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RP-HPLC 测定不同产地酢浆草中刺槐素-6-C-β-D-葡
萄糖苷含量
★ 刘受先1，2 吴欢1 邓志清1，2 宋永贵1，2 冯育林1，2* 杨世林1，2 (1． 中药固体制剂制造技术国家工程
研究中心 330006;2． 江西中医学院 江西 南昌 330006)
摘要:目的:建立 RP-HPLC测定不同产地酢浆草中刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷含量的方法，评价酢浆草药材质量。方法:采用高
效液相色谱法，DiamonsilC18 色谱柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ，以乙腈和质量分数为 0． 1%磷酸水溶液(20:80，v /v)作流动
相，流速:1 mL /min;检测波长:330nm;柱温:25℃。结果:不同产地酢浆草中刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷含量差别较大，含量范
围为 0． 5968 ～ 2． 9504mg /g。结论:该方法简便、快速、准确可靠，适用于酢浆草的质量控制。
关键词:酢浆草;刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:R 284． 1 文献标识码:B
Determination of acacetin-6-C-β-D-glucopyranoside in Oxalis corniculata L of different re-
gions by RP-HPLC
LIU Shou-xian1，2，WU Huan1，DENG Zhi-qing2，SONG Yong-gui1，2，FENG Yu-lin1，2* ，YANG Shi-lin1，2
1． Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330006;
2． National Pharmaceutical Engineering Centre for Solid Preparation in Chinese Herbal Medicine Nanchang 330006
Abstract:Objective:To establish a reserved-phase HPLC method for the determination of acacetin-6-C-β-D-glucopyranoside in Oxalis
corniculata L from different regions，and evaluate its internal quality． Methods:HPLC separation was performed on a DiamonsilC18 ana-
lytical column (4． 6 mm × 150 mm，5 μm)by acetonitrile -0． 1% phosphoric acid(20:80，v /v)at the flow rate of 1mL /min． The UV
detection wavelength was set at 330nm and the column temperature was 25℃ ． Results:The acacetin-6-C-β-D-glucopyranoside contents
of Oxalis corniculata L of different regions varied significantly，and it ranged from 0． 5968 to 2． 9504(mg∕ g)． Conclusion:The method
is simple，rapid and accurate，and can be used for quality control of Oxalis corniculata L
Key words:Oxalis corniculata L;acacetin-6-C-β-D-glucopyranoside;RP-HPLC;content determination
酢浆草(Oxalis corniculata L)为酢浆草科植物
酢浆草的干燥全草［1］。多年生小草本，全草味酸，
因此也称酸浆草、酸味草、斑鸠草、三叶草等［2］。产
于空地、路旁及杂草地上，夏、秋二季采收，分布于江
西及全国各地，并收载于《江西省中药材标准》、《上
海市中药材标准》。全草含刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖
苷，柠檬酸、苹果酸、酒石酸、草酸盐等。其性酸、凉，
功效为清热解毒、消肿利湿。在临床上可用来治疗
神经衰弱、失眠、肺炎、扁桃体炎、急性肝炎、小儿上
呼吸道感染、骨折等多种疾病［3］，是骨康胶囊的主
要原料。
酢浆草中刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷为其主要
活性成分，本实验以刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷为指
标，对不同产地的酢浆草中刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖
苷的含量进行了 RP-HPLC测定，为评价酢浆草的质
量奠定了基础。
1 仪器和试药
Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公
司) ，SCL-10A型 DAD 检测器(美国 Agilent 公司) ，
AB135-S天平(瑞士 Metrler toledo 公司)。刺槐素-
6-C-β-D-葡萄糖苷对照品由中药固体制剂制造技术
国家工程研究中心对照品室分离得到，按峰面积归
一化法计算，纯度 ＞ 98%。乙腈(山东禹王实业有
限公司化工分公司，色谱纯) ，水为超纯水，其余试
剂为分析纯。
2 方法和结果
2． 1 色谱条件 DiamonsilC18色谱柱(250 mm × 4． 6
mm，5 ?m) ;流动相为乙腈-0． 1%磷酸水(20:80) ;
检测波长 330 nm;流速 1 mL /min;柱温 25℃;进样
量:10 μL。理论板数按刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷
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江西中医学院学报 2 0 1 1 年 2 月第 2 3 卷第 1 期
JOURNAL OF JIANGXI UNIVERSITY OF TCM2011 Vol. 23 No. 1
* 通讯作者:冯育林，Email:fengyulin2003@ hotmail． com
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计算，不低于 3000。色谱图见图 1。
图 1 刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷
对照品(A)、酢浆草样品(B)HPLC图谱
2． 2 对照品溶液的制备 取刺槐素-6-C-β-D-葡萄
糖苷对照品适量，精密称定，置 25 mL 量瓶中，用甲
醇溶解并稀释至刻度，制得质量浓度为 0． 1068 mg /
mL的对照品溶液。
2． 3 样品溶液制备 取样品粉末 (过 4 号筛)0． 5
g，精密称定，置 150 mL的带塞锥形瓶中，加入 70%
甲醇 5 mL，冷浸 1 h，超声处理 30 min，滤过，残渣再
超声提取 1 次。合并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇
转移并定容至 10 mL。用 0． 45 μm 微孔滤膜滤过，
取续滤液，即得。
2． 4 线性范围的考察 刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷
对照品贮备液，浓度为 106． 8 μg /mL。分别精密吸
取 0． 5、1、2、3、4、5 mL 置 5 mL 容量瓶中，加甲醇稀
释至刻度，摇匀，得质量浓度分别为 10． 68、21． 36、
42． 72、64． 08、85． 44、106． 8 μg /mL。在上述色谱条
件下进行分析。用峰面积(Y)对浓度(X)进行线性
回归，回归方程为 Y = 996． 52X + 1． 901 4，r = 0． 999
3。结果表明在 10． 68 ～ 106． 8 μg /mL 范围内刺槐
素-6-C-β-D-葡萄糖苷的浓度与峰面积呈良好线性
关系。
2． 5 精密度试验 精密吸取对照品溶液，进样 10
μL，重复进样 5 次，刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷峰面
积 RSD为 2． 81%。
2． 6 稳定性试验 取供试品溶液，室温下放置，分
别于 0、2、4、6、8 h、10 h测定，结果表明，供试品溶液
在 10 h内稳定性良好，刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷峰
面积 RSD为 2． 73%。
2． 7 重复性试验 取同一批贵州产酢浆草药材粉
末 5 份，按 2． 3 项方法制备，进样测定，结果刺槐素-
6-C-β-D-葡萄糖苷含量的 RSD为 2． 19%。
2． 8 加样回收率试验 精密称取已知刺槐素-6-C-
β-D-葡萄糖苷量的样品(贵州酢浆草药材粉末)5
份，准确加入等量的对照品适量，按 2． 3 项方法制
备供试品溶液，在上述色谱条件测定，计算回收率。
结果刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷平均回收率为 101．
09%，RSD为 1． 82%。
2． 9 样品的测定 取不同产地酢浆草样品，按 2． 3
项下制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样测定，
按标准曲线法并代入回归方程计算含量，测定结果
见表 1。
表 1 不同产地酢浆草样品中刺槐
素-6-C-β-D-葡萄糖苷含量测定结果(n = 3，mg /g)
药材编号 产地 刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷含量
1 贵州 0． 596 8
2 河南 2． 194 1
3 江苏 1． 900 8
4 广西 1． 296 5
5 江西 2． 950 4
3 讨论
本实验采集了 5 个不同产地酢浆草药材，具有
一定的代表性。测定结果表明 5 个不同产地酢浆草
药材刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷的含量在 0． 5968 ～
2． 9504(mg /g)之间，且各地含量差异较大，其中以
江西产地含量最高(2． 950 4 mg /g) ，贵州产地含量
最低(0． 596 8 mg /g)。
本实验考察了提取溶剂、提取方法等因素对实
验结果的影响，结果表明对试验结果均有显著性影
响，选择的提取条件为药材粉碎成细粉，加 20 倍量
的 70%甲醇超声处理 30 min。
检测波长的选择 本实验以 DAD检测器对刺槐
素-6-C-β-D-葡萄糖苷进行最大吸收波长扫描，结果
表明刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷在检测波长为 330
nm处有最大吸收，故本实验检测波长选用 330 nm。
流动相的考察:本研究曾分别采用了甲醇-水、
乙腈-水、乙腈-0． 1%磷酸水溶液等流动相体系。结
果相比于甲醇，使用乙腈所得到的色谱峰，峰形更加
尖锐，理论塔板数更高。0． 1%磷酸的加入使得分离
效果更好，基线更平稳，样品中刺槐素-6-C-β-D-葡
萄糖苷的峰形好，与杂质峰的分离度均大于 1． 5，最
终确定乙腈-0． 1%磷酸水系统为流动相。
参考文献
［1］江西省卫生厅．江西省中药材标准［S］．南昌:江西科学技术出版
社，1996:199．
［2］余汉华，王勇，肖英华，等．酢浆草的生药鉴定［J］．中国民族医药
杂志，2005，74(3) :178 － 179．
［3］江毅，李朝斗，杨卫平，等．草药彩色图集［M］．贵州:贵州科学技
术出版社，2001:324．
(收稿日期:2011-01-11)
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江西中医学院学报 2011 年第 23 卷第 1 期