全 文 ：黔产酢浆草总黄酮含量的测定及提取方法研究
贵州省六盘水师范高等专科学校(553004) 谭 萍 赵云婵
酢浆草(Oxalis corniculata L)为酢浆草科的多年生小
草本 ,全草味酸 , 因此也称酸浆草 、酸味草 、酸草 、三叶酸 、酸
咪咪等。产于空地 、路旁及杂草地上 , 分布于贵州及全国各
地。全草含柠檬酸 、苹果酸 、酒石酸 、草酸盐等。其性味功
效为酸 、凉 、清热解毒 、利湿消肿。在临床上可用来治疗神
经衰弱 、失眠 、肺炎 、扁桃体炎 、急性肝炎 、小儿上呼吸道感
染等多种疾病[ 1] 。
黄酮类化合物广泛存在于自然界的许多植物中 , 是一
类重要的天然的有机化合物 ,其生理活性多种多样 , 主要表
现在对心血管系统的调节作用 、抗炎作用 、抗菌及抗毒素作
用等 ,因而引起了国内外的广泛重视 , 研究进展很快[ 2] 。本
研究就酢浆草总黄酮的提取方法进行比较研究并利用紫外
可见分光光度法测定其含量 , 以期为酢浆草总黄酮的提取
及酢浆草的进一步利用提供相应的依据。
1 材料与仪器
1.1 仪器:UV —9100 紫外可见分光光度计。
1.2 试剂:标准品芦丁为比利时进口。所用试剂均为分析
纯 ,所用水为蒸馏水。
1.3 材料:供试样品酢浆草采自我校的花圃空地 , 测得其
含水量为 81.3%。
2 方 法
2.1 总黄酮含量的提取:将酢浆草清洗干净 , 待其自然晾
干 ,称取其鲜重 , 置于恒温干燥箱中烘干至恒重 ,称其干重。
计算出含水量 , 再将其磨碎过 60 目筛。分别精密称取 1 g
的酢浆草全草粉末于索氏抽提器中 , 分别加入 70%的乙
醇 、50%的乙醇 、70%的甲醇 、50%的甲醇 100 mL , 在 90 ℃
的恒温水浴锅中分别提取 8、4、2、2 h ,倒出提取液用减压蒸
馏浓缩去乙醇 、甲醇后 , 浓缩液用相同体积的乙醚洗 2 ～ 3
次 ,以除去叶绿素及蜡质 , 最后用 70%的乙醇将各提取液
分别定容至 100 m L待测。
2.2 绘制标准曲线[ 3] :准确称取 10 mg的标准芦丁样品 ,
用 70%的乙醇溶解并定容至 100 m L ,其浓度为 100 mg/L ,
将芦丁溶液用 70%的乙醇稀释成 0、5 、10、15、20、25 、30 、
35 、40 、45、50 、55 、60、65 、70、75 、80 、85、90 、95、100 mg/ L ,各
取 1 mL 于试管中加入 70%的乙醇 1 mL , 加人 300μL 5%
NaNO 2 , 6 min 后加入 300 μL 10% Al(NO3)3 溶液 , 6 min
后再加入 2 m L 4% NaOH , 10 min 后于分光光度计波长
510 nm 测定吸光度(A)值 , 绘制浓度-A 标准曲线。
2.3 样品中总黄酮含量的测定:取经稀释过的样品液各 1
mL ,按上述同样的步骤和方法测定得 A 值 ,然后从标准曲
线查得样品中的总黄酮含量(mg/ L),最后根据稀释倍数及
下式计算每克干酢浆草中总黄酮的含量(μg):干样品中总
黄酮含量(μg/g)=V×C。式中:V 为 1 g 干酢浆草的提取
液的体积(mL), 本实验为 100 mL。 C 为提取液中测得的
总黄酮含量(mg/ L)。
3 结果与讨论
酢浆草的总黄酮含量按 4 种不同溶剂分别为 17 258、
19 879 、22 258、12 863μg/g 。
由以上结果可知在对酢浆草全草的总黄酮提取的 4 种
方法中 , 酢浆草的总黄酮含量最高的提取方法是用 70%的
甲醇 , 提取 2 h , 总黄酮的含量为 22 258 μg/g 。此外 , 本次
实验结果还表明在用不同浓度的提取试剂提取总黄酮时 ,
用 50%的乙醇提取效果要比 70%乙醇的效果好 ,而在用甲
醇提取时 , 则是 70%的甲醇所提总黄酮的效果要比 50%的
甲醇高。
生物类黄酮在自然界中不仅分布广 、含量高 , 还具有多
种生理活性。其具有超强的抗氧化能力 , 早在 20 世纪 60
年代就已经证实了黄酮的抗油脂过氧化作用;20 世纪 80
年代以来 , 研究逐渐发现生物类黄酮在清除自由基的能力 、
抗衰老及对老年病的防治方面均有较好的功效。近年来随
着研究方法和技术的不断提高 , 发现了许多新的种类和生
理作用 , 特别是抗自由基及抗癌 、防癌的作用 , 使生物类黄
酮的研究进入了一个新的阶段 , 掀起了生物类黄酮的研究 、
开发 、利用热潮。
酢浆草的茎 、叶中有大量的草酸盐 ,另外叶中还含有柠
檬酸及大量的酒石酸 , 茎含有苹果酸 ,对金黄色葡萄球菌有
抗菌作用[ 3] 。有关酢浆草的总黄酮含量目前尚未见报道 ,
本研究就酢浆草中的总黄酮含量的提取方法进行研究 , 以
期为酢浆草的进一步医药研究提供相应的依据。
参 考 文 献
1 江毅 ,李朝斗 ,杨卫平 ,等 ,编.草药彩色图集.贵州:贵州科学
技术出版社 , 2001.324.
2 吴立军 ,主编.中药化学.北京:中国医药科技出版社 , 2000.103-
107.
3 张志良 ,瞿伟菁 ,主编.植物生理学实验指导.第 3版.北京:高
等教育出版社 , 2003.173-175.
(收稿日期:2005-11-18)
作者简介:谭萍 ,女 , 1963 年 4 月生 , 副教授 ,贵州省六盘水
师范高等专科学校 , 553004
·462· 山西医药杂志 2006年 5月第 35卷第 5期 Shanxi Med J ,M ay 2006 , Vol 35 , No.5