全 文 ：基金项目:内蒙古政府重大项目(编号:2013-006)
作者简介:其其日乐格(1991. 09—)，女，在读研究生，内蒙古医科大学蒙药学研究，研究方向:蒙药现代化研究，E-mail:601977642@ qq. com
通信作者:那生桑(1956. 01—)，男，博士，教授，调研员，研究方向:蒙药现代化研究，E-mail:nasang56@ sina. com
蒙药小白蒿与炒白蒿的质量标准研究
其其日乐格 萨茹拉 那生桑
(内蒙古医科大学，呼和浩特，010110;内蒙古国际蒙医医院，呼和浩特，010020;内蒙古医科大学，呼和浩特，010110)
摘要 目的:制订蒙药小白蒿饮片的质量标准草案。方法:用薄层鉴别法对小白蒿、炒白蒿含有的主要止血有效成分绿原
酸建立鉴别方法;照《中华人民共和国药典》(2010 年版一部)与检查项相关规定，对该二品种进行逐项检查;用 HPLC 测
定小白蒿、炒白蒿中绿原酸建立了定量分析方法。结果:质量标准鉴别中绿原酸薄层斑点清晰可辨;各检查项数据均符合
《中华人民共和国药典》要求。含量测定的色谱条件中色谱柱:GraceSmart ＲP18(250 mm × 4. 6 mm，5 μm);波长:327 mm;
流动相:乙腈 － 0. 4%磷酸溶液(12∶ 88);流速:1. 0 mL /min;柱温 25 ℃;色谱柱理论塔板数按绿原酸色谱峰面积计算不得
超过 3 000;与相邻峰的分离度(Ｒ ＞1. 5)，空白无干扰;线性范围为 2 ～ 12 g(Ｒ2 = 0. 9998);平均回收率为 105. 775%(ＲSD
= 2. 8%)。结论:质控方法可靠，灵敏度高，专属，稳定，准确，重现性好。
关键词 蒙药;炒白蒿;博层色谱鉴别;含量测定;高效液相色谱法
Study on Quality Standard of Xiaobaihao and Chaobaihao
Qiqirilege，Sarula，Nashengsang
(1 Inner Mongolia Medical University，Huhehaote 010110，China;2 Inner Mongolia international Mongolian Medicine
Hospital，Huhaote 010020，China;3 Inner Mongolia Medical University，Huhehaote 010110，China)
Abstract Objective:To draft the quality specification of Xiaobaihao slices． Methods:Chlorogenic acid，the main hemostatic
component in Xiaobaihao and Chaoxiaobaihao was identified by TLC identification method． According to the inspection correlation
stipulation provisioned in the Chinese Pharmacopoeia (2010 edition)，the Xiaobaihao and Chaoxiaobaihao were inspected item by
item and quantitative analysis method was established with the highly effective liquid phase for chlorogenic acid． Ｒesults:In the
quality specification，the chlorogenic acid spot in TLC was clear and easily distinguished and all test items conformed to the Chi-
nese Pharmacopoeia (2010 edition)． Chromatographic column in content determination was set as Grace Smart ＲP18 (250 mm ×
4． 6 mm 5 μm) ;Wave length was 327 nm;Flowing was at the second grade;nitrile was 0． 4% phosphoric acid solution (12∶
88) ;flow speed was 1． 0mL /min;and the column warm was set at 25 ℃ ． The theoretical plate number was less than 1000 according
to the chlorogenic acid computation． Compared with the neighboring peak degree of dissociation (Ｒ ＞1． 5) ，there was no obvious
disturbance． The linear scope was 2 ～ 12 μg(Ｒ2 = 0． 9998)，and the average returns-ratio was 105． 775% (ＲSD = 2． 8%)． Con-
clusion:The indictment method is reliable，stable and accurate with high sensitivity，specificity and replicability．
Key Words Mongolian medicine;Chaobaihao;TLC;Quality standard;HPLC
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标识码:A doi:10． 3969 / j． issn． 1673 － 7202． 2016． 04． 040
小白蒿是蒙医最常用药材之一。是菊科多年生
植物冷蒿(Artemisia frigida Willd)的地上部分，秋季
花盛开时采集，阴干［1］。味苦，性凉。主要止血，消
肿，消“奇哈”;用于各种出血，关节肿胀，肾热，月经
不调，疮痈等。其植物资源丰富，北半球寒带、亚热
带几乎有分布。蒙医用于消肿，消“奇哈”，或人工
药浴时处方入用小白蒿;而止血或诊疗血液病证处
方和制剂中主要用小白蒿炒制品—炒白蒿［2］。蒙医
临床一直以来用小白蒿、炒白蒿，但缺乏该二品质量
标准，无法控制其内在质量［3］。本文经实验研究采
取 TLC、HPLC等方法，为建立小白蒿和炒白蒿质量
标准提供了依据。
1 材料
1. 1 仪器 P230 型液相色谱仪(大连伊力特牌);
EC2000 型色谱站(大连伊力特牌);UV230 +型紫外
分光光度仪(大连伊力特牌);AB135-S 型电子分析
天平(德国);ＲE52CS-2 旋转蒸发器(上海亚荣生化
仪器厂)。
1. 2 试药 绿原酸对照品(批号:110753-200413):
由中国食品药品检定研究院提供;小白蒿药材:采自
呼和浩特大青山、赤峰市巴林右旗、赤峰市罕山、锡
盟阿巴嘎旗和鄂尔多斯市等 5 个产地 10 批样品。
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经内蒙古药检所鉴定为正品;炒白蒿:由本校炮制实
验中心自行炮制成品;甲醇、乙腈等色谱试剂:市售;
纯净水等。
2 方法
2. 1 药材性状 小白蒿为不规则段，多破碎。茎圆
柱形，长短不一，直径 0. 5 ～ 1 mm;表面灰绿色，具纵
棱线，密被灰白色茸毛;质脆，易折断，断面中部有
髓，白色或中空。叶互生，灰黄绿色，1 ～ 3 回羽状全
裂，小裂片条状披针形或矩圆形，密被灰白色茸毛。
气香特异，味微苦;炒白蒿形如小白蒿，表面呈棕黄
色，多破碎。气香，味苦。
2. 2 薄层鉴别 取小白蒿和炒白蒿粉末各 0. 5 g，
分别置具塞瓶中，各加稀盐酸 0. 05 mL，乙酸乙酯
7. 5 mL，超声(功率 150，频率 40 kHz)提取 20 min，
滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1 mL使溶解，作为 2 种
供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每 1
mL含 0. 1 mg的溶液，作为对照品溶液。按照《中华
人民共和国药典》(2010 年版一部附录 VIB)薄层色
谱法试验，吸取上述 3 种溶液各 6 L，分别点于同一
聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1
∶ 15∶ 1∶ 1∶ 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯
(365 nm)下检视［4-5］。供试品色谱中，在与对照品
色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见下
图 1。
图 1 小白蒿与炒白蒿薄层色谱
注:1 绿原酸;2 小白蒿;3 炒白蒿。
2. 3 水分 按照《中华人民共和国药典》(2010 年
版一部附录 IXH)法第一法(烘干法)测定样品中的
水分［4］，结果 5 个产地 10 批样品水分含量均不超过
5. 0%，放凉后样品重量差别不超过 5 mg，可以确定
为该品水平含量不超过 5. 0%。见表 1。
2. 4 总灰分 按照《中华人民共和国药典》(2010
年版一部附录ⅨK)总会分测定法测定样品中的总
灰分［4］，结果 5 个产地 10 批样品总灰分含量，均不
超过 6. 5%。见表 2。
表 1 小白蒿炮制样品中水分含量(珋x ± s，n = 2)
样品 样品量(g) 减少量(g) 重量差距(g)水分含量(%)
呼和浩特 2. 321 0. 109 0. 003 4. 7
巴林右旗 2. 457 0. 093 0. 004 4. 0
赤峰罕山 2. 270 0. 093 0. 003 4. 0
阿巴嘎旗 2. 426 0. 095 0. 004 4. 1
鄂尔多斯 2. 357 0. 097 0. 004 4. 2
表 2 小白蒿炮制样品总灰分含量
样品 样品重量(g) 减少量(g) 水分含量(%)
呼和浩特 3. 025 0. 165 5. 5
巴林右旗 3. 114 0. 186 6. 0
赤峰罕山 3. 063 0. 166 5. 4
阿巴嘎旗 3. 125 0. 173 5. 7
鄂尔多斯 3. 058 0. 181 5. 9
2. 5 含量测定 按照《中华人民共和国药典》
(2010 年版一部)高效液相色谱法(附录 VID)测定
样品中止血主要成分绿原酸的含量［6-12］。
2. 5. 1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱:
GraceSmart ＲP18(250 mm × 4. 6 mm，5 μm);波长:
327 nm;流动相:乙腈:0. 4%磷酸溶液(12 ∶ 88);流
速:1. 0 mL /min;柱温:25 ℃;理论塔板数按绿原酸
峰计算不得低于 3 000;与相邻峰的分离度(Ｒ ＞
1. 5)，空白无干扰;线性范围为 2 ～ 12 μg(Ｒ2 =
0. 999 8)，平均回收率为 105. 775%(ＲSD =2. 8%)。
2. 5. 2 对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量，
精密称定，加 50%色谱甲醇制成 0. 838 mg /mL 的溶
液，即得。
2. 5. 3 供试品溶液的制备 取本品粗粉 0. 5 g，精
密称定，置具塞瓶中，加 50%色谱甲醇 50 mL，称重，
加塞过夜，超声提取(功率 150 W，40 kHz)40 min，放
凉，补充溶液失重，摇匀，离心(3 000 r /min)15 min，
倾取上清溶液，准确量取 2 mL，置 100 mL 具塞锥形
瓶中，加 50%色谱甲醇稀释至刻度，摇匀即得。
2. 5. 4 线性关系考察 精密吸取绿原酸对照品溶
液 1 mL、2 mL、3 mL、mL、5 mL、6 mL 分别置 10 mL
量瓶，加上述甲醇至刻度，摇匀。从中各取 10 μL注
入液相色谱仪，测定其峰面积积分值。以进样量
(μg)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准
曲线并计算得回归方程为:Y = 772. 59X + 92. 768，
Ｒ2 = 0. 999 8。结果表明绿原酸对照品在 0. 838 ～
·917·世界中医药 2016 年 4 月第 11 卷第 4 期
5. 028 μg范围内峰面积与进样量呈良好的线性关
系，结果见下图 2 和表 3。
表 3 绿原酸线性关系考察
样品 浓度(mg /mL) 峰面积(A)
1 0. 922 789. 51
2 1. 844 1513. 93
3 2. 766 2231. 63
4 3. 688 2949. 41
5 4. 610 3681. 06
6 5. 532 4340. 98
图 2 绿原酸溶液线性关系
2. 5. 5 精密度试验 精密吸取绿原酸对照品溶液
10 μL，重复进样 5 次，测定吸收峰结果精密度良好，
峰面积 ＲSD为 0. 88%，结果见表 4。
表 4 精密度试验结果
序号 保留时间 tr 峰面积 A 平均(A) s ＲSD(%)
1 9. 10 1053. 77
2 9. 09 1057. 28
3 9. 11 1060. 33 1056. 762 9. 395 0. 88
4 9. 07 1043. 36
5 9. 00 1069. 07
2. 5. 6 重复性试验 取同一批炒白蒿，同上方法平
行制备供试品溶液 5 份，按上述色谱条件进行测定，
样品中绿原酸的平均含量为 0. 0753%，峰面积 ＲSD
为 2. 5%，证明本法重复性良好，结果见表 5。
表 5 重复性试验结果
序号 峰面积 A 保留时间 tr含量(mg /g) 均值(珋x ± s) ＲSD(%)
1 1179. 89 9. 00 0. 07894
2 1222. 19 9. 05 0. 06987
3 1396. 03 9. 09 0. 08063 . 075257 ± 0. 0019 2. 5
4 1352. 85 9. 01 0. 07751
5 1333. 29 8. 94 0. 06932
2. 5. 7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液 10 μL，
每隔 2 h 进样 1 次，测得 5 次的峰面积 ＲSD 为
2. 30%，表明绿原酸在 8 h内稳定，结果见表 6。
2. 5. 8 加样回收率试验 精密称取已知含量的炒
白蒿粗粉约 0. 5 g(6 份)，分别加入绿原酸对照品适
量，同上制备供试品溶液并依法测定，平均回收率为
105. 78，峰面积 ＲSD为 2. 8%，结果见表 7。
表 6 稳定性试验结果
时间
峰面积
A
保留时间
tr
含量
(mg /g) 平均
s
ＲSD
(%)
0 1276. 24 9. 67 0. 075444
2 1288. 41 9. 12 0. 076203
4 1291. 55 9. 10 0. 073398 0. 074031 0. 001734 2. 3
6 1280. 83 9. 14 0. 073087
8 1204. 65 9. 09 0. 072022
表 7 加样回收率试验结果
序号
样品量
(g)
供试品含量
(mg /g)
对照品加入
量(mg)
测得量
(mg /g)
回收率
(%)
平均
(%)
ＲSD
(%)
1 1. 023 0. 07698 4. 456021 4. 47329 98. 66 105. 78 2. 80
2 1. 008 0. 07585 4. 359011 4. 46363 100. 66
3 1. 008 0. 07585 4. 503344 4. 39906 96. 00
4 1. 026 0. 07721 4. 275727 4. 78051 110. 00
5 1. 017 0. 07653 4. 174261 4. 97419 117. 33
6 1. 009 0. 07593 4. 228973 4. 81238 112. 00
图 3 绿原酸 HPLC
图 4 炒白蒿样品 HPLC
表 8 含量测定结果
样品
样品重量
(g)
绿原酸含量
(mg /g)
平均含量
(mg /g)
s
ＲSD
(%)
呼和浩特样品 1. 036 0. 07718 0. 0637 0. 00098 1. 5
1. 030 0. 07430
巴林右旗样品 1. 027 0. 05740
1. 025 0. 05678
汉山样品 1. 031 0. 05880
1. 032 0. 05749
阿巴嘎旗样品 1. 028 0. 07475
1. 026 0. 07272
鄂尔多斯样品 1. 033 0. 05145
1. 036 0. 05589
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2. 5. 9 样品含量测定 取 5 个产地小白蒿炮制品
(炒白蒿)各 2 份，同上制备供试品溶液，精密吸取
10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定。结
果样 品 中 绿 原 酸 的 平 均 含 量 为 0. 064 mg /g
(0. 0064%)，ＲSD为 1. 5%，结果见表 8 和图 3、4。
3 讨论
小白蒿虽是常用蒙药材，但一直没有质量标准。
借此小白蒿饮片标准的建立的机会，可完善了其药
材质量标准。以止血有效物质绿原酸为目标成分，
建立了小白蒿、炒白蒿的薄层鉴别方法和高效液相
色谱法含量测定方法。该法简单易行，分离效果理
想，灵敏度高，专属。经精密度等方法学考察证明稳
定可靠，重现性好。可作为小白蒿药材、小白蒿饮片
和炒白蒿的质量标准。绿原酸作为炒白蒿的含量测
定指标具有较强的专属性。
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