全 文 ：　
２０１２－０４
４８（２）　
北京师范大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）
　
１６１　
秋水仙素处理对黄花酢浆草
生长的影响及诱变效应＊
吴　杰　覃　铭　颜　帅　罗　健　李咏旻
（北京师范大学珠海分校工程技术学院，５１９０８５，广东，珠海）
摘要　以黄花酢浆草（Ｏｘａｌｉｓ　ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ　Ｌ．）腋芽为外植体，建立快速繁殖体系，并观察不同浓度秋水仙素处理对
其生长的影响及诱变效应．结果表明：丛生芽诱导及增殖的最适培养基为 ＭＳ＋２．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ（６－苄氨基腺嘌呤）＋
１．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ（α－萘乙酸），１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ生根效果最好．１０ｍｇ·ｍＬ－１秋水仙素处理诱导丛生芽率达
１００％，且出现茎膨大、矮化等现象．
关键词　黄花酢浆草；秋水仙素；快速繁殖体系
收稿日期：２０１１－１１－２７
　　黄花酢浆草（Ｏｘａｌｉｓ　ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ　Ｌ）为酢浆草科酢
浆草属（Ｏｘａｌｉｓ）的多年生草本植物，全草味酸，因此也
称酸浆草、酸味草、酸咪咪等［１］；由于植株有３片倒心
形叶，也称为三叶草．黄花酢浆草腋生伞形花序，黄色，
具有清热解毒、凉血散淤等疗效［２］．原产于南非，现广
泛分布于中国各地，在广东省珠海市尤为常见．经研究
表明，黄花酢浆草提取物具有抗菌［３］、抗氧化［４］和清除
自由基［５］的作用．但目前对于黄花酢浆草的研究报道
较为少见．
秋水仙素（ＣＯＬＣ）诱变广泛用于多倍体育种和植
物改良方面［６－７］．经其诱导，可产生许多不定性的突变
结果．酢浆草中“幸运四叶草”一直以来因其数量极其
稀少备受市场关注．本文以黄花酢浆草为材料建立快
速无性繁殖体系，研究秋水仙素处理对其生长的影响
及诱变效应．
１　材料与方法
１．１　材料　研究材料取自北京师范大学珠海分校（广
东省珠海市）校园内自然生长的黄花酢浆草，取０．８
ｃｍ长的黄花酢浆草芽为外植体，流水冲洗５ｍｉｎ，φ＝
７０％乙醇消毒３０ｓ，无菌水冲洗３次，φ＝１０％次氯酸
钠消毒１２ｍｉｎ，无菌水冲洗５次，无菌纸吸干表面水
分待用．
１．２　方法
１．２．１　培养基成分及培养条件　实验所用培养基均
以 ＭＳ为基础，添加不同浓度的植物生长激素，蔗糖
ｗ＝３％，琼脂ｗ＝０．７％，ｐＨ 均为５．８，并于１２１℃高
压灭菌 ２０ ｍｉｎ．培养温度为 （２５±２）℃，光照度
１　０００ｌｘ．光照周期１６ｈ光，８ｈ暗．
１．２．２　诱芽培养基筛选　采用两因素６－苄氨基腺嘌
呤（６－ＢＡ）、α－萘乙酸（ＮＡＡ），３个水平（６－ＢＡ、ＮＡＡ
质量浓度ρ分别为１、１．５、２ｍｇ·Ｌ
－１）正交设计（见表
１）．每种处理５个重复，每个重复１５个外植体．５ｄ后
观察、统计丛生芽生长状况．
１．２．３　生根培养基筛选　将长势良好的苗分别转入
１／２ＭＳ＋（０．５、０．７５、１．０）ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ的诱根培养
基中．每种处理５个重复，每个重复１０个外植体．继续
培养１５ｄ后观察生根情况．
１．２．４　驯化和移栽　当根长至２ｃｍ左右（约４０ｄ）进
行驯化和炼苗后，移栽至ｍ（营养土）∶ｍ（蛭石）∶ｍ（珍
珠岩）＝２∶１∶１的混合土．组培室驯化１周后移栽室外
培养．
１．２．５　秋水仙素诱变处理　采用组培苗为实验对象．
芽接种２４ｈ后分别用０．０１、０．１、１、１０、１４．８ｍｇ·ｍＬ－１
５种质量浓度的秋水仙素脱脂棉包埋法进行处理；与
空白组进行对照，观察并记录经秋水仙素处理后的诱
变现象．
２　结果与分析
２．１　黄花酢浆草快速繁殖体系的建立
２．１．１　丛生芽的诱导和增殖　以 ＭＳ为基本培养基，
６－ＢＡ和ＮＡＡ的不同质量浓度组合见表１．每种培养
基接种１５个外植体．每瓶接种１个外植体．外植体接
种３ｄ后，开始生长，５ｄ左右开始芽分化，１０ｄ左右丛
生芽生长状态最好．接种７ｄ后观察芽的生长情况．以
筛选出适合丛生芽诱导的最佳激素配比：ＭＳ＋２．０
ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋１．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ．将丛生芽分割后
进行继代培养，每个增殖培养基中移入１或２个芽．每
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１５ｄ继代１次．
表１　不同质量浓度激素组合对外植体诱导芽的影响
ρ（６－ＢＡ） ρ（ＮＡＡ）
ｍｇ·Ｌ－１
外植体
总数
诱芽数
　诱芽率　
％
１．０　 １．０　 ５０　 ４０　 ８０．００
１．０　 １．５　 ５０　 ２２　 ４４．００
１．０　 ２．０　 ７０　 ５５　 ７８．５７
１．５　 １．０　 ５０　 ２９　 ５８．００
１．５　 １．５　 ５０　 ３０　 ６０．００
１．５　 ２．０　 ５０　 ２８　 ５６．００
２．０　 １．０　 ４８　 ３２　 ６６．６７
２．０　 １．５　 ５０　 ４４　 ８８．００
２．０　 ２．０　 ５０　 ４０　 ８０．００
２．１．２　生根培养　当丛生芽长到２ｃｍ以上，将其进
行切割分成单苗转入生根培养基培养．１５ｄ后统计生
根率，结果表明：１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ培养基生
根率最高，达到８６．６７％．
表２　不同质量浓度ＮＡＡ（ρ（ＮＡＡ））对诱导生根的影响
ρ（ＮＡＡ）／（ｍｇ·Ｌ－１） 接种样品数 １５ｄ诱根数 生根率／％
０．５　 ３０　 １９　 ６３．３３
０．７５　 ３０　 １７　 ５６．６７
１．０　 ３０　 ２６　 ８６．６７
Ａ：秋水仙素处理（左）和对照（右）丛生芽的生长情况；
Ｂ：１０ｍｇ·ｍＬ－１秋水仙素处理后丛生芽的生长情况；
Ｃ：对照．
图１　秋水仙素处理对丛生芽的影响　
２．１．３　驯化和移栽　待苗长至５～７ｃｍ时，打开封口
膜，炼苗３ｄ后洗去根部的培养基，移栽混合土中，成
活率达１００％．
２．２　不同ρ（秋水仙素）处理对其生长影响　外植体
接种到诱芽培养基２４ｈ后，采用不同的ρ（秋水仙素）
处理，７ｄ后观察现象．结果表明，随着ρ（秋水仙素）的
增加，诱变现象逐渐明显．从图１中可以看出，与对照
相比，秋水仙素处理出现丛生芽数明显增多，并且出现
矮化以及茎膨大的现象．尤其是经１０ｍｇ·ｍＬ－１秋水
仙素处理过后诱导丛生芽率达到１００％，且茎膨大、矮
化现象最明显（见表３）．
表３　不同ρ（秋水仙素）诱导芽结果及其现象
组名 ρ
（秋水仙素）
ｍｇ·ｍＬ－１
诱导率
％
诱导现象
对照 ０　 ８８．００ 无
１组 ０．０１　 ８９．４６ 部分出现茎膨大
２组 ０．１　 ９８．３１ 茎膨大
３组 １　 ９０．７４ 茎膨大、丛生芽多、轻度矮化
４组 １０　 １００．００ 茎显著膨大、丛生芽多、矮化明显
５组 １４．８　 ８３．７２
茎膨大、丛生芽多、矮化、
且出现烧苗现象
３　讨论
３．１　外植体的选取对快速繁殖体系建立的影响　目
前对于黄花酢浆草快速繁殖体系研究稀少，主要针对
同属三角紫叶酢浆草的研究较多［８－１１］．所采用的外植
体有叶片、鳞茎、茎等．以腋芽作为外植体，有取材方
便、萌发快、操作简单、诱导率高、用时短等特点，是一
种较为有效的方法和途径．
３．２　激素对芽和根分化的影响　在植物组织培养过
程中，外界植物生长激素（例如６－ＢＡ、ＮＡＡ、ＫＴ等）对
离体组织培养起着至关重要的作用．但植物本身内源
激素也对诱导生长有着相互协调的作用［１２－１３］．在黄花
酢浆草快速繁殖体系中发现添加一定质量浓度的６－
ＢＡ和ＮＡＡ，可以诱导外植体先生长，再分化出不定
芽，之后诱导根的生长，同时伴有愈伤组织形成．
３．３　不同ρ（秋水仙素）对诱导丛生芽的影响　０．０１
ｍｇ·ｍＬ－１秋水仙素诱变现象不明显，随着ρ（ＮＡＡ）增
加，诱变现象更明显．１０ｍｇ·ｍＬ－１秋水仙素处理诱导
丛生芽率达到１００％．但当ρ（秋水仙素）达到１４．８ｍｇ
·ｍＬ－１对苗本身生长有抑制作用，且丛生芽的萌发与
对照相比要推迟１～２ｄ．
４　参考文献
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州科技出版社，２００１：３２４
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　第２期 吴　杰等：秋水仙素处理对黄花酢浆草生长的影响及诱变效应 １６３　 　
［５］　谭萍，赵云婵．黔产酢浆草总黄酮质量浓度的测定及提取
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ＣＯＬＣＨＩＣＩＮＥ　ＥＦＦＥＣＴ　ＯＮ　ＧＲＯＷＴＨ　ＤＩＦＦＥＲＥＮＴＩＡＴＩＯＮ
ＡＮＤ　ＭＵＴＡＧＥＮＥＳＩＳ　ＩＮ　ＯＸＡＬＩＳ　ＣＯＲＮＩＣＵＬＡＴＡＬ
ＷＵ　Ｊｉｅ　ＱＩＮ　Ｍｉｎｇ　ＹＡＮ　Ｓｈｕａｉ　ＬＵＯ　Ｊｉａｎ　ＬＩ　Ｙｏｎｇｍｉｎ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｚｈｕｈａｉ），５１９０８５，Ｚｈｕｈａｉ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｘａｌｉｓ　ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ　Ｌ　ａｘｉｌａｒｙ　ｂｕｄ　ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｔｏ　ａｓｓｅｓｓ　ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ
ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｔｏ　ｂｅ：
ＭＳ＋２．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋１．５ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ．Ａｆｔｅｒ　ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｔ　１０ｍｇ·
ｍＬ－１，ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　１００％，ｓｔｅｍ　ｓｗｅｌｉｎｇ，ａｎｄ　ｄｗａｒｆｉｎｇ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｏｘａｌｉｓ　ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ　Ｌ；ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ；ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ