全 文 ：２０１５年６月 甘　肃　农　业　大　学　学　报 第５　０卷
第３期９２～９６ ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＧＡＮＳＵ　ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ 双 月 刊
ＰＥＧ６０００渗透胁迫对鸟巢蕨生理指标的影响
梁晓华１，２，周晓俊１，徐成东１，２
（１．楚雄师范学院化学与生命科学系，云南 楚雄　６７５０００；２．滇中高原生物资源开发与
利用研究所，云南 楚雄　６７５０００）
摘要：研究在聚乙二醇６０００（ＰＥＧ６０００）室内模拟干旱条件下，比较不同浓度ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨的叶片相
对含水量、可溶性糖含量、过氧化物酶活性、丙二醛含量以及游离脯氨酸量５个生理指标的影响．结果表明：鸟巢蕨
叶片相对含水量与胁迫程度呈负相关；复水后各浓度处理下的叶片含水量不能够恢复．丙二醛含量、游离脯氨酸量
与胁迫程度呈正相关．复水后各浓度处理下的丙二醛含量不能够恢复，游离脯氨酸含量恢复到对照水平，可溶性糖
均随着胁迫的时间延长而累积，２０％ 浓度胁迫１２ｈ时达到峰值１０５．３１ｍｇ／ｇ，是参与鸟巢蕨渗透调节的主要物质
之一，过氧化物酶活性呈先升高后降低的变化趋势，复水后降低至与对照组相近水平；说明鸟巢蕨逆境条件下，过
氧化物酶上升到一个较高水平，减轻膜伤害程度，但随着膜伤害程度加深，过氧化物酶不能够在发挥作用．综合各
项生理指标的分析认为，鸟巢蕨抗旱能力较差．
关键词：鸟巢蕨；ＰＥＧ胁迫；室内模拟；生理指标
中图分类号：Ｑ　９４５．１７　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００３－４３１５（２０１５）０３－００９２－０５
第一作者：梁晓华（１９６４－），女，教授，主要从事植物生理和植物有效成分分析研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｘｈ＠ｃｘｔｃ．ｅｄｕ．ｃｎ
通信作者：徐成东，男，教授，博士，主要从事植物分类与植物生态学研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｔｏｗｎ＠ｃｘｔｃ．ｅｄｕ．ｃｎ
基金项目：国家自然科学基金项目“云南产铁角蕨植物对水分和光照的生理响应”（３１２６００９５）．
收稿日期：２０１４－０６－２７；修回日期：２０１４－１２－３１
Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＰＥＧ６０００ｏｓｍｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｎｄｅｘｅｓ
ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．
ＬＩＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｈｕａ１，２，ＺＨＯＵ　Ｘｉａｏ－ｊｕｎ１，ＸＵ　Ｃｈｅｎｇ－ｄｏｎｇ１，２
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈｕｘｉｏｎｇ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｕｘｉｏｎｇ　６７５０００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｂｉｏ－ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｙｕｎｎａｎ，Ｃｈｕｘｉｏｎｇ　６７５０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｄｏｏｒ　ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｄｒｏｕｇｈｔ　ｗｉｔｈ　ＰＥＧ６０００，ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｅｄ
ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｏｓｍｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｆ　ＰＥＧ６０００ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｗａｔｅｒ
ｃｏｎｔｅｎｔ，ｓｏｌｕｂｌｅ　ｓｕｇａｒ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＰＯＤ）ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｆｒｅｅ　ｐｒｏｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ
ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ　ｌｅａｖｅｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｗａｔｅｒ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｌｅａｆ　ｗａｓ
ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｔｒｅｓｓ　ｌｅｖｅｌ．Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ＰＥＧ６０００ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ　ＲＷＣ
ｗｏｕｌｄ　ｎｏｔ　ｒｅｃｏｖｅｒ　ｅｖｅｎ　ａｆｔｅｒ　ｗａｔｅｒｉｎｇ．Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｆｒｅｅ　ｐｒｏｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｂｏｔｈ　ｐｏｓｉ－
ｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｔｒｅｓｓ　ｌｅｖｅｌｓ．Ａｆｔｅｒ　ｗａｔｅｒｉｎｇ，ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｅａｃｈ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｏｕｌｄ　ｎｏｔ
ｒｅｓｔｏｒｅ，ｗｈｉｌｅ　ｆｒｅｅ　ｐｒｏｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｒｅｔｕｒｎｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｌｅｖｅｌｓ．Ｓｏｌｕｂｌｅ　ｓｕｇａｒｓ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｔｒｅｓｓ　ｔｉｍｅ，
ｗｈｉｃｈ　ｒｅａｃｈｅｄ　ｔｏ　ｐｅａｋ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　１０５．３１ｍｇ／ｇ　ａｆｔｅｒ　ｓｔｒｅｓｓｅｄ　ｕｎｄｅｒ　２０％ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　１２ｈｏｕｒｓ，ａｎｄ　ｉｔ
ｗａｓ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｏｓｍｏｔｉｃ　ａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ
ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｆｉｒｓｔ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｌｏｗｅｒｅｄ　ｃｌｏｓｅｌｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｆｔｅｒ　ｗａｔｅｒｉｎｇ．Ｉｔ　ｗａｓ　ｉｎ－
ｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ａｄｖｅｒｓｉｔｙ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＰＯＤ）ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｏ　ａ　ｈｉｇｈ－
DOI:10.13432/j.cnki.jgsau.2015.03.012
第３期 梁晓华等：ＰＥＧ６０００渗透胁迫对鸟巢蕨生理指标的影响
ｅｒ　ｌｅｖｅｌ　ｔｏ　ｒｅｌｉｅｖｅ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｄａｍａｇｅ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＰＯＤ）ｃｏｕｌｄ　ｎｏｔ　ｃｏｎｔｉｎｕｅ　ｔｏ　ｐｌａｙ　ａ　ｒｏｌｅ　ｗｈｅｎ
ｔｈｅ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｄａｍａｇｅ　ｇｅｔｔｉｎｇ　ｗｏｒｓｅ．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｎｄｅｘｅｓ，ｗｅ　ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ　ｔｈａｔ
ｔｈｅ　ｄｒｏｕｇｈｔ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ　ｗａｓ　ｗｅｅｋ．Ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｃｏｕｌｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｔｈｅｏｒｅｔｉ－
ｃａｌ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｍｏｉｓｔｕｒｅ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ；ＰＥＧ　ｓｔｒｅｓｓ；ｉｎｄｏｏｒ　ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ；ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ
　　自２０世纪９０年代开始，中国蕨类植物的研究
逐渐由植物分类发展演变为对观赏蕨类的开发利
用．观赏植物的发展经历了一个由观花到观叶的过
程．目前，观花植物栽培技术已经较为成熟，品种也
很丰富，但一些观叶的蕨类植物则刚刚被认识、接
受，市场前景广阔．我国虽然拥有较为丰富的观赏蕨
类资源，但园林应用的种类及其应用方式都还十分
缺乏，国内现在的蕨类市场开发处于初创阶段．因
此，对观赏蕨类植物研究具有一定的经济效益和生
态意义．鸟巢蕨［Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．］，
又名巢蕨、山苏花、王冠花，为铁角蕨科鸟巢蕨属多
年生阴生草本植物［１］．鸟巢蕨可作为观赏植物栽培，
尤其是近年来用作切叶发展迅速，栽培面积不断扩
大．鸟巢蕨原产于热带亚热带地区，在我国广东、广
西、海南和云南等地均有分布，在亚热带其他地区也
有分布．其常成大丛附生于雨林或季雨林内树干上
或林 下 岩 石 上 或 灌 丛 基 部，适 生 海 拔 １００～
１　９００ｍ［１］．
聚乙二醇（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ，ＰＥＧ）是模拟干
旱胁迫最好的材料［３］．由于ＰＥＧ的性质特殊，在很
多行业中都有广泛的用途［４］．Ｒａｗｌｏｒ［５］用随机标记
的 １４Ｃ对ＰＥＧ进行了测定，认为ＰＥＧ１０００、４０００～
２００００能模拟干旱逆境的原因是其可阻塞植物的输
导组织．Ｋａｕｆｍａｎｎ和Ｅｃｋａｒｄ ［６］对ＰＥＧ反复研究
后得出的结论是，ＰＥＧ６０００诱导水份逆境所得的效
果与将土壤逐步干旱是一样的，唯ＰＥＧ４００有毒负
作用．聚乙二醇６０００（ＰＥＧ６０００）模拟干旱胁迫环境
的研究越来越广泛，因本身不易自由通过植物组织
细胞壁，不易渗入活细胞内，不会给种子内增加营养
物质，无毒，但能使活细胞缓慢吸水等优点，而常被
作为干旱胁迫的渗透胁迫剂［４］．
我国许多地区干燥少雨，易受到干旱胁迫的影
响，干旱胁迫是植物逆境最普遍的形式，它是影响植
物正常生长发育的主要非生物因素之一［７］，能够引
起植物水分亏缺，进而影响植物的形态、光合和生理
生化指标的变化［８］．掌握其栽培过程中的水分生理
尤为重要．因此，对植物的抗旱性及干旱胁迫下的生
理表现进行相关研究，有利于了解植物的干旱适应
机制，探求植物抗旱的适应调控措施，对充分发挥森
林的生态效益具有重要的作用，并为今后绿化应用
提供科学依据．
ＰＥＧ渗透胁迫对植物生理指标的影响的研究
很多，但对蕨类植物的研究较少，而对鸟巢蕨的研究
尚未发现研究报道．因此，本研究拟通过ＰＥＧ６０００
室内模拟干旱－复水的方法［９－１０］，对鸟巢蕨进行干旱
处理，研究干旱胁迫对其叶片相对含水量、可溶性糖
含量、过氧化物酶活性、丙二醛含量、游离脯氨酸量
等相关生理指标的影响，探究鸟巢蕨适应生长的水
分环境，寻求水分环境对鸟巢蕨生理指标的影响规
律，以对鸟巢蕨的引种栽培、开发利用和科学研究提
供科学依据与参数．
１　材料与方法
１．１　试验材料
供试材料鸟巢蕨于２０１３年３月１日购买于云
南省楚雄市龙江公园，选择长势一致的１２株苗盆
栽，盆规格统一为１６ｃｍ×１６ｃｍ，基质配比为腐殖
土∶蛭石∶沙＝５∶１∶１［９］，置于烘箱内６０～８０℃烘烤
２ｈ．均匀分配于每个花盆，装置花盆１４ｃｍ处．室内
养护，进行正常的水分管理．
１．２　试验方法
１．２．１　试验设计　２０１３年４月将盆栽苗木按照叶
面积均匀分成４组，每组３株．４月１８日将根系用
清水小心洗净泥土，移入水中进行无土栽培．待生长
稳定后，再将其移入不同浓度的ＰＥＧ６０００溶液中对
苗木进行模拟干旱胁迫处理．利用不同浓度的
ＰＥＧ６０００溶液进行模拟干旱胁迫处理．设３个ＰＥＧ
浓度为处理梯度：１０％、２０％、３０％，以蒸馏水为对
照［９］．处理开始后，分别于０、４、８、１２、１６、２０、２４、２８ｈ
３９
甘 肃 农 业 大 学 学 报 ２０１５年
取非当年生的成熟叶片进行生理指标测定，３次重
复．胁迫２８ｈ后复水，并于复水７２ｈ后来采样测定
复水情况［９］．
１．２．２　生理指标的测定　叶片相对含水量（ＲＷＣ）
采用烘干法［１０］：迅速剪取植物材料，电子天平称取
鲜质量（ＦＷ）．放入烘箱内，１０５℃杀青１０ｍｉｎ，然后
把烘箱的温度降到８０℃左右，烘至恒质量．放入干
燥器中冷却至室温，称其干质量（ＤＷ）．称过干质量
后浸入水中，数小时后取出，用吸水纸吸干表面水
分，立即称质量；重复浸泡一段时间后，再次取出，吸
干表面水分，称鲜质量，直到２次称质量的结果基本
相等，最后的结果即为饱和鲜质量（ＳＦＷ）．按公式
计算相对含水量：
ＲＷＣ％ ＝（ＦＷ－ＤＷ）／（ＳＦＷ－ＤＷ）×１００％
可溶性糖含量采用蒽酮比色法［９］：取鲜叶
０．５ｇ，用蒸馏水研磨后于沸水中浸提 ３ 次，用
０．５ｍＬ蒽酮乙酸乙酯剂和５ｍＬ浓硫酸显色，用
７２２Ｓ型可见分光光度计在６３０ｎｍ处比色测定．
过氧化物酶（ＰＯＤ）活性采用愈创木酚法［１０］：提
取粗酶液，测定酶活性，取光径１ｃｍ比色杯２只，于
１只中加入反应混合液３ｍＬ，ＫＨ２ＰＯ４１ｍＬ，作为
较零对照，另１只中加入反应混合液３ｍＬ，上述酶
液１ｍＬ，立即开启秒表计时，于分光光度计４７０ｎｍ
波长下测量Ｄ值，每隔１ｍｉｎ读数１次．以每分钟Ｄ
变化值表示酶活性大小，即以ΔＡ４７０／［ｍｉｎ．鲜质量
ｇ］表示．
丙二醛（ＭＤＡ）含量采用硫代巴比妥酸法［１１］：
剪取各不同处理的植株叶片中部０．５ｇ，放人研钵
中，加入５％三氯乙酸（ＴＣＡ）２．０ｍＬ，少量石英砂
研磨，研磨液倒人离心管中．另取３．０ｍＬ的 ＴＣＡ
用来 清 洗 研 钵，清 洗 液 也 倒 入 离 心 管 中，在
３　０００ｒ／ｍｉｎ的离心机中离心１０ｍｉｎ．分别取上清液
２ｍＬ各３份，各放人１０ｍＬ管中，每管中加入２ｍＬ
０．６７硫代巴比妥酸（ＴＢＡ），混合后在１００℃水浴中
煮沸 ３０ ｍｉｎ．反应溶液冷却后 在 离 心 机 中 以
３　０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，最后分别在４５０，５３２和
６００ｎｍ处测定上清液的吸光度．按公式：Ｃ＝６．４５
×（Ａ５３２－Ａ６００）－０．５６Ａ４５０，计算 ＭＤＡ含量．
游离脯氨酸量采用磺基水杨酸法［１１］：取鲜叶
０．５ｇ，用３％磺基水杨酸浸提，２．５ｍＬ酸性茚三酮
显色，５ｍＬ甲苯萃取，用７２２Ｓ型可见分光光度计在
５２０ｎｍ处比色测定．
１．３　数据处理
采用 Ｍｃｒｏｓｏｆｔ　Ｅｘｃｅｌ　２００３和ＳＰＳＳ　２０．０对数
据进行统计分析．
２　结果与分析
２．１　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨叶片相对含水量的影
响
由图１可知，不同ＰＥＧ浓度处理下，鸟巢蕨叶
片含水量均随着处理时间的延长而降低，下降幅度
随胁迫浓度的提高而变大．叶片相对含水量与胁迫
程度呈负相关（ｒ＊ ＝０．７０６）．在处理４ｈ时，１０％
ＰＥＧ处理叶片含水量为８４．１５％，与对照差异不显
著（Ｐ＝０．０６），而２０％和３０％胁迫下的叶片含水量
分别为８０．５４％（Ｐ＝０．０４）和７６．６２％（Ｐ＝０．０２），
与对照差异显著．胁迫２８ｈ时３０％、２０％和１０％浓
度处理的相对含水量分别为对照的 ３９．２０％、
４６．８７％和５０．３７％．复水后各浓度处理下的叶片含
水量未恢复．
图１　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨叶片相对含水量的影响
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＰＥＧ　ｏｓｍｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｌｅａｆ　ｒｅｌａｔｉｖｅ
ｗａｔｅｒ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．
２．２　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨叶片可溶性糖含量的
影响
由图２可知，在ＰＥＧ胁迫下，鸟巢蕨可溶性糖
的含量总体呈现先升后降的趋势，但每个处理水平
下达到峰值的时间不同．１０％ＰＥＧ 胁迫下２４ｈ时
达到最大值，为对照的２６８．６８％．２０％ＰＥＧ胁迫下，
糖含量在上升过程中出现２次波峰，分别在１２ｈ，为
对照的２９５．９８％，２４ｈ，为对照的２２６．０９％．３０％
ＰＥＧ胁 迫 下 ，在８ｈ时 达 到 最 大 值 ，为 对 照 的
４９
第３期 梁晓华等：ＰＥＧ６０００渗透胁迫对鸟巢蕨生理指标的影响
图２　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨可溶性糖含量的影响
Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＰＥＧ　ｏｓｍｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｌｅａｆ
ｓｏｌｕｂｌｅ　ｓｕｇａｒ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．
２９０．２６％．复水后１０％和２０％胁迫的糖含量仍然高
于对照，分别为对照的１９６．６％和１５７．７１％．３０％梯
度的降为对照的８８．１２％．
２．３　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨过氧化物酶活性的
影响
由图３可知，随着ＰＥＧ浓度的升高和胁迫时间
的延长，过氧化物酶活性呈先升高后降低的变化趋
势．复水后，过氧化物酶活性降低至与对照组相近水
平．１０％ＰＥＧ 胁迫下２４ｈ达到最大值，为对照的
４５０％．２０％ＰＥＧ 胁迫下２０ｈ达到最大值，为对照
的８３３．３％．３０％ＰＥＧ 胁迫下１２ｈ达到最大值，为
对照的５３３．３％．复水后，１０％ＰＥＧ胁迫的过氧化物
酶含量仍然高于对照，为对照的１３３．３％．２０％ＰＥＧ
胁迫的过氧化物酶含量与对照相同．３０％ＰＥＧ胁迫
的过氧化物酶含量低于对照，为对照的６６．７％．
２．４　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨丙二醛含量的影响
由图４可知，不同ＰＥＧ浓度处理下，鸟巢蕨丙
二醛含量均随着处理时间的延长而上升，上升幅度
随胁迫浓度的提高而变大．丙二醛含量与胁迫程度
图３　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨叶片过氧化物酶活性的影响
Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＰＥＧ　ｏｓｍｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ
ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ　ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．
呈正相关（ｒ＊＝０．７４０）．复水后各浓度处理下的丙二
醛含量未恢复．ＰＥＧ胁迫２４ｈ时，１０％ＰＥＧ胁迫的丙
二醛含量为对照的４１８．７％，２０％ＰＥＧ胁迫的丙二醛
含量为对照的５８９．７％，３０％ＰＥＧ胁迫的丙二醛含量
为对照的６５４．２％．复水后，１０％ＰＥＧ胁迫的丙二醛
含量有下降的趋势，仍高于对照，为对照的３８２．１％．
２０％、３０％ＰＥＧ胁迫下丙二醛含量保持上升趋势．
图４　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨丙二醛含量的影响
Ｆｉｇ．４　Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＰＥＧ　ｏｓｍｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｌｅａｆ
ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ
ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．
２．５　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨游离脯氨酸含量的
影响
由图５可知，不同ＰＥＧ浓度处理下，鸟巢蕨叶
内游离脯氨酸含量均随着处理时间的延长而上升，
上升幅度随胁迫浓度的提高而变大．游离脯氨酸含
量与胁迫程度呈正相关（ｒ＊＊＝０．９９３）．复水后各浓
度处理下的游离脯氨酸含量恢复到对照水平．在处
理４ｈ时，１０％、２０％和３０％浓度ＰＥＧ胁迫的游离
脯氨酸含量分别为对照的 １１６．３％、１２０．２％、
１３９．９％．胁迫２８ｈ时１０％、２０％和３０％浓度ＰＥＧ
图５　ＰＥＧ渗透胁迫对鸟巢蕨游离脯氨酸含量的影响
Ｆｉｇ．５　Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＰＥＧ　ｏｓｍｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｌｅａｆ
ｆｒｅｅ　ｐｒｏｌｉｎｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｏｔｔｏｐｔｅｒｉｓ
ｎｉｄｕｓ（Ｌ．）Ｊ．Ｓｍ．
５９
甘 肃 农 业 大 学 学 报 ２０１５年
胁迫的游离脯氨酸含量分别为对照的３１３．３％、
３４２．９％和３７０．６％．复水后各浓度胁迫的游离脯氨
酸含量恢复到与对照相近水平．
３　讨论与结论
叶片相对含水量的大小可以反映植物的渗透调
节能力，是水分缺失条件下植物是否维持正常生长
的重要指标［１０］．试验结果表明，随着ＰＥＧ浓度的增
加和胁迫时间的延长，鸟巢蕨的叶片相对含水量与
胁迫程度呈负相关，复水后各浓度处理下的叶片含
水量不能够恢复，说明鸟巢蕨叶片保水能力差．
可溶性糖是植物叶片细胞内的一种渗透调节物
质，可溶性糖的主动积累，可以参与降低植物体内渗
透势，以利植物在于旱逆境下维持植物体正常生长
所需水分，以提高抗逆性［１１］．试验结果表明，鸟巢蕨
叶片中可溶性糖对渗透胁迫反应敏感，胁迫程度越
高，可溶性糖积累越迅速．但胁迫时间过长会使其进
入耗尽期，且胁迫浓度越高，进入耗尽期的时间越
早，此时再复水不能改变下降趋势．说明围栏网试验
渗透胁迫，鸟巢蕨叶内的可溶性糖含量的明显积累，
提高了抗逆性，而其含量的很快下降说明了鸟巢蕨
的抗逆性差．
过氧化物酶能有效清除活性氧，保证细胞正常
的生理功能，维持其对干旱胁迫的抗性．有研究表
明，耐旱植物在逆境条件下能使保护酶活力维持在
一个较高水平，有利于清除自由基，降低膜脂过氧化
水平，从而减轻膜伤害程度［１５］．试验结果表明，随着
ＰＥＧ浓度的升高和胁迫时间的延长，鸟巢蕨过氧化
物酶活性呈先升高后降低的变化趋势．原因可能是
随着胁迫程度的上升，膜伤害程度加深，过氧化物酶
不能够在发挥作用．复水后，过氧化物酶活性降低至
与对照组相近水平，说明了鸟巢蕨不是耐旱植物．
丙二醛是植物细胞膜脂过氧化物之一，能与细
胞内各种成分发生反应，从而引起各种酶和膜的损
伤．ＭＤＡ大量增加时，表明体内细胞受到较严重的
破坏，因此，丙二醛的含量是衡量膜透性的一个重要
指标［１１］．试验结果表明，丙二醛含量与胁迫程度呈
正相关；复水后各浓度处理下的丙二醛含量不能够
恢复；鸟巢蕨在受到干旱等胁迫时，丙二醛含量的高
低与细胞膜的伤害程度呈正相关，与其抗旱能力呈
负相关，说明鸟巢蕨抗旱能力较差．
植物遭受逆境后会积累脯氨酸，作为胞质渗透
调节剂，脯氨酸积累的多少与植物抗逆性有关，可作
为抗逆性筛选的重要指标［１０］．试验结果表明，游离
脯氨酸量与胁迫程度呈正相关．这和徐新雨［１８］研究
报道一致，即不耐旱的植物在胁迫中表现出高的脯
氨酸含量．复水后各浓度处理下的游离脯氨酸含量
恢复到对照水平．
综合比较５个指标以及复水后的恢复情况，认
为鸟巢蕨对１０～３０％浓度的ＰＥＧ胁迫都不具有适
应能力，是抗旱性极差的植物，在栽培管理过程中要
注意保持其充足的水分，进行严格的水分管理．
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６９
第３期 胡紫璟等：李广杏幼胚的离体培养
上，获得９３．８％以上的萌发率，最高可达到１００％．
本试验结果表明，李广杏胚培养中，诱导胚萌发的适
宜６－ＢＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ，适宜ＩＡＡ浓度为０．２
ｍｇ／Ｌ，在此条件下，培养３０ｄ时胚萌发率达１００％，
胚培苗的平均株高为４．６２ｃｍ，且胚培苗生长健壮．
由此说明，在胚培养过程中，细胞分裂素浓度并不是
越高越好．胚培苗的继代增殖过程中，适宜ＩＡＡ浓
度为０．０５ｍｇ／Ｌ，适宜６－ＢＡ浓度为１．０ｍｇ／Ｌ，该条
件下胚培苗继代增殖系数达３．４２，显著高于其他处
理．在ＩＡＡ浓度相同的条件下，１．０ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ处
理的增殖系数明显大于０．５ｍｇ／Ｌ处理下的．但是
因为只设定了ＩＡＡ　０．５、１．０ｍｇ／Ｌ　２个浓度梯度，
所以不能说明６－ＢＡ浓度１．０ｍｇ／Ｌ就是胚培苗继
代培养的最佳浓度．
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