全 文 ：第 19卷　第 4 期 　　　　　　　　　　　　　　云南农业大学学报　　　　　　　 Vol.19　No.4
2004年　8月 　　　　　　　　　　Journal of Yunnan Agricultural University　　　　　 Aug.2004
紫叶酢浆草鳞茎离体培养及快速繁殖研究
余朝秀 , 李枝林 , 王玉英
(云南农业大学花卉研究所 , 云南 昆明 650201)
摘要:采用紫叶酢浆草(Oxalis violalea)鳞茎作外植体源 , 进行离体培养及快速繁殖研究 。结果表明:MS+6-BA
2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L诱导丛生芽发生 , 效果较好;丛生芽增殖用MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L每 20 d
转接 1 次增殖 3～ 4 倍。1/2MS+NAA 2.5 mg/ L+IBA 1.0 mg/ L有利于壮苗和生根。从生根诱导到试管苗出瓶需
20 d , 生根率 100%.从丛芽增殖至生根出苗 ,整个培养周期只需 40 d.较已有报道的用叶片 、叶柄组织培养的提
前 15～ 10 d ,且繁殖速度极快 , 试管苗生长健壮 ,炼苗成活率达 95%.
关键词:紫叶酢浆草;鳞茎组培;快速繁殖
中图分类号:S 682.19　　文献标识码:A　　文章编号:1004-390X(2004)04-0433-03
Research on Rapid in Vitro Propagation of
Bulb of Oxalis violalea
YU Chao-xiu , LI Zhi-lin , WANG Yu-ying
(Flowers Institute , Yunnan Agricultural University , Kunming 650201 , China)
Abstract:Rapid in Vitro propagation of bulbs of Oxalis violalea was studied in this paper.The results
showed as follows:the MS medium supplemented with 2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA was suitable for
inducing axillary buds.MS +3.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA was used for proliferation and the prolif-
eration rate could reach 3 ～ 4 times in 20 day.1/2MS+2.0mg/L NAA+1.0mg/L IBA was suitable for
rooting and getting strong plants.20 d were needed from root induction to tube plant and the rooting rate
could reach 100%.One cycle which was from proliferation to forming roots only needed 40 d.Bulb culture
could be shortened for 10 ～ 15 d in contrast to culture of leafstalk and leaf which was reported before.The
tube plants was very strong and the survival rate could reach to 95%.
Key words:Oxalis violalea;bulb tissue culture;rapid propagation
　　紫叶酢浆草(Oxalis violacea )为酢浆草科多年
生草本植物 ,又名堇花酢浆草 。原产美国佛罗里达
州 、西达落矾山[ 1] 。雅称名“幸运草” ,其意是为寻
获者带来幸运[ 2] 。紫叶酢浆草具有很高的观赏价
值。紫叶酢浆草株高约 15 ～ 30 cm ,掌状复叶 ,叶片
基生 ,小叶 3枚 ,但有时可以找到 4枚 ,形状三角形
或倒箭形 ,叶面紫色而带紫红斑 ,叶背紫红色。春
夏季开花 ,伞房花序 ,淡红色或淡紫色 。在国内用
叶柄 、叶片进行离体培养的文献偶见报道。本试验
取其鳞茎进行腋芽诱导 、增殖 、生根及炼苗培养的
系列研究 ,以期达到优质快繁 、适于工厂化规模生
产 ,更好满足市场需求的目的 。
收稿日期:2004-01-12
　基金项目:国家自然科学基金资助(30160074);云南省自然科学基金资助(2002C0003P)
　作者简介:余朝秀(1954-),女 , 重庆市人 ,助理研究员 , 主要从事植物组织培养科研 、教学工作 。
DOI :10.16211/j.issn.1004-390x(n).2004.04.016
1 　材料与方法
1.1 　材料
取自云南农业大学花卉研究所温室内盆栽生
长健壮的紫叶酢浆草植株离体鳞茎 。
1.2 　培养条件
采用光照每天 12 h ,光照强度 1 500 ～ 2 000 lx ,
培养温度(26±2)℃;MS 为基本培养基 ,另加蔗糖
3%,琼脂 0.65%,调整 pH 5.8.
1.3 　培养方法
将离体鳞茎用自来水冲洗掉覆在上面的基质
后 ,再刷洗干净 ,将鳞片剥下 ,用饱和洗涤剂浸泡 4
～ 5 min后再冲洗 ,滤纸吸干 ,置于超净工作台上 ,
用75%酒精处理 40 s ,次氯酸钠漂洗 10min ,无菌
水冲洗 3次 ,再用 0.1%升汞消毒 12min ,无菌水冲
洗5 ～ 7次 ,接种于诱导培养基上。30 d 后将诱导
出的丛生芽转入不同激素浓度配比的增殖培养基
上扩大繁殖 。待丛芽长到 3 ～ 4 cm 高 ,带有 3 ～ 4
个叶片以上的健壮幼苗 ,切下转入不同激素浓度的
生根培养基中 ,诱导生根 。最后把生根的完整植株
从瓶中取出 ,清洗干净 ,进行炼苗 、移栽 。
2 　结果与分析
2.1 　不定芽诱导
外植体在无菌条件下植于MS+6-BA 2.0mg/
L+NAA 0.5 mg/L+ATP 2 mg/L 培养基中 , 4 ～ 5 d
后观察到外植体开始膨大。8 d后产生小突起腋芽
开始萌动 ,15 d后有3 ～ 4个浅绿色丛生芽形成 ,30
d后形成数量更多的丛芽。
2.2 　激素水平对丛芽诱导的影响
将约高 0.5 cm以上的芽转接于不同浓度的增
殖培养基中进行增殖培养 。结果表明:6-BA 在
1.0 ～ 5.0mg/L ,琼脂 0.65%,调整 pH 5.8范围内均
可不同程度地诱导芽增殖 ,但以 MS +6-BA 3.0
mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳(见表 1)。在此激素
水平上 ,随着细胞分裂素的增减 ,丛芽分化率明显
降低 。
表 1 　激素水平对丛生芽诱导的影响
Tab.l　Effect of hormone concentration on adventitious buds
培养基 激素/(mg·L-1)
6-BA NAA 接种芽数/个
丛　　芽
总数 增殖率/ %
MS
MS
MS
MS
MS
MS
0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
55
55
55
55
55
55
56
86
152
216
90
60
1.80
56.4
176
293
63.6
9.09
　　　注:丛生芽增殖时间为 20 d.
2.3 　不同激素组合对生根的影响
将高约 3 ～ 5 cm 以上的增殖芽苗单个切下转
接到生根培养基上 ,8 d 后开始有白色绒毛状根点
突起 ,继续培养 10 d 后许多不定根形成十分明显 ,
并且数量较多 。试验结果表明:1/2MS+NAA 2.5
mg/L+IBA 1.0 mg/L促进生根效果最好(见表 2),
每株平均根数已达 26 条 ,生根率 100%,并且幼苗
长势健壮 。
2.4 　炼苗移栽
转接生根 20 d后苗长 7 ～ 8 cm 时进行移栽极
易成活 。出瓶时 ,先揭开封口膜 ,置于室内散射光
条件下 ,使其逐渐适应外界环境。2 d后将苗从瓶
内取出 ,洗尽粘在根部的培养基(尽量少伤根)。由
于培养室内的养分 、光照 、温度及湿度条件最佳 ,如
果从室内直接转入大田 ,外界变化的环境会对植株
造成伤害 ,所以在移栽之前 ,一定要经过炼苗阶段 。
选用育苗床 ,育苗袋及花盆进行栽植 ,采用腐叶土 ,
田园土 ,珍珠岩等作为混合基质。基质采用蒸汽消
毒 ,温度保持 83℃,30min ,再将苗植入炼苗床。期
间避免阳光直射 ,避免基质过湿 、过干 。保持空气
湿度在 80%左右。温度 20 ～ 30 ℃左右 ,成活率可
达 95%以上。
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表 2 　不同生长素组合对生根的影响
Tab.2　Effect of combination of different auxins on rooting
培养基 NAA/(mg·L-1) IBA/(mg·L-1) 接种苗数 平均根数 生根率/ %
1/ 2MS
1/ 2MS
1/ 2MS
1/ 2MS
1/ 2MS
1/ 2MS
1/ 2MS
0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
24
24
24
24
24
24
24
1.6
8.5
10.2
16
20
26
10
8.4
66.7
100.0
100.0
100.0
100.0
88.0
　　　注:生根培养时间为 20 d
3 　讨论
(1)根据作者栽培的情况紫叶酢浆草无论是
在野生状态或人工栽培(磷茎切块繁殖)生长速度
都很慢 ,繁殖系数较低。应用组织培养 ,特别是用
磷茎除去鳞片后诱导不定芽效果好。无性系一旦
建立 ,增殖速度极快 ,每隔 18 ～ 20 d转接 1次 ,在较
短的时间内就能快速 、大量繁殖幼苗 ,且生根多 ,苗
壮 ,成活率高。本试验已成功地培育出数量较多的
一批组培苗 , 试管苗质量高 。
(2)由于紫叶酢浆草鳞茎深埋于土中 ,外植体
消毒比较困难 ,因此外植体的清洁工作十分重要。
(3)试管中的组培苗叶柄较脆易折 ,转接操作
中要多加小心 ,以防损伤种苗 。
(4)在增殖过程中 ,少数叶片有返绿现象 ,可
能是由于光照强度较弱的缘故 。一旦露天栽培后 ,
叶片即转为紫红色。
[ 参　考　文　献]
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435第 4期　　　　　　　　余朝秀 ,等:紫叶酢浆草鳞茎离体培养及快速繁殖研究