全 文 :西北大学学报(自然科学版)
2013 年 12 月,第 43 卷第 6 期,Dec.,2013,Vol. 43,No. 6
Journal of Northwest University (Natural Science Edition)
收稿日期:2013-04-19
基金项目:陕西省科技厅科研基金资助项目(2010JM3014)
作者简介:冯永辉,男,陕西韩城人,西安医学院副教授,从事天然药物学研究。
蒽酮 -硫酸比色法测定盘龙七中多糖的含量
冯永辉1,曹东凯2,郭耀武3
(1.西安医学院 药学院,陕西 西安 710021;2.陕西省富平县人民医院药剂科,陕西 富平 711700;
3.陕西省食品药品检验所,陕西 西安 710061)
摘要:建立测定盘龙七中多糖含量的方法。以无水葡萄糖为对照品,采用蒽酮 -硫酸比色法,在
584 nm处测定盘龙七中多糖的含量。多糖在 0. 02 ~ 0. 10 mg /mL 范围内呈良好的线性关系,线性
回归方程为 y = 6. 795 0x + 0. 034 2,γ = 0. 999 4( n = 5) ,平均回收率为 101. 06 %,RSD =1. 31%,( n
= 6) 。结论是所用方法快速准确、重现性好,可用于盘龙七中多糖的含量测定。
关 键 词:盘龙七;多糖;含量测定
中图分类号:R932 文献标识码:A 文章编号:1000-274Ⅹ( 2013) 06-0921-06
Determination of polysaccharides in Rhizoma Bergeniae Scopulosae
by Anthrone-sulfuric Acid colorimetric method
FENG Yong-hui1,CAO Dong-kai2,GUO Yao-wu3
(1. College of Pharmacy,Xian Medical University,Xian 710021,China;
2. Fuping Hospital,Pharmacy Department,Fuping 711700,China;
3. Shaanxi Province Institute of Food and Drug Control,Xian 710061,China)
Abstract:To establish a method to determine the content of polysaccharides in Rhizoma Bergeniae Scopulosae. De-
termination of polysaccharides in Rhizoma Bergeniae Scopulosae were tested at 584 nm by Anthrone-sulfuric Acid
colorimetric method in which anhydrous Dextrose was used as standard reference. The linear range of polysaccha-
rides was 0. 02 ~ 0. 10 mg /mL,the linear equation was y = 6. 795 0x + 0. 034 2,the relevance modulus γ = 0. 999
4(n = 5). The average recovery was 101. 06% and RSD =1. 31% (n = 6). Conclusion:this method is rapid,accu-
rate and reproducible. It can be used to determine Rhizoma Bergeniae Scopulosae.
Key words:Rhizoma Bergeniae Scopulosae;polysaccharide;content determination
盘龙七(Rhizoma Bergeniae Scopulosae)为虎耳
草科(Saxifragaceae)岩白菜属(Bergenia)植物秦岭
岩白菜 Bergenia scopulosa T. P. Wang 的干燥根
茎[1]。分布于陕西地区,生长于海拔 2 000 m 的石
灰岩山顶疏林下阴湿石缝中。具有补脾益胃、收涩
固肠、除湿利水、活血等功效,可用于治疗急慢性肠
胃炎、浮肿、崩漏、白带、淋症、痢疾、黄水疮、秃疮、疥
癣等。盘龙七除含有岩白菜素、儿茶素等有效成分
外[2],多糖也是其主要有效成分。迄今为止,关于
其多糖的含量测定尚未见报道。为了更好地研究开
发盘龙七中的多糖成分,笔者建立了蒽酮 -硫酸比
色法测定盘龙七中多糖含量的方法,现报道如下。
1 材料、仪器与试剂
1. 1 主要材料
试验用盘龙七由笔者采自秦岭太白山,经鉴定
为秦岭岩白菜 Bergenia scopulosa T. P. Wang。
1. 2 主要仪器
UV1750 紫外可见分光光度计,由日本岛津公
司生产;DKB-1906 精密恒温水浴箱,由上海精宏 -
北京雷勃恒通科技公司生产;SENO. R 系列旋转蒸
发器,由上海申生科技有限公司生产;SHZ-D(Ⅲ)循
环水式真空泵,由巩义市予华仪器有限责任公司生
产。
1. 3 主要试剂
无水葡萄糖、蒽酮、硫酸、无水乙醇、石油醚。
2 方法与结果
2. 1 制备样品溶液
取盘龙七药材于 55℃干燥 24 h后粉碎过 60 目
筛,称取 10 g 药粉置圆底烧瓶,先以石油醚回流除
去脂质,再以 80%乙醇提取去除单糖、低聚糖、苷类
以及生物碱等干扰成分,然后以 90℃,1 h,1∶ 20 的
料液比在热水浴中回流提取,抽滤收集沉淀物。沉
淀物用加热的蒸馏水溶解后转移到 250 mL 容量瓶
中定容,准确量取定容好的 2 mL 溶液移至 100 mL
容量瓶中定容,即为待测液[3 - 4]。
2. 2 配置标准液
取无水葡萄糖置 105℃干燥至恒重,精密称取
100. 00 mg,加 100 mL蒸馏水,制得 1 mg /mL葡萄糖
标准溶液。
2. 3 含量测定
2. 3. 1 蒽酮试液的配制 精密称取蒽酮 200 mg,
用浓硫酸定容到 100 mL,配成浓度为 0. 2%的蒽酮
硫酸,现用现配[3]。
2. 3. 2 选择检测波长 取试管 A 加水 2. 0 mL,试
管 B加入对照品 2. 0 mL,分别在试管 A,B 中再加
入现配制的蒽酮试剂 8 mL 摇匀,置水浴中加热 10
min,冷水冷却 3 min,静置 10 min,以试管 A 为空
白,用 UV1750 紫外可见分光光度计在 500 ~ 700 nm
处扫描,结果表明,最大吸收波长为 584 nm,被确定
为检测波长。
2. 3. 3 绘制标准曲线 分别取标准液 0. 2,1. 0,
1. 5,2. 0,2. 5 mL等 5 份定容于 25 mL容量瓶中,分
别取定容好的标准液 2 mL,按“2. 3. 2”项下分别加
入蒽酮、水浴加热、冷却、静置,以蒸馏水 1 mL 同上
法作空白对照,在 584 nm 处检测得回归方程 y =
6. 795 0x + 0. 034 2,γ = 0. 999 4 (n = 5)。结果表
明:在 0. 02 ~ 0. 10 mg /mL 范围内,葡萄糖与吸收度
线性关系良好[5 - 8]。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 精密度试验 分别量取对照品液 2 mL(5
份),加入 8 mL蒽酮试液,按“2. 3. 3”项下测定其吸
光度值(A),结果显示:RSD = 4. 65% < 5%(n = 5),
表明精密度良好。
2. 4. 2 稳定性试验 分别量取 5 份供试品溶液 2
mL,加入 8 mL蒽酮试液,按“2. 3. 3”项下操作,每隔
10 min,检测吸光度值(A),结果显示:RSD = 0. 29%
<3%,表明该方法在 1 h 内测定的多糖显色稳定,
所检测多糖含量至少在 1 h内是稳定的。
2. 4. 3 重现性试验 分别量取 5 份供试品溶液 2
mL,加入 8 mL蒽酮试液,按“2. 3. 3”项下操作,检测
吸光度值(A),结果显示:RSD = 2. 49% < 3%(n =
5),表明该实验方法重现性良好。
2. 4. 4 回收率试验 分别量取供试品溶液 6 份,加
入一定量对照品溶液,按“2. 3. 3”项下操作,检测吸
光度值(A),并计算其回收率,测得 RSD = 1. 31%,
见表 1。
表 1 回收率试验
Tab. 1 Test results of recovery rate
样品量
/μg
加入量
/μg
测定值
/μg
回收率
/%
平均回
收率 /%
相对标准
偏差 /%
25. 76 5. 44 31. 36 102. 94
25. 76 5. 62 31. 32 98. 93
25. 76 13. 6 39. 48 100. 88
25. 76 13. 28 39. 25 101. 58
101. 06 1. 31
25. 76 21. 76 47. 64 100. 55
25. 76 22. 18 48. 26 101. 44
2. 5 样品液的测定
分别量取 3 份样品液 2 mL,按“2. 3. 3”项下操
作,分别测得样品液的吸光度值,带入曲线方程,分
别计算出盘龙七中多糖的含量为:1. 14%,1. 17%,
1. 16%。
3 讨 论
3. 1 原 理
本实验采用蒽酮 -硫酸比色法测定盘龙七中多
糖含量的技术方法,在线性回归、重现性、稳定性等
方面效果良好,其测定原理是:多糖与硫酸反应的中
间产物糖醛及其衍生物与蒽酮反应结果所得绿色络
合物颜色的深浅与糖的含量相关,但具体生成的络
合物是什么有待进一步研究。
3. 2 试剂对测定结果的影响
在实验中我们发现,用同样的方法配制蒽酮试
剂,测定结果不稳定。后来采用现用现配蒽酮试剂
分别与放置一天、二天的蒽酮试剂作对比,结果表
明,随着时间的推移,所测值有偏大的现象。但是,
蒽酮试剂采用现用现配,反复实验,误差消除。这与
—229— 西北大学学报(自然科学版) 第 43 卷
蒽酮试剂性质不稳定有关,故在实验过程中,蒽酮试
剂采用现用现配的方法较宜。
4 结 语
盘龙七作为“太白七药”之一,功能补脾利水消
肿,民间广泛应用于脾胃病,多糖是其不可缺少的主
要有效成分,所用蒽酮 -硫酸比色法测得盘龙七中
多糖含量平均值为 1. 16%,标准偏差 σ = 1. 53% (n
= 3),所用方法快速准确、重现性好。盘龙七中多
糖含量的测定为进一步研究开发利用陕西地方药材
盘龙七奠定了一定的基础。
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(编 辑 徐象平
)
(上接第 889 页)
4 结 语
当合成孔径时间较长、机载雷达与舰船目标的
相对运动所产生的距离弯曲较大的情况下,提出一
种校正距离弯曲和距离走动的新方法。采用广义二
阶 Keystone变换校正距离弯曲和距离走动,同时运
用 Radon-Ambiguity变换搜索方位信号的调频率,然
后用 Relax超分辨算法进行散射点的参数估计,最
终获得高分辨的 ISAR 图像。通过点目标仿真和实
测数据处理,验证了本方法的有效性。
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(编 辑 曹大刚)
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