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魔芋主要品质成分测定法研究



全 文 :1998年 12月 西 南 农 业 大 学 学 报 V ol. 20, No. 6
第 20卷第 6期 Journal of Southw est Ag ricul tural Universi ty Dec. 1998
魔芋主要品质成分测定法研究⒇
        隆有庆         刘佩瑛
       (重庆教育学院生物系 ,重庆 400067)    (西南农业大学园艺系 ,重庆 400716)
孙远明
(华南农业大学食品科学系 ,广州 510642)
【摘要】气相色谱法鉴定表明 ,除去可溶性糖的魔芋样品 ,仅含葡甘露聚糖和淀
粉。其水解性多糖经酸水解后可用斐林试剂滴定法或 3, 5-二硝基水杨酸比色法测
定 ;淀粉含量可用改进后的重铬酸钾氧化法测定而不受葡甘聚糖存在的干扰。二者
的差值即为葡甘聚糖的含量。该文还对测定条件和方法的精密度、准确度进行了探
讨。
关 键 词: 魔芋 ;多糖 ;葡甘聚糖 ;测定
中图分类号: Q 539. 1; S 632. 3
A N EW M ETHOD FOR THE DETERM IN AT ION
O F THE PRIN CIPAL N U TRIEN T COM PON-
EN TS IN ELEPHAN T-FOO T YAM
Long Youqing
( Depa rtment of Biolog y, Chongqing Educational Co lleg e, Chongqing 400067, China)
Liu Peiying
( Department of Ho rticul ture, Southw est
Ag ricultural Univ ersity, Chongqing 400716, China )
Sun Yuanming
( Depar tment of Food Science, South China
Ag ricultural Univ ersi ty, Guang zhou 510642, China )
Abstract  GC determina tion show ed that elephant-fo ot yam samples deprived of th eir sol-
uble ca rbohydrates contained only tw o kinds o f hydrolysable po lysaccharides-g lucomannan
and starch. The hydro lysable po ly-saccharides can be determined wi th the Fehling reagent
tit ration or wi th 3, 5-dini t rosalicylic acid reagent colo rimetry. Starch content can be deter-
⒇ 收稿日期: 1998- 03- 23
DOI : 10. 13718 /j . cnki . xdzk. 1998. 06. 008
mined by means o f the capaci ty pota ssium dichroma te ti t ra tion, and the presence o f g luco-
mannan has no interference wi th the resul ts. The di fference betw een the tw o figures men-
tioned above w ill be the content of g lucomannan in the sample. Improvement o f some de-
termina tion condi tions and the precision and accuracy o f the method repor ted a re dis-
cussed.
Key words: Amorphophallus Blume; polysaccharide; glucomannan; determination
魔芋的主要成分为葡甘聚糖和淀粉。葡甘聚糖是由葡萄糖和甘露糖通过 β - 1, 4糖苷链
连接而成的多缩己糖〔4〕 ,而淀粉也是一种多缩己糖 ,是由葡萄糖分子通过 α- 1, 4糖苷链连
接而成 ,二者性质相近 ,但葡甘聚糖粘度大 ,尚无准确、简便、成熟的分析方法〔5, 6〕。对此 ,进行
了一些研究 ,旨在为魔芋品质鉴定提供参考。
1 材料与方法
将花魔芋 ( Amorphophallus konjac )和白魔芋 ( A . albus )的球茎洗净、切片、烘干、研成
粉 ,于 60℃下烘至恒重备测。
1. 1 多糖组成鉴定
样品经石油醚脱脂 , 80%乙醇提取 3次后 , 60℃下烘至恒重。取样用 3NHCl于 100℃水浴
中水解 1 h , 10% NaOH中和 , 10% Pb( Ac) 2除去蛋白质 ,过滤定容 ,经甲醚化后 (三甲基硅醚
衍生物 )用气相色谱法鉴定糖的组成。色谱条件: 固定液 5% OV - 225,担体 Gas Ch rom Q
( 60~ 80)目 ,柱长 2 m× 2 mm。柱始温 140℃ ,保留 2 min,终温 170℃ , 3℃ /min。载气流速 , 15
m l /min,汽化室温 210℃ ,记录纸速 3 mm /min,数据处理灵敏度 (面积抑制 ) 100。
1. 2 多糖含量测定
多糖水解液采用斐林试剂滴定法、 3, 5-二硝基水杨酸法〔 1〕和气相色谱法定量测定。
1. 3 淀粉测定
称取脱脂及除去可溶性糖的样品 ,溶于 80% Ca( N O3 ) 2 ,加热煮沸 5 min后 ,用热蒸馏水
冲洗沉淀 3次 ,取上清液冷后定容 ,用容量重铬酸钾氧化滴定法进行测定〔2〕 ,并比较氧化剂用
量和氧化时间等因素对测定的影响。
1. 4 葡甘聚糖测定
用差减法。即多糖含量减去淀粉含量即为葡甘聚糖的含量。
2 结果与分析
2. 1 多糖组分
魔芋糖分包括葡甘聚糖、淀粉、纤维素、蔗糖、葡萄糖、果糖及甘露糖等。后 4者属于单糖
和双糖 ,在多糖提取中溶于 80%乙醇而除去。纤维素化学性质稳定 ,在强酸条件下才能水解 ,
而在 3NHCl中稳定。葡甘聚糖虽溶于水 ,但不溶于石油醚、乙醇等有机溶剂 ,故在脱脂和去
可溶性糖的过程中不会损失。在酸性条件下 ,葡甘聚糖与淀粉均易水解成单糖——葡萄糖和
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甘露糖。因此 ,多糖水解液即为淀粉和葡甘聚糖的水解产物 ,这为气相色谱鉴定法所证实。如
果样品中含其它易水解的多糖 (如半纤维素 ) ,则其水解液中应能鉴定出除葡萄糖和甘露糖
外的己糖和戊糖。因此 ,魔芋中易水解的多糖就是葡甘聚糖和淀粉 ,这为魔芋葡甘聚糖分析
测定提供了可靠依据 (图 1, 2)。
图 2 葡萄糖与甘露糖气相色谱分析 (綦江花魔芋 )
2. 2 水解多糖测定法比较
斐林试剂滴定法是经典的测定还原糖的方法 ,可靠而准确。3, 5- 二硝基水杨酸法比斐
林法简单 ,操作更方便 ,有相当的精密度和准确度 ,对含糖量高的魔芋 ,适用这种方法。气相
色谱法的重现性及准确性也较好 ,并能分别测出多糖的各种单糖含量 ,但操作麻烦 ,费时 ,需
要昂贵的仪器 ,一般难于采用。3种方法的变异系数分别是 0. 15% , 0. 23%和 3. 32% 〔3〕 ,均有
相当的精密度 ,特别是滴定法和比色法更高。3者的纯样平均回收率分别为 99% (葡萄
糖 )、 10 3% (葡萄糖 )和 102% (甘露糖 )。回收量的变异系数分别为 1. 30% , 4. 15%和
4. 09% ,表明 3者的回收效果均较好。其中 ,斐林试剂滴定法的回收量误差最小 ,为 1. 3% 。
2. 3 淀粉的重铬酸钾氧化滴定法
魔芋的淀粉不能简单地用还原糖测定法测定。因此 ,采用重铬酸钾氧化滴定法 ,将魔芋
样品溶液中的淀粉沉淀 ,达到与葡甘聚糖分离的目的。
2. 3. 1 碘液用量与络合时间。随着碘液用量增大 ,碘淀粉络合物 (沉淀 )形成完全。即
Na2 S2O3的用量少。随络合时间的增长 ,淀粉络合物沉淀更完全 ,但络合 30 min与 60 min的
差异不显著。
2. 3. 2 重铬酸钾用量与氧化时间。氧化剂重铬酸钾用量对测定结果的影响很小 ,氧化时间
对测定结果影响较大。氧化时间短 ( 5 min) ,反应不完全 ,测定值偏低 ;时间过长 ( 20 min) ,测
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定值也趋减少 ,以氧化 15 min较适当。
2. 3. 3 测定时间对测定结果的影响。在加入氧化剂及 KI后 ,静置 1 h内的测定值最大。随
着时间延长 ,滴定值逐渐减少。
2. 3. 4 标准曲线的制作。原方法中 ,滴定消耗的 Na2 S2O3体积数 ,经繁琐的公式换算得到测
定淀粉含量。试验发现 ,当样品中淀粉含量在 0~ 6. 0 mg时 ,其含量与滴定消耗的 0. 1 N
Na2 S2O3体积数成直线关系。因此 ,测定同时制作标准曲线 ,可简化换算程序 ,得到准确结果。
2. 3. 5 方法的精密度与准确度。应用改进后的方法测定样品重现性的相对偏差为 2. 5%以
下 ,变异系数 2. 93% ,表明有相当的精密度和准确度。
2. 4 葡甘聚糖的间接测定
上述试验表明 ,魔芋中水解性多糖 ,是葡甘聚糖和淀粉。其中 ,淀粉可用改进后的重铬酸
钾氧化滴定法测定 ,水解性多糖可用斐林试剂滴定法或 3, 5- 二硝基水杨酸比色法测定。因
此 ,魔芋中葡甘聚糖的含量等于水解性多糖含量减去淀粉含量。
该研究得到中科院上海有机所吴厚铬研究员的热情帮助 ,特此致谢。
参 考 文 献
1 张龙翔 ,张庭芳 ,李令媛 .生化实验技术和方法 .北京:人民教育出版社 , 1981. 6~ 11
2 X H波钦诺克 .植物生物化学分析方法 .北京: 科学出版社 , 1981. 158~ 164
3 西南农学院 .蔬菜研究法 .郑州:河南科学技术出版社 , 1981. 76~ 135
4  Rih ei Takaha shi, et al. St ruc tures o f g lucomanno- o lig o saccha- rides f rom the hydroly tic products o f
konjac g lucomannan produced by aβ - mannano se st reptomyces sp. Ag r Bio l Chem, 1984, 48( 12): 2943
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5  Tarao Ohtssuki. Studies on reserv e carbohydra tes of four Amo rphopha llus species with special refer-
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6  Takao Mura ta.コンニセクマンナンの生合成に关する研究 (第 1报 )生育にとも存る炭水化物含有量
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