全 文 :试验研究 现代园艺 2009年第 2期
紫叶酢浆草快繁技术的研究
肖文艳 曹 智
( 福建师范大学福清分校生物与化学工程系 福清市 350300)
【摘 要】 研究了不同消毒时间和激素水平对于紫叶酢浆草茎段组织快繁的影响,采用组培方法建立起了紫叶
酢浆草离体培养体系。 结果表明: 消毒时间以 4 分钟为宜; 最佳诱导培养基配方为:MS+NAA0.5 mg/L+6-
BA1.0 mg/L;最佳增殖培养基为:MS+NAA0.2 mg/L+6-BA0.5 mg/L。
【关键字】 紫叶酢浆草;组织培养;激素水平;
1 实验材料和方法
1.1 实验材料
从大棚移入实验室 1个月左右的盆栽三角紫
叶酢浆草,以叶柄作为外植体。
1.2 外植体消毒
挑选健壮无虫害的叶柄, 用消毒后的剪刀将
其剪成约 4cm的小段,放于烧杯中,用自来水冲
洗外植体 10 分钟,加少量中性洗洁精浸泡 0.5 小
时,流水冲洗干净,移入无菌接种室,浸入 0.1%
HgCl2溶液中振荡消毒 4 分钟,用蒸馏水冲洗 5~8
次,即可用于接种。
1.3 不同的消毒时间
处理时间分别为 2 分钟、4 分钟、8 分钟、12
分钟,用无菌水冲洗 5次后接种。接种时先用滤纸
吸干叶柄表面的水分,把叶柄和叶片切成 1cm分
别接种于培养基上。 观察不同时间处理对叶柄的
愈伤组织诱导率的影响,最终采用最佳消毒时间。
1.4 培养基配方
采用 MS基本培养基, 其中 3%蔗糖,0.7%琼
脂,pH值 5.8。 培养温度 25±2℃,光照 3000Lux,
12小时 /天。 培养基见表 1、表 2。
2 结果与分析
紫叶酢浆草 ( O xalis triangularis) 又名紫蝴
蝶,原产热带美洲。为酢浆草科酢浆草属多年生宿
根草本植物,株高 15~30cm,地下部分长有小鳞
茎。叶基生,掌状复叶,每个复叶由 3片小叶组成,
小叶倒三角形或倒箭形, 叶色常年为艳丽的紫红
色,犹如无数飘舞的“ 紫色蝴蝶” [1],极具观赏价
值。 紫叶酢浆草适应性广,抗性强,生长迅速[2]。 是
优良的地被植物,同时也是布置花坛、花镜或点缀
草坪、道路的良好材料。 具有很高的开发利用和
推广价值[3]。
紫叶酢浆草的繁殖以分株繁育为主, 多在生
长季节进行,也可在春季播种繁殖,但观赏栽培种
结籽率较低。上述繁殖方法繁殖速度慢,远不能满
足市场的需求。 目前较为理想的是组织培养快速
繁殖技术,具有速度快,变异率低等优点,能满足
大规模生产的需求[4]。
紫叶酢浆草的组织培养李霖等 [5]已有作初步
报道, 但试验结果中培养基中激素种类及激素浓
度有不同的见解。 本实验通过建立紫叶酢浆草快
繁体系, 研究激素水平对三角紫叶酢浆草组培快
繁的影响。 旨在为三角紫叶酢浆草工厂化育苗提
供技术参数。
表 1:三角紫叶酢浆草诱导培养基
处理 基本培养基 NAA( mg/L) 6- BA( mg/L)
A1 MS 0.2 0.5
A2 MS 0.2 1.0
A3 MS 0.2 1.5
A4 MS 0.5 1.0
A5 MS 0.5 1.5
A6 MS 0.5 0.5
A7 MS 1.0 1.5
A8 MS 1.0 0.5
A9 MS 1.0 1.0
表 2:三角紫叶酢浆草增殖培养基
处理 NAA( mg/L) 6- BA( mg/L)
B1 0.00 0.5
B2 0..05 0.5
B3 0.2 0.5
B4 0.5 0.5
B5 1.0 0.5
B6 0.2 0.2
B7 0.2 1.0
B8 0.2 1.5
④
2.1 不同消毒时间对三角紫叶酢浆草芽诱导的影
响
在 8、12 分钟消毒的外植体多出现白化现
象,结果如表 3 所示:2 分钟消毒的外植体污染率
较高,而 8 分钟、12 分钟的出芽率较低,4 分钟消
毒的出芽率较高为 60%,污染率也较低,故最佳
消毒时间为 4分钟。
2.2 不同激素水平对三角紫叶酢浆草芽诱导的结
果及分析
在超净工作台上,切去两端受损部分留下约
1.5~2.0cm的小段,分别接种于不同的诱导培养基
(包括不同种类激素的诱导培养基)上培养,每瓶
接种 2个外植体,每种培养基接种数为 12个。
叶柄接种后逐渐透明,至 12 天时较为明显,
且两端切口处膨大并出现白色愈伤组织,培养至
19 天, 愈伤组织开始分化, 生出白色不定根,28
天以后形成紫色小芽,并始终保持紫色。 继续培
2009年第 2期 现代园艺 试验研究
养生长发育出丛生芽。 第 40天结果如表 4所示。
从表 4可以看出: 在 9种不同培养基上叶柄
均能诱导出愈伤组织和分化出根及芽, 其中以处
理 A4 的培养基出芽数最多,出芽率最高,培养基
上 生 出 较 多 的 白 色 不 定 根 。 所 以 该 处 理
MS+6- BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+ 蔗糖 3%+ 琼脂
0.7%最适宜愈伤组织诱导分化和芽的形成。
2.3 不同激素水平对三角紫叶酢浆草增殖的结果
及分析
将诱导培养基中已分化的丛生芽移入增殖培
养基中培养,每瓶移入丛生芽 2~3个,共 13瓶。15
天后统计情况如表 5所示。
表 5 可见,随着 NAA的浓度的提高,丛生芽
增殖率逐渐上升,在 NAA为 0.2 mg/L时增殖率为
229%, 增殖效果较好。 当 NAA的浓度高于 0.5
mg/L时增殖率开始下降, 且叶片出现畸形。 在
表 3:消毒时间对于三角紫叶酢浆草芽诱导和污染的影响
处理
消毒时间
( 分钟)
接 种
数
污 染
数
污染率
( %)
出 芽
数
出芽率
( %)
D1 2 20 12 60 8 40
D2 4 20 6 30 12 60
D3 8 20 6 30 3 15
D4 12 20 4 20 1 5
表 4: 不同激素水平对三角紫叶酢浆草芽诱导的影响
处理 NAA( mg/L) 6- BA( mg/L) 接种数 出芽数 愈伤组织数 出芽率%
A1 0.2 0.5 12 5 5 41.7
A2 0.2 1.0 12 4 8 33.3
A3 0.2 1.5 12 3 6 25.0
A4 0.5 1.0 12 10 11 83.3
A5 0.5 1.5 12 5 5 41.6
A6 0.5 0.5 12 4 6 33.3
A7 1.0 1.5 12 7 10 58.3
A8 1.0 0.5 12 4 11 33.3
A9 1.0 1.0 12 6 9 50.0
表 5: 不同激素水平对三角紫叶酢浆草芽苗增殖影响
处理 NAA( mg/L) 6- BA( mg/L) 接种数 增殖数 增殖率% 植株生长状况
B1 0.00 0.50 26 48 185 植株较弱,叶片较绿
B2 0.05 0.50 26 54 208 植株较壮,叶片紫色
B3 0.20 0.50 26 59.5 229 植株健壮,叶片紫色
B4 0.50 0.50 26 448 185 植株健壮,但叶柄有瘤状突起
B5 1.00 0.50 26 37.5 144 植株健壮,但生长畸形
B6 0.20 0.20 26 42.5 163 植株较弱,叶片较绿
B7 0.20 1.00 26 50 192 植株较弱,叶片较绿
B8 0.20 1.50 26 44.5 171 植株较弱,叶片较绿
⑤
良种推介 现代园艺 2009年第 2期
6- BA单因素实验中,植株均较弱,说明 6- BA的
浓度过高或过低对于增殖均不利。 基于以上情况
丛 生 芽 生 长 的 最 佳 培 养 基 为 MS+6- BA0.5
mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖 3%+ 琼脂 0.7%, 在此
培养基上成苗率高,芽苗粗壮,长势好。
3 讨论
3.1 外植体选取和消毒的关系
材料的初代培养是植物组织培养过程中较
为重要的一个步骤,也是整个培养能否成功的关
键步骤。 相关报道认为紫叶酢浆草的诱导培养选
择叶片作为外植体更易形成愈伤组织或分化不
定芽。 但叶片组织细胞较嫩,在消毒处理时经过
自来水的冲洗,容易受到机械损伤,经 HgCl2消毒
后,叶片变得软而难以切割,材料的利用效率不
高。 以叶柄为外植体材料进行组织培养虽然效果
不如叶片,但材料的利用率比较高。 如果能从培
养基的配方上作些改进,从而提高叶柄培养愈伤
组织的诱导率,对生产具有一定的指导意义。
3.2 白色不定根的作用
我们在对三角紫叶酢浆草外植体的诱导中
发现,外植体先膨大分化出少量愈伤组织,然后
分化形成大量不定根, 其上有大量白色绒毛,最
后愈伤组织才分化出芽(注:不定根和芽长于愈伤
组织的不同部位)。该现象有人认为是植物体内的
IAA和外源的细胞分裂素诱导了不定根的分化[6]。
李霖等 [5] 认为不定根上的白色绒毛为愈伤组织。
王利等[4]认为观察到分化不定芽早的或不定芽长
势好的外植体,不定根往往较多,这和我们观察到
的现象一致。 不定根是否有利于外植体对营养成
分的吸收有待于进一步研究。
( 收稿:2008- 12- 10)
参考文献
[1] 王 志,朱万琴,李风忱.紫叶酢浆草的组织培养和快速
繁殖[J].农业科技通讯,2007,(3):53-53.
[2] 李海燕 .紫叶酢浆草的园林应用及培育技术 [J].北方园
艺,2007,(2):13.
[3] 王旭昭.紫叶酢浆草栽培技术与推广应用[J],安徽农业
科学.2007,35(36):11905,11922.
[4] 王利,王永清,张帆.三角紫叶酢浆草离体培养植株的再
生研究[J].安徽农业科学,2005,(02):238-239,315.
[5] 李霖,宋宜颖,鲁润龙,等.紫叶酢浆草的组织培养[J].植
物生理学通讯, 2002,38(4):360-360.
[6] 胡国富,李凤兰,胡宝忠 .三角紫叶酢浆草的组织培养
[J].北方园艺,2008,(6):176-178.
罐藏黄桃金童 5号引种观察及配套栽培技术总结 *
钱东南 钭凌娟 蒋飞荣 施宏展
( 浙江省金华市农科院 321017) ( 金华市特产站) ( 金华市第二罐头厂)
试验园位于金华市金东区曹宅镇金华市第
二罐头食品厂基地内,面积 26.7hm2,为红黄壤的
丘陵山地,土壤微酸性。
2 引种观察表现
金童 5 号树势稍强,树姿半开张,成枝力较
强。 中、长果枝较多,为主要结果枝,花芽着生起
始节位平均为 2.6 节,单、复花芽比例相近。 铃型
花,花粉量多,7月底 ~8月上旬果实成熟。果实近
圆形,平均单果重 160g,最大单果重 290g,果顶部
圆,两对半稍不对称,果皮底色橙黄,有暗红色片
状晕,约占果面的 60%。 果肉橙黄,近核处微红,
不溶质,韧性强,粘核,风味甜多酸少,含可溶性
固形物 11%~12%,总糖 9.4%,总酸 0.5%。 加工耐
煮性强,成品色卡 7级以上,有光泽。
自我国 2000 年加入 WTO以来,多年被冷落
的加工型黄桃,近几年来又热了起来,目前我省黄
桃罐头的生产量及出口量均居全国首位。 为了适
应市场的需求, 我们向浙江省科技厅申请了黄桃
研究的科技专项, 并于 2007年得到了立项批准。
根据加工型黄桃必须具备 “ 果肉金黄色或橙色,
硬度大,不溶质,成熟后无红色素,耐高温蒸煮”
的标准, 从当地引进栽培的 9个黄桃品种中筛选
出金童 5号等 3个适宜红黄壤种植的加工型黄桃
优良品种, 现将金童 5号黄桃的特征特性及配套
栽培技术介绍如下。
1 试验园基本情况
*浙江省科技计划资助项目(计划编号:2007C32032 )的子
项目
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
⑥