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药
研
究
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酢浆草的薄层色谱鉴别研究
★ 廖惠平1* 陈思思1 黄文平2 吴欢2 李志峰1,2 冯育林1,2** 杨世林1,2 (1.江西中医药大学 江
西 南昌 330004;2.中药固体制剂制造技术国家工程研究中心 江西 南昌 330006)
摘要:目的:建立酢浆草的薄层色谱鉴别方法。方法:以刺槐素 - 6 - C - β - D -葡萄糖苷对照品为对照,采用薄层色谱法进行
鉴别研究。结果:供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,以二氯甲烷 -甲醇 -甲酸( 7∶ 2∶ 0. 1) 展
开后 Rf值适中,斑点清晰。结论:建立的薄层色谱鉴别方法对酢浆草中刺槐素 - 6 - C - β - D -葡萄糖苷的鉴别有较好的适
应性,重现性好,为完善其质量标准奠定了基础。
关键词:酢浆草;刺槐素 - 6 - C - β - D -葡萄糖苷;薄层色谱
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A
Thin - Layer Chromatography of Herba Oxalis corniculata L.
LIAO Hui - ping1,CHEN Si - si1,HUANG Wen - ping2,WU Huan2,LI Zhi - feng1,2,FENG Yu - lin1,2,YANG Shi -
lin1,2
1. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanchang 330004,China;
2. Solid preparation of Traditional Chinese Medicine Manufacturing Technology National Engineering Center,Nanchang 330006,China.
Abstract:Objective:To establish a Thin - Layer Chromatography(TLC)identification methods for Oxalis corniculata L. Methods:Using
TLC with acacetin - 6 - C - β - D - glucoside as the reference substance. Results:Both acacetin - 6 - C - β - D - glucoside and Oxalis
corniculata L. had the same main spot and color on the plate. The Rf value was moderate and the spot was clear by using dichlorometh-
ane - methanol - formic acid(7∶ 2∶ 0. 1)as the developing solvent substance. Conclusion:The method is adaptable and reproducible to
identify acacetin - 6 - C - β - D - glucoside of Herba Oxalis corniculata L.,which provide a basis for the quality control of Herba Oxa-
lis corniculata L. .
Key words:Oxalis corniculata L.;acacetin - 6 - C - β - D - glucoside;TLC
酢浆草为酢浆草科植物酢浆草(Oxalis cornicu-
lata L.)的干燥全草,又名三叶酸、三角酸、雀林草、
小酸茅等[1]。国内各地均分布,生于山坡草池、河
谷沿岸、路边、田边、荒地或林下阴湿处等。其味酸,
性凉,具有清热利湿,解毒消肿之功效[2]。用于感
冒发热,肠炎,尿路感染,尿路结石,神经衰弱;外用
治跌打损伤,毒蛇咬伤,痈肿疮疖,脚癣,湿疹,烧烫
伤;也可治尿血、尿路感染、黄疸肝炎等。《江西省
中药材标准》1996 版、《上海市中药材标准》1994
版、《湖南省中药材标准》2009 版、《云南省中药材标
准》2005 版、《广西壮药质量标准》均以“酢浆草”之
名正式收载该药。据统计,约有 15 个使用酢浆草的
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江西中医药大学学报 2 0 1 4年 8月第 2 6卷第 4期
JOURNAL OF JIANGXI UNIVERSITY OF TCM 2014 Vol. 26 No. 4
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作者简介:廖惠平(1990 - ) ,女,江西吉安人,在读研究生。研究方向:天然药物分离及其质量控制。Tel:15083835880,E - mail:
787312759@ qq. com。
通信作者:冯育林,男,博士,教授,硕士生导师。研究方向:中药化学教学及研究。Tel: (0791)87119632,E - mail:fengyulin2003@ hot-
mail. com。
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中成药处方,是极具开发前景的中草药。现代临床
研究报道,将酢浆草制成制剂,具有一定的镇静、安
眠效果[3]。另有报道酢浆草药理作用主要集中在
体外抗菌[4]。实验研究发现,酢浆草中具有抗菌消
炎活性的特征性成分(刺槐素 - 6 - C - β - D -葡萄
糖苷)。鉴于地方标准中未规定酢浆草薄层鉴别,
导致其药材可控性差,本文对 10 批酢浆草药材进行
了薄层鉴别研究,探索了酢浆草简单易行的鉴别方
法,为酢浆草药材质量控制提供了依据。
1 实验材料
1. 1 样品来源 本实验收集到不同批次的酢浆草
样品共 10 批,来源于江西、安徽、云南等地,见表 1。
样品经江西中医药大学钟国跃教授鉴定为酢浆草
(Oxalis corniculata L.)。
表 1 药材信息
批次 批次
1 号江西 130412 6 号安徽 130610
2 号江西 130513 7 号安徽 130505
3 号安徽 130715 8 号云南 130811
4 号安徽 130802 9 号江西 130906
5 号河南 130813 10 号江西 130906
1. 2 试药与试剂 刺槐素 - 6 - C - β - D -葡萄糖
苷对照品(中药固体制剂制造技术国家工程研究中
心对照品室分离制得,经面积归一法计算,含量大于
98%) ,硅胶 G 薄层板预制板(青岛海洋化工厂分
厂) ,薄层层析硅胶 G薄层板预制板(青岛市基亿硅
胶试剂厂) ,薄层层析硅胶 G(青岛海洋化工厂分
厂) ;其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 样品前处理考察 酢浆草含有一些色素、糖类
等杂质,故对前处理方法进行筛选。
2. 1. 1 提取方法的考察 方法一:取酢浆草粉末
2g,加甲醇 20mL回流提取 1h,滤过,滤液备用。
方法二:取酢浆草粉末 2g,加石油醚 20mL回流
提取 1h,滤过,滤渣加甲醇 20mL 回流提取 1h,滤
过,滤液备用。
方法三:取酢浆草粉末 2g,加石油醚 20mL回流
提取 1h,滤过,滤渣加甲醇 20mL 回流提取 1h,过
滤,回收甲醇,残渣加水 50mL 置水浴锅中加热 2h,
趁热滤过,滤液用等量乙酸乙酯萃取 3 次,合并乙酸
乙酯液,蒸干,残渣加甲醇 1mL使溶解。
方法四:取本品粉末 2g,加甲醇 20mL,超声处
理 20min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1mL使溶解。
以上 4 种溶液点于硅胶 G 薄层板上展开后经
碘熏,结果表明,方法四的色谱斑点清晰,杂质干扰
少,效果最好。
2. 1. 2 提取溶剂考察 以 50%乙醇,75%乙醇,
95%乙醇,甲醇作为提取溶剂,按上述方法 4 操作,
各溶液点于硅胶 G薄层板上展开后经碘熏,结果表
明,以甲醇提取效果最好,故选用甲醇作为提取溶
剂。
2. 1. 3 提取溶剂用量考察 以甲醇为溶剂,加入量
分别为 10,20,40mL,按方法 4 操作,各溶液点于硅
胶 G薄层板上展开后经碘熏,结果表明,以 20mL和
40mL效果好,故选用加入量为 20mL。
2. 2 展开剂考察 ①二氯甲烷 -甲醇 -甲酸(7∶ 1
∶ 0. 1) ;②二氯甲烷 -甲醇 -甲酸(7∶ 2 ∶ 0. 1) ;③二
氯甲烷 -甲醇(8∶ 2)。以上 3 个展开系统展开前须
先用展开剂饱和 15min 后,上行展开后经碘熏。结
果表明,以二氯甲烷 -甲醇 -甲酸(7∶ 1 ∶ 0. 1)分离
效果最好,斑点清晰,Rf值适中。
2. 3 点样量考察 对照品、样品点样量分别为 1,
2,3,4,5,10 μL,于硅胶 G 薄层板上展开后经碘熏,
结果表明,对照品、样品的点样量均为 5μL 时分离
效果好,斑点清晰。
2. 4 展距考察 分别考察 9,11,13cm,结果表明,
展距在 9 ~ 11cm时,斑点分离较好,无拖尾,Rf值适
中。
2. 5 展开湿度考察 加入不同浓度硫酸,调节展开
缸内湿度分别为 25%和 72%,进行展开后经碘熏,
结果表明,湿度为 25%时,斑点分离效果较好,无拖
尾。
2. 6 展开温度考察 分别在 4℃、16℃和 25℃下展
开后经碘熏,结果表明,在 25℃时,分离效果好,斑
点较为圆整清晰。
2. 7 薄层板饱和时间考察 薄层板分别饱和 5,
15,30min,然后展开,结果表明,薄层板饱和 15min
或以上时,分离效果好,斑点圆整清晰。
2. 8 不同薄层板的考察 分别选用自制手铺板、薄
层硅胶预制板 1(青岛市基亿硅胶试剂厂)和薄层硅
胶预制板 2(青岛海洋化工厂分厂)进行点样展开,
结果表明,薄层硅胶预制板分离效果较好,斑点较为
清晰圆整。
2. 9 方法的确定及样品鉴别 供试品溶液的制备:
取本品粉末 2g,加甲醇 20mL,超声处理 20min,滤
过,滤液蒸干,残渣加甲醇 1mL 使溶解,作为供试品
溶液。
对照品溶液的制备:取刺槐素 - 6 - C - D -葡
萄糖苷对照品适量,加甲醇制成每 1mL含 0. 5mg 的
溶液,作为对照品溶液。
吸附剂:硅胶 G薄层预制板;( 下转第 67 页)
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廖惠平等:酢浆草的薄层色谱鉴别研究
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公藤生物碱的提取效率,同时兼顾浸膏得率,采用加
权评分法综合表征雷公藤生物碱的整体特性,最终
通过正交试验确定雷公藤生物碱提取的相关工艺参
数,为雷公藤生物碱的提取提供依据。
在雷公藤总生物碱提取率的考察中,采用不同
对照对总生物碱含量进行比较,最终选择含量较高
的雷公藤吉碱作为对照品,测得的结果较为稳定,含
量较高。同时建立了 HPLC 法同时测定雷公藤吉
碱、雷公藤次碱的含量,在梯度洗脱条件的摸索中,
考察了甲醇 -水、乙腈 -水和乙腈 - 0. 02mol /L 磷
酸二氢钠等系统的多种洗脱程序,结果以乙腈 -
0. 02mol /L磷酸二氢钠可以得到良好的分离效果,2
种成分的峰形对称,结果稳定,可用于 2 种成分的定
量分析。
参考文献
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( 收稿日期: 2014-01-09) 编辑:
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曾文雪
( 上接第 63 页)
展开剂:二氯甲烷 -甲醇 - 甲酸(7 ∶ 1 ∶ 0. 1) ;显色
剂:碘蒸汽,熏至斑点清晰,置可见光下检视。
图 1 不同产地酢浆草样品薄层色谱图
S:刺槐素 - 6 - C - D -葡萄糖苷对照品;1 ~ 10:不同来源酢浆草药材
表 2 10 批酢浆草药材薄层鉴别结果
批次 斑点颜色 比移值(Rf) 批次 斑点颜色 比移值(Rf)
1号江西 130412 亮蓝色 0. 522 6号安徽 130610 亮蓝色 0. 520
2号江西 130513 亮蓝色 0. 520 7号安徽 130505 亮蓝色 0. 520
3号安徽 130715 亮蓝色 0. 523 8号云南 130811 亮蓝色 0. 523
4号安徽 130802 亮蓝色 0. 521 9号江西 130906 亮蓝色 0. 522
5号河南 130813 亮蓝色 0. 521 10号江西 130906 亮蓝色 0. 521
点样量:5μL;展距:9 ~ 11cm;展开湿度:25%;
展开温度:25℃;薄层板饱和时间:15min。
取 10 批酢浆草药材样品,按上述方法试验,结
果表明,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置
上,均显相同颜色的亮蓝色斑点,如图 1 和表 2。
3 讨论
3. 1 建立了酢浆草中刺槐素 - 6 - C - D -葡萄糖
苷的薄层色谱鉴别方法,该方法对酢浆草中刺槐素
- 6 - C - D -葡萄糖苷的鉴别有较好的适应性,其
方法简便,重现性好。
3. 2 在酢浆草各样品薄层色谱中,2、4、7 号样品在
与对照品色谱相对应的位置上,蓝色斑点较弱,其余
主要色谱斑点强弱略有一定的差异,可能与药材的
来源产地不同有关。
参考文献
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( 收稿日期: 2014-02-23) 编辑:
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曾文雪
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