全 文 ：图 2 苦绳根横切面的显微图
表 1 傣百解和苦绳根横切面的比较
特征项 傣百解 苦绳根
最外层含厚壁细胞群 有 无
中柱鞘中厚壁细胞数量
及位置
较少，零星散在，
在韧皮部中间
多，断续排列成环，
近木质部
簇晶 无 有
木质部导管分布状态 单个或 2 ～ 3 个相聚 多单个
4 小结
傣百解和苦绳的显微比较可以从最外层细胞含厚壁细胞群
的有无、中柱鞘中厚壁细胞数量及存在位置、簇晶有无和木质部
导管分布状态来进行区别。
参考文献:
［1］ 中国科学院昆明植物所． 云南植物志［M］． 北京:科学出版社，
1983:657．
［2］ 林艳芳，依 专，赵映红．中国傣医药彩色图谱［M］． 昆明:云南民
族出版社，2000:397．
收稿日期:2011-03-03; 修订日期:2011-09-19
基金项目:粤港关键领域重点突破项目(No． 20080106 － 2)
作者简介:黄珊珊(1981-) ，女(汉族) ，江西宜春人，现任广东省中药研究
所讲师，博士学位，主要从事药用植物方面的教学与科研工作．
* 通讯作者简介:成金乐(1962-) ，男(汉族) ，湖北麻城人，现任中山市中
智药业集团有限公司总工程师、主任中药师，学士学位，主要从事中药新
药、保健食品、食品的开发研究工作．
玄参超微粉粒细胞学研究
黄珊珊1，成金乐2* ，徐吉银2，邓 雯2
(1．广东省中药研究所，广东 广州 510520; 2．广东省中山市中智药业集团有限公司 528437)
摘要:目的 对玄参超微粉粒进行细胞学研究。方法 利用荧光显微法、透射电镜检测法等比较超音速气流粉碎机在不同
频率下生成的玄参超微粉粒的细胞结构特征。结果 15，25Hz频率下生成的玄参粉末在显微镜下仍有完整的石细胞和导
管存在，而 35，55Hz频率下生成的粉末形态均一、细致，粉碎较为彻底。结论 该法可推荐作为玄参粉碎的较为适当的频
率及工艺参数，具有一定的参考价值。
关键词:玄参; 超微粉碎; 破壁; 细胞学
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 02． 076
中图分类号:R284． 1 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)02-0419-02
超微粉碎是近年来迅速发展起来的一项高新技术，是以植物
类药材细胞破壁为目的的粉碎作业。细胞经破壁后，胞内有效成
分可充分暴露出来，从而提高药物的释放速度和释放量。该技术
研制的中药制剂如微米中药等具有独特的活性已引起医药界广
泛关注［1 ～ 3］。
玄参来源于玄参科植物玄参 Scrophularian ingpoensis Hemsl
的干燥根，又名元参、浙玄参，其性微寒，味甘、苦、咸，为常用中
药，具滋阴降火、润燥生津、解毒利咽之功效，用于治疗阴虚火旺、
烦眠、潮热、盗汗、咽喉肿痛、淋巴结核、痈肿疮毒、津亏便秘等症，
主产于长江流域各地，现浙江、四川、江苏、安徽、湖北及东北各省
均有栽培［4］。本文对在不同频率下超微粉碎后的玄参粉末进行
了细胞学比较研究，在观察粉体显微特征的基础上，预找出粉碎
玄参的的最佳频率及细度，为玄参的超微粉的制作工艺提供参
考，也对超微粉末的鉴定有一定的指导意义。
1 材料与仪器
玄参为 2009 －10采自浙江，利用 JGM － T 50 型超音速气流粉
碎机在 15，25，35，55 Hz等不同频率下制成不同细度的玄参粉末。
2 方法
2． 1 光学显微镜 取少量玄参破壁粉粒于玻片上，用滴管加少许
稀甘油，轻轻盖上载玻片，用镊子轻敲去除气泡于 Leica DM1000
下观察。
2． 2 荧光显微镜 选取少量不同频率(15，25，35，55 Hz)下生成
的玄参破壁粉粒进行组织化学及荧光显微镜鉴定，希夫试剂
(PAS)染多糖类物质、SudanⅢ 染总脂类［5］，Leica DM1000 荧光
显微镜于 334 nm和 365 nm 波长范围内鉴定脂类及萜类。
2． 3 透射电镜观察 取不同细度的玄参粉末(每一细度三重
复) ，用 2%戊二醛(pH 7． 0 磷酸缓冲液配制)和 1%锇酸双重固
定，酒精系列脱水，环氧丙烷过渡，Spurr 包埋后，LKB － 11800 半
薄切片机切片，半薄切片厚度 2 μm，甲苯胺蓝染色，Olympus －
DP50 显微镜观察并照相。用 Leica － Ultracut S 超薄切片机制作
超薄切片，切片用醋酸双氧铀和柠檬酸铅染色后，用 JEM － 1010
透射电镜观察和拍照。
3 结果
3． 1 不同细度的玄参粉末显微鉴定 15，25Hz 频率下生成的玄
参细粉颗粒较不均匀，薄壁组织碎片甚多，仍有完整细胞存在，如
石细胞、网纹导管等(图版 I:A，B，C，D箭头) ，且 15 Hz频率下生
成的玄参细粉破碎的细胞结构较多，颗粒也大，其中仍可见大片
的细胞壁结构(图 1:A，B)。而 35，55 Hz频率下生成的玄参细粉
形态均一，未发现较大的细胞组织碎片及完整细胞存在(图 1:E，
F)。
3． 2 不同细度的玄参粉末组织化学鉴定 组织化学鉴定表明:不
同频率下生成的玄参粉末经希夫试剂然后变淡红色(图 2:A，
B) ，说明粉末含有多糖性物质;经苏丹Ⅲ染后，粉末只有少许颗
粒变成橘红色(图 2:C，D) ，说明含有脂类物质，但是大部分粉末
仍成灰褐色，说明玄参破壁总脂类成分含量较低。经荧光电子显
微镜观察，部分粉末碎片发黄色荧光的说明有角质类物质存在
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 2 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 2 期
(图 2:E) ，而经希夫试剂染色后的玄参粉末在 365 激发光下成红
色(图 2:F) ，表明为细胞壁类物质;粉末中未发现蓝色荧光，而倍
半萜稀类物质在荧光电镜下呈淡蓝色，说明粉末中不含倍半萜烯
类物质［6］。
A －15 频率下生成的玄参超微粉末示石细胞(箭头) ;
B － 15 频率下生成的玄参超微粉末示网文导管(箭头) ;
C － 25 频率下生成的玄参超微粉末示石细胞(箭头) ;
D －示 25 频率下生成的玄参超微粉末及石细胞(箭头) ;
E －示 35 频率下生成的玄参超微粉末光镜图;
F －示 55 频率下生成的玄参超微粉末光镜图
图 1 玄参超微粉末光镜图片(标尺:50 μm)
A －15 Hz频率下生成的玄参超微粉，示经希夫试剂染后成淡红色的细胞碎片;
B － 35 Hz频率下生成的玄参超微粉，示经希夫试剂染后成淡红色的细胞碎片;
C － 25 Hz频率下生成的玄参超微粉，
示经苏丹Ⅲ染后的细胞碎片，D(导管) ;
D －55 Hz频率下生成的玄参超微粉
，示经苏丹Ⅲ染后的细胞碎片，略见桔黄色物质(箭头) ;
E －示 35 Hz频率下生成的玄参超微粉荧光显微镜图，
RD(网纹导管)、石细胞(箭头) ;
F －示 55 Hz频率下生成的玄参超微粉荧光显微镜图
图 2 玄参超微粉末组织化学及荧光显微镜图片(标尺:50 μm)
3． 3 不同细度的玄参粉末超微结构鉴定 玄参粉末透射电镜观
察结果主要为杂乱的细胞组织碎片，由于缺乏可比性，无法断定
为何种细胞结构(图 3:A)或细胞器，能够断定的细胞结构仅有
细胞壁、细胞膜等(图 3:B，C，D ，E)。其中，15，22Hz频率下可以
观察到疑似石细胞的结构(图 3:D) ，任一种频率都可发现有疑
似质体(图 3:C，F，H) ，和脂质体(图 3:G)的存在。不同的是:
15，25 Hz频率下的粉末仍可发现细胞壁及附近遗留的少许细胞
内含物(图 3:B，C) ，而 35，55 Hz频率下的粉末碎片更加细杂(图
3:E、I)。
4 讨论
科学研究表明，营养物质能否被充分吸收，与其比表面积呈
强的正相关关系，也就是比表面积越大，吸收得越完全。比面积
是表面积与体积的比值，体积越小，比表面积越大，吸收越完全，
所以颗粒小的物质比颗粒大的物质更易被吸收［7，8］。此外，现代
研究表明，小粒径的颗粒其黏附性也强，有利于提高局部用药的
滞留性，也有利于增加靶位点的接触时间与接触面积，提高药物
吸收的生物利用度［9］。在本实验中，相较于 15Hz 与 25 Hz 频率
下生成的玄参细粉，35，55 Hz频率下生成的玄参细粉形态均一，
细腻，未发现大颗粒和大片细胞组织结构，说明药材已完全破壁。
因此，35，55 Hz频率下生成的玄参细粉形比 15Hz 与 25 Hz 频率
下生成的细粉更易被吸收，可推荐作为玄参粉碎的较为适当的频
率及工艺参数。
据资料显示，玄参显微鉴别特征为根横切面后生皮层微微栓
化，皮层细胞切向延长，长方形或类圆形，石细胞单个散在，或 3
～ 5 个成群。韧皮射线多裂隙。导管呈断续放射状排列，中央有
少数导管，并有薄壁细胞。粉末特征为灰棕色，石细胞大多散在
或 2 ～ 5 个成群，长方形，类方形，类圆形，三角形梭形或不规则
形，直径 22 ～ 94 μm，壁厚 5 ～ 26 μm，有的孔沟分叉，胞腔较
大［10］。在本研究中，15，25 Hz 频率下生成的玄参粉末仍可见较
多的石细胞和导管，其大小、形状与前人所报道的一致，因此，玄
参石细胞的特殊形态很有可能成为玄参生药或具有较大颗粒的
玄参粉末的鉴定标准之一。
A －15Hz玄参超微粉，示不明细胞碎片(箭头) ，标尺:2 μm。;
B － 15 Hz玄参超微粉，示细胞碎片，标尺:500 μm。;
C － 25 Hz玄参超微粉，示疑似质体结构，标尺:100 nm;
D －25 Hz玄参超微粉，示疑似石细胞结构(箭头) ，标尺:1μm。;
E － 25 Hz玄参超微粉，示细胞碎片，标尺:50 μm。;
F － 35 Hz玄参超微粉，示疑似质体结构，标尺:100 nm;
G －55 Hz玄参超微粉，示疑似质体结构，标尺:100 nm;
H －示分离后线粒体透射电镜图片，未发现完整的线粒体结构，500 nm;
I － 55 Hz玄参超微粉，示细胞碎片，标尺 50 μm
图 3 玄参超微粉末透射电镜图片(标尺:50 μm)
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 2
玄参粉末超微结构观察中未观察到比较明显的亚细胞结构，
其中相对较大的细胞核也未观察到，尤其是 35 及 55 Hz 频率下
生成的玄参粉末，充分说明粉碎比较彻底。另一方面，由于玄参
根组织基本上是薄壁组织细胞，所含的细胞内含物非常少，加之
经超微粉碎后，细胞器结构已被破坏，所以未能观察到完整的细
胞器。
据报道，玄参化学成分主要为环烯醚萜类、苯丙素类及三萜
皂苷、肉桂酸等［11，12］。本实验经组织化学鉴定，玄参超微粉末主
要含多糖类，总脂含量很少，不含倍半萜烯类。这与文献资料所
报道的较为吻合，而多糖类很可能是细胞壁及木质部导管等纤维
素类，而少有的脂质物质很可能是细胞壁上的角质类物质。
综上所述，35，55 Hz 频率下生成的玄参粉末显微镜下形态
均一，细致;超微结构的观察结果也进一步证明玄参在该频率下
粉碎较为彻底，可推荐作为破壁的工艺参数。但由于缺乏参照
物，个别特殊的细胞及细胞器难以定论，进而比较难制定出玄参
超微粉末的细胞学鉴定标准。在以后的研究中，建议相近属或种
间的粉末进行比较研究，以寻求突破。此外，应考虑从物理学纳
米技术等角度出发，探索药效学研究。
参考文献:
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临床报道
收稿日期:2011-04-25; 修订日期:2011-08-10
基金项目:国家中医药管理局中医药科学技术研究专项
(No． 06 － 07LB13)
作者简介:陈光亮(1964-) ，男(汉族) ，安徽宿州人，现任安徽中医学院中
西医结合临床学院教授，博士学位，主要从事中西医结合防治高血压工
作．
控释硝苯地平对不同证型高血压病的降压疗效的研究
陈光亮1，王滨燕2，戴小华1，周亦轩1，王 旭2
(1．安徽中医学院中西医结合临床学院，安徽 合肥 230038;
2．安徽省生物医学研究所，安徽 合肥 230032)
摘要:目的 观察控释硝苯地平对不同中医证型高血压病的疗效是否存在差异。方法 按照中国高血压防治指南的标准
明确高血压病诊断与分级，根据《中药新药临床研究指导原则》分为 4 型。523 例患者给予控释硝苯地平 30mg /d治疗，疗
程 15d。分析对总体血压的影响、不同证型的有效率，以及对不同证型的疗效有无差异。结果 患者血压明显下降，治疗
前后 SBP［(150． 6 ± 10． 3 )vs (134． 6 ± 11． 9)、DBP(98． 7 ± 6． 8)vs (90． 4 ± 7． 3) ］有显著性差异。控释硝苯地平对痰湿
壅盛型、阴阳两虚型效果较好，其显效率和总有效率明显高于未分型、肝火亢盛型和阴虚阳亢型(P ＜ 0． 001)。各型之间
达标率无明显差异。以未分型患者血压下降值作为对照进行多元线性分析，肝火亢盛、阴虚阳亢、痰湿壅盛、阴阳两虚型
患者收缩压下降值、舒张压下降值均有显著性差异。结论 控释硝苯地平对不同中医证型高血压病的疗效不同。
关键词:高血压病; 辨证分型; 控释硝苯地平; 降压疗效
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 02． 077
中图分类号:R4 /78 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)02-0421-03
高血压是动脉粥样硬化的重要危险因素之一，中医证型可在
不同程度上揭示病机特点的个体差异性，能够比较集中地反映出
疾病的原因、性质、部位、范围、动态等多方面信息。高血压病西
医治疗的个体化原则和中医辨证论治的概念非常吻合。为此，我
们对高血压病进行中医辨证分型的同时，采用临床常用的钙通道
阻滞剂控释硝苯地平进行治疗，观察控释硝苯地平对不同中医证
型高血压病降压疗效是否有差异，从中医的角度使用西药，为高
血压病的个体化用药和中医辨证论治提供客观依据。
1 临床资料与研究方法
1． 1 诊断标准与病例选择
1． 1． 1 原发性高血压诊断标准 根据《中国高血压防治指南
(2005 年修订版》诊断标准［1］，3 次不同时间测量血压，舒张压
(DBP)≥90 mmHg或收缩压(SBP)≥140 mmHg。
1． 1． 2 入选标准 年龄 25 ～ 65 岁，2 周内无服药史的原发性高
血压患者，进行血压测量和病史问诊，排除其他情况引起的高血
压。排除标准:各种原因引起的继发性高血压及药物引起的高血
压，过度肥胖(BMI≥30) ，糖尿病，以及有其他严重疾病的患者。
最终在安徽省安庆地区入选 523 人符合入选条件并签署知情同
意书的原发性高血压患者参加本次研究。
1． 2 中医辨证分型 以《中药新药治疗高血压病的临床研究指
导原则》［2］作为诊断依据并设计标准化高血压中医证候调查量
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