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香石竹扦插苗茎腐真菌病研究



全 文 :香石竹扦插苗茎腐真菌病研究*
阿芳1 ,  张加春2 ,  林卫东2
( 1. 云南师范大学化学化工学院 ,云南 昆明 650092;
2. 云南师范大学生命科学学院 ,云南 昆明 650092)
摘 要: 从香石竹扦插茎腐苗上分离纯化了 35 株镰刀菌 , 优势菌为:串珠镰孢(F. moniliform Shel-
don)11 株 ,串珠镰孢中间变种(F. moniliforme var. intermedium Neish&leg ge stt)9 株 , 尖孢镰孢(Fusa ri-
um oxy spo rum Schlecht)8 株 , 其次还有茄病镰孢蓝色变种(Fusa rium solani va r. coeculeum(Sacc.)
Boo th)等 7 株 , 共 6个种和变种;选用 12 株菌检测其致病性 , 其中 11 株菌的致病率高达 88 ~ 100%;农
药药效实验表明 ,大生的效果最好 , 0. 1g / L即能完全抑制 5 株试验菌的生长;其次为甲霜灵 - 锰锌;根
病必治的效果最差。
关 键 词: 香石竹;真菌茎腐病;镰刀菌
中图分类号:   文献标识码: A  文章编号: 1007 - 9793(2006)03 - 0050 - 04
  香石竹又名康乃馨 、麝香石竹 ,为石竹科石竹属多年生草本植物。原产欧洲南部 、地中海北岸到希
腊一带。是世界五大切花之一 ,也是云南的主要切花种植品种。其繁殖方式主要采用组织培养和扦插
繁殖 ,但由于组织培养成本较高而且栽培时易出现高脚 、倒伏而影响产量 ,因此常采用成本低 、成花率高
的扦插繁殖法。然而 ,香石竹在扦插繁殖过程中 ,病原菌易从伤口侵入而引起插条的茎腐 ,严重影响生
根 ,导致成活率降低 。本文对香石竹插条茎腐真菌病进行研究 ,为香石竹茎腐病的防治提供依据 ,以提
高香石竹扦插成活率和产量。
1 材料与方法
1. 1 培养基:分离纯化培养基:PDA培养基;鉴定培养基:PSA 培养基 、米饭培养基 、Bilai’ s培养基。
1. 2菌种分离:采用组织分离法 ,将基部茎腐的香石竹扦插苗用水冲洗干净 ,剪弃腐烂严重部分 ,用 75%
的酒精表面消毒 ,于病健交接处取 2 - 4mm 长的茎段插入 PDA 培养基中 ,28℃培养3天后 ,截取尖端菌
丝 ,转至 PDA斜面培养 5 - 7天至孢子成熟[ 1] 。
1. 3 菌种纯化:采用孢子稀释法 ,将斜面孢子制成悬液 ,系列稀释 ,选用每视野(10×20倍)2—4 个孢子
的稀释液 ,取一环移入无菌培养皿中 ,再倒入 50℃的培养基 ,混匀 , 28℃培养 2天 ,挑取单菌落。
1. 4 菌种鉴定:按文献[ 2]
1. 5 香石竹插条感病实验:(1)培养土的制备:培养土用 0. 3%CH 3CHO 喷洒 ,并充分摊晾 ,临用前水
洗 ,以去除残留 CH 3CHO;(2)选取 12株菌 ,于 PDA液体培养基中培养 2天制成菌悬液 ,并加入孢子制
成菌丝体孢子混合液(3)香石竹插条用 0. 1%优氯净消毒后剪成新鲜切口 ,切口在上述菌液中浸过后移
栽至消毒培养土中。每株菌接种插条 18株成一组 ,各组苗隔离栽培以防交叉感染;另取 64株苗不接菌
作两组空白对照 ,一组培养土不消毒 ,另一组培养土消毒。15天后观察发病情况 。
 第 26卷第 3期
2006年 5月
云南师范大学学报
Journal of Yunnan Normal U niversi ty
Vol. 26 No. 3
M ay 2006
 
* 收稿日期:2005 - 08 - 30
基金项目:云南省教育厅自然科学基础应用研究基金资助项目(03Y296B).
作者简介:阿芳(1972 -), 女(白族),云南省邱北县人 ,实验师 , 从事化学及生物化学的教学及研究.
1. 6 农药杀菌实验:采用 6种市售农药分别为菌核净(40%)、百菌清(75%)、大生 M - 45(80%)、根病必
治(60%)、甲霜灵- 锰锌(58%)及百抗(10亿个芽孢杆菌 /克),均为可湿性粉剂。用无菌水将农药制成
悬液 ,加入 PDA 培养基中 ,制成含不同药物浓度的平板;选用致病力强的 5株菌 ,用无菌的生理盐水将
斜面菌种制成孢子悬液 ,用移液枪取 10ul滴于农药培养基平板中央 ,静置 10分钟 ,在 28℃下培养 ,4天
后量菌落直径。每株菌设置 1个不加农药的对照 。
2 结果与分析
2. 1鉴定结果
共分离纯化 37株菌 ,其中镰刀菌 35株 ,分别属于 6个种和变种(见表 1),数量较多的有:串珠镰孢
(F. moni li form Sheldon)11株 ,串珠镰孢中间变种(F. moni li f orme var. intermed ium Neish & leg-
gest t)9株 ,尖孢镰孢(Fusarium oxy sporum Schlecht)8株 ,其次还有茄病镰孢蓝色变种(Fusarium so-
lani var. coeculeum (Sacc.)Booth)等 7株。
表 1 从茎腐插条上分离到的 35 株镰刀菌
Tab. 1 35 Fusarium strains from ro tted carnation stem s
种名 菌株数 组 别
串珠镰孢 F . monilifo rme Sheldon 11 李瑟组
串珠镰孢中间变种 F. monilifo rme var. intermedium Neish &Leggett 9 李瑟组
尖孢镰孢 Fusarium oxy spo rum Schlecht 8 美丽组
胶孢镰孢 F . subg lutinans 3 李瑟组
茄病镰孢蓝色变种 Fusarium so lani v ar. co eculeum(Sacc.)Booth 3 马特组
多隔镰孢 Fusarium decellulare Brick 1 拟穗霉组
2. 2. 菌株的致病性
表 2 12株菌的致病情况
Tab. 2 The pathogenicities o f 12 Fusarium strains
菌株编号 致病率 发病情况 所属种
1 100. 0 % 重:18 株 串珠镰孢
2 100. 0% 重:7 株 ,轻:11 株 尖孢镰孢
3 88. 9% 重:16 株 尖孢镰孢
4 94. 4% 重:3 株 ,中:5 , 轻:9 多隔镰孢
5 44. 4% 中:8 串珠镰孢中间变种
6 100. 0% 重:5 , 轻:13 胶孢镰孢
7 100. 0% 重:5 , 轻:13 串珠镰孢中间变种
8 100. 0% 重:18 串珠镰孢
9 94. 4% 重:17 尖孢镰孢
10 88. 9% 重:9 , 轻:7 串珠镰孢中间变种
11 100. 0% 重:5 , 轻:13 串珠镰孢
12 100. 0% 重:8 , 轻:10 串珠镰孢
对照 1 52. 8% 中:19
对照 2 5. 6% 中:1
  注:*发生茎腐病的扦插苗茎基部腐烂呈水浸状 ,褐色 , 轻者有病斑 ,重者腐烂达 1cm
以上 ,病健交接处横截面可见微维管束区有褐色病斑;病苗叶片较正常苗瘦弱 , 略显黄色。
  *对照 1 培养土未用 CH3CHO 消毒 , 对照 2 用 CH3CHO 消毒。
由表 2可见:
51  第 3 期 阿芳 , 等: 香石竹扦插苗茎腐真菌病研究 
(1)除 5号菌外 ,所接株菌的发病率为 88 ~ 100%,明显高于对照组;
(2)对照1发病率为 52. 8%,对照 2为5. 6%,两组对照结果差别较大 ,可能是因为对照 1土壤未经
消毒 ,带菌率高引起发病率较高。
2. 3 农药杀菌实验
采用 6种市售农药 ,测定其对 5株致病菌(1 、3 、6 、8 、9)的杀菌效果 ,结果图 1:
图 1 6 种市售农药对 5 株致病菌的杀菌效果
Fig. 1 The effect of some fungicides de st royed 5 strains of pathogenic fung i
如图显示 ,大生的效果最好 ,浓度仅为 0. 1g /L 即能完全抑制 5 株镰刀菌的生长;其次为甲霜灵 -
锰锌 ,0. 1g /L 时仅有 1株菌能微弱生长;百菌清亦具有较好的抑菌效果;根病必治的效果最差 ,0. 4g /L
时 ,5株菌的菌落直径均大于 3. 0cm ,仅有轻微的抑菌作用 。
参 考 文 献:
[ 1]  方中达. 植病研究方法[ M] . 北京:中国农业出版社 , 1998. 112 - 145.
[ 2]  王拱辰 , 郑重 , 叶琪明 , 等 . 常见镰刀菌鉴定指南[ M] . 北京:中国农业科技出版社 , 1996. 3 - 45.
52 云南师范大学学报(自然科学版) 第 26 卷  
The Research of Carnation Stem Rot Mycosis in Shoot Tip Culture
A Fang1 ,  ZHANG Jia-chun2 ,  LINWei-dong2
( 1. Schoo l of Life Science , Yunnan No rmal Univ ersity , Kunming , 650092 , China;
2. College o f Chemist ry and Chemical Enginee ring , Yunnan Normal Unive rsity , Kunming , 650092 , China)
ABSTRACT: 35 Fusarium st rains w ere isolated f rom rot ted carnat ion stems by shoo t tip cul ture.
The dominant species w ere F . moni li f orme Sheldon (11 strains), F. moni l i forme var . intermedium
Neish & Legge tt (9 st rains) and Fusarium oxysporum Schlecht (8 st rains). The o ther 7 isolated
st rains w ere identified as Fusarium solani var . coeculeum (Sacc. ) Boo th and o ther species. There
were 6 species and variet ies isolated f rom the stems. The pa thogenicity of 12 st rains w as detected , and
pathogenet ic rates of 11 st rains w ere 88 ~ 100%. The test results of some fung icides dest royed 5
st rains o f pathogenic fungi research showed that Dithane M - 45 and M etalaxy l - mancozeb rest rained
grow th o f tho se pathomycetes thoroughly .
KEYWORDS: carnation;stem rot ted myco sis;Fusarium
(上接第 38页)
[ 2]  王至正 , 朱汉荣 , 肖福坤 , 等. 电子技术基础[ M ] .
北京:高等教育出版社 , 1990.
[ 3]  韩汝奇. 固体物理学[ M] . 北京:高等教育出版社 ,
1980.
[ 4]  黄波. 固体物理学导论[ M] . 广州:华南理工大学
出版社 , 1994.
[ 5]  方可 , 胡述楠 ,张文彤 ,等. 固体物理学[ M] . 重庆:
重庆大学出版社 , 1991.
Essential Explain on Holes
———misunderstanding for the concept of holes in some elect ronic books can be dearified
XUShui-yuan
(Huang shi Scince and Engineering College , H uang shi 435000 , China)
ABSTRACT: In this paper , the prope rties of moving elect rons in a cry stal , the dist inction among in-
sulato r , conducto r and semiconducto r , and the concept of holes are discussed sy stematically , clearly and
deeply. So misunder standings for ho les in some elect ronic books can be clearified.
KEYWORDS: Eng rgy band;Semiconducto r;Hole
53  第 3 期 阿芳 , 等: 香石竹扦插苗茎腐真菌病研究