全 文 :第 17 卷第 4 期
1 9 8 9年 1 2月
西北农业大学学报
A e t a U n i v
.
S e p t e n t r i o n a l i O e e i d e n t
.
A g r i e
.
V o l
.
1 7
,
N o
.
D e e
. , 1 9 8 9
黄花棘豆引起山羊流产的研究 .
汤 承 段得贤 曹光荣 李绍君 薛登民
(兽医系 )
摘 要
给 5头妊娘 5 4d的 山羊每天 饲 喂 黄 花 棘 豆 干 粉 129 / k g体 重 , 试 验 羊
分别于第 15 , 2 1 , 2 , 3 d全部流产 , 而 讨照 组羊全部产下健康羊羔 。 流产 毋
羊各器官 , 特别是卵粱和胎 盘的病理组织 学检 查及试验羊的血装孕酮 和 17 刀-
雌二醉的放射 兔疫刚 定结果表明 : 卵巢黄体细 胞颗杜变性 、 空 泡化和胎盘绒毛
膜上皮细胞空泡化 , 以及妊娘羊血浆孕酮下降 。 这些 变化 可 能干扰母体时胎 儿
的 营养供应 以 及毒草的毒素直接作用于胎 儿导致流产 。
关镶词 ; 黄花棘豆 , 山 羊 , 流产 , 孕酮 ; 雌二 西享, 颗杜变性 ; 空 泡变性
棘豆属 ( O 二 yt or :P’ : )有毒植物广泛分布于我国内蒙古 、 新疆 、宁 夏 、 青 海 、 甘 肃 、 陕
西 、 西藏 、 四川等省 , 每年都引起马 、 牛 、 羊等多种家畜中毒 厂` 一 ` ’ , 是 目前我国 西 北
草原上危害最严重的毒草。 我国现已报道能引起家畜中毒 的棘豆有小花棘豆 ( o . gl a .b) a
D
.
C )
、 甘肃棘 豆 ( 0 . 寿a n s u e n s i s ) 、 黄花棘豆 ( o . o c h r o c e夕儿a l a P u 二刀“ ) 、 急弯棘
豆 ( 0 . d “ l e x o P o l ) 等 。 这些棘豆对家畜几乎发生相同的作用 , 因此认为他 们 在 毒
理上是一致的 〔` 〕。 除了直接引起家畜中毒死亡外 , 引起家畜消瘦 、 母畜不 孕 、 流 产 、
死胎及弱胎等 ` 9 ’ , 是严重影响畜牧业发展的因素 。
国内学者对棘豆中毒做过不 少研究 , 但关于棘豆引起妊娠家畜流产 , 尚未进行系统
研究 。 本试验试图通过对黄花棘豆引起家畜流产的实地调查 , 人工复制黄花棘豆引起流
产试验 , 测定试验羊济产前后 的孕酮和雌 二醇的动态变化以及流产羊的病理剖检 , 特别
是流产羊生殖器官的剖检变化 , 以探讨棘豆引起山羊流产的原因 , 为该病的防制提供参
考 。
1 材料与方法
1
.
1 黄花棘豆
地上部分于 19 8 6年 8 月采 自宁夏海原县 , 采样经 自然干燥 , 粉碎后备用 。
1
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2 仪器和主要试剂
F l一 2 1 0 0液体闪 烁 仪 (西安2 62 厂产 品 , 对 3 H 的 探测效半为 5 5% ) 。 多 普 勒 超 声
诊断仪 (河北保定定兴电子仪器厂产品 。 3 H 一孕酮 、 标准孕酮 、 孕酮抗 血 清 、 J H 一 17 口
一雌 二醇 、 标准 17 刀一雌二醇及打 刀一雌二醇抗血清均为上海内分泌研究所户品 。
本 文子 1 9 8 9年 1月 18 日收到 。
, 本课题 系国家 自然料学基金资助 。
第 4期 汤 承等: 黄花棘豆引起山羊流产的研究
1
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3 试验羊的选择与处理
选择 1周岁健康的杂种西农萨能奶 山羊 , 观察 2 个发情周期 。 于 10 月底至 n 月 初 全
部本交配种 , 配种后 30 ~ 4d0 用多普勒超声诊断仪进行妊娠诊断 , 将妊娠的 12 只 羊 随机
分 为试验组 (n 二 5只 )和对照组 (n 二 7 只 ) 。
试验羊与对照羊均于妊娠第 40 , 47 , 5 d4 各采血一次 , 肝素抗凝 , 迅速离 心 ( 3 5 0 。
转 / m i n , l o m in ) 分离血浆 , 一 20 ℃保存待测 。 采血时间为上 午 8 . 3 h0 至 9 . 30 h 。 试 验
开始后每 d3 采血一次 , 时间方法同前。
妊娠 5 d4 起 , 试 验羊单个饲喂黄花棘豆 ( 12 9 / k g体重 ) 与 3 5 09 精料加 水 拌 合 , 令
其自由采食 。 待采食完后 , 给予。 . 2 k5 g青干草和充足饮水 。 对照羊 每只每天按 1 . sk g 青
干草 、 15 0 9混合精料混群饲喂 , 自由饮水。 所有羊只 每周进行 一次常规检 查 , 记 录 体
温 、 呼吸 、 心跳 ; 同时每天观察试验羊的中毒与流产情况 。
试验羊流产后予以剖检 , 取流产胎儿与母羊卵巢 , 胎盘及心 、 肝 、 脾 、 肺 、 肾 、胰 、
肾上腺 、 甲状腺 、 脑等组织器官 , 固定于 10 % 的福尔马林中 , 作病理组织学检查 。 流产
羊及对照羊作布氏杆菌病检查 。
1
.
4 激案浦定
孕酮 (尸 ; ) 和 1 7口一雌二醇 ( E 3 ) 测定 , 按西北农业大学内分泌研究室的 方 法 进
行 。 孕酮抗血清的稀释度为 1 : 2万 , 17 刀一雌二醇抗血清的稀释度为 1 : 2 . 5万 ; 尸 4和 E :
的标准曲线范围为 25 ~ 8 0 o p g 和 5 ~ 2 0 p g ; 灵敏 度分别在 25 和 1 1P g / 管以下 ; 批间变异
系数和批内变异系数 : 尸 `为 2%(n = 3) 和 5 . 3 % (n = 8) ; E Z为 5 . 6%(n 二 2) 和 7 . 6% ( 。 二 3 ) ;
血浆中标准孕酮 (n = 6 ) 和 17 刀一雌二醇 (n = 6 )的平均回收率分另1为 9 5 . 4 8%和 9 3% 。
激素 ( p g ) / m l = 激素 ( p g ) / 管 x 提取液总量测定用提取液
1
提取用血浆
试验结果
试验羊的流产情况
1 , 2 , 3 , 4 , 5号羊分别在连续饲喂毒草后的第 2 2 , 2 0 , 3 3 , 2 1 , 1 5 d 流 产 (见 表
1)
。 试验羊首先表现两眼略发呆 、 颈部僵硬等黄花棘豆中毒的早期症状 , 然后 表 现 喜
卧地 , 最后发生流产 。 流产母羊心跳 、 体温 、 呼吸均正常 , 但子宫子叶表面出血 , 且明
显小子同期妊娠的正常羊子宫子叶 。 流产胎儿死亡 , 全身皮下出血 、 水肿 。 对照组 7 只
羊全部产下正常羔羊 。
表 1 试验羊的发病情况
羊号 流产时间 d( ) 共入黄花棘豆 ( k幼 流产胎 儿情况
2 2
2 0
3 3
2 1
1 5
5
。 2 8
5
。
0 4
9
。
0 8
5
。
4 2
3
。
6 0
腐败
皮 下出血水肿
皮 下出血水肿
末找着
皮下出血水肿
叙 ,西北农业大学学报 17 卷
2
.
2 流产母羊的病理组织学变化
心脏 : 轻度浊肿 , 充血。 肝脏 : `肝细胞肿大 , 胞浆呈结构不清 的小块状 , 有的肝细
胞溶解 , 核消失 。 脾脏和肺脏 : 无明显可见病变 。 肾脏 : 肾小管上皮细 胞胞浆呈红色颗
粒状 , 大部分胞膜破裂 , 胞浆流失于管腔中 , 有的核溶解消失 。 肾小球和间质 轻 度 充
血 。 肾上腺 : 主要表现为浊肿 , 也有空泡出现 , 血窦扩张 , 轻度充血 。 胰脏 : 胞浆里呈
现空泡 。 甲状腺 : 未见明显异常 。 大脑 : 神经细 胞浆淡染 、 溶解 , 有噬神经现象 , 血管
充血 、 内皮肿胀增生 , 有的神经细胞淡染成浓缩状态 。 小脑 : 蒲金叶氏细胞胞浆淡染 ,
尼氏小体溶解 , 胞浆呈网织状犷并有明显出血 。 胎盘 : 母体胎盘充血 , 血管扩张 , 绒毛
膜上皮核浓缩 , 双核细胞浓缩 。 胎儿胎盘绒毛膜上皮细胞呈大小不等的空泡 。 卵巢 : 黄
体细胞胞浆内出现大量红色细小颗粒 , 细胞肿大 , 呈明显的浊肿变化 , 并有大量的空泡
形成 。
2
.
3 流产羊与对照羊血清布氏杆菌平板凝集试验阴性
2
.
4 对照组与试验组羊血桨孕酮与雌 一二醉的变化
孕酮 : 饲喂黄花棘豆前对照羊与试验羊血浆孕酮水平相近似 , 妊娠第 40 d 时分 别 为
3
.
o 6 n g / m l和 3 . 1 4 n g / m l , 妊娠第 5 4 d时分另lj上升至 4 . 7 6 n g / m l和 5 . 3 1n g / m l 。 试 验
组 从妊娠第 5 4d 开始词喂毒草 , ’ 妊娠第 57 d 、 6 d0 时 血浆孕酮分别为 5 . 3 9 3n g / m l 和 4 . 18
gn / lm
, 以后随着饲 喂 黄花棘豆时间延长而逐渐下降。 流产时血浆孕酮降至 nI g / m l以
下 。 对照羊血浆孕酮在妊娠第 5 d7 , 6 d0 时分 别 为 6 . 3 1n g / m l和 7 . 7 6n g / m l , 第 6川 以
后呈波动性变化 , 但都维持在 5 . 珍s n g / 耐 ~ 7 . 1 3n g / ln1 之间 。 试验羊 与对照羊血 浆 孕
酮的变化图见 l 。
17 刀一雌二醇 : 流产前试验组与对照组羊血浆中 17 刀一雌 二醇水平相近 , 无 明 显 差
异 。 对照羊与试验羊的 17 刀: 雌二醇变化见图 2 。
, 嘴里性
一一-一 -一 -一闷` 一-叫一- J` , 5` 5 7 功 。 , “ ` 9 咒 7 5 帕 引 d .
·川l刻.井砚,f0t切T.油么~目
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图 1 试验羊与对照羊血浆孕
酮的变化曲线
图 2 试验羊与对照羊血浆雌二
醇的变化曲线
3 讨 论
试验组羊每天按 12 9 / k g体重采食黄花棘豆 , 最早于连续采 食后第 1d5 流 产 ,
最迟 3 d流产 , 平均为 2 2 d。 平均每只进食 6 k g黄花棘 豆干粉 。 试验羊流产前表 现 两 眼
发呆 、 颈部僵硬等早期黄花棘豆中毒的症状 。 流产胎儿水肿 , 全身皮下出血等均与自然
第4期 汤 承等 : 黄花棘豆 引起山羊流产的研究 5
病例一致 。
3
.
2组织病理剖检观察表明 , 黄花棘豆对大部分器官都有毒 害作用 , 似乎 对 肝 、
肾 、 胰 、 神经组织 、 卵 梁 、 胎盘 等器官的危害较严重 。 这些器官广泛空泡变性 , 对妊娠
中止有重要影响 。 特别 怪卵巢和胎盘的病 变 , 对流形 的发生有着决定性意义 。 在本试验
条件 一 『, 中毒流 J祝羊卵巢黄体细 H包袍浆内出现大量红色颗粒 , 细胞呈明显 的浊肿变化 ,
并有大量空泡 形成 。 这络必 卜扰 孕酮的合成 , 从而引起血浆孕酮含量 下 降 〔 ` 5 ’ ` 已 〕。 胎
儿胎盘和母体胎盘都有明显的病变 , 特别是胎儿胎盘的绒毛膜上皮细胞空泡化 , 必然影
响母体对胎儿的营养供应 二” 。 流产母羊胎盘明显小于同期正常妊娠羊胎盘 , 这似乎说
明黄花棘豆能千扰胎盘的正常发 汀 。 由于流产胎儿极脆弱 , 未能制片观察其病理组织学
变化 , 但流产胎儿均呈皮下出血 、 水肿等明显的病理变化 。 W il i o m J . H ar t l y 报道 ,
疯草可引起胎儿神经红l织和 `{宁小球囊 、 曲细小竹等多种器官出现空泡变性 , 说明疯草对
胎儿有直接作用 仁“ 三。
从血浆孕酮的测定结果可 以吞出 , 试验组与对照组的妊 娠羊 , 在妊娠第 40d 时分 别
为 3 . 1 4 n g / m l和 3 。 0 6 n g / 1J } , 与前人 的报道相近 似。 饲喂黄 花棘豆后的第 6 d , 试验羊
孕酮值开始明显 低于 .对 !!棍组 (P < 0 . 0 1) 。 此后 , 试验羊血浆孕酮 含量随进食黄花 棘 豆
的时间延 长而逐渐下降 , 而对照组在妊娠第 6 o d时达到峰值 , 以后则在一个较高的基 数
上波动 , 而中毒 一丫流 ; 之一 !`」一血浆孕酮值多降至 1 9 / m l以下。
山羊整个妊娠期间的孕酮主要来 自卵巢黄体细胞 , 胎盘仪分泌少量孕酮 〔 ` ’ 二。 而绵
羊和马妊娠后期的胎盘则 吐产生 孕酮的重要场所 L ` l 。 儿花棘豆可 引起卵巢黄体细胞颗
粒变性和空泡变性 , 以及胎盘绒毛膜上皮细胞空池变性。 因此 , 无论 山羊 、 绵羊和马在
妊娠的任何阶段采食足够量的黄花棘豆 , 均可干扰孕酮的合成 , 从而破坏妊娠 。 流产前
的整个阶段 , 试 验羊血浆 1 7刀一雌 醇含量与对照羊无明显差 异。 据此推测 , 黄花 棘 豆
引起 黄体和胎盘 的颗粒变性 , 从而干扰孕酮 的合成 , 导致母体循环中孕酮水平下降 。 尽
管雌 二醇没多大变化 , 但使得雌激素 、 孕酮的比值增大 , 从而诱导子宫前列腺素 P G F Z a
的合成 〔 ’ `, j 。 另外 , 由于胎盘绒毛膜上皮空泡化 , 干扰母体对胎儿的营养供应 , 加上毒
素对胎儿的直接作用 , 一导致胎儿变性死亡 , 刺激子宫前列腺素的产生 〔 ` 8 一 “ “ J。 前 列 腺
素的增高 , 导致孕畜流产 。
4 结 论
4
.
1 每天给妊娠山羊饲喂 12 9 / k g 体重的黄花棘豆 , 连续饲喂半个月 以 上 , 可 以
引起妊娠中期的奶山羊流产 。 人工复制 的黄花棘 _豆引起流产病例与实地调查的自然病例
相一致 。
4
.
2 黄花棘豆可 引起卵巢黄体细抱颗粒变性和空泡变性 以及胎盘绒毛膜上皮 空 泡
变性 , 从而干扰黄体和胎盆的孕酮合成和母体对胎儿的营养供应 , 此外毒草毒素还可直
接作用于胎儿 。 以上诸因素共同作川 , 导致山羊流产 。
试验过程中得到张琼璐工程师及我校 内分泌 研究室全体同志的帮助 , 并承蒙王建辰教 授提出许多宝贵 意 见 , 在
此一并致 酚 。
S 6 西北农业大学学报 1 7卷
参 考 文 献
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王宏杰等 。 中国草原 , 1 08 3 ( 1 ) : 6 5一 6 6
刘洪先 . 四川草原 , 1 9 8 5 ( 3 ) : 4 4一 4 ,
曹光荣 等 . 动物毒物学杂志 , 1 9 8 6 (1 ) , 18 一 21
李作煌等 。 内蒙古畜牧兽医 , 1 9 7 8 ( D : 1一始
鲁西科 。 动物毒物学杂志 , 1 9 8 6 l( ) : 3 2一 3
李建科等。 中国兽医科技 , 19 8 7 ( 5) : 2 一 23
曹光荣 等。 中国普医科技 , 1 , a s ( 3 ) : 4 1一 4 3
张生 民等 。 畜牧兽 医学报 , 1 9 8 1 ( 3 ) : 1 4 5一 14 9
谢贞兰 。 青海畜收兽医杂志 , 1 9 8 2 (3 ) , 91 一92
王建 辰 . 孕酮及其在家畜繁殖上的应 用 , 家畜的生殖激素 , 2 72 一 3 54
Ja 功 e s L F e t a i . JA V M A , 2 0 5 1 , i 了s : 1 4 6一 i魂。
L e g r a n d C
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. 才 m e r J 犷 e t R e s z , 8 5 , z盛6 : 1 . 0 3一 25 0了
W i ll
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. 才川 e r J 厂 e t R e s 1 9 7 4 ; 3 4 : 2 0 9一 2 1 1
W i l l
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. 刁川 e , J 犷 ` t R e s 1 0 7 5 , 3 6 : 5 2 5一 5 2 6
B a l l L D
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JA V M A
,
1 0 7 3 , 16 2
: 2 0 1一 2 0 3
M o l l w r a i t h C W
.
AJ V M A
, 2 9 5 2 , 2 5 2
, 2 5 5一 2 5 a
K o n d a l l J 1 e t a l
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,二,土.ō1几上孟勺山
S T U D I E S O N T H E A BO R T IO N O F G O A T C A U S E D
B Y O X Y T R O P I S O C H R O C E P H A L A
T o n g C h e
: 、 D u a n D e i x i a n C a o G u a n g r o n g
(犷 e t e r i n a r 夕 对 e d `e ` ” e D e P a r t琳 e n t , N o r t h川 e s t e r n
A b s t r a e t
S h a o i u n X i u D e n g m i n g
A 夕r i e u l t u r a l U n i口 e r ` i t y )
F i v e p r o g n a n t g o a t s w e r e f e d w i th o 劣夕 t r o P i s o e h r o e e P h a l a P“ n夕 e o f 2 2 9 / k g
e v e r y d a y f r o m t h e 5 4 t h d a y o f g e s t a t i o : 1
.
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, 2 1 t h , 2 2 t h a n d 3 3 t h d a y s “ f t e r i n g e s ti n g t h e p o i s o n o n s p l a n t ,
w h i l e t h e e o n t r o l g o a t s p r o d u c e d t h e h e a l t h Ia m s
.
H i s t o p a t h o l o g i e a l c h a n g e s o f
o r g a n s f r o m a b o r t e d 9 0 “ t s , e s p e c i a l l y o v a r y a n d p l a c e n t a , w e r e e X a m i n e d , a n d
t h e l e v e l o f p r o g e s t e r o n e a : 、 d 17刀一 e 、 t r a d i o l i n t h e e x p e r i m e n t a l g o a t s w e r e
d e t e r m i n e d b y r a d i o i m m u n o a s s y
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e p o i s o n o u s p l a n t
e o u l d r e s u l t i n g r a n u l a r d e g e n e r a t i o n a n d v a e u o l a r d e g e n o r a t i o n o f o v a r y a n d p l a -
e e n t a i n d e c r e a s e i迁 p r o g o s t e r o n e . T h e e h ; n g e s m i g h t d i s t u r b e d t h e s u p p l y o f
n u t r i t i o n f r o m m a t e r : l a l b o d y t o f e t u s
, a l s o
, t h e t o x i n o f p l a n t a e t s o n f e t u s
。
A 11 o f t h e f a e t o r s In e一l ti o : l e d a七o V e m i g h t C a u s e g o a t a b o r ti o n .
K e y w o r d s : o x y t r o p i s o e h r o e o p h a l a ; g o a t ; a b o r t i o n ; p r o g e s t e r o n e , l了刀 -
e s t r a di o l ; g r a n u l“ ` d o g o n e r a t i o l飞; v a e u o l a r d e g e n e r a t i o li