全 文 ：A －提取时间和乙醇浓度及其交互作用 B －料液比与提取时间的交互作用 C －乙醇浓度与提取时间的交互作用
图 3 各因素对 DPPH·清除率影响的等高线图
正交试验设计虽能同时考虑几种因素，寻找最佳因素水平组
合，却不能给出因素和响应值之间明确的函数表达式，即回归方
程，因此无法找到整个区域上因素的最佳组合和响应值的最优
值。Box － Behnken响应面设计法较传统的正交设计相比，能够
更加精确的确定提取工艺的最佳点，对于非线性影响因素的预测
指导性更强，具有较好的推广应用价值。本实验在单因素试验基
础上，建立可信的各因素和响应值的数学模型，运用响应曲面法
对乙醇回流提取筋骨草抗氧化活性成分的工艺进行优化。通过
模型分析，得到的条件为料液比 26 ml /g，乙醇浓度 68%，提取时
间 2． 10 h，此时筋骨草总酚得率为 10． 14 mg /g，总环烯醚萜得率
为 8． 33 mg /g，DPPH·清除率为 82． 96%。通过回归分析和验证
实验证明了该响应面法的合理性和可行性，为筋骨草抗氧化及抗
AD活性成分的寻找提供参考。
参考文献:
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收稿日期:2011-03-27; 修订日期:2011-08-02
基金项目:江西省教育厅科技计划项目(No． GJJ09322) ;
赣南医学院校级科研项目(No． 2008108)
作者简介:吴素珍(1979-) ，女(汉族) ，安徽宿松人，现任赣南医学院讲师，
硕士学位，主要从事中药活性成分研究工作．
硫酸酯化当归多糖抗肿瘤实验研究
吴素珍1，李加林2，陈水亲1，朱秀志1
(1．赣南医学院·基础医学院，江西 赣州 341000; 2．赣南医学院·药学院，江西 赣州 341000)
摘要:目的 研究硫酸酯化当归多糖(SPAS)的抗肿瘤作用。方法 以 S180小鼠模型研究 SPAS 的体内抗肿瘤作用，及对脾
脏、胸腺指数的影响。结果 SPAS对 S180小鼠的肿瘤生长有抑制作用，40，80，160 mg·kg
－1·d －1剂量组抑瘤率分别达到
27． 89%，34． 69%，39． 45%。160 mg·kg －1·d －1剂量组明显增加脾脏指数达到(6． 51 ± 0． 51)mg·g －1;80，160 mg·kg －1·
d －1剂量组明显增加胸腺指数分别达到(2． 82 ±0． 12)，(3． 44 ±0． 26)mg·g －1。结论 SPAS在体内具有显著抗肿瘤活性。
关键词:当归; 硫酸酯化多糖; 抗肿瘤
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 02． 029
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)02-0319-02
多糖是一类重要的生物大分子物质，能提高机体的免疫功能，
具有防衰老、抗氧化、抗癌、抗病毒等作用。硫酸酯化多糖是指糖
羟基上带有硫酸根的多糖，硫酸酯化多糖能够提高多糖的水溶性，
其生物学活性明显强于或不同于非硫酸酯化多糖，很多具有抗病
毒、抗肿瘤、调节免疫系统和抗凝血等生物活性［1］。已有文献报道
硫酸酯化当归多糖具有抗氧化和抗病毒作用［2］。但对于硫酸酯化
当归多糖是否具有抗肿瘤作用还未见报道。本文首次报道了硫酸
酯化当归多糖对小鼠肉瘤 180 移植性肿瘤生长的抑制活性，以期
为硫酸酯化当归多糖的开发利用提供一定的实验基础。
1 材料
1． 1 硫酸酯化当归多糖(sulfated polysaccharide from Angelica
siensis，SPAS)本实验室自制。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 2 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 2 期
1． 2 注射用环磷酰胺 江苏恒瑞医药股份有限公司产品，规格:
0． 2 g /支，批号:09070221，临用前以注射用生理盐水溶解并配成
10 mg /ml。
1． 3 动物及瘤株 健康昆明种成年小鼠，雌雄各半，体质量(20． 0
± 2． 0)g，由赣南医学院实验动物中心提供。小鼠肉瘤 180(S180)
由赣南医学院科研中心细胞室提供。
2 方法
2． 1 体内抗肿瘤实验［3］ 无菌条件下抽取传代 7 d 生长良好的
S180的小鼠腹水，用生理盐水稀释成细胞悬液(细胞数为 1 × 10
7 /
ml) ，每只小鼠右后肢腋皮下接种 0． 2 ml。接种后随机分成生理
盐水阴性对照组(NS 组)、阳性对照组 (环磷酰胺组，20 mg·
kg －1·d －1)、SPAS高剂量组(160 mg·kg －1·d －1)、SPAS中剂量
组(80 mg·kg －1·d －1)、SPAS 低剂量组 (40 mg·kg －1·d －1) ，
每组 10 只。接种 24 h 后开始灌服给药，每日给药 1 次，连续给
药 10 d。最后一次给药后 24 h，处死动物，解剖分离皮下瘤块，称
瘤重，计算各组平均瘤重和抑瘤率。同时摘取胸腺及脾脏，称重
并计算脾指数和胸腺指数。肿瘤增长抑制率(%)=(对照组平
均瘤重﹣实验组平均瘤重)/对照组平肿瘤重 × 100%;脏器指数
=平均脏器重 /平均体质量(mg·g －1)。
2． 2 存活率计算 S180荷瘤小鼠连续给药 10 d，停药后继续饲养，
观察小鼠生存时间及其生命延长率。
生命延长率(%)= (给药组平均生存日 －对照组平均生存
日)/对照组平均生存日 × 100%
2． 3 统计学分析 实验数据以 珋x ± s表示，数据分析采用 SPSS13．
0 统计软件进行单因素方差分析。
3 结果
3． 1 SPAS对小鼠移植性肿瘤 S180的抑制作用 小鼠接种 S180后，
各组均可在第 4 天触及皮下肿瘤，且 SPAS 组肿瘤体积明显小于
阴性对照组。第 11 天阴性对照组肿瘤生长至(1． 47 ± 0． 17)g，
SPAS组与阴性对照组比较，肿瘤明显较轻，均有显著性差异，其
中 SPAS 80，160 mg·kg －1·d －1两个剂量组高于中药疗效评价中
规定的指标(抑瘤率 30%以上)［4］，且随着 SPAS剂量增加，抑瘤
率有逐渐增加的趋势，表明 SPAS的抑瘤效果呈现明显的量效关
系。结果见表 1。
表 1 SPAS对小鼠 S180的抑制作用(珋x ± s)
组别
剂量
C /mg·kg －1·d －1
瘤重
m / g
抑瘤率
(%)
阴性对照 － 1． 47 ± 0． 17 －
环磷酰胺 20 0． 70 ± 0． 15＊＊ 52． 38
SPAS 40 1． 06 ± 0． 19＊＊ 27． 89
80 0． 96 ± 0． 19＊＊ 34． 69
160 0． 89 ± 0． 21＊＊ 39． 45
与对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01;n = 10
3． 2 SPAS对 S180荷瘤小鼠免疫器官的影响 结果显示，环磷酰
胺组小鼠脾脏和胸腺重量减轻，脾脏指数和胸腺指数明显减少
(P ＜ 0． 01)。SPAS高剂量组能显著增加 S180小鼠脾脏指数(P ＜
0． 01) ，中剂量组和高剂量组能明显增加胸腺指数(P ＜ 0． 01)。
结果见表 2。
表 2 SPAS对 S180荷瘤小鼠免疫器官的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C /mg·kg －1·d －1
脾脏指数
C /mg·g － 1
胸腺指数
C /mg·g － 1
阴性对照 － 5． 85 ± 0． 30 2． 54 ± 0． 19
环磷酰胺 20 4． 66 ± 0． 16＊＊ 1． 70 ± 0． 11＊＊
SPAS 40 5． 90 ± 0． 31 2． 53 ± 0． 20
80 5． 83 ± 0． 52 2． 82 ± 0． 12＊＊
160 6． 51 ± 0． 51＊＊ 3． 44 ± 0． 26＊＊
与对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01;n = 10
3． 3 SPAS对 S180腹水瘤小鼠存活期的影响 SPAS的各个剂量组
都能够显著延长 S180腹水瘤小鼠的存活天数，与荷瘤对照组比较
有显著差异(P ＜ 0． 01) ，且随浓度增加生命延长率有增大的趋
势。结果见表 3。
表 3 SPAS对 S180腹水瘤小鼠存活期的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C /mg·kg －1·d －1
存活天数
t /d
生命延长率
(%)
荷瘤对照 － 12． 00 ± 0． 74 －
环磷酰胺 20 13． 50 ± 1． 08＊＊ 12． 50
SPAS 40 14． 70 ± 0． 95＊＊ 22． 50
80 15． 70 ± 0． 95＊＊ 30． 83
160 16． 20 ± 1． 40＊＊ 35． 00
对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01;n = 10
4 讨论
文献报道硫酸酯化多糖可以通过调节机体免疫功能、抑制细
胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制肿瘤组织血管生成等作用，从而抑制
肿瘤的生长［5 ～ 7］。本实验结果初步说明，硫酸酯化当归多糖能显
著抑制小鼠实验性肿瘤的生长，虽然硫酸酯化当归多糖对肿瘤生
长的抑制作用不及环磷酰胺，但能显著增加荷瘤小鼠胸腺指数和
脾脏指数，改善荷瘤小鼠的非特异性免疫功能，而环磷酰胺抑瘤
作用虽然十分明显，抑瘤率达 52． 38%，但对小鼠免疫器官影响
较大，脾脏、胸腺明显萎缩，脾脏指数和胸腺指数下降，其毒副作
用明显高于硫酸酯化当归多糖各剂量组，同时硫酸酯化当归多糖
能明显延长 S180腹水瘤小鼠生命存活期。硫酸酯化当归多糖作
为一种潜在的抗肿瘤药物，其作用机理有待进一步研究。
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 2