全 文 :第 45 卷 第 5 期
2016 年 5 月
Vol.45 No.5
May.2016
化 工 技 术 与 开 发
Technology & Development of Chemical Industry
红花酢浆草抗氧化活性研究
李中尧,何英姿
( 广西师范学院化学与生命科学学院,广西 南宁 530001)
摘 要:采用DPPH法分别对红花酢浆草的根茎、叶子、花等部位的极性提取物进行抗氧化活性测试,结果表明,
随着提取物浓度的增大,其对DPPH自由基的清除能力越强;其中红花酢浆草根茎的乙酸乙酯提取物对DPPH的清除率
达90%以上。红花酢浆草的根茎、花、叶均具有良好的抗氧化活性,以酢浆草根茎最为突出。
关键词:红花酢浆草;提取物;抗氧化活性
中图分类号:R 284 文献标识码:A 文章编号:1671-9905(2016)05-0027-03
作者简介:李中尧 (1990-),男,重庆人,硕士研究生,电话:15177909407,E-mail:zhongyao36@163.com
通讯联系人:何英姿,博士,教授,硕士生导师
收稿日期:2016-03-15
生命活动过程中必定产生自由基,生命体内的
自由基浓度过高会造成细胞损伤,诱发一系列的疾
病,如衰老、炎症、心血管、肿瘤等 [1-5] 。因此,清除
体内过多的自由基有助于预防和治疗多种疾病。近
年来,大量的研究发现,中草药有利于清除体内过多
的自由基,具有延缓衰老、保健等作用。
红花酢浆草又名铜锤草、紫花酢浆草、大酸味草
等,主要分布于我国河北、陕西、华北、华中、华南、四
川和云南等地 [6]。红花酢浆草既可入药又能食用,
同时也是优良的蜜源植物 [7-8]。据报道,红花酢浆草
叶子具有很强的抗氧化活性 [9]。DPPH(1,1- 二苯
基苦基苯肼)是一种稳定的有机自由基,研究表明,
DPPH 法是一种能够快速、简便、灵敏地评估植物抗
氧化能力的可行方法 [10]。本文采用 DPPH 法测试
红花酢浆草根茎、叶子、花等部位的不同极性提取物
的抗氧化活性,旨在为红花酢浆草的开发和利用提
供数据参考。
1 材料和方法
1.1 实验材料
实验所用红花酢浆草均采自广西师范学院明秀
校区。
1.2 实验方法
将采集的红花酢浆草分为根茎、叶子和花 3 个
部分,并分别洗净阴干,粉碎备用。将酢浆草粗粉分
别放入浸泡缸中,加入 95% 乙醇浸泡 7d,浸泡期间
定时搅拌,抽滤旋干,得红花酢浆草各部分浸膏。连
续浸泡 3 次,将所得的浸膏合并,分别得到红花酢浆
草根茎的粗提物(RCGE)、红花酢浆草叶子的粗提
物(RCYE)和红花酢浆草花的粗提物(RCFE)。
将上述红花酢浆草各部分的粗提物加入适量
蒸馏水制成悬浊液,并分别用石油醚、氯仿、乙酸
乙酯、正丁醇萃取。将萃取后的提取液减压浓缩
成 浸 膏,得 到 根 茎 部 分 的 石 油 醚 相(RCGE1)、氯
仿 相(RCGE2)、乙 酸 乙 酯 相(RCGE3)、正 丁 醇 相
(RCGE4)及水相(RCGE5)。叶子部分的石油醚相
(RCYE1)、氯仿相(RCYE2)、乙酸乙酯相(RCYE3)、
正 丁 醇 相(RCYE4)及 水 相(RCYE5)。 花 部 分 的
石油醚相(RCFE1)、氯仿相(RCFE2)、乙酸乙酯相
(RCFE3)、正丁醇相(RCFE4)及水相(RCFE5)。
1.3 试剂配制
DPPH 溶 液 的 配 制:准 确 称 量 DPPH 0.0197g
(M=394.32),用无水乙醇溶解定容至 250mL 即得到
DPPH 浓度为 2×10-4 mol·L-1 的乙醇溶液,备用,
避光冷藏。
样 液 的 配 制:准 确 称 量 待 测 样 品 0.0010g,
取 1mL 无水乙醇将其溶解,得到 1mg·mL-1 的原
液。 分 别 取 原 液 0.05mL、0.10mL、0.15mL、0.20mL、
28 化 工 技 术 与 开 发 第 45 卷
0.25mL,并将其稀释至 0.05mg·mL-1、0.10mg·mL-1、
0.15 mg·mL-1、0.20 mg·mL-1、0.25 mg·mL-1。
芦丁溶液配制:准确称量芦丁 0.0010g,取 1mL
无水乙醇将其溶解,得到 1mg·mL-1 的原液。分别
取 原 液 0.05mL、0.10mL、0.15mL、0.20mL、0.25mL,
并 将 其 稀 释 至 0.05mg·mL-1、0.10mg·mL-1、
0.15mg·mL-1、0.20mg·mL-1、0.25mg·mL-1。
2 酢浆草各部分提取物的 DPPH自由
基清除能力的测定
分别向各比色管中加入 2.0mL 不同浓度的样品
溶液(或者芦丁溶液),每支试管中各加入 2.0mL 浓
度为 2.0×10-4 mol·L-1 的 DPPH 溶液,充分摇匀后,
于常温下黑暗处静置 30min,以无水乙醇作为参比,
测定其在 517nm 处的吸光度,记为 Ai。同时测定
2.0mL 无水乙醇与 2.0mL DPPH 溶液混合后的吸光
度值,记为 A0。2.0mL 无水乙醇和 2.0mL 样品溶液(或
者芦丁溶液)混合后的吸光度,记为 Aj。
清除率 K/%=[1-(Ai-Aj)/A0] ×100%
式 中:A0 为 2.0mL DPPH 溶 液 +2.0mL 无 水 乙
醇混合后的吸光度;
Ai 为 2.0mL DPPH 溶液 +2.0mL 样品溶液(或芦
丁溶液)混合液的吸光度;
Aj 为 2.0mL 无水乙醇 +2.0mL 样品溶液(或芦
丁溶液)混合液的吸光度。
3 结果与分析
图 1 是红花酢浆草根茎部分的不同极性提取物
以及芦丁对 DPPH 自由基清除作用的测定结果。由
图 1 可以看出,在测试浓度低于 0.25mg·mL-1 时,
红花酢浆草根茎各极性部分的清除率随浓度增大
而增强,其中 RCGE3(乙酸乙酯相)的活性最强,
其对 DPPH 自由基清除作用和芦丁的清除作用最
为接近,其浓度为 0.05mg·mL-1 时对 DPPH 自由基
的清除率达 90%。而 RCGE5(水相)的活性最弱。
RCGE2(氯仿相)、RCGE4(正丁醇相)、RCGE1(石
油醚相)对 DPPH 自由基均具有良好的清除能力。
图 2 是 红 花 酢 浆 草 叶 子 部 分 的 不 同 极 性 提
取物以及芦丁对 DPPH 自由基清除作用的测定结
果。根据实验所测得的数据可知,在测试浓度低于
0.25mg·mL-1 时,红花酢浆草叶子部分各极性提取
物的清除率均随浓度增加而增强,RCYE3(乙酸乙
酯相)递增最快,其清除 DPPH 的能力均强于其他
各相。当 RCYE3(乙酸乙酯相)浓度为 0.25mg·mL-1
时,DPPH 自由基的清除率达 67.06%。因此,由图 2
可知,红花酢浆草叶子部分对强自由基有良好的清
除作用。
清
除
率
/%
浓度/mg·mL-1
0.05 0.10 0.15 0.20 0.25
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
RCGE1
RCGE2
RCGE3
RCGE4
RCGE5
图 2 红花酢浆草叶子部分不同极性提取物以及芦丁对 DPPH
自由基清除作用的测定
图 3 是红花酢浆草花部分的不同极性提取物以
及芦丁对 DPPH 自由基清除作用的测定结果。由图
3 可知,当测试浓度在 0.05~0.25mg·mL-1 之间,样
品对 DPPH 自由基的清除率强弱顺序依次为 RCFE3
(乙酸乙酯相)> RCFE4(正丁醇相)> RCFE1(石
油醚相)> RCFE2 (氯仿相)> RCFE5(水相)。在
0.05~0.25mg·mL-1 时,RCFE3 和 RCFE4 递增速率
最大,RCFE1 和 RCFE2 递增速率稍弱,RCFE5 递
增速率最弱。当浓度为 0.25mg·mL-1,RCFE3 和
RCFE4 对 DPPH 的清除率分别为 78.95%、77.05%。
因此,红花酢浆草花部分对 DPPH 自由基有良好的
清除作用。
清
除
率
/%
浓度/mg·mL-1
0.05 0.10 0.15 0.20 0.25
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
RCGE1
RCGE2
RCGE3
RCGE4
RCGE5
图 1 红花酢浆草根茎部分不同极性提取物以及芦丁对
DPPH 自由基清除作用的测定
29第 5 期 李中尧等:红花酢浆草抗氧化活性研究
清
除
率
/%
浓度/mg·mL-1
0.05 0.10 0.15 0.20 0.25
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
RCGE1
RCGE2
RCGE3
RCGE4
RCGE5
图 3 红花酢浆草花部分不同极性提取物以及芦丁对 DPPH 自
由基清除作用的测定
4 小结
本文以芦丁作为对照,分别对红花酢浆草的根
茎、叶子和花等部位的不同极性提取物进行 DPPH
自由基抗氧化活性测试。结果表明,红花酢浆草的
根茎、叶子和花 3 个部位均具有良好的抗氧化活性。
其中根茎部分的抗氧化活性较强,花部分活性相对
较弱,叶子的活性最弱。在红花酢浆草各部位的极
性提取物中,乙酸乙酯相的抗氧化活性均最强,正丁
醇相次之,氯仿相和石油醚相的活性相对较弱,水相
的抗氧化活性最弱。
本实验仅对红花酢浆草进行了自由基清除活性
进行测定,其确切的有效成分还有待进一步的分析
确认。
参考文献:
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Research on Antioxidant Activity of Oxalis Corymbosa DC
LI Zhong-yao, HE Ying-zi
(College of Chemistry and Life Science, Guangxi Teachers Education University, Nanning 530001, China)
Abstract: The antioxidant activity of oxalis corymbosa DC in vitro was studied. An antioxidant activity test on polarity extracts
from rhizome, leaf, flower of oxalis corymbosa DC, was carried out by DPPH method. The results showed that with the extracts
concentration of oxalis corymbosa DC increased, the eliminating capability on DPPH free radicals was gradually enhanced. DPPH
clearance rate of ethyl acetate extract from rhizome of oxalis corymbosa DC was more than 90%. The rhizome, flower and leaf of
oxalis corymbosa DC had good antioxidant activity, among which the most prominent was rhizome.
Key words: ; extracts; antioxidant activity