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青苹果竹芋组培快繁体系建立的探讨



全 文 :中国科技信息 2 0」4 年第 」2 斯 H N N N D H N L N F R T C I A S C I E CE A EC o o GY I o M灯旧 N Jn u. Z o 14 基础及前沿
唐玲 (1 984 一 )女 湖南衡阳市人 大学毕业 广 州市绿化公司白云苗圃 研究方
向 :花卉繁育 。
唐 玲
鬃 本文对 青苹果竹芋 (C a !a七h e a00七。n d if o !ia cV . F a s c ia七 a )组培快繁体 系的建立 , 进行 了探讨 。 试验结果表明 : 初代诱导 无 菌芽萌发的培养基为 M+s 6一 B八 ( 6 一 节基腺漂吟 ) 5 . Omg / L ( 单位下 同 )+ N八八 (茶乙酸 ) 0 . ;5 丛生芽继代增殖培养基为 M S + 6一 B八2 . 5 +盯 (激动素 ) 0 . 5+ N八八0 . 2 ;5 试管苗生根诱导培养基为 1 / Z M S + N八八0 . 2 5 ,
其效果为佳 。
D o l : 10
.
3 9 6 9 / i
.
is s n
.
10 0 1一 8 9 72
.
20 14
.
12
.
0 12
青苹果竹芋组培快繁体系建立的探讨
概述
青苹果竹芋 ( e a la 仇 e a r o t un d ifo il a e v . F a s e ia t a )
为竹芋科 、 肖竹芋属 , 为多年生常绿草本观叶花卉 ; 因其
叶色清翠 、 叶片形状圆润恰似苹果而得名 ; 原产美洲的热
带地区 , 生长在热带雨林中 ; 后来 , 欧洲人经多年试验 ,
由圆叶竹芋筛选 、 培育而获得 。
青苹果竹芋宜温暖 、 湿润 、 半萌 , 其抗寒性能也较差 ;
适宜生长温为 : 18 一 30 ℃ 。 因青苹果竹芋不耐高温 , 且忌
强光 ; 当其生长环境温度高于 2 5℃时 , 则要搭遮阳网 , 用
喷水等方式来降温 , 使空气相对湿度保持在 8 5% 一 9 0 ;0/
当水分不足时 , 易导致出现叶缘枯焦 、 生长不良的现象 ;
而阳光过强 , 也会使叶片褪色 , 重则使叶片灼伤 , 若太阳
光照太弱 , 也会影响其叶绿素的形成及光合作用 , 而失去
固有的鲜活美感 , 致使其观赏性降低 ; 在冬季 , 要将其移
人棚内的阳光充足处 ; 使其创造一个凉爽通风 、 湿润半荫
的平和环境 。 宜栽培于疏松肥沃 、 排水良好 、 富含有机质
的泥炭土或酸性腐叶土中 。
青苹果竹芋叶色清新宜人 , 适合做中型盆栽 , 装饰居
室 , 时尚自然 , 极具特色 , 是很受人们喜爱的室内观叶花
卉植物 , 市场需求量大 。 一般采用分株繁殖 , 由于分秦少 ,
繁殖速度慢 , 故难以满足其市场的需求 。 目前 , 众多学者
对青苹果竹芋进行了卓有成效的组织培养及应用技术的研
究 , 以满足市场的需求 。 为快速 、 大批量生产 , 本文作者
在参考前人的经验和成果的基础上 , 自 2 0 0 5 年以来 , 以
青苹果竹芋带基部茎段为外植体 , 对其组培快繁技术进行
了探讨 , 并获得成功 。 现将其介绍如下 。
材料及方法
试验材料
由广州市绿化公 司 白云苗 圃所栽培的青苹果竹芋
( C a la 仇 e a r o tun d ifo il a e v . F a s e ia t a ) , 取其带基部的
茎段作为外植体 。
试验方法
初代无菌苗的建立
选择一年生的青苹果竹芋植株 , 除去叶片 , 经 清
洗干净 , 再 自来水冲洗 10 m in 左右 , 于超静工作台上
用 10% N a C IO 溶 液 浸 泡 10 111卫 l , 7 5 % C H 3 C H ZO H 浸
泡 3 05 , 无菌水冲洗 3 一 4 次 , 再用 0 . 1% H gc U 溶液消毒
10 m in
, 无菌水漂洗 3一 4 次后 ; 将其沿基部切割成 1 . 0
cnI 长的 茎段 , 接 种到 M S + 6 一 B A ( .2 0 、 .2 5 、 .3 0 、 .3 匀
+ N A A ( 0
.
0

.0 2

0
.
5

1
.
0) + .0 2% 活性炭 + 3% 蔗糖的初
代无菌芽的诱导培养基中 ; 每种培养基接种 90 管 , 每管
接种 1 段 ; 置于 2 5 士 1℃下 , 暗培养 3 d , 然后再给予光照 。
继代增殖培养
将初代所得的青苹果竹芋无菌丛生苗 , 沿其基部切割
成单个芽 , 转接到继代培养基中 , 进行芽的继代增殖培养 。
其继代基本培养基采用 M 3 生长调节物质为 6 一 B A ( 1 . 5 、
2
.
0

2
.
5

3
.
0 ) + K T ( 0
.
0

0
.
10

0
.
5 0

1
.
0 0 ) + N A A ( 0
.
0 0

0
.
15

0
.
2 5

0
.
35 )
。 每个处理培养基接种 30 瓶 , 每瓶接种 3 小株 ,
继代 2 代后统计其芽的增殖系数 (瓶内萌发的总芽数 / 瓶
内原接种的芽数 ) 和每个瓶内的有效苗 (长出 3 片叶以上 ,
叶绿平展 , 生长正常的小植株 ) 。
生根诱导培养
当继代苗长至 2 .又m 以上 、 具有 4 片左右叶时 , 沿丛
生芽基部切下并分别转接到 l/ ZM S + N A A ( 0 . 0 、 0 .沥 、
.0 2 5

0
.刃 ) 生根诱导培养基中; 再经培养 2元后统计其
生根率 (生根的总株数 / 接种的总芽数 ) 。
以上培养基均添加 0 . 7% 琼脂粉 ; 蔗糖 : 3 0 ;0/ p H 值 :
5
.
6 一 5
.
8 ; 培养温度为 2 5 士 1℃ , 光照强度 Z 0 00 h 左右 ,
光照 12 h 左右 / d 。
一 49一
基础及前沿 中国科技信息 2 0」 4年第 」 2斯 C I A C I C A C o o GY I o S H N N N D T H N L N F R E E EM灯旧 N Ju n .o Z l斗
表 1 不同培养基质对青苹果竹芋茎段初代培养的影响
培养基 (浓度m 虾 ) L萌发出芽的外植体 芽萌发率 (% ) 萌发芽数 (个 ) 萌发芽系数 生长势
M S +6一 A O B Z +NA A O
.
O 2 6 2 8
.
9 85 O 1 9 2芽绿 叶平展
M S +6一 A B 2
.
5 +NA A O
.
7 2 6 l 6
,
7 8 1 48 2湃3 芽绿 叶平展
M S + 6 一 B A 3
.
O+ N A A 0
.
5 6 5 72 2 2 2 64 4
.
0 6 芽绿 叶平展
M S + 6 一 B A 3 5 + N A A 1 0 6 8 75
.
5 6 3 48 5
.
12 芽紧密结块淡黄
注 : 培养基均加 。 . 2% 活性炭和 乙% 蔗糖 ; 接种外植体样本数均为 90 。
结果及分析
初代无菌苗的建立
建立初代无菌苗的 目的 , 就是获得青苹果竹芋的无菌
芽 , 为继代增殖培养作准备 。 当其带基部的茎段接种到初
代培养基中 , 培养 2 5 士 Z d , 便萌发出侧芽来 。
由表 1 不难看出 , 其出芽率和出芽系数都与培养基
中的 6 一 B A 、 N A A 浓度有关 , 当 6一 B A 浓度超过 3 . Om g/
L 时 , 萌发出的芽叶不展开 , 当 6 一 B A 浓度达 3 . sm g/ L 时 ,
其出芽率 、 出芽系数虽高 , 但芽结块而呈淡黄色 , 形态不
正常 。 试验结果表明 , M S + 6一 B A 3 . O+ N A A O . 5 是青苹果
竹芋初代培养较为理想的初代无菌苗诱导培养基 。
继代增殖培养
将初代培养获得的青苹果竹芋无菌单芽 , 转接到增殖
培养基中培养 , 以进一步获得大量的丛生芽 。 经试验结
果表明 , 增殖培养基中添加三种生长调节物质 ( 6 一 B A ,
K T
,
N A A )
, 对丛生芽的增殖和芽增殖系数的提高都有
明显的效果 , 只添加 6 一 B A 或添加 6 一 B A 、 K T 两种 , 不
加 N A A , 芽的增殖系数和有效苗都受到明显的影响 ; 而
6 一 B A 与 K T 浓度偏高 , 芽增殖系数虽有提高 , 但有效苗
数有所降低 (见表 2 ) ; 可见继代增殖培养较为理想的培
养基为 : M S + 6 一 B A 2 . 5 + K T O. 5 + N A A .0 2 5 。
表 2 不同培养基质对青苹果竹芋丛生芽诱导的影响
.0 sm g/ L 时 , 生根率虽较高 , 但试管苗基部有淡黄色愈
伤组织出现 , 进而影响苗的正常生长 。 其试验结果表明 :
1/ ZM S
+ N A A o
.
2 5 生根培养基 , 其生根率高 , 每株平均根
数也较多 。
表 3 不同培养基质对青苹果竹芋试管苗生根的影响
培养基 (浓度 m虾 )L 生根株数 生根率 (% ) 平均根数 (条 )
l / ZM S + N A A O力O 5 6 6 2
.
2 2 2
.
6 0
l / ZM S + N A A O力 5 7 2 8 0力O 3 2 1
l / ZM S + N A A O2 5 9 O 100力O 4刀O
l / ZM S + N A A O j O 9 O 100力O 5 80
注 : 接种试管苗数均为 90
当青苹果竹芋有 4 条根 , 根长 Z cln 以上 , 其苗高 又二
左右时 , 即可出瓶移栽 。 移栽前经经常规炼苗 , 再将试管
苗轻轻取出并清净根部的培养基 , 经 10 0 倍多菌灭菌后
栽植于混合基质 (营养泥炭 :2 珍珠岩 :l 河沙 l) 中; 用
80 一 10 0 倍多菌灵喷雾灭菌 ; 在温度 2 5 一 30 ℃ , 相对温
度 85% 左右 , 遮阳率 7 5% 的环境条件培养 。 当栽培的组
培苗出新叶后 , 再开始炼苗 , 然后进行常规管理 。 当小苗
长出 3一 4 片新叶后 , 即可进行上盆或定植栽培 。
小结
培养基 〔浓度 m留 )L 丛生芽数〔个 ) 增殖系数 有效苗数 有效苗率 / %
卜侣+ 6一 B A I . 5 + K T O. O+ N A A O . OO 168 1 . 86 13 5 80 . 36
卜侣+ 6一 B A Z . O+ K T O. 1+ N A A O . 15 2 74 3刀 7 2 4 7 90 2 5
卜侣+ 6一 B A 2 . 5 + K T O. 5 + N A A O . 25 4 5 6 5刀 6 4 0 3 88 . 13
卜侣+ 6一 B A 3 . O+ K T I . O+ N A A O . 35 5 42 6 . 02 35 0 64 4 7
注 : 接种茅数均为 90
生根诱导培养与移栽
将青苹果竹芋有效芽扦插到生根培养基中 , 进行生根
培养 , 经 14 d 培养便开始生根 , 培养 2 5 d 左右后 , 芽基
部生根数可达 2 一 6 条 ; 由表 3 可看出 : 生根培养基中
无 N A A 也可生根 , 但生根率较低 ; 当 N A A 体积质量达
青苹果竹芋叶形浑圆 、 叶质丰腆 、 叶色青翠 , 并排列
有整齐的条纹 , 极具观赏价值 , 兼之喜萌 , 适于室内作
盆栽 。 常点缀于商场 、 宾馆 、 会议室等公共场所和用于居
家的客厅 、 书房 、 卧室等 ; 美化环境 , 净化空气 。 以青苹
果竹芋带基部茎段为外植体进行组培 , 不仅繁殖系数大 ,
经济效益亦高 , 是青苹果竹芋生产育苗快繁的较理想途
径 。 其初代无菌苗建立 , 较为理想的芽诱导培养基是 :
M S
+ 6 一 B A 3 . O+ N A A O .况 芽的继代增殖 , 以 M S + 6 一 B A 2 . 5
+ K T O
.
5 + N A A 0
.
2 5 培养基为佳 ; 而 1/ ZM S + N A A O . 2 5 是
诱导生根较为适宜的培养基 。 要大规模进行青苹果竹芋工
厂化生产育苗 , 有待进一步研究与探讨 。