全 文 ：2008年第 2期(总第 115期) 广西 热 带农 业 7
厚荚相思种子离体培养萌发试验
秦 欣 1 岑秀芬 1 韦鹏霄 1 赖家业 2 秦武明 2
(1广西大学农学院 , 南宁 530005;2广西大学林学院)
摘 要:对影响厚荚相思种子离体萌发的几种因素进行系统的试验研究 , 结果表明用浓硫酸 30
min加沸水浴 10 min的处理方法的萌发率高于单一的浓硫酸处理或沸水处理;接种方式以胚芽向下接
种最佳 ,诱导培养基以 1/2MS培养基为宜。
关键词:厚荚相思 种子萌发率 离体培养
基金项目:广西科学基金(0342013);国家林业局重点开放实验室项目。
作者简介:秦欣 ,男 ,四川邻水人 ,在读硕士研究生。
通讯作者:韦鹏霄 ,男 ,副研究员 ,硕士生导师。
收稿日期:2007-12-18
厚荚相思(Acacia crassicarpa)原产澳大利亚 ,为热
带速生豆科乔木树种 。其适应性强 , 多生于沿海深厚
沙土和粘土 ,具有固氮改土性能 ,能耐火烧和海风(含
盐);主干通直 ,为重要的纸浆和用材树种 [ 1]。1985年
我国开始引种 , 经种源试验和林木改良 , 厚荚相思已
在华南地区推广 , 成为我国南方短周期工业用材林的
主要造林树种之一。相思树常规繁殖方法以种子繁殖
为主 ,但厚荚相思种子具有种皮坚硬 ,外层裹有蜡质 ,
不易吸水膨胀的特点 ,未经处理的种子 ,萌发不整齐 ,
萌发期长达 2 ～ 3个月 ,有的甚至半年后还有萌发[ 2 , 3] ,
因此需要进行萌发前处理以打破休眠。本试验旨在对
影响厚荚相思树种子离体萌发率的几种因素进行系
统的研究 , 以提高离体培养获得无菌苗和进行离体快
繁的效率。
1 材料与方法
采用厚荚相思优良单株种子为试材 , 进行如下几
项试验 。
1.1 种子预处理
分别采用 98%浓硫酸处理种子 10 、30 、60 min;沸
水浴处理种子 5 、 10、 20 、 35 min;98%浓硫酸处理 30
min后再沸水浸泡 5、10 、20 min这 3种方法进行预处
理 , 空白试验为对照 。每个处理 50粒种子 , 重复 3
次 。每种方法都将处理好的种子先用 75%酒精消毒
60 s , 然后用 0.1%升汞消毒 10 min , 最后经无菌水冲
净后接种在 pH值 5.8的 MS培养基上培养。
1.2 种子灭菌消毒处理
种子先用 98%浓硫酸处理 30 min后沸水浴处理
10 min;然后分别用 75%酒精处理种子 30、60 s , 再分
别用 0.1%升汞消毒 10、20 min , 共设 4个处理 , 每个
处理 50粒种子 , 重复 3次;最后用无菌水冲洗 5遍后
接种在 pH值 5.8的 MS培养基上培养。
1.3 种子接种方式
对种子先用 98%浓硫酸处理 30 min后再沸水浴
处理 10 min , 然后依次用 75%的酒精消毒 60 s、 0.1%
的升汞消毒 10 min , 最后用无菌水冲净后接种在 pH
值5.8的 MS培养基上培养 ,采用撒播和胚芽向下 2种
接种方式共设 2个处理 , 每处理 50粒种子 , 重复 3
次。
1.4 诱导培养基设计
按 1.2.3的方法对种子进行预处理和灭菌消毒
处理 , 然后将处理好的种子分别接种在 pH值 5.8的
MS 、1/2MS 、改良 MS 、MS+活性炭 4种诱导培养基上
培养 ,每种培养基接种 50粒 ,重复 3次 。
培养条件:温度 25±2 ℃,光照强度 2000 lx ,光照
时间 12 h/d的培养室内培养 。
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观察统计:各实验处理分别在接种培养 10、20 、30
d时观察统计种子萌发情况 , 并采用 DPS 7.05数据统
计分析软件进行多重比较分析 。萌发率=未污染种子
发芽数/未污染种子数×100%。
2 结果与分析
2.1 不同预处理对离体培养萌发的影响
结果见表 1。用 98%浓硫酸处理相思种子 ,处理
30 min的萌发率较高 ,到第 10 d萌发率达 16.38%, 30
d达 56.23%;处理 10、60 min的种子萌发率明显不如
处理 30 min。可能是用 30 min处理的种子已充分吸
胀 ,所以萌发率较高;10 min的处理时间可能过短 , 种
子未得到充分吸胀而使萌发率不够高;60 min的处理
可能由于处理时间过长 , 使种子结构受到浓硫酸伤
害 , 导致萌发率降低 。而未经浓硫酸处理的种子根本
不萌发。
用沸水浴处理厚荚相思种子 ,处理 20 min的种子
萌发率较高 , 30 d后达到了 21.82%;而处理 35 min的
种子萌发率只有 5.97%, 这可能是由于处理时间太
长 ,引起种子坏死 ,从而导致萌发率降低。未经沸水浴
处理的种子也根本不萌发。
用 98%浓硫酸处理 30 min 结合不同的沸水浴
处理(5 、10 、20 min)厚荚相思种子 , 结果 , 浓硫酸处
理30 min结合沸水浴处理 10 min萌发率最高。
浓硫酸处理
(min)
沸水浴处理
(min)
萌发率
10 d(/%) 20 d(/%) 30 d(/ %)
0 0 0 0 0Hh
10 0 8 25 29.79De
30 0 16.38 40.78 56.23 Bbc
60 0 10 32.65 42.86 Cd
0 5 0 8 12 FGg
0 10 0 12 14.58 EFg
0 20 5 17.85 21.82 Ef
0 35 3 5.97 5.97 GHh
30 5 22 42 60 ABb
30 10 28 48 67.35Aa
30 20 32 44 52 Bc
表 1 不同预处理方法对厚荚相思种子离体培养萌发的影响
表 2 不同的灭菌组合处理对厚荚相思种子离体培养萌发的影响
75%酒精
处理时间(s)
0.1%升汞
处理时间(in)
30d
污染率(%) 萌发率(%)
0 0 100 Cc
30 10 4 62 Aa
60 10 2 54 ABab
30 20 4 46 ABab
60 20 2 38 Bb
2.2 不同灭菌处理对离体培养萌发的影响
用 75%酒精结合 0.1%升汞消毒厚荚相思种子 ,
比较不同处理组合的灭菌效果和对种子萌发的影
响。结果见表 2 ,不同灭菌组合的灭菌效果均较好 ,培
养 30 d后的菌污染率只为 2%或 4%;不同灭菌组合
的处理时间对种子萌发率的影响较大 ,其中 75%酒精
处理 30 s加 0.1%升汞处理 10 min种子萌发率最高 ,
由此说明这个组合对种子的伤害较小 。
2.3 不同接种方式对离体培养萌发的影响
用撒播和胚芽向下的接种方式来接种 , 比较 2种
接种方式对厚荚相思种子萌发的影响。结果见表 3 ,经
方差分析发现这 2种接种方式萌发率的差异不显著 ,
表明本试验的不同接种方式对种子萌发率的影响不
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表 3 不同接种方式对厚荚相思种子离体培养萌发的影响
不同接种方式 30 d萌发率(%) 整齐度
撒播 62 低
胚芽向下 66 高
大 , 但后期观察发现对苗的整齐度有很大影响 , 以胚
芽向下的接种方式整齐度为佳。
2.4 不同诱导培养基对离体培养萌发的影响
从表 4中可以看出 , MS 、1/2MS 、MS+活性炭这 3
种培养基都有较高的种子萌发率 , 30 d后均显著高于
改良 MS , 但这 3种培养基之间的种子萌发率差异不
显著 , 种子萌发率最高的是 1/2MS 培养基 , 达到了
69%, 改良 MS 培养基的种子萌发率最低 , 只有
34.04%。表明厚荚相思种子离体培养萌发时 ,不需要
MS培养基的全量大量元素;加入活性炭的 MS培养
基 ,种子萌发率高于不加活性炭的 MS培养基 ,说明活
性炭对提高种子的萌发率有一定的效果 。
3 小结
厚荚相思种子是硬实种子 , 在自然情况下 , 只能
靠细菌和真菌分泌酶类去水解这些种子种皮的多糖 ,
使种皮变软后萌发 [ 4]。本试验结果表明:用 98%浓硫
酸处理 30 min后再沸水浴处理 10 min , 然后依次用
75%酒精处理 30 s、升汞处理 10 min后采用胚芽向下
的方式接种在大量元素减半的 1/2MS培养基可以获
表 4 不同诱导培养基对厚荚相思种子离体培养萌发的影响
诱导培养基 萌发率
10 d(%) 20 d(%) 30 d(%)
MS 22 38 61.22 Aa
1/2MS 25 46 69 Aa
MS+活性炭 28 40 65 Ab
改良MS 10.64 19.15 34.04 Bb
(上接第 6页)
熟桃结果枝占的比例大 ,结果性能好 。
在对花芽种类进行调查中发现 , 早熟桃主要是单
花芽和三花芽 , 花芽大部分在长结果枝和中结果枝
上 , 长结果枝上的三花芽最多 , 占花量的 44.26%, 其
次是单花芽占 39.25%;说明早熟桃花芽种类多。
开花量大 ,结果率高。随机调查 5株早熟桃和毛桃 ,
每树随机选一大枝 。座果数在终花期后 25天进行调
查 。调查结果 ,早熟桃的开花量比毛桃多 ,平均每大枝开
花量为 577朵 、平均结果数 112个 、座果率 19.4%。毛桃
每大枝开花量为 329朵 、结果数 17个 ,座果率 5.17%。
早熟桃座果明率明显比毛桃高 ,优势很明显。
3 小结
优势 。台湾早熟桃春梢 、秋梢比较短 、粗壮 , 长短
适宜 。以长果枝结果为主 , 结果枝的结果能力强。开花
量和结果率高 ,座果率是毛桃的几倍 ,优势很明显。
存在问题 。台湾早熟桃树势旺盛 ,落叶迟 ,甚至没
有落叶终期 ,无法进行正常休眠。叶片病虫害严重 ,抗
性能力弱 。
得较好的培养效果。
在本试验中 , 虽然厚荚相思种子的离体培养萌发
率达到了 69%,但和其他同类研究的报道 [3]的结果仍
有差距 , 这可能是由于品种不同 , 以及种子保存时间
过长 ,种子活性降低所致。
参考文献
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