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当归对血虚小鼠抗疲劳作用的研究



全 文 : 药理药化
收稿日期:2007-07-11; 修订日期:2007-11-12
基金项目:国家中医药管理资助项目(No.04-05ZP08)
作者简介:龚梦鹃(1983-),女(汉族),江西九江人 ,现任广东药学院助教 ,
硕士学位 ,主要从事中药神经药理实验方法研究工作.
当归对血虚小鼠抗疲劳作用的研究
龚梦鹃 1 , 刘新民2 , 王立为 2
(1.广东药学院 , 广东 广州 510006;
2.中国医学科学院·中国协和医科大学药用植物研究所 , 北京 100094)
摘要:目的 研究当归对血虚小鼠的抗疲劳作用。方法 通过环磷酰胺造小鼠血虚模型 , 给予当归水煎液 2周后 ,对血虚
小鼠体重 、外周血象 、游泳时间 、运动后血乳酸(LAC)和尿素氮(BUN)的影响。结果 当归水煎液能明显增加血虚小鼠体
重 、升高红细胞总数(RBC)、白细胞总数(WBC)和血红蛋白含量(HGB);6 g/(kg· d)的当归水煎液组还能显著延长游
泳时间 、降低运动后的 LAC及 BUN。结论 当归水煎液能提高血虚小鼠的抗疲劳作用。
关键词:当归; 血虚; 抗疲劳
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2008)03-0533-02
StudyontheAnti-fatigueFunctionofAngelicasinensis(Oliv.)DielsontheBlood-de-
ficientModelMice
GONGMeng-juan1 , LIUXin-min2 ,WANGLi-wei2
(1.GuangdongPharmaceuticalUniversity, GuangdongGuangzhou510006, China;2.InstituteofMedicinal
PlantDevelopment, ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalColege, Beijing100094,
China)
Abstract:ObjectiveToobservetheanti-fatigueeffectofAngelicasinensis(Oliv.)Dielsontheblood-deficientmodelmice.
MethodsAftertheblood-deficientmicemodelwasinducedbyinjectingcyclophosphamide, miceweregivenAngelicasinensis
(Oliv.)Dielsfortwoweeks, thenAngelicasinensis(Oliv.)dielswasestablishedwithforcedswimmingtestandthechangesof
bodyweight, levelsofRBC, WBC, HGB, exhaustiveswimmingtime, lacticacid, ureanitrogenwereobserved.ResultsAngelica
sinensis(Oliv.)dielscouldincreasebodyweightandobviouslypromotethelevelsofRBC, WBC, HGBinblood-deficientmodel
mice.Theswimmingtimeofmicein6 g/(kg· d)groupwassignificantlyprolongedcomparedwithmodelgroup.Thelevelsof
bloodlacticacidandureanitrogenweredecreased.ConclusionAngelicasinensis(Oliv.)Dielshasanti-fatigueeffectonthe
blood-deficientmodelmice.
Keywords:Angelicasinensis(Oliv.); Blood-deficient; Anti-fatigue
  疲劳属中医 “虚损”范畴 , 中医认为精(津)血为体力产生的
物质基础 , 它的生化和运行与中医脾 、肾 、肝 、心有密切关系 ,人的
耐力亦由此而生。 尽快消除疲劳 ,提高机体体质 ,中医药有很大
优势。当归 Angelicasinensis(Oliv.)Diels的干燥根具有补血活
血 、调经止痛 、润燥滑肠等功效。本文采用化学药物损伤法造成
小鼠血虚模型 , 研究当归对血虚模型小鼠的影响。
1 器材
1.1 药品与试剂 当归 Angelicasinensis(Oliv.)Diels, 生品 ,购
于北京崇光饮片厂 , 产地甘肃 , 取当归 500 g, 加 10倍量的水 ,开
始煎煮。第 1次 1 h,第 2次 30 min, 第 3次 30 min。合并煎液 ,
过滤蒸发浓缩 , 然后放入烘箱烘干成粉末。最终 1 g当归粉末相
当于原药材 3.50g。
全血乳酸试剂盒 , 南京建成生物工程研究所产品 , 批号
20050615;尿素氮试剂盒 , 南京建成生物工程研究所产品 , 批号
20050615;环磷酰胺 ,上海华联制药有限公司产品 ,批号 031205。
1.2 仪器 SWELAB血球计数仪 , BouleMedicalAB公司产品;瑞
典 stockholmUV757CRT紫外可见分光光度计 ,上海精密科学仪器
有限公司产品。
1.3 动物 KM种小鼠 , 雌雄各半 , 体重(22±2)g, 由中国医学科
学院动物中心提供 , 合格证号:SCXK(京)2004-0001。
2 方法
小鼠自然饲养 3~ 4 d, 随机分成 5组:正常对照组 、血虚模型
组 、当归水煎液低剂量组 1.5 g/kg(按生药量计)、当归水煎液中
剂量组 3 g/kg、当归水煎液高剂量组 6 g/kg,每组 12只。给药组
按给药剂量连续灌胃 14 d, 1次 /d, 对照组和模型组则灌胃给予
相等体积的生理盐水。除正常对照组外 ,其余 4组小鼠于第 5 d
开始给药 1 h后 ,分别经腹腔注射环磷酰胺 100 mg/kg, 连续注射
3 d[ 1] 。正常对照组同时注射等量的生理盐水。
2.1 外周血象测定 于末次给药后 30 min, 眼眶取血 , 测定小鼠
红细胞总数(RBC)、白细胞总数(WBC)和血红蛋白含量(HGB)。
2.2 小鼠负重游泳实验 末次给药后 30 min后 , 鼠尾根部负荷
6%体重的铅丝 ,置于游泳箱中游泳(水深 35cm, 水温 25℃), 记
录小鼠自游泳开始至死亡的时间。以小鼠 10 s内无法再浮出水
面为依据 ,来判断动物死亡 [ 2 , 3] 。
2.3 血乳酸(LAC)的测定 末次给药 30 min后小鼠尾部负重
(体重 4%), 然后将其放入水深 35 cm, 水温(30±0.5)℃游泳
箱中游泳 10 min。休息 15min后 ,用毛细玻璃管眼球采血 20 μl,
用全血乳酸测定试剂盒进行血乳酸测定。
2.4 血尿素氮(BUN)的测定 末次给药 30 min后 , 将小鼠放入
水深 35cm, 水温(30.0±0.5)℃游泳箱中不负重游泳 90 min, 休
息 60min后 ,拔眼球采血 0.5 ml(不加抗凝剂),依照血清尿氮素
试剂盒说明书操作。于 520 nm下 , 30min内测定各管吸收度 , 换
算为血尿素氮含量 ,依照试剂盒说明书操作测定 BUN含量。
3 结果
3.1 体征与体重 造模小鼠非常行动迟缓 ,眼睛暗淡无光 、血色
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.3 时珍国医国药 2008年第 19卷第 3期
暗红。正常对照组和给药组小鼠活动灵活 , 皮毛光泽 , 鼠尾
粉红。
当归水煎液对血虚小鼠体重的影响表 1所示 , 给药 7 d后 ,
各组间体重仍无差异。但第 14天 ,与正常组比较 , 模型组小鼠体
重明显下降(P<0.001);与模型组比较 , 低 ,中 , 高剂量组动物的
体重均有显著性增加(P<0.05, P<0.01)。
表 1 当归水煎液对血虚小鼠体重的影响( x±s)
组别 n给药前 给药后 7 d 给药后 14d
体重 /g
给药前 给药后 7d 给药后 14d
正常 12 12 10 20.58±0.85 26.86±0.80 33.09±1.78***
模型 12 12 10 21.21±1.15 27.52±1.60 27.50±2.14
低剂量 12 12 10 21.18±0.76 27.55±1.48 29.77±1.99*中剂量 12 12 10 20.89±1.17 26.84±1.74 30.86±2.05**
高剂量 12 12 10 20.58±1.09 26.69±2.35 30.19±1.97**
  与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001
3.2 当归水煎液对血虚小鼠 RBC, WBC和 HGB的影响 血象的
改变是血虚最明显的症状。当归活血补血 ,能明显改善血虚小鼠
的外周血象。结果见表 2。
表 2 当归水煎液对血虚小鼠血象的影响( x±s)
组别 RBC/×1012· L-1 WBC/×1012· L-1 HGB/g· L-1
正常 7.28±0.87** 6.82±1.63** 158.18±19.76**
模型 5.91±0.54 4.09±0.90 123.56±19.56
低剂量 7.65±0.42*** 5.71±1.66* 158.30±7.07**
中剂量 7.35±0.42*** 6.70±1.72** 154.60±13.31**
高剂量 7.11±0.53*** 5.88±1.53* 152.36±8.36**
  与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001
从表 2可看出 , 与正常对照组比较 ,模型组小鼠血象显著降
低(P<0.01), 说明造血虚模型成功;与模型组比较 , 当归水煎液
低 、中 、高剂量组能显著升高血虚小鼠 RBC水平(P<0.001), 当
归水煎液中剂量组能显著升高血虚小鼠的 WBC水平 (P<
0.01), 低 、高剂量组能明显升高 WBC水平(P<0.05);当归水煎
液低 、中 、高剂量组水煎液组均能显著升高血虚小鼠 HGB水平
(P<0.01)。
3.3 当归水煎液对血虚小鼠游泳时间的影响 实验结果如表 3
所示 , 血虚小鼠体力下降 , 与正常组比较 , 游泳时间明显缩短。
当归水煎液高剂量组能显著延长血虚小鼠游泳时间 , 且与模型
组比较 , 有非常显著性差异(P< 0.01)。
表 3 当归水煎液对血虚小鼠游泳时间的影响( x±s) s
组别 游泳时间
正常 451.96±140.21***
模型 202.03±89.36
低剂量 309.52±150.32
中剂量 353.09±187.51
高剂量 448.88±200.38**
  与模型组比较 , **P<0.01, ***P<0.001;n=10
3.4 当归水煎液对血虚小鼠 LAC的影响 LAC是评价剧烈运动
时机体疲劳程度最常用的生化指标。当归水煎液对小鼠负重
4%游泳 10 min,休息 15 min后 LAC的影响如表 4所示 , 与正常
组对比 , 血虚小鼠在游泳后 LAC显著性增加(P< 0.01)。 与模
型组比较 , 当归水煎液高剂量组能明显降低血虚小鼠运动后的
LAC(P<0.05)。
表 4 当归水煎液对血虚小鼠 LAC的影响( x±s)  mmol· L-1
组别 LAC
正常 5.17±0.13**
模型 6.38±1.03
低剂量 5.59±1.28
中剂量 5.56±1.25
高剂量 5.44±0.59*
  与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
3.5 当归水煎液对血虚小鼠 BUN的影响 BUN与机体机能 、疲
劳程度以及负荷量的大小呈密切正相关 ,因此可作评定运动量的
指标 [ 4] 。当归水煎液对小鼠不负重游泳 90 min, 休息 60 min后
BUN的影响如表 5所示 , 与正常组对比 , 血虚小鼠在游泳后 BUN
显著性增加(P< 0.01)。与模型组比较 ,当归水煎液高剂量组能
明显降低运动后的 BUN(P<0.05)。
 表 5 当归水煎液对血虚小鼠 BUN的影响( x±s)  mmol· L-1
组别 BUN
正常 6.85±1.76**
模型 9.07±2.16
低剂量 8.76±0.98
中剂量 8.28±1.57
高剂量 7.49±1.10*
  与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
4 讨论
中医认为 , 经脉失于濡养 , 心血不足为血虚。 当归具有补血
活血之功效。本研究证明当归水煎液能明显改善环磷酰胺所致
血虚小鼠的体征 , 并使小鼠体重增加 , 同时明显升高血虚小鼠
RBC, Hb, WBC水平 , 即具有补血作用。
血虚是慢性疲劳综合征的病机之一。中华人民共和国保健
食品检验和评价技术规范(试行)2004版中缓解体力疲劳功能检
测方法中指出:负重游泳实验结果阳性 , 且血乳酸 、血尿素氮 、肝
糖原 /肌糖元三项生化指标中任两项指标阳性 ,可判定该受试样
品具有缓解体力疲劳功能的作用。运动耐力的提高是抗疲劳能
力加强的表现 , 游泳时间的长短可以反映动物运动疲劳的程
度 [ 5] 。在肌肉剧烈收缩时 , 因供氧不足单靠有氧氧化不能满足
能量的要求 , 必须加速糖酵解的供能过程。在无氧情况下 , 肌肉
在通过糖酵解反应得到能量的同时 , 也产生了大量的乳酸 , 乳酸
解离生成的氢离子占肌肉中酸性物质解离的 85%以上。乳酸的
增加使肌肉中氢离子浓度上升 , pH下降 ,进而引起一系列生化变
化 ,是导致疲劳的重要原因 [ 6] , 本实验结果表明 , 6 g/(kg· d)高
剂量当归水煎液能显著延长小鼠游泳时间和降低运动后小鼠的
乳酸累积。机体在长时间运动不能通过糖 、脂肪分解代谢获得足
够的能量时 , 蛋白质和氨基酸代谢加强 , 从而产生血尿素氮
(BUN),血清尿素氮的含量与运动呈直线关系 , 其在体内的蓄积
是引起运动性疲劳的一个重要原因。本实验结果表明 , 6 g/(kg
· d)高剂量当归水煎液能显著降低血清尿素氮含量。本实验证
实了当归提高血虚小鼠的抗疲劳能力。
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 3期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.3