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兔眼越桔芽增生诱导培养基及激素的筛选



全 文 :吉林农业大学学报 2002 ,24(1):55 ~ 57
Journal of J ilin Agricultural Universi ty
兔眼越桔芽增生诱导培养基及激素的筛选
刘树英 , 张志东 , 吴 林 , 安 伟 , 李亚东
(吉林农业大学农学院 , 吉林 长春 130118)
摘 要:利用固体培养方式 , 对兔眼越桔(Vaccinium ashei Reade)5个栽培品种的茎段进行了芽诱导增殖试验
(采用的基本培养基有:MS 、WPM 和 Anderson , 采用的激素有:6-BA 、ZT 和 NAA)。试验结果表明:①MS 、
WPM 、Anderson 培养基都适宜于芽的增殖 , MS 和WPM 培养基较 Anderson 培养基表现好;②激素组合以
6-BA 5 mg/ L+ZT 1 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L 和6-BA 5 mg/ L+ZT 2 mg/ L+NAA 0.3 mg/ L为好。
关键词:兔眼越桔;芽;诱导;激素;培养基
中图分类号:S685.21   文献标识码:A   文章编号:1000-5684(2002)01-0055-03
Screening of Culture Media and Hormones for Inducing the
Propagation of Rabbiteye Blueberry Shoots
LIU Shu-ying , ZHANG Zhi-dong , WU Lin , AN Wei , LI Ya-dong
(College of Agronomy , J ilin Agricultural University , Changchun , J ilin 130118 , China)
Abstract:The experiment of inducing the propagation of rabbiteye blueberry(Vaccinium ashei
Reade)shoo ts f rom stem segments of f ive cultivated varieties by w ay of solid cultivation w as con-
ducted(MS 、WPM and Anderson as basic media were applied respectively , and hormones used
w ere 6-BA 、ZT and NAA).The results showed that MS 、WPM and Anderson w ere all sui table
for the propagation of shoots while the former two were more effective than the third;hormone
combination w ith 6-BA 5 mg/ L +ZT 1 mg/L +NAA 0.2 mg/ L and 6-BA 5 mg/L +ZT
2 mg/L+NAA 0.3 mg/L was the best , and good media were established successfully.
Key words:rabbiteye blueberry;shoot;induction;ho rmone;medium
  越桔为杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vac-
cinium L.)植物。越桔果实色泽美观(蓝黑色或红
色),营养丰富 ,甜酸适口 ,是具有较高经济价值和
广阔开发前景的新兴果树树种 。兔眼越桔(Vac-
cinium ashei Reade)是北美三大商业栽培越桔类
群之一 ,原产于美洲亚热带地区 ,主要分布在河流
两岸的湿地 、河谷 ,耐湿热及抗旱能力强 ,对土壤
条件要求不严 ,并且较其他类群具有生长势强 、产
量高等优点 ,在日后越桔产业发展中将会占有不
可替代的地位。兔眼越桔繁殖方法有扦插繁殖法 、
分株繁殖法 、组织培养繁殖法 ,前2种方法与后者
相比 ,具有繁殖慢 、繁殖规模受限及生产出的苗木
在生长势 、果实品质等诸多方面较组培苗差等不
足[ 1-2] ,同时有许多品种采用前2种繁殖方法生根
较难[ 3] ,或生根率低[ 4] 。越桔组织培养研究工作
I.V.Hall始于1976年[ 3] 。目前 ,已在多个类群中
建立了微芽繁殖或不定芽继代繁殖程序 ,主要有
高丛越桔(V.corymbosum)[ 5-9] 、矮丛越桔(V.
angust ifolium)[ 10-12 ,4] 、蔓越桔(V. macrocar-
pon)[ 13-14] 、兔眼越桔(V.ashei Reade)[ 9 ,15-16] 、红
基金项目:长春市科委资助项目(长科合字第 01-063N23)
作者简介:刘树英(1974-),女 ,硕士研究生 ,研究方向:园艺植物生物技术。
收稿日期:2001-12-24
DOI :10.13327/j.j jlau.2002.01.012
豆越桔(V.vi tis-idaea L.)[ 17-21] 。其中 ,兔眼越桔
的繁殖程序不够完善 ,本文将在前人的基础上就
兔眼越桔芽增生诱导工作做进一步探讨 。
1 材料与方法
1.1 材料
试材取自于吉林农业大学农学院园艺系浆果
园三年生兔眼越桔(1999年由南京植物研究所赠
送)的幼嫩枝条 ,品种有:园蓝(Gardenblue)、杰兔
(Premier)、芭尔德温(Baldw in)、蓝美人(Blue-
belle)、巨丰(Dellite)。
1.2 方法
试验于2000年4月至2000年8月末在吉林农业
大学浆果研究所进行 。从植株上剪取幼嫩枝条后 ,
用自来水冲洗5 ~ 10 min ,再用洗衣粉漂洗5 ~
10 min ,然后用0.1%的氯化汞消毒3 ~ 8 min ,最
后用无菌水冲洗3 ~ 4次 , 每次10 min。剪取长约
1 cm的幼嫩单芽茎段接种于培养基上 ,基本培养
基为 Anderson 、MS 和 WPM , 然后各加入蔗糖
30 g/L ,琼脂6.5 g/L , pH 5.4 ~ 5.8 ,再各添加不
同的激素组合:①ZT 4 mg/ L +NAA 0.2 mg/L;
② ZT 3 mg/ L+ NAA 0.3 mg/L ;③ 6-BA
5mg/L +ZT 2 mg/ L+NAA 0.3 mg/ L;④6-BA
5mg/L +ZT 1 mg/ L+NAA 0.2 mg/L;⑤6-BA
3mg/L +NAA 0.2 mg/L;⑥6-BA 3 mg/L+NAA
0.3 mg/L。
2 结果与分析
2.1 芽诱导培养基的选择
根据基本培养基及激素组合的不同 , 对影响
兔眼越桔芽诱导的培养基设计了3个试验 ,试验结
果见表1。
表1 3种基本培养基中不同激素组合对兔眼越桔侧芽诱导增殖的影响
Table 1.The effect of induction in three basic media with different hormone combinations in rabbiteye blueberry
基本培养基
Basic
medium
激素组合
Hormone
combi-
nation
园蓝
Gardenblue
杰兔
Premier
芭尔德温
Balduin
蓝美人
Bluebelle
巨丰
Dellit e
萌芽数
No.of
sprout
萌芽率/ %
Sprout
rate
萌芽数
No.of
sp rout
萌芽率/ %
Sprout
rate
萌芽数
No.of
sprout
萌芽率/ %
Sprout
rate
萌芽数
No.of
sprout
萌芽率/ %
Sprout
rate
萌芽数
No.of
sprou t
萌芽率/ %
Sprout
rate
Ande-
rson
1 9 38(+) 10 42(+) 12 50(+) 8 33(+) 14 58(+)
2 15 63(+) 10 42(+) 13 54(+) 7 29(+) 15 63(+)
3 13 54(+) 9 38( ) 13 54( ) 9 38( ) 13 54( )
4 10 42( ) 8 33(+) 14 58( ) 6 25(+) 13 54( )
5 4 17(+) 4 17(+) 2 8(+) 1 4(+) 3 13(+)
6 3 13(+) 3 13(+) 1 4(+) 2 8(+) 2 8(+)
WPM
1 10 42(+) 10 42(+) 12 50(+) 15 60(+) 11 46(+)
2 9 38(+) 11 46(+) 13 54( ) 12 50(+) 13 54(+)
3 15 60(+) 15 60( ) 15 62( ) 13 54( ) 16 67( )
4 17 70(+) 16 67(+) 14 58(+) 14 58(+) 12 50(+)
5 2 8(+) 4 17(+) 1 4(+) 3 13(+) 4 17(+)
6 3 13(+) 3 13(+) 2 8(+) 2 8(+) 1 4(+)
MS
1 8 33(+) 10 42(+) 10 42(+) 6 25(+) 10 42(+)
2 11 46(+) 10 42(+) 6 25(+) 7 29(+) 12 50(+)
3 14 58(+) 9 38( ) 11 46( ) 8 33(+) 10 42( )
4 12 50( ) 10 42(+) 9 38( ) 6 25( ) 13 54( )
5 1 4(+) 2 8(+) 1 4(+) 0 0 0 0
6 2 8(+) 1 4(+) 0 0 1 4(+) 0 0
 注:表内数字为24 个外植体接种30 d后统计结果。(+)表示生长势一般 , ( )表示生长势较好 ,萌芽率=(萌芽的外植体数/总外植体
数)×100%
Note:The data in the table w ere calculated f rom 24 cotyledons 30 days af ter inoculation.The symbols in the bracket indicate the grow th vig-
or.(+):good , ( ):bet ter.Shoot sp rout rate = the explants w ith shoots/ the total explants × 100%
  从表1可以看出:采用 Anderson 、WPM 和 MS
培养基都适宜于诱导兔眼越桔的幼嫩茎段萌芽 ,
这与Wolfe 的结论是一致的[ 8] 。总体比较 , MS 培
养基优于 WPM 培养基 ,WPM 培养基优于 An-
derson培养基。采用 Anderson为基本培养基的 ,
萌芽率因激素组合不同而不同 ,在0%~ 58%之
56  吉 林 农 业 大 学 学 报                 2002年
间 ,萌芽外植体数在0 ~ 13之间;采用 WPM 为基
本培养基的 ,萌芽率在4%~ 63%之间 ,萌芽外植
体数在1 ~ 15之间;采用 MS 为基本培养基的 ,萌
芽率在8%~ 70%之间 ,萌芽外植体数在1 ~ 17之
间。
2.2 芽诱导激素组合的选择
从表1中可以看出:细胞分裂素对兔眼越桔幼
嫩茎段诱导至关重要 ,这与 Read 的结论是一致
的[ 2] 。尤其以 ZT 的诱导作用较为明显 ,而且当
ZT 为1 mg/L 、2 mg/L 时兔眼越桔幼嫩茎段萌芽
率最好 ,萌芽率为25%~ 70%之间 ,而且大都在
40%~ 50%之间。ZT 为3 mg/L 、4 mg/L 时 ,诱导
作用不佳 ,生长势较差;6-BA诱导效果较差 ,萌芽
率都在20%以下;而在Anderson培养基中表现最
差 ,巨丰 、芭尔德温和蓝美人的萌芽率为0。经综合
分析 ,笔者认为激素组合中③、④诱导效果最好 ,
①、②次之 , ⑤、⑥最差。
3 小结与讨论
兔眼越桔芽增殖诱导生成的最佳外植体为春
季剪取幼嫩枝条处理后的茎段 。用其作外植体 ,初
期茎段诱导萌芽需7 ~ 10 d ,萌芽到长成枝条的生
长势各品种表现不同 ,基本是 Bluebelle和 Dellite
表现较好。经试验研究 ,笔者认为 Anderson 、MS 、
WPM培养基都适宜于诱导兔眼越桔茎段芽增
殖 ,这与美国专家Wolfe[ 8]的结论是一致的 。诱导
效果优劣的培养基排列依次为 MS >WPM >An-
derson。笔者与 Ly rene[ 22] 、金炜等[ 16 , 22]所用的主
要激素不同 ,因只有选用适宜细胞分裂素及适宜
浓度 ,才能达到快繁的目的 。笔者选用激素的是6-
BA(6-苄基氨基嘌呤)和 ZT(6-4-羟基-3-甲基-2-
反式-丁烯氨基嘌呤)。由试验结果可知:6-BA 不
适合诱导兔眼越桔芽萌发 ,萌发率低 ,而且接种的
外植体芽有的不萌发 ,有的只长愈伤组织 ,有的长
出小叶逐渐变红变褐坏死。而 ZT 适合诱导兔眼
越桔芽萌发 ,不仅萌发率高 ,而且接种的外植体芽
生长势好 。Lyrene 与金炜用的激素是2ip(2-异戊
烯基氨基嘌呤 ,仅与 ZT 相差1个羟基),诱导效果
与ZT 的基本一样 ,但繁殖周期长 。
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57第 24卷 第 1期          刘树英等:兔眼越桔芽增生诱导培养基及激素的筛选