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有柄石韦及其近缘种叶的显微鉴别



全 文 :有柄石韦及其近缘种叶的显微鉴别
杨金玲 1 ,郭庆梅 2 ,周凤琴2* ,陈正溪 3 ,李建秀 2
(1.中国医学科学院 /北京协和医学院药物研究所 ,北京 100050;2.山东中医药大学药学院 ,山东 济南
250355;3.广西中医学院 ,广西 南宁 530001)
  摘要 目的:建立中药石韦的显微鉴别方法 , 为制定其质量标准提供依据。方法:采用现代显微技术 , 对目前
市场流通领域的有柄石韦及其近缘种的叶进行显微鉴别。结果:有柄石韦及其近缘种的叶在显微和超微特征上有
显著差异。结论:通过上述方法可以简便地将有柄石韦及其近缘种的叶区分开。
关键词 有柄石韦;叶;显微鉴别
中图分类号:R282.5  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2009)07-1046-03
收稿日期:2008-02-17*通讯作者:周凤琴 , Tel:13553190263, E-mail:zfqsdzy@yahoo.com.cn。
  中药石韦为水龙骨科石韦属植物石韦 Pyrosia
lingua(Thunb.)Farwel、庐山石韦 P.sheareri
(Bak.)Ching和有柄石韦 P.petiolosa(Christ)Ching
的干燥叶〔1〕。始载于《神农本草经 》,列为中品 。味
苦 、甘 ,性微寒 ,归肺 、膀胱经 ,具有利尿通淋 、清热止
血的功效 ,主要用于治疗热淋 、血淋 、石淋 、小便不
通 、淋沥涩痛等症。近年来笔者发现市场中流通的
石韦除了正品来源之外 ,尚有石韦属其他种和瓦韦
属植物的叶 。正确鉴定石韦是规范药材市场以确保
临床准确用药的关键 。关于石韦及其同属植物的形
态组织学研究已有一些报道 〔2-6〕。本文对有柄石韦
及其近缘种的叶进行了显微和超微结构的比较研
究 ,旨在为石韦药材的真伪鉴别提供理论依据 。
1 材料与仪器
1.1 材料 石韦药材及其近缘种的叶购自河北安
国药材市场或取自山东中医药大学药用植物标本
室 。经周凤琴教授鉴定 ,石韦药材为有柄石韦 P.
petiolosa的叶 ,其混伪品分别为华北石韦 P.davidi
(Gies.)Ching、瓦韦 Lepisorusthunbergianus(Kaulf.)
Ching和乌苏里瓦韦 L.usuriensis(RegeletMaack)
Ching的叶。凭证标本存放于山东中医药大学药
用植物标本室 。冰醋酸 、过氧化氢和丙酮均为分
析纯 。
1.2 仪器 OLYMPUS实体显微镜(日本);AO生
物显微镜(美国);日立 S-570型扫描电子显微镜及
图像采集系统。
2 方法
分别取叶片中部及成熟的孢子囊群 ,用 50℃水
浴软化 ,叶片中部徒手切片 ,部分材料石蜡切片 。
叶表皮制片:干燥叶片浸入表皮离析液 (冰醋
酸:过氧化氢 =1∶2)中 ,置 50℃水浴中若干小时(根
据叶片质地决定时间),叶片近透明时 ,清水冲洗 3遍 ,
中性红染色 ,撕离上下表皮 ,除尽叶肉 ,稀甘油装片。
孢子囊环带细胞计数:在 10×10倍光学显微镜
下计数 ,每种植物孢子囊随机观察 30个以上 ,取最
小和最大值为变异幅度 ,取概率密度最大值为该种
的环带细胞数 。
扫描电镜样品制备:成熟孢子叶用丙酮超声清
洗 2次 ,每次 10min,取出 ,自然干燥 。切取适当大
小 ,将叶片下表面向上 ,粘贴于扫描电镜样品托上 ,
喷金 ,扫描电镜下观察并绘制结构示意图。
3 结果
3.1 有柄石韦
3.1.1 叶片中部横切面:上下表皮细胞各 1列 ,外
被角质层 。上表皮细胞外平周壁平直 ,无气孔 ,偶见
星状毛 ,其下有 1列薄壁性的下皮细胞 。下表皮密
被星状毛 ,偶见腺毛;气孔集中分布于下表皮 ,气孔
凹陷 。中脉上下表皮内方均有厚角组织 ,中脉维管
束 1个 ,木质部呈 “T”字形或三角形。叶肉明显分
化为栅栏组织和海绵组织 ,栅栏组织细胞 2 ~ 3列 ,
占叶片宽度的 1 /2 ~ 3 /5。见图 1-C。
3.1.2 叶表皮:上表皮细胞多角形 ,细胞垂周壁增
厚。下表皮细胞垂周壁增厚 ,并呈波状弯曲;气孔主
为单圈型 ,偶见共韧带型;下表皮星状毛一型 ,分枝
宽披针形 ,先端钝 ,有时可见横隔 ,表面有不规则纹
理 ,柄长短不一;偶见并列双细胞头单细胞柄的腺
毛。见图 2-D,图 3-3,图 3-4,表 1。孢子囊呈类圆形
或椭圆形 ,环带细胞纵行垂直型 ,环带细胞数 18(16
~ 19)个 ,唇细胞加厚 。柄细长 ,由 3列细胞构成。
3.2 华北石韦
3.2.1 叶片中部横切面:上下表皮细胞各 1列 ,外
被角质层 。上表皮细胞外平周壁平直 ,其下无薄壁
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图 1 有柄石韦及其近缘种叶的比较
Ⅰ.叶主脉中部横切面 Ⅱ.毛茸 Ⅲ.厚壁细胞
A.瓦韦 B.乌苏里瓦韦 C.有柄石韦 D.华北石韦 1.上表皮 2.栅栏组织 3.主脉维管束 4.海绵组织 5.下表
皮 6.厚角组织 7.水囊 8.棒状毛 9.下皮细胞 10.星状毛 11.腺毛
图 2 有柄石韦及其近缘种叶的上下表皮详图
A.瓦韦 B.乌苏里瓦韦 C.华北石韦 D.有柄石韦 
1.上表皮 2.下表皮
性的下皮细胞。下表皮密被星状毛;气孔集中分布
于下表皮。中脉上下表皮内方均有厚角组织 ,中脉
维管束 1个 ,木质部呈 “T”字形或三角形。叶肉栅
栏组织细胞 3 ~ 4列 ,占叶片宽度的 3 /5 ~ 2/3。见
图 1-D。
图 3 叶下表皮扫描电镜图
1、2.华北石韦 3、4.有柄石韦
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 表 1  有柄石韦和华北石韦下表皮星状毛比较
名称 类型 分枝数/个 分枝长* 分枝宽*
柄细胞数/个 柄长 *
Pyrosiapetiolosa 一型 6 ~ 9 136 ~ 232 41~ 95 1 ~ 10 54 ~ 245
Pyrosiadavidi 二型 6 ~ 9 231 ~ 400 20~ 41 1 ~ 5 27 ~ 109
  注:*长度单位 μm
3.2.2 叶表皮:上表皮细胞多角形 ,细胞垂周壁增
厚 ,稍呈波状弯曲 。下表皮细胞多角形至不规则形 ,
垂周壁波状弯曲;气孔主为单圈型 ,少见韧带型和共
极附型 。下表皮星状毛二型 , 一为绒毛状 ,一为星
状 ,星状毛 7 ~ 9分枝 ,分枝细长平直 ,先端尖锐 ,柄
较短。见图 2-C,图 3-1,图 3-2。孢子囊环带细胞数
17(15 ~ 20)个 。
3.3 瓦韦
3.3.1 叶片中部横切面:上下表皮细胞各 1列 ,上
表皮细胞外平周壁突出 ,下表皮可见棒状毛和气孔 。
中脉上下表皮内方有厚角组织 ,维管束 1个 ,木质部
呈 “T”字形。叶肉栅栏组织细胞 2 ~ 3列 ,占叶片宽
度的 1/3 ~ 2/5。见图 1-A。
3.3.2 叶表皮:上下表皮细胞不规则形 ,垂周壁波
状弯曲 ,有 2 ~ 3细胞的棒状毛;气孔主为胞环型 ,少
数共极附型 。见图 1-A,图 2-A。孢子囊环带细胞数
13(11 ~ 14)个 。
3.4 乌苏里瓦韦
3.4.1 叶片中部横切面:上下表皮细胞各 1列 ,上
表皮细胞外平周壁突出 ,下表皮可见棒状毛和气孔。
中脉上下表皮内方有厚角组织 ,维管束 1个 ,木质部
呈 “T”字形 。叶肉栅栏组织细胞 1 ~ 2列 ,占叶片宽
度的 1 /4 ~ 1 /3。见图 1-B。
3.4.2 叶表皮:上下表皮细胞不规则形 ,垂周壁浅
波状弯曲 ,有 2 ~ 3细胞的棒状毛;气孔主为胞环型。
见图 2-B。孢子囊环带细胞数 13(10 ~ 14)个 。
4 小结
尽管有柄石韦及其近缘种的叶在外部形态上相
似 ,但在显微和超微特征上可根据下列几个方面进
行鉴别:叶上下表皮细胞 、栅栏组织细胞列数及厚
度 、气孔的类型 、叶片被毛情况及毛的类型。
参 考 文 献
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材 , 2000, 23(8):446-447.
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[ 6] 钟国跃 , 凌云 .川产石韦属植物的组织学研究 [ J] .中
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黑加仑与其混淆品异果小檗的鉴别
何 江 ,谭 为 ,徐 芳* ,张彦福 ,赵 军 ,陈 燕
(新疆维吾尔自治区药物研究所 ,新疆 乌鲁木齐 830004)
  摘要 目的:建立黑加仑与其混淆品异果小檗的鉴别方法。 方法:采用性状 、显微与薄层色谱鉴别。结果:黑
加仑与其混淆品异果小檗的药材性状 、显微特征及薄层色谱存在一定差异。结论:本研究结果可以作为黑加仑药
材真伪鉴别的依据。
关键词 黑加仑;异果小檗;鉴别
中图分类号:R282.5  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2009)07-1048-03
收稿日期:2009-03-12基金项目:新疆维吾尔自治区科技重大专项项目(200733146-1)作者简介:何江(1979-),男 ,硕士 ,助理研究员 ,研究方向:药用植物学;E-mail:hj-1211@163.com。*通讯作者:徐芳 , Tel:0991-2320227, E-mail:xufangxj@163.com。
  黑加仑又名黑穗醋栗 、黑豆果 、黑夏果 ,为虎耳
草科植物黑茶藨子 RibesnigrumL.的干燥成熟果
实 ,主产于黑龙江 、新疆等省区〔1, 2〕。黑加仑在维吾
尔医药学文献古籍中无临床应用的记载 ,它是维吾
尔族民间用药 ,维吾尔语名称为 Kharkhat(喀日喀
特)。常用于治疗头痛 、咽喉肿痛 、发烧 、口腔生疮 、
消化不良 、高血压等疾病。现代研究证明黑加仑还
具有降血脂 、抗炎 、抗肿瘤 、抗病毒 、抗氧化和增强人
·1048· JournalofChineseMedicinalMaterials  第 32卷第 7期 2009年 7月