全 文 :棱角山矾繁殖技术
邓小梅1 黄宝祥1 符树根1 欧阳海华2
(1江西省林业科学院 2 崇仁县林业局)
摘 要:通过对棱角山矾播种 、扦插及组织培养技术的研究 , 探讨了棱角山矾种苗繁殖的关键技术。 结果表明:采
用杀虫剂拌种 ,可较好地保存种胚 , 提高种子萌发率;利用春梢扦插繁殖 , 成活率可达 90%以上;以种子为外植体 ,
初步建立了棱角山矾的组织培养体系。
关键词:棱角山矾;种子繁殖;扦插繁殖;组织培养
Techniques for Propagation of Symplocos tetagona Chen et.Y.F.Wu∥DENG Xiao-Mei ,HUANG Bao-Xiang ,FU Shu-
GEN ,OU YANG Hai-hua
Abstract:The propagation techniques of Symplocos tetagona Chen et.Y.F.Wu were reported in this paper.Three methods of
seedling, cutting and tissue culture were compared to seek the suitable propagation way of Symplocos tetagona Chen
et.Y.F.Wu.Seeds mixed with insecticide could increase their germination rate.The best season for cutting propagation might be in
Spring , when the survival rate of cuttings could reach 90% or higher.The regeneration system of tissue culture of Symplocos tetag-
ona Chen et.Y.F.Wu was established using seeds as explants.
Key words:Symplocos tetagona;Seedling raising;Cutting ;Tissue culture
First author s address:Jiangxi Academy of Forestry , 330032 , Nanchang , China
收稿日期:2006-06-12 修回日期:2006-07-02
基金项目:宁波市重点科技计划项目《优良园林生态树种棱角山矾的
抗污染效能评价与培育技术研究》(编号:2004C1000016)。
第一作者简介:邓小梅(1966-), 女 ,博士 ,研究员 ,主要从事植物生
物技术与植物资源开发利用研究。
棱角山矾[1](Symplocos tetagona Chen et.Y.F.Wu)属
山矾科山矾属植物 ,又名山桂花 ,留春树。为常绿阔叶
乔木 ,其主干通直 ,树冠圆球形或圆锥形;枝叶浓密 ,小
枝粗壮且具有三条明显的纵棱;叶革质 ,椭圆状披针形;
盛花期 1~ 2月份 ,白色穗状花序布满整个树冠 ,清香怡
人 ,观赏性极强。该树种具有抗污减噪的功能 ,特别是
对CO 、SO2等有毒气体有很强抗性 ,因此棱角山矾是生
态环保型新优绿化树种 ,市场前景非常广阔。棱角山矾
主要分布于江西 、福建和湖南等省份 ,浙江杭州植物园
已有引种栽培。然而 ,由于棱角山矾自然分布的野生资
源少 ,自然繁殖力低 ,加之其种子虫害严重 ,并有隔年结
果的习性 ,现有的种质资源已远不能满足市场的需求。
为了科学合理地保护和利用棱角山矾野生资源 ,解决其
繁殖技术是关键。本研究开展了棱角山矾种子的采集
与处理方法 ,种子育苗 、扦插繁殖和组织培养等繁育体
系的研究 ,将为该树种的开发利用提供技术支撑。
1 材料与方法
1.1 种子繁殖[ 2 ,3]
种子采集处理 。试验于 2001年和 2003年的 11
月采集棱角山矾的成熟种子 ,在室内堆沤 10 ~ 20 d
后 ,再洗净果肉阴干。并采用甲氰菊酯拌种和不处理
2种试验设计。
播种与苗木管理 。试验点圃地土层深厚 ,肥力中
等 ,均为沙红壤 ,微酸性 ,光照及水 、热条件较好。圃
地整理时施复合肥 1 500 kg/hm2 作基肥 ,播种采取条
播方式 。播种量为750 kg/hm2 ,播种后覆盖 2 cm左右
的黄心土 ,后用稻草覆盖。
苗木培育分留床培育和芽苗移栽培育两种方式 ,
芽苗移栽于 5月 10 ~ 15日进行。苗期管理主要技术
措施:自 6月中旬开始使用 65%的遮阳网遮阴 ,以免
幼苗灼伤。大量出芽后 ,及时锄草 ,以免杂草与苗木
争肥 。5 ~ 8 月追施尿素 3 ~ 4次 ,施肥量由第 1 次
45 kg/hm2逐渐增加到75 kg/hm2 。为了增加苗木的抗
寒能力 ,9月份叶面喷施KH2PO4(浓度为 5‰)1次 。9
月底停止施肥和灌溉 ,以利苗木安全越冬 。苗木病虫
害的防治采用甲胺磷和杀虫双(1∶800)混合喷施。苗
木生长指标调查采用小样方方法 。即在播种圃地随
机设立 5个 1 m×1 m的固定样方 ,每个样方内随机
选定 30株苗木为固定调查样株。苗木生长指标调查
于每年的 5月份开始 , 12月份结束 ,每个月测定 1次
苗木高度 ,12月份测 1次地径 。
1.2 扦插繁殖[ 4 , 5]
分别于每年的 5月和 10月采集当年生半木质化
技术开发
林业科技开发 2006年第 20 卷第 5 期 59
的健壮春梢和秋梢为插穗 。插穗采集后剪成 10 ~
12 cm长的短穗 ,留 2片叶 ,分别用 50 、100 、200mg/kg
的 IBA 、NAA 、ABT-6 生根粉浸泡 2 h ,以不浸泡的枝
条为对照。插床采用人工细致整地 ,苗床宽 100 cm ,
深20 cm ,步道宽 30 cm ,床面均匀铺上厚约 5 cm的过
筛黄心土 , 充分曝晒后 , 用 5‰高锰酸钾溶液杀菌。
扦插密度为5 cm×5 cm 。苗床上设拱架 ,插后用农用
塑料薄膜保湿 ,上面搭 65%遮阳网遮阴。
在插床上选取5个 2m×1m的样方 ,扦插后 30 d
观察记载成活率和生长指标 ,以后每月调查 1次 ,连
续10次。每次每样方观察样本 30株 。
1.3 组培繁殖
本试验以棱角山矾当年的成熟种子为外植体 ,种
子采集处理后于 4℃冰箱中冷藏保存备用。
取出在4℃冰箱中冷藏的成熟种子 ,用自来水浸
泡 24 h ,然后用工具砸开外种壳 ,取出种胚(连同胚
乳),洗净。在超净工作台上先用 75%的酒精浸泡
30 s ,再用 0.1%升汞消毒 10min ,无菌水冲洗多次。
用已灭菌的滤纸吸干种子外部水分 ,然后接入 1/2MS
附加2 ,4-D 0 ~ 4mg/L 的愈伤组织诱导培养基。接
种好的试验材料置于温度为 23 ~ 27 ℃, 光照强度
1 500 ~ 2 000 lx ,光照时间为 12 h/d 的条件下进行培
养[ 5 ,6] 。
经诱导产生的愈伤组织接入不定芽诱导培养基 ,
进行丛芽诱导与增殖培养。本试验选用 MS 、1/2MS
和WPM 3种基本培养基。附加物种类和量值范围为
6-BA 0 ~ 2mg/L 、KT 0 ~ 2 mg/L、NAA 0 ~ 2mg/L 、蔗糖
3%、卡拉胶 0.7%、pH5.8。
2 结果与分析
2.1 种子繁殖
2.1.1 种子出苗
表1为棱角山矾种子萌发的进程 。试验于 2003
年11月采集的种子 ,经处理后当年即行播种。从表
1可以看出 ,所播种子2005年春季 3 ~ 4月份才发芽 ,
这说明棱角山矾种子存在深休眠 ,有隔年发芽习性。
3月 20 日 ~ 4月 10 为棱角山矾种子出芽盛期 ,到 4
月25日出芽基本结束 。试验结果还表明 ,采用甲氰
菊酯拌种处理的组合 ,出苗率可达 500株/kg ,而未采
用甲氰菊酯拌种处理的组合 ,发芽率很低。采用甲氰
菊酯拌种 1 ~ 2 d ,有大量白色肉质幼虫从种子内爬
出 ,种子解剖后发现 ,棱角山矾种子有 3 ~ 4个种腔 ,
已有虫子侵入的种子 ,其种子内已全部或部分为空
腔 ,这说明棱角山矾种子受虫害危害严重 ,因此 ,其种
子发芽率与虫害的程度密切相关 。有关虫体的侵入
机制有待进一步的研究。
表 1 棱角山矾种子萌发进程
播种日期 胚根初露期
胚芽初
露期
胚芽
出土
大量发
芽期
发芽基本
结束期
2003-12-10 2005-02-15 02-23 03-09 03-20~ 04-10 04-25
2.1.2 播种苗生长节律
于 2001年和 2003年连续 2 a 采种开展棱角山矾
种子育苗试验 ,以了解其苗期生长规律。图1为 2003
年底采集播种后 , 2005年萌发的苗高生长节律 。从
图 1可以看出 ,两种苗培育方式的棱角山矾 1 a 生苗
高生长高峰期均在 7 ~ 10月底 , 11 月份以后高生长
开始下降。2005年 12月份测定的 1 a 生苗生长指标
调查显示:留床培育的 1 a 生苗平均高为 38 cm ,最高
达到73 cm ,地径达0.96 cm;芽苗移栽的 1 a生苗平均
高不足 30 cm ,但苗木生长整齐 。从苗木生长指标比
较来看 ,芽苗移栽后其生长量不如留床培育的好。这
可能由于芽苗移栽后有一个缓苗期 ,加之南方 5月中
旬以后天气较热 ,而遮阳措施又在 6月中旬才开始 ,
部分幼苗出现灼伤 ,甚至死亡从而影响到苗木的生
长 。2001年播种后 ,2004年底调查的 2 a 生苗 ,其平
均高生长可达 100 cm以上。
图 1 不同苗木培育方式的苗高生长节律
2.2 扦插繁殖
2.2.1 不同激素对扦插效果的影响
表 2为不同激素处理对棱角山矾扦插效果的影
响 。由表 2可以看出 ,经激素处理的插条生根率比对
照高出近20%,根系更为发达;虽地上部分开始萌发
新梢时间相差不大 ,但采用激素处理后的枝条其新梢
较对照生长要快 ,长势更好。3种生长素之间处理效
果差别不大。试验结果表明 ,采用激素处理扦插穗
条 ,能促进生根和地上部分的生长。
2.2.2 不同扦插时间对扦插效果的影响
表 3为不同扦插时间对棱角山矾扦插效果的影
响 。从表 3试验结果可以看出 ,不同扦插时间直接影
响到扦插效果 ,采用春季萌发的半木质化嫩枝比秋季
技术开发
60 林业科技开发 2006 年第 20 卷第5 期
萌发的嫩枝进行扦插效果更好 。如 5月 12日扦插的
嫩枝 ,30 d时 ,91%的茎基部已形成愈伤组织 ,发根率
达74%。最终发根率达 96%,持续发根时间为 90 d
以内。而 10月 12日扦插的嫩枝 ,30 d时 ,仅 56%的
茎基部形成愈伤组织 ,发根率为 21%。最终发根率
76%,持续发根时间则长达 180 d。影响同时还表现
在地上部分的生长 ,春季扦插的嫩枝插后 15 d 开始
萌发新梢 ,3个月后平均新梢长可达 3 cm 以上 ,而秋
季扦插的嫩枝要到第 2年春季温度回升后才开始萌
发新梢 ,时间长达 135 d。
表 2 不同激素种类对扦插效果的影响
不同处理 愈伤形成/ % 生根/ % 根系生长 新梢萌动/ % 平均新梢长/ cm 最长新梢长/ cm
对照 99 79 一般 53 2.2 3.5
IBA 99 96 好 68 3.8 7.9
NAA 100 94 好 67 3.4 8.3
ABT-6 100 97 好 71 3.6 8.1
注:扦插时间为 5月 ,激素浓度均为 200mg/kg ,浸泡时间为 2 h,扦插 90d统计试验结果。
表 3 不同扦插时间对扦插效果的影响
扦插时间
/月-日
不同时间愈伤形成/ %
30d 60 d 90 d
不同时间生根/%
30d 60d 90 d
根持
续时间/ d
最终发
根率/ %
新梢萌
动时间/ d
05-12 91 99 100 74 89 96 20~ 90 96 15
10-12 56 75 82 21 32 36 20~ 180 76 135
注:插条均采用 200mg/ kg ABT-6浸泡 2 h。
2.3 组培繁殖
2.3.1 愈伤组织的诱导
成熟合子胚接种于1/2MS附加 2 ,4-D 0 ~ 4 mg/L
的诱导培养基上 ,接种 7 d 左右 ,开始出现污染;25 d
后 ,在附加 2 ,4-D 0.5 ~ 4mg/L 的培养基上部分外植
体开始出现愈伤 ,并随着 2 ,4-D浓度的增加 ,愈伤化
的速度加快 ,通过比较发现 ,2 , 4-D浓度为 2mg/L 时
的愈伤组织状态最好 。试验还发现有一部分没污染
的外植体 ,一直未出现膨大和愈伤化 ,且随着时间的
推移 ,慢慢干枯 。这可能是由于棱角山矾种子的外壳
坚硬 ,在砸开外壳取种胚时 ,用力不当 ,伤及种胚 ,接
种的外植体仅为胚乳 ,而所用培养基并不适合胚乳愈
伤组织的诱导。
2.3.2 不定芽的诱导
本试验选用 MS 、1/2MS 、WPM 3种基本培养基 ,
附加6-BA 0 ~ 2mg/L、KT 0 ~ 2mg/L 、NAA 0 ~ 2mg/L ,
蔗糖 3%等进行棱角山矾不定芽的诱导 。统计结果
表明 , 3种基本培养基以WPM 较适合不定芽的诱导。
试验显示 , 6-BA 、KT 浓度在 0.2 ~ 1.5mg/L 范围内 ,
愈伤组织不定芽诱导频率随着 6-BA 、KT 浓度的增高
而增高 ,不定芽生长更加嫩绿。但 6-BA 、KT 浓度达
到 2.0mg/L ,不定芽诱导频率反而降低 ,这可能是分
裂素浓度过高所致 。棱角山矾不定芽最佳增殖培养
条件有待进一步研究 。
3 结论与讨论
(1)棱角山矾种子内生虫的危害严重 ,种子发芽
率与虫害程度密切相关。为了保存种子的有胚率 ,种
子一旦成熟 ,需及时采集并进行杀虫处理 。
(2)棱角山矾种子存在深休眠 ,具有隔年发芽的
特性 ,种子萌发之前 ,夏秋干旱季节适时浇水 ,保持土
壤湿润 。棱角山矾苗木喜阴 ,宜在湿度较大 、光照偏
弱的环境条件下生长 。为此 ,育苗时要及时搭荫棚遮
阳 ,以免幼苗灼伤 ,促进苗木生长。
(3)从扦插时间的对比结果来分析 ,春梢扦插比
秋梢扦插容易生根 ,扦插成活率更高;经激素处理的
插条生根更快 ,长势更好。
(4)以种子为外植体初步建立组培再生体系 ,其
不定芽的生根培养及组培高效再生体系还在进一步
研究中 。
参考文献
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分册[M] .北京:科学出版社 ,1987.
[ 2] 邓小梅, 符树根 , 胡斌 , 等.棱角山矾种子育苗及苗期生长规律
[ J].江西林业科技 , 2006(3):21-22.
[ 3] 美国农业部林务局主编.美国木本植物种子手册[M] .李霆 ,等 ,
译.北京:中国林业出版社 , 1982.
[ 4] 肖水清.13种阔叶树育苗技术及苗木生长规律研究初报[ J] .江西
林业科技 ,2002(2):5-6.
[ 5] 熊茂铁 ,蒋苏珍.坛果山矾扦插繁殖技术[ J] .江西林业科技 , 2003
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[ 6] 邓小梅 ,王明庥 ,黄敏仁.香花槐组织培养及工厂化快繁技术研究
[ J].江西农业大学学报(自然科学版), 2003(1):69-72.
(通讯地址:330032 ,南昌市经济技术开发区)
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