采集花药开裂未散粉时的花粉，采用处理１
培养２ｈ）。结果如表５所示。
表５说明，在１５℃贮藏１个月之后，荷兰水仙
所有供试品种都不能萌发，活力完全丧失，这说明
１５℃条件十分不利于荷兰水仙花粉活力的保存。
４℃和－１８℃条件有利于荷兰水仙花粉活力的保
存。贮藏１个月时，有８个品种４℃处理的花粉萌
发率大于－１８℃处理的萌发率，贮藏２个月时，有７
个品种４℃处理的花粉萌发率大于－１８℃处理的
萌发率，贮藏３个月时，有６个品种４℃处理的花粉
萌 发 率 大 于 －１８ ℃ 处 理 的 萌 发 率，其 中
Ｆｏｒｔｉｓｓｉｍｏ、Ｍａｒｉｅｋｅ、Ｓｌｉｍ Ｗｈｉｔｅｍａｎ、Ｖａｌｄｒｏｍｅ、上
农蝶影、上农早春６个品种４℃处理萌发率高于－
１８℃处理的萌发率，其他８个品种则是－１８℃处理
高于４℃处理的萌发率。贮藏半年时，大部分品
种－１８℃处理高于４℃处理的萌发率。贮藏到１年，
７２
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版） 第３０卷
表５ 不同贮藏条件和时间对荷兰水仙花粉萌发的影响
Ｔａｂ．５ Ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｉｍｅ ｏｎ Ｎａｒｃｉｓｓｕｓ ｐｏｌｅｎ ｖｉｇｏｒ
品种
Ｖａｒｉｅｔｉｅｓ
不同条件及贮藏时间下花粉萌发率／％
Ｐｏｌｅｎ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｉｍｅ
１个月
１Ｍｏｎｔｈ
２个月
２Ｍｏｎｔｈ
３个月
３Ｍｏｎｔｈ
６个月
６Ｍｏｎｔｈ
１２个月
１２Ｍｏｎｔｈ
１５℃ ４℃ －１８℃ ４℃ －１８℃ ４℃ －１８℃ ４℃ －１８℃ ４℃ －１８℃
Ｆｏｒｔｉｓｓｉｍｏ ０ ２８．７ １６．２ ２０．３ ８．６ １８．２ ６．５ ０ ３．３ ０ ０
Ｍａｒｉｅｋｅ ０ ３７．７ ３１．２ ２１．６ １８．７ １７．９ １４．６ ３．８ ９．６ １．８ ５．３
Ｓｐｅｌｂｉｎｄｅｒ ０ ４１．３ ５７．９ ２８．６ ４２．５ ９．４ ３３．２ ５．１ ２３．２ ２．３ １６．３
Ｓｌｉｍ Ｗｈｉｔｅｍａｎ ０ ４０．２ ３３．８ ３６．７ ２１．５ ２３．８ １９．９ １３．７ ２０．６ ６．３ １１．４
Ｖａｌｄｒｏｍｅ ０ ３５．６ １８．７ １６．７ ９．６ ８．３ ７．９ ２．５ ０ ０ ０
Ｄｅｌｉｂｅｓ ０ ４７．６ ３６．８ ２２．９ ３１．４ １５．２ ２０．６ １．２ １７．３ ０ ８．８
Ｐｉｎｚａ ０ ２３．５ ４２．３ １５．３ ３９．６ ７．８ ２４．２ ６．１ ８．４ ２．２ ７．７
Ｇｉｇａｎｔｉｃ Ｓｔａｒ ０ ３２．１ ２８．６ ２８．３ ２０．４ １６．３ １８．７ １２．６ １３．１ ４．４ ５．２
Ｍｏｎｄｒａｇｏｎ ０ １０．２ １４．９ ８．３ ９．７ ２．６ ６．１ ０ ０ ０ ０
Ｍｏｕｎｔ Ｈｏｏｄ ０ １２．３ ３０．３ ６．４ １０．５ ３．１ ７．４ ０ ０ ０ ０
Ｐｉｎｋ Ｃｈａｒｍ ０ １９．７ ２０．６ １３．６ １９．７ ６．９ １６．２ ３．８ １１．３ １．２ ３．８
Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ Ｅｉｎｓｔｅｉｎ ０ ９．５ ４０．７ ５．２ ３２．１ ０ ２１．２ ０ １２．６ ０ ０
上农蝶影 ０ ３９．９ ２８．２ ２７．３ ２６．８ ２４．６ ２２．３ １５．７ １０．１ ３．７ ５．４
上农早春 ０ ４４．９ ３８．８ ２７．６ ２５．１ ２４．７ ２０．３ １３．４ １１．７ ５．２ ８．７
各品种－１８℃处理萌发率皆高于４℃处理的萌发
率。其中Ｓｐｅｌｂｉｎｄｅｒ和Ｓｌｉｍ Ｗｈｉｔｅｍａｎ－１８℃处
理１年后仍有１０％以上的萌发率，是供试品种中最
耐贮藏的品种；而 Ｍｏｎｄｒａｇｏｎ和 Ｍｏｕｎｔ Ｈｏｏｄ ２个
品种则在贮藏半年时就丧失活力，最不耐贮藏。
３ 讨论
花粉是大部分植物有性繁殖途径中传递遗传物
质的载体，其活力的有无直接影响遗传物质传递的
成败，因此在进行人工授粉、杂交育种和花粉学研究
之前首先要对花粉的活力进行检测［１９］。实验结果
表明Ｄｅｌｉｂｅｓ花药开裂时花粉活力最高，这与王振
民［１５］等的研究结果，花粉活力在花Ⅲ级（花被片开
放，花药刚刚开裂未散）时最高是一致的。这是因为
在花药开裂前花粉不够成熟，开裂后花粉则有很多
散开，同时随着时间的增长，活力逐渐下降，所以要
保证花粉采集的质量和数量，最佳的花粉采集时期
就是花药已经开裂但花粉并未散开的时期。
花粉的萌发和花粉管的生长受到温度、蔗糖、硼
酸、ＣａＣｌ２ 和ＰＥＧ－４０００等培养基成分的影响［２０，２１］，
本研究通过对Ｄｅｌｉｂｅｓ花粉进行这５个因素正交实
验分析表 明处理 １（温度：２０ ℃，ＣａＣｌ２ 浓 度：
０．０５％，硼酸浓度：０．０１％，蔗糖浓度：５％，ＰＥＧ－
４０００浓度：５％）为最佳萌发条件。由此可看出，荷
兰水仙的花粉自身含有一定的营养，因此对培养基
的营养程度要求比较低。这与罗凤霞［１３］的研究结
果最佳蔗糖浓度为１００ｇ／Ｌ有一定的差异，可能是
由于供试品种不同造成的。在培养的整个过程中，
蔗糖浓度一直是影响其花粉萌发率的最重要的因
子，这是因为蔗糖作为碳源参与花粉的代谢，同时也
作为渗透压的调节剂对花粉管壁形成一定的渗透
势，而较低浓度（５％）的蔗糖最利于荷兰水仙花粉管
的萌发和生长，所以蔗糖浓度对其生长起着重要的
作用。
植物的花粉一般较小，贮藏的营养物质有限，而
花粉的呼吸作用又比较强烈，花粉生活力的降低就
是由于高强度的呼吸导致花粉的养分消耗过度所
致［２２］。在供试的１４个荷兰水仙品种中，所有品种
中经过１５℃贮藏１个月后完全失去活力，其中９个
品种的花粉在－１８℃贮藏１年后仍然可以萌发，说
明这些品种的花粉活力较强。但是各品种的生活力
都随着储藏时间有明显的下降，品种间也存在着较
大的差异。王振民等［１５］的研究结果也表明水仙花
粉在室温贮藏１个月已完全丧失活力。１５℃贮藏
有利于花粉进行代谢活动，导致花粉酶活性较强，呼
８２
第５期 董 易，等：荷兰水仙花粉萌发和花粉贮藏性
吸作用也较强，所以在１个月内养分被消耗掉，花粉
活力完全丧失。在贮藏前２个月内，４℃处理过的
花粉萌发率大部分高于－１８℃处理的萌发率；在３
～６个月间，４℃处理的大部分花粉生活力有着明
显的下降；到贮藏达到１年时，所有品种－１８℃处
理的花粉萌发率均高于４℃处理的萌发率。这可能
是因为在冷冻处理的过程中，对花粉的细胞造成了
一定的伤害，所以在较短的时间内，－１８℃处理的
花粉萌发率低于４℃处理的萌发率，但在长时间的
贮藏过程中，４℃处理呼吸作用对花粉营养的消耗
则大于－１８℃处理呼吸作用的消耗，所以－１８℃
处理更适合花粉的长期贮藏［１１］。不同荷兰水仙品
种经过不同时间及不同方式的处理后萌发率有着较
为明显的差异，可见花粉的耐贮藏性及活力的高低
主要取决于自身的遗传特性。但总体来讲，荷兰水
仙花粉短时间（１～３个月）贮藏可采取４℃条件，长
时期贮藏（６个月～１年）则应选择－１８℃条件。
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