全 文 ：桫椤叶和茎干抑菌活性初探
弓加文 , 陈封政 , 李书华　(乐山师范学院化学与生命科学系 ,四川乐山 614004)
摘要　[目的] 初步探讨桫椤叶和茎干提取物的抑菌活性 ,为中药龙骨风(桫椤叶的茎干)研究开发提供依据。[方法]以金黄色葡萄球
菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌为供试菌种 ,研究了桫椤茎叶和茎干甲醇提取物对它们的抑菌作用 ,并与黄连提取物的抑菌效果进行比较。
[结果]桫椤叶对大肠杆菌的抑制效果最好 ,最低抑制浓度为 0.10%,对枯草芽孢杆菌的抑制效果次之 ,对金黄色葡萄球菌的抑制作用最
弱;桫椤茎干对枯草芽孢杆菌的抑制效果最好 ,最低抑制浓度为 0.10%,对大肠杆菌的抑制效果次之 ,对金黄色葡萄球菌的抑制作用最
弱。桫椤叶和茎干提取物的抑菌作用与黄连提取物的相比较弱。[结论]桫椤叶对大肠杆菌的抑制效果较好 ,桫椤茎干对枯草芽孢杆菌
的抑制效果较好 ,最低抑制浓度均为 0.10%。
关键词　桫椤;叶;茎;龙骨风;抑菌作用
中图分类号　Q946　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2007)33-10566-01
Primary Discussion on the Bacteriostatic Activity of Alsophila spinulosa Leaves and Stems
GONG Jia-wen et al　(Department of Chemistry and Life Sciences , Leshan Normal College ,Leshan ,Sichuan 614004)
Abstract　[ Objective] The aim of the research was to primarily discuss the bacteriostatic activity of Alsophila spinulosa leaves and stems so as to provide
basis for developing and utilizing Chinese traditional medicine Longgufeng.[ Method] With Staphylococcus aureus , Escherichia coli and Bacillus subtilis as
tested bacterium , the bacteriostatic effects of ethanol extracts from Alsophila spinulosa leaves and stems on 3 kinds of bacteria were studied and compared
with that of coptis extracts.[ Result] The leaves of A.spinulosa had best inhibition effect on E.coli with the minimum inhibition concentration of 0.10%,
followed by the inhibition effect on B.subtilis and its effect on S.aureus was weakest.The stems of A.spinulosa had best inhibition effect on B.subtilis
with the minimum inhibition concentration of 0.10%, followed by the inhibition effect on E.coli and its effect on S.aureus wasweakest.The bacteriostatic
effects of the extracts from the stems and the leaves of A.spinulosa wereweaker than that of coptis extracts.[Conclusion] The leaves of A.spinulosa had better
inhibition effect on E.coli and the stems of A.spinulosa had better inhibition effect on B.subtilis ,with the minimum inhibition concentration of 0.10%.
Key words　Alsophila spinulosa;Leaf;Stem;Longgufeng;Bacteriostatic effect
基金项目　四川省科技厅应用基础研究项目(05JY029);四川省教育厅
自然科学研究基金项目(2005A165)。
作者简介　弓加文(1950-),男 ,四川乐山人 ,副教授 ,从事动物生理
与药理研究。
鸣　　谢　乐山师范学院 01级生物技术专业的周　和罗容同学参与
部分实验工作。
收稿日期　2007-07-01
　　桫椤[ Alsophila spinulosa(Hook.)Tryo .] ,俗名树蕨 ,是著名
的孑遗植物 ,在地球上存活了上亿年 ,它是地理变迁的见证
者 ,也是划分自然带的重要证据[ 1] ,对物种的形成和植物地
理区系 、古生物学 、古气候 、古环境变迁的研究具有重要价
值[ 2] ,所以我国将桫椤列为国家一级保护植物。桫椤的茎干
在中药里称为龙骨风[ 3] ,含有黄酮苷 、生物碱 、氨基酸 、二元
酚等成分 ,具有较高的药用价值 ,有祛风除湿 、活血化瘀 、清
热止咳的功效 ,还可用于治疗人 、畜瘟症和痢疾等;髓心还可
入药 ,有驱风湿 、强筋骨 、清热止咳等功效[ 4] 。笔者根据资料
记载的功效 ,对桫椤叶和茎干提取物的抑菌活性进行了初步
探索。选择与人们日常生活有密切关系的金黄色葡萄球菌 、
大肠杆菌 、枯草芽孢杆菌 ,并与黄连提取物的抑菌效果进行
比较 ,为龙骨风的进一步研究开发提供依据。
1　材料与方法
1.1　材料　①桫椤茎干 、桫椤叶(采自四川乐山市五通桫椤
沟)、黄连(Coptis chinensis)购自乐山市中药材公司;②菌种:
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacil-
lus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)均由乐山师范学院微生
物室提供;③培养基:牛肉膏蛋白胨培养基;④仪器:干燥箱 、
培养箱 、移液枪 、高压灭菌锅 、超净工作台 、真空抽提器 、循环
水真空泵 、旋转蒸发仪。
1.2　试验方法
1.2.1　桫椤叶 、茎干提取液的制备。称取阴干桫椤叶和茎
干的粉末各 40 g ,加入 50%的甲醇 400 ml ,于 100 ℃水浴锅回
流浸提2 h ,再浸泡3 h ,用布氏漏斗抽滤 ,充分洗涤后得滤液 ,
将滤液真空浓缩至干 ,置于恒重培养皿中 ,于 105 ℃干燥箱
中烘 6 h ,称重 ,其净重分别为 1.691 3和 3.857 3 g ,然后分别
加水 16.9和 38.6 ml稀释 ,使固形物含量均为 0.100 g/ml。
1.2.2　黄连提取液的制备。称取干黄连粉末 40 g ,放入烧杯
中 ,加水 200ml ,浸泡约 6 h ,然后加热煮沸 ,保持微沸 2 h ,过
滤后 ,药渣再加水复煎 1次 ,合并两次滤液 ,用布氏漏斗抽
滤 ,充分洗涤后得滤液 ,将滤液真空浓缩至干 ,置于恒重培养
皿中 ,于 105 ℃干燥箱中烘 6 h ,称重 ,其净重为 4.014 3 g ,加
40 ml水稀释 ,使固形物含量为 0.100 g/ml 。
1.2.3　供试菌株的活化。将供试的 3种细菌移接入试管斜
面培养基上 ,在 37 ℃的生化培养箱内培养 18～ 24 h备用。
1.2.4　提取物培养基的配制及平板的制备。取桫椤叶 、茎
干和黄连提取液与营养琼脂培养基于 250 ml三角瓶中配成
不同浓度的提取液培养基(表 1),经 118 ℃高压蒸汽灭菌 15
min后 ,冷却至 55 ℃左右 ,分别倒入培养皿。
　表 1 不同浓度的桫椤叶、茎干和黄连提取液培养基的配制
提取液体积
ml
营养琼脂
g
蒸馏水
ml
提取液培养基
浓度∥%
　　0 4.06 　100.0 　　　　　 0
0.5 4.06 99.5 0.05
1.0 4.06 99.0 0.10
1.5 4.06 98.5 0.15
2.0 4.06 98.0 0.20
2.5 4.06 97.5 0.25
3.0 4.06 97.0 0.30
1.2.5　菌悬液的制备。用接种环挑取菌体放入 50 ml装有
玻璃球的无菌生理盐水中 ,振摇 10 min ,使菌分布均匀 ,通过
稀释 ,采用比浊法 ,制成菌悬液浓度均为 107 个/ml。
(下转第 10568页)
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2007, 35(33):10566 ,10568　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　孙红忠　责任校对　李菲菲
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.33.019
(上接第 10566页)
1.2.6　抑菌实验 。用移液枪精密吸取各菌悬液 0.2 ml于
不同浓度的培养基中 ,用无菌三角涂布棒涂布均匀 ,待干后
倒置于生化恒温培养箱中培养(37 ℃、24 h),观察培养
结果。
2　结果与分析
经过 37 ℃、24 h培养后观察结果如表 2。由表 2可见 ,
　　表2 不同浓度的提取液培养基的抑菌情况
菌种 提取液 提取液培养基浓度∥%
0 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30
金黄色 桫椤叶 ++++++ ++ ++ + + +
葡萄球菌 桫椤茎干 ++++++ ++ ++ + + +
黄连 +++ ++ + + - - -
大肠杆菌 桫椤叶 +++ ++ + + - - -
桫椤茎干 +++++++++ ++ ++ + +
黄连 +++ ++ + - - - -
枯草芽 桫椤叶- ++++++++++++ ++ + -
孢杆菌 桫椤茎干 ++++++ ++ ++ + - -
黄连 +++ ++ + - - - -
　注:“ -”表示培养基上无菌;“ +”表示培养基上有菌。
桫椤叶对大肠杆菌的抑制效果较好 ,最低抑制浓度为
0.10%,对枯草芽孢杆菌的抑制效果次之 ,对金黄色葡萄球
菌的抑制作用最弱;而桫椤茎干对枯草芽孢杆菌的抑制效
果较好 ,最低抑制浓度为 0.10%,对大肠杆菌的抑制效果次
之 ,对金黄色葡萄球菌的抑制作用最弱。桫椤叶和茎干的
抑菌作用与抑菌中药材黄连提取物相比较弱。
3　小结与讨论
金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌常会引起食物中毒 ,其主要
症状为呕吐 、腹泻 、腹痛 ,中毒严重可引起死亡;而枯草芽孢
杆菌属革兰氏阳性需氧芽孢杆菌 ,广泛存在于土壤 、尘埃和
环境空气中 ,为一种条件致病菌 ,可致呼吸道感染 、心内膜
炎 ,以及菌血症 、败血症等 ,而通过实验验证了桫椤叶对大
肠杆菌的抑制效果比较好 ,桫椤茎干对枯草芽孢杆菌的抑
制效果比较好 。
参考文献
[ 1] 廖富林.阴那山的几种珍稀濒危植物[ J] .嘉应大学学报, 1994(2):106-110.
[ 2] 程治英 ,陶国达.桫椤濒危原因的探讨[ J] .云南植物研究 ,1990, 12(2):
186-190.
[ 3] 江苏新医学院.中药大词典[M] .上海:上海科技出版社 , 2001:2402.
[ 4] 敖光辉.我国桫椤研究进展[ J] .内江师范学院学报, 2004(6):79-82.
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