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蒙药小白蒿的炮制工艺及炮制品的药理研究



全 文 :2015 年 11 月 第 17 卷 第 11 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Nov. 2015 Vol. 17 No. 11
·基础研究·
△[基金项目] 内蒙古政府重大项目(2013-006)
*[通信作者] 那生桑,教授,研究方向:蒙药现代化研究;E-mail:nasang56@ sina. com
蒙药小白蒿的炮制工艺及炮制品的药理研究

珠娜1,萨茹拉2,那生桑1*
(1. 内蒙古医科大学,内蒙古 呼和浩特 010110;
2. 内蒙古国际蒙医医院,内蒙古 呼和浩特 010065)
[摘要] 目的:优选小白蒿蒙医炮制工艺,并观察其饮片安全有效性。方法:以炮制品绿原酸含量为主要指标
并参考槲皮素含量进行正交试验,以考察炒制温度、时间和药材粒度的影响,确定最佳工艺;采用小白鼠急性毒性
实验,断尾实验测定出血时间,眼眶静脉丛取血测定凝血时间,断头采全血计数血小板总数,评价安全有效性。结
果:本品在 270 ℃温度下翻动炒制 20 min效果最佳,经方差分析证明炒制温度、时间和粒度因素对所监测的两种成
分的含量均没有显著影响;小白蒿炮制后可缩短小白鼠的出血时间,显著增高血小板计数。结论:小白蒿经过合理
的炒制后,可提高其安全性和止血药效,为验证传统蒙药小白蒿用药理论,提供了参考依据。
[关键词] 蒙药;小白蒿;炮制;药理
Processing Technology of Mongolian Artemisia frigida Willd and Pharmacological Studies on Processed Product
ZHU Na1,SA Rula2,NA Shengsang3*
(1. Inner Mongolia Medical University,Inner Mongolia,Hohhot 010110,China;
2. International Mongolian Hospital of Inner Mongolia Autonomous Region,Inner Mongolia,Hohhot 010065,China)
[Abstract] Objective:To optimize the Mongolian processing technology of Artemisia frigida Willd and observe the
safety and effectiveness of processed product. Methods:The orthogonal test was conducted with the content of chlorogenic acid
in processed products and quercetin as the main indicator and reference factors. The impact of frying temperature and time and
medicinal material granularity were examined to determine the optimum. The safety and effectiveness by adopting acute toxicity
test in mice were evaluated,and the bleeding time was determined by tail docking experiments,the blood coagulation time was
determined with orbital venous plexus,the total number of platelet was counted with whole blood. Results:When the product
was flipped fryed at a temperature of 270 ℃ 20 min,the best effect was achieved. By analysis of variance,it proved that the
frying temperature and the time and granularity had not significant effect on the content of the two monitored components. After
processing A. frigida,it can shorten the bleeding time of mouse,significantly increased the platelet count. Conclusion:After
reasonable frying,it can improve the A. frigida safety and hemostatic efficacy. The study provided a reference basis to verify the
theory of traditional Mongolian medicine on A. frigida.
[Keywords] Mongolian medicine;Artemisia frigida Willd;processing;pharmacology
doi:10. 13313 / j. issn. 1673-4890. 2015. 11. 012
小白蒿是菊科多年生植物冷蒿 Artemisia frigida
Willd. 的地上部分,其植物资源丰富,北半球寒带、
亚热带几乎有分布。秋季花盛开时采集,阴干[1]。
小白蒿是古老而最常用的一种蒙药[2],蒙药本草
《蒙药正典》中有其药用记载。现代蒙医学文献则
更详细描述了其功效,止血、消肿,主治各种出血、
肾热、月经不调、疮痛[3]。关于小白蒿的炮制,《认
药白晶药鉴》[4]、 《四部甘露》[5]等多个蒙医药经典
文献记载基本一致,配入止血方剂时炒制。其炮制
目的在于提高止血作用, 《蒙药炮制学》已予肯
定[6]。此外,据报道小白蒿中的与止血功效有关系
的钙、镁、钾、铁等含量炮制后呈现不同程度的增
加[7],支持了止血功能增加的论断。有人也研究了
小白蒿炒炭炮制工艺与药效后提出:与凝血机制有
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关的无机元素含量增加,炮制使止血作用有增强的
趋势[8],但未提及对血小板计数有何影响。至于炮
制法有二,一为炒焦,二为焖煅至碳。故炒制程度
是要探讨的问题。在蒙医古代文献中表述火制(用火
处理)程度没有明显的界限之分,凡炒或煅制使药材
变化后统称为碳(或碳灰) ,不能够用中医炒黄、炒
焦或炒碳来衡量。故本文照蒙医理论对小白蒿炒制程
度以饮片性状(炒至药材表面深棕色,断面见呈浅褐
色)为标准优选炮制工艺,并评价其饮片安全有效性。
1 材料
1. 1 药物与试剂
小白蒿:采集于呼和浩特大青山,由内蒙古药检
所康双龙蒙药主任药师鉴定为正品,标本号:NM-
MP20130701;三七粉(批号:20120801,亳州市京皖
中药饮片厂)。以上药物用于动物实验时制成一定年
度的混悬液;绿原酸对照品(中国食品药品检定研究
院,批号:110753-201213)、槲皮素对照品(中国食品
药品检定研究院,批号:100081-201207) ;铁氰化钾、
三氯化铁、十二烷基硫酸钠等试剂均为分析纯或色
谱纯。
1. 2 动物
昆明品系小白鼠(内蒙古大学动物实验中心) ,
雌雄各半,体重(20 ± 2)g。
1. 3 仪器
HH-S数显恒温油浴锅(金坛市双佳实验仪器
厂) ;TU-1901 双光束紫外可见分光光度计(北京普
析通用仪器有限责任公司) ;AC910EO 型血球仪计
数器(瑞典)。
2 方法与结果
2. 1 炮制工艺优选
2. 1. 1 小白蒿药材 新鲜采集药材,除去杂质,洗
净,切 1 ~ 5 mm段,阴干。
2. 1. 2 炒制方法 根据药材炒制通则,取净小白蒿
药材置恒温炒药锅,用武火(220 ~ 300 ℃)不断翻动
炒至喷发香味,停止冒白烟,外表面呈棕黄色时取
出,出现火星时喷以清水灭尽,炒干取出,放凉。
2. 1. 3 炮制工艺优选正交试验设计 以炮制品绿原
酸含量为指标并参考槲皮素含量,对影响因素进行
正交优选。具体选炒制温度(A)、时间(B)及药材
粒度(C)3 个因素,每因素设 3 个水平,选用正交表
L9(3
4)进行正交试验[9]。结果见表 1。
表 1 小白蒿炮制工艺因素水平表
水平 温度(A)/℃ 时间(B)/h 粒度(C)/mm
1 240 20 1
2 270 30 3
3 300 40 5
2. 1. 4 指标检测 取绿原酸和槲皮素对照品,用紫外
分光光度计依法测定分别绘制标准曲线,得回归方程
式依次为 Y绿 = 2. 905 68X + 0. 003 64(r = 0. 999 6)和
Y槲 = 5. 566 99X -0. 034 3(r = 0. 999 6)。据不同被测
物质采用相应的溶剂和方法提取小白蒿样品,制备
两种供试品溶液,依法测定。
2. 1. 5 正交试验结果 按绿原酸或槲皮素含量为指
标排序,各因素影响主次结果为 A2 ﹥ B1 ﹥ C3;即
药材切 5 mm段,270 ℃温度下翻动炒制 20 min效果
最佳。经方差分析证明设定的温度、时间对检测成
分均没有显著影响(P > 0. 05)。见表 2、3。
表 2 小白蒿炮制工艺正交试验方案及结果
编号 A B C 绿原酸(%) 槲皮素(%)
1 1 1 1 0. 455 0. 338
2 1 2 2 0. 454 0. 350
3 1 3 3 0. 454 0. 384
4 2 1 2 0. 479 0. 401
5 2 2 3 0. 461 0. 351
6 2 3 1 0. 440 0. 349
7 3 1 3 0. 436 0. 342
8 3 2 1 0. 423 0. 339
9 3 3 2 0. 417 0. 327
绿


K1 1. 363 1. 37 1. 318
K2 1. 38 1. 338 1. 35
K3 1. 276 1. 311 1. 351
R 0. 104 0. 027 0. 033



K1 1. 072 1. 081 1. 026
K2 1. 101 1. 04 1. 078
K3 1. 008 1. 06 1. 077
R 0. 093 0. 041 0. 052
表 3 方差分析表
误差来源 平方和 均方 F P
绿原酸 A 0. 006 23 0. 003 115 3. 57 > 0. 05
B 0. 001 745 0. 000 872 5 1 > 0. 05
槲皮素 A 0. 004 53 0. 002 265 5. 386 > 0. 05
B 0. 000 841 0. 000 420 5 1 > 0. 05
注:F0. 05(2,1)= 18. 5. 00;F0. 01(2,1)= 98. 50。
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2. 2 药理实验
2. 2. 1 急性毒性实验 据预试了解到小白蒿饮片毒
性很低,测不出 LD50,故将小白蒿饮片制成适宜浓
度的的混悬液,常规测定小鼠最大口服耐受量。结
果每次给药量达 9. 4 g·kg -1,超过了临床有效量的
340 倍而无死亡,未见异常反应,14 d 小鼠增长与
对照组间无差异[10]。说明小白蒿饮片毒性很小。
2. 2. 2 对昆明小鼠出、凝血时间及血小板总数的影
响 取小白鼠 80 只,雌雄各半,随机分为 4 组,每
组 20 只,分别为赋形剂(空白)组、三七粉(阳性)
组、药材组和饮片组。小白蒿药材细粉制成混悬液,
按 13. 8 mg·(10g)- 1剂量连续灌胃给药 5 d,末次给
药 1 h后,小鼠固定,剪于尾尖 0. 5 cm 处横断,待
血液自行流出开始计时,测出血时间(BT) ;同时自
眼眶静脉丛取血测定凝血时间(CT) ;最后断头采全
血,用血球仪计数血小板总数。
小白蒿经炮制可缩短正常小白鼠出凝血时间,
炮制前后相比具有统计学意义(P ﹤ 0. 05) ,小白蒿
可显著增加血小板计数(P ﹤ 0. 05) ,经炮制可提高
该作用强度(P ﹤ 0. 05) ,见表 4。证明小白蒿经炮
制,可增强其止血作用,其机制可能与血小板计数
增加等有关。
表 4 小白蒿对小白鼠出血、凝血时间及血小板
总数的影响(珋x ± s,n = 20)
组别 出血时间 / s 凝血时间 / s 血小板数
空白组 105. 34 ± 42. 48 58. 645 ± 11. 264 400. 1 ± 49. 037
阳性组 74. 34 ± 24. 48▲ 41. 758 ± 9. 1731▲▲ 441. 7 ± 110. 76
药材组 61. 40 ± 20. 19▲ 60. 594 ± 12. 84△ 509. 5 ± 152. 13▲△
饮片组 41. 86 ± 22. 91▲▲△★49. 198 ± 6. 906▲★ 664. 9 ± 184. 75▲▲△△★
注:与空白组比,▲ P ﹤ 0. 05,▲▲ P ﹤ 0. 01;与阳性组比,△P ﹤
0. 05,△△P﹤ 0. 01;与药材组比,★P﹤ 0. 05。
3 讨论
小白蒿是古老而最常用的一种蒙药[11],多用于
出血性或血液病证的治疗。配入止血方或治疗血液
病的方剂中,需要炮制,以提高其止血作用。本文
研究炮制工艺,以绿原酸和槲皮素含量为检测指标
优选了炒制工艺,结果药材切成小段,在 270 ℃下
翻动炒制 20 min 效果最佳;药理实验显示小白蒿具
有缩短出血时间和凝血时间、提高血小板计数作用,
经炮制后可提上述作用的强度,炮制前后比较具有
统计学意义,有力地证明了传统蒙医药的有效性和
科学性。
参考文献
[1] 罗布桑. 蒙药学[M]. 呼和浩特:内蒙古人民出版社,
2006:138.
[2] 德力格玛. 蒙药小白蒿的功效及使用方法[S]. 中国医
学,2013,12(3) :87
[3] 王青虎,乌仁苏布德,布和巴特尔,等. 蒙药小白蒿的历
史沿革与现代研究概述[J]. 中国现代应用药学,2010,
27(10) :897-900,915.
[4] 伊希巴拉珠尔.认药白晶药鉴[M].呼和浩特:内蒙古科
技出版社,1998:559
[5] 伊希巴拉珠尔.甘露四部[M].呼和浩特:内蒙古科技出
版社,1998:178
[6] 罗布桑. 蒙药炮制学[M]. 呼和浩特:内蒙古人民出版
社,1989:234.
[7] 张婉,谢坤,楼彩霞,等.蒙药阿给(冷蒿)炒炭前后无机
元素含量及溶出率的变化[J].中国药物与临床,2008,8
(11) :852-854.
[8] 张婉.蒙药阿给(小白蒿)炮制前后化学成分变化及止
血作用机制研究[D].北京:中央民族大学,2009.
[9] 李永辉,谭银丰,张俊清,等. 正交试验法优选咖啡渣中
脂肪酸的提取工艺[J]. 中国现代中药,2014,16(1) :
41-44.
[10]李清,刘姣,曹秀莲,等. 垂盆草不同提取物急性毒性实
验[J].中国现代中药,2010,12(11) :36-38.
[11]姜保平,许利嘉,王秋玲,等. 菊花的传统使用及化学成
分和药理活性研究进展[J]. 中国现代中药,2013,15
(6) :523-530.
(收稿日期 2015-02-06)
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