全 文 ：福建农学院学报 ( 自然科学版 ) 2 2 ( 1 ): 126一 128 , 199 3
J o u nr a l o f F u i
a n A g r ie u l t u r a l C o ll e g e ( N a t u ar l S e ie n e e Ed i t io n )
自然生长与栽培种中国水仙
过氧化物同工酶的测定 ’
许 荣 义 叶 季 波
(福建农学院漳州分部 , 漳州 3 6 30 0 0)
摘要 为探索在浙江 、 福建沿海岛屿及云南通海等地发现的自然生长中国水仙与漳州历年栽培的中国水
仙间的亲缘关系 , 测定了它们的过氧化物同工酶 . 结果表明自然生长中国水仙、 云南通海 、 上海崇明中国
水仙与漳州栽培种中国水仙是同一个种 (刃 a ; c i s u s t a z e t za v a r . 动 in e n s衍 R o e m ) .
关键词 中国水仙 ; 自然生长 ; 同功酶 ; 过氧化物酶
中图分类号 5 682 . 21
S t u d i e s o n P e r o x id a s e I s o z y m e s fr o m C h i n e s e N a r c i s s u s e s
G r o w i n g W i l d ly
a n d C u l t i v a t e d S P e e i e s
X u R o n g y i Y e J IP o
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e Z h a n胭h o o B ar n ch , 厂月C , Z ha n君z h o u J石0 0 0 0 )
A b s t r ac t T h e P e r o x id a s e i s o z y m e s w e r e e x a m i n e d of r s t u d y i n g t h e P h y l o g e n e t i e r e l a t io n
-
咖 iP a m o n g C h i n e s e n a r e i s s u se s g r o w i n g w i ld l y a n d e u l t i v a t e d in Z h a n g z h o u D i s t r ie t of r
挥 a r s . R e s u l t s sh o w e d t h a t a l l n a r e i s s u s e s e o l l e e t e d fr o m T o n g h a i , Y u n n a n P r o v i n e e ,
C h o n g m i n g I s l a n d
,
S h a n g h a i b lo n g t o s a m e s P e e i e s
, 刃 d r e is u s t a z e l t a v a r
.
hc 加户n s is .
K e y w o r d s C h i n e s e n a r e i s s u s : g r o w i n g w i ld ly : i s o z y m e ; P e r o x id a s e
中国水仙 (Na r c is s u s t a z e t r a v a r . e人切 e n s st R o e m ) 是我国+ 大传统名花之一 , 具有很
高的观赏价值 , 也是出口创汇的主要花卉 .
除了中国水仙历年栽培的主产地福建漳州 、 上海崇明等外 , 还在浙江普陀诸岛、 福建沿
海岛屿发现有自然生长的中国水仙 (许荣义 1 9 87) . 笔者考察并采集的有 : 浙江朱家尖
岛、 普陀山 ; 福建霞浦大西洋岛 , 宁德青山岛 , 平潭北岚岭 , 莆田南 日岛 、 西罗盘岛以及云
南通海等 . 为了探索自然生长 中国水仙与栽培种中国水仙的亲缘关系 , 测定了它们的酶过氧
化物同工酶 .
1 材料与方法
供试水仙为采 自福建宁德青山岛 (编号 i) 、 霞浦大西洋岛 ( h) 、 浙江朱家尖岛 ( g ) 、
浙江普陀 山 ( O 、 上海崇明岛 ( e) 、 福建平潭北岚岭 ( d) 、 莆 田南 日岛 ` ( c) 、 西 罗盘岛
· 收稿日期: 1 9 9 2一 0 3一 1 7
DOI : 10. 13323 /j . cnki . j . f af u( nat . sci . ) . 1993. 01. 023
第 l 期 许荣义等 : 自然生长与栽培种中国水仙过氧化物同工酶的测定 · 12 7 ·
b( )
、 云南通海 ( a) 等地 自然生长的中国水仙以及漳州栽培种等 (j) 共 10 个样品 . 19 8 6 年
取 自各自然生长地 (云南通海 198 9 年采集 ) , 漳州栽培种采白龙海九湖乡下庵村 . 取植株及
鳞茎供试 . 1 989 和 19 90 年取材 自种植在福建农学院漳州分部内试验地 ; 龙海九湖乡下庵后
山村水仙花田 .
供试材料选用正常植株 , 取样期在每年 1月份生长期间 . 采样时整株挖取 , 然后抽出最
后生长的一个叶片 , 去弃叶基部及叶尖部 , 在叶中间部位称取 3 克重叶片 , 用蒸溜水充分洗
净 , 无菌纸擦干 , 剪成碎片 , 研成匀浆制样供试 . 样品 3 次重复 , 酶带迁移率为 3 次电泳平
均值 .
侧定参照福建农学院植物生理组 ( 19 8 2) , 周光宇等 ( 19 7 9) 的方法取 3 9 叶片 , 加人
, m l电极缓冲液 ( p H S . 3的 0 . 0 5 m o l / L T r i S一甘氨酸 ) 及少许石英砂 , 研磨后用 4 0 0 r / m in
的电动离心机 , 离心 20 m in , 待澄清后 , 取上清液作为样品液 . 分离胶和浓缩胶浓度分别为
7% 和 4% .
采 用 S C R 一 6 稳压稳流 电泳仪 , 在 D Y Y 一 1 系列多 用电泳槽 (每槽管放人样品液 5
” L ) 中于室温下 (稳流每槽管 2 m A ) 电泳 3一4 .h
采用联苯胺一愈创木酚染色 . 用水漂洗过的凝胶 , 放人 20 m L .0 2 m ol / L 的醋酸钠 , 2
m L 5 m m ol / L 硫酸锰 , 5 m L 0 . 12 % 过氧化氢和 5 m L 联苯胺一愈创木酚溶液 ( 50 m g 联苯
胺加上 , 35 m g愈创木酚溶于 25 m L 10 % 醋酸中 ) 混和液中 , 保温 30 m in . 取出漂洗后 , 保
存在 2% 醋酸中 , 于暗处保存 . 过氧化物酶同工酶区带呈紫红色 .
2 结果及分析
自然生长中国水仙与漳州栽培种等 10 个样品的过氧化物酶同功酶谱如图 1 .
从以上过氧化物同工酶测定的结果看 , 最多有 9 条谱带 , 最少 6 条 , 一般有 7一 8 条 . 最
多谱带 9条是漳州栽培种 , 最少的是采自无人居住的西罗盘岛的 自然生长的水仙 .
根据各条谱带从阴极向阳极的迁移顺序 , 可分为 A 区 、 B 区和 C 区 3 个活性区 . 在供
试的 10 个材料 中仅漳州栽培种及宁德青山岛自然生长中国水仙有 B 区 . 漳州栽培种 B 区谱
带又呈较强而宁德青山岛的呈弱 (发现宁德青山岛自然生长中国水仙在房前屋后土壤肥沃 ) .
但所有供试材料的 A 区与 C 区谱带几乎相同 , 迁移率和活性差异很少 . 说明在亲缘起源上
有着密切联系 ; 又据笔者对自然生长与栽培种中国水仙切片观察 (许荣义等 1 9 89) 和栽培
生长发育规律观察 , 认为自然生 长中国水仙与栽 培种 中国水仙是同一个种 ( aN cr 加us
at ez et a v a r 。 h in e ns l’s R o c m ) . 其间的迁移率和活性有些差异 , 可能是生长环境和栽培方法
不同而产生的 .
12 8 福 建 农 学 院 学 报 (自然科学版 ) 第 2 卷
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〔二二」弱 〔 二〕 极弱
图 1 自然生长与栽培种中国水仙同功醉过粗化物酶谱图
a
, 云南通海 ; b . 西罗盘岛; c . 南日岛; d . 平俐匕岚岭 ; 。 . 祟明岛 ; .f 普陀山; g. 朱家尖岛 ; 瓦 大西洋岛 ; i. 宁攀青
山岛; 多潭州栽培种 .
参 考 文 献
许荣义 . 198 7 . 中国水仙资源考察初报 . 福建农学院学报 , 16 (2) : l印一 164
许荣义 . 198 9 . 自然生长与栽培种中国水仙的切片观察 . 福建农学院学报 . 18 ( l :) 123 一 126
周光宇 , 龚秦蔡 , 王自芬 . 19 79 . 遗传育种的生化指标一同工酶的分析 . 上海农业科技 , (:3) 卜3
福建农学院植物生理教研组 . 19 82 . 植物生理学实验指导 (下册 ) : 19