全 文 ：上 海 农 业 学 报 199 0, 6 ( 3 ) : 8 5一 88
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上海地区香石竹斑驳病毒的若干行为 ’
张 爱 平
(上海市园林科学研究所 , 上海 2 00 2 32)
摘 要 香石竹斑驳病毒 (C a M V ) 是茎尖苗中的主要病毒 , 较难通过常规茎尖培养方法脱
除 。 生物检测仍是剔除带毒苗的简易手段之一 , 高雪轮是 C a M V 的一种敏 感 检测 寄 主 。 上海
地区 C a M V 不同分离物存在着寄主反应差异 。 不卫生园艺操作是 C a M V 田间扩散的重要因素 。
在国内普遍发现 C a M V 的情况下 , 香石竹外检对象的拟定应进一步斟酌。 香石竹脱毒方法也有
待改进 , 以提高脱毒率 。
关健词 香石竹 ; 香石竹斑驳病毒 , 检测
在香石竹 系列化生产的诸多环节中 , 香石竹病毒已经成为引起香石竹品质退化 , 妨碍优
质种苗生产的重要 因子 。 八十年代初 , 上海园林科研所与复旦大学和上海生物化学研究所 等
单位协作 , 曾诊断出田间发生的四种 香 石 竹 病毒 , 即 潜 隐 病毒 ( C a L V ) , 脉 斑驳病毒
( C a V M V )
, 蚀环病毒 ( C a E R V )和坏死斑点病毒 ( C a N F V ) . 限于当时的条件 , 未能把病毒
一一分离出来 , 也未肯定其它病毒 。 近几年研究表明 , C a M V 在上海地区香石竹上发生很普
遍 [ 2 〕。 本文简要报道对这一病毒检测研究的部分结果 .
材 料 与 方 法
(一 ) 组培苗来谏 由本研究所组织培养室剥取 0 . 2一 0 . 7 m m 香石竹茎尖培育而成 .
(二 ) 生物检测 用 0 . 001 M , p卿 . 4 的 P B 研取病汁液 , 按照常规汁液摩擦接种方法接
种于指示植物 , 置于防虫温室内观察 。 指示植物一般为 4一 6 叶期 .
(三 ) 电镜观察检测 用 0 . 0肠M 的 P B 研取病汁液 , 经 4 % P T A 负染后用 H 一30 0 型电
镜观察 。
(四 ) 血清反应检测 琼脂双 扩法 。 所用琼脂糖平 板以 0 . o 1M P B S 缓 冲液配制 ( 内含
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.弱% , 加叠氮钠 0 . 4肠为防腐剂 ) 。 抗血清为英国温室作物研究所 B r u nt 博士赠送 ,
同时用北京农业大学于嘉林先生提供的自制 C a M V 抗血清作比较 . 加样后置 于 白瓷盘内 ,
常温保湿 24 小时观察结果 。
结 果 与 分 析
(一 ) 香石竹茎尖苗带毒状况 根据有关资料 s1t , 绝大多数香石 竹 病 毒 都 能 在览色荻
( C h e o O夕 o d l’ u o a m a , a n t f e o l o r )或昆诺冀 ( C . g u i n o 。 )上产生症状 . 据此 , 对移盆定植于消毒
本文于 19 89年 9 月 20 日收到 , 19 90年 5 月 12 日收到修改稿。
寒 本研究为上海市青年科技基金资助课题 ; 本工作得到本所袁梅芳、 上海生化所沈菊英的热情帮助 ,
特此一并致谢 .
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介质中 1一 , 个月的香石竹茎尖苗采样检测 。 因为 , 定植 1一 2 个月后 , 小苗体内病毒已积累
到相当浓度 , 有利于采用生物检测法 。 结果 , 随机采样邪3 棵组培苗中 , 60 棵 样 品 在昆诺
葬或览色葬上产生局部枯斑或褪绿斑 , 有时还产生系统褪绿和扭曲症状 。 对不使觉色黎等显
症的样品小苗进行电镜和血清学反应抽样检测 , 未发现病毒 。 这表明生物检测剔除带毒种苗
有一定的可靠性 , 并测出这批茎尖苗带毒 率至少达 23 % 。 接种指示植物后 , 常温下 6一 7 天
便可观察到结果 。
(二 ) 带毒茎尖苗中的主要病毒种类 从上述带毒苗中随机取样 3 个 , 从另一批组培茎
尖苗盆栽群体中采表现褪绿斑驳和白色线纹坏死等病毒病症状 的样品 n 个 ,以其昆诺黎病叶
汁液为抗原进行免疫双扩散试验 。 结果 , 3 个样品有 幻 个与 C a M V 抗血清 起 反应 , 另外
1 个样品则全部与 C a M V 抗血清反应 , 比例分别为 7 6%和 10 0 % 。 而没有一 个样品与环斑
病毒 ( c a R v )和 C a L v 、 C a N F v 等有反应 , 其它病毒尚待测定 。 可见 , 在带毒茎尖苗 中 ,
C a M V 是主要病毒之一 。 这一结果同时表明 , 仅用常规茎尖组培法 (即 , 取 0 . 2一 0 . 7 m m 茎
尖在没有其它辅助措施的情况下进行培养 )难以全部脱除病株中所带的 C a M V 。
(三 ) 上海地区 C a M V 的寄主反应差异 带毒样品经过在觉色蔡上单斑纯化 后获得多个
纯净的分离物 。 各个分离物的觅色黎或昆诺拿病叶汁液均见到直径 3O n m 左右的球状病毒粒
体 , 琼脂双扩散试验中均与英国 B r u nt 博士赠送 的 C a M V 抗血清和北京农业大 学 于嘉林先
生提供的 C a M V 抗血清发生反应 , 产生清晰的沉淀线 , 各分离物的沉淀线 完全 融合 。 但在
览色菠或昆诺葬上的反应有两种类型 : 一种仅为局 部褪 绿斑或枯斑 , 以 C V 8 9 一 4 为代表 :
另一种则除局部症状外还有系统褪绿及扭曲等症状 , 以 C V 一6 8 为代表 。 寄主反应的比较见
表 1 .
表 1 C a MV 不同分离物寄主反应比较术
T a b l e 1 5了m p t o m , o f 2 C a M V ’ : i s o l a t e s o n s o m e h o s t p l a n t s
供试植物
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. 符号说明 L : 局部 , S : 系统 , 。 hl : 褪绿 ; N : 坏死 ; O : 无症状
2
. 虹豆为子叶期 。
可见 , 上海地区的 C a M V 不同分离物虽然 血清学关系基本一致 , 但在致病性 (或寄主反
应 ) 上并不是一个均一的群体 , 而是有差异的 。 故正在扩大上述代表分离 物 的寄主范围与反
应试验和其它特性的研究 , 以确定它们的株系所属及其鉴别寄主 。
(四 ) 高雪轮可作为 C a M V 的检测寄主 高雪轮 ( lS’ l e n e ar o er l’a ) 常 作为 C a E R V 灵敏
的指示植物 〔“ ]。 作者曾报道 , 另有一种直径约 3O n m 的球状病毒和 长度约 7 60 n m 的线状病
毒也能通过汁液摩擦传染至高雪轮 , 并表现 出与接种了 C a E R V 后相似的症状 [4 】。 经进一步
分离鉴定 , 球状病毒就是 C a M V , 线状病毒尚待确认。 这是首次认定 C a M V 具 有人工接种
3期
侵染高雪轮的能力 ,
张爱平 : 上海地区香石竹斑驳病毒的若千行为
也就进一步证实高雪轮可 用来俭测 C a M V 等多种香石竹病毒 。
(五 ) C a M V 对脱毒苗再次侵染的初步测定 为了解脱毒苗在生 产 过程中受病毒再次侵
染的情况 , 对部分供试脱毒苗在开花前再一次通过生物接种和血清学反应进行带毒状况的检
测 。 脱毒苗盆栽于防虫温室 , 其中混入 2 棵带有 C a M V 的病株 , 按传统生 产方式进行栽培
管理 。 一年后 , 测定结果是 , 14 6 棵供试 脱 毒 苗中有 7 4 棵又感染了 C a M V , 再 侵 染率超
过 5 0 % 。 这说明 , 不卫生园艺操作是 C a M V 田间扩散的重要促进因素 .
讨 论
通过茎尖组织培养获得脱毒种苗是控制香 石 竹 病 毒 的重要手段 , 病毒检测则是了解茎
尖组培苗巾带毒状况的关键措施 。 本文对近来工作结果的分析确认 C a M . V 是上 海 地 区香石
竹茎尖苗中的主要病毒种类 , 同时还揭示了一些问题 : 组培苗中一定比 例 存 在 C a M V 表明
应摸索更有效的脱毒方法 , 以降低带毒率 ; 高雪轮对 C a M V 反应敏感 , 这就为 C a M V 确认
了又一种指示植物 。 因此 , 在不具备电镜和血清学技术的基层单位 , 昆诺薄 、 高雪轮等是检
测带毒苗的有用材料 , 但在试管苗期需谨慎以防止因病毒含量 低 而 漏 检 (宋荣浩 , 私人交
流 ) 。 C a M V 的不同分 离物存在着寄主反应差异 , 这就有希望从中筛选到弱毒类型 。 结果还
表明 , 为尽量减少脱毒苗受 C a M V 再次侵染和病毒病的田间扩散 , 应建立田间 卫 生操作的
技术规范 。 C a M V 在上海已较普遍 , 北京 、 厦门 、 广州 、 常州 、 武汉和南京等地的香石竹上
都有发生 ( 中国园林植物病毒病普查报告 , 19 8 8) , 昆明 、 桂林等地的送检材料中也检测出这
种病毒 〔5 〕 . 应引起足够的重视 。 茎尖苗中的其它病毒种类 、 C a M V 的 株系分化 、 血清学技术
向生产单位的推广应用方式等已在进一步研究之中。
〕 张健如 , 等 ,
〕 张爱平 , 等 ,
〕 C M I / A B B :
〕 张爱平 , 等 ,
〕 袁梅芳 , 等 ,
参 考 文 献
19 8了: 香石竹病毒病及综合治理 , 植物病理学报 1了(返) : 21 9~ 2 22
19 88 : 香石竹斑驳病毒分离鉴定及发生率的初步分析 , 森林病虫通讯 198 8 , 3
D e s e r i p t i o n s o f p l a n t v i r u s e s
,
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.
7
,
2 1
,
e l , 7 8
, 1 36 , 1 82
1 98 8
: 高雪轮检测多种香石竹病毒 , 上海农业学报 4 ( 4 ) : 9 1一 93
199 0 : 桂林昆明的进 口 香石竹中检测出病毒 , 植物检疫
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S y m p t o m a t i e e o m p a r i s o n s h o w s t h a t t h e r e m a y b e s o m e d i f f e r e n
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t i a t i o n o f p a t h
o g e n i e i t y a m o n g C a M V i ,
o l a t e s f r o m e a r n a t i o n g r o w n i n S h a n g h a i
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紫 香 糯 861 新 品 种 的 选 育
顾德法 徐美玉 秦成如
(上海市农业科学院作物育种栽培研究所 , 上海 2 01 10的
陈全庆 张繁琴
(上海市农业科学院植物保护研究所 , 上海 20 1 10的
本品种与香粳 8 3 2 新品种同为国内外首次应用软 x 射线育成的新品种 。 紫香糯 那 1 系采
用软 x 射线辐射技术及南繁加代繁殖途径 , 用五年时间所育成 。 其育种手段与速度均居国际
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、
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