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紫萼玉簪快繁体系建立和移栽初步研究



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收稿日期: 2013-09-18
基金项目: 安徽省教育厅青年教师一般项目(2008jq1126)资助。
作者简介: 李 玲,讲师。E-mail:li97ling@163.com
安徽农业大学学报, 2014, 41(1): 155-159
Journal of Anhui Agricultural University
网络出版时间:2013-12-17 16:40:19
[URL] http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1162.S.20131217.1640.016.html
紫萼玉簪快繁体系建立和移栽初步研究

李 玲,杨 杰,袁华玲,朱小茜
(合肥师范学院生命科学系,合肥 230601)

摘 要:以安徽黄山产野生紫萼玉簪叶片作为外植体,对其快繁体系的建立和幼苗移栽技术进行初步研究。结
果表明,利于愈伤组织诱导的最佳取材季节为春季,诱导愈伤组织形成和不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA2.0+
NAA0.3;适宜的不定芽增殖培养基为 MS+6-BA3.0+NAA0.1;利于生根的培养基为 1/2MS+NAA0.3。最佳的移栽
基质为珍珠岩+腐殖土(1:3),移栽成活率最高,幼苗长势好,明显优于其他 3个处理。
关键词:紫萼玉簪;快繁体系建立;移栽
中图分类号:S682.265 文献标识码:A 文章编号:1672352X (2014)01015505

Preliminary study on establishing rapid propagation system and transplant of Hosta ventricosa

LI Ling, YANG Jie, YUAN Hualing, ZHU Xiaoxi
(Department of Life Sciences, Hefei Normal University, Hefei 230601)

Abstract: The wild Hosta ventricosa leaves which collected from Huangshan Mountain in Anhui Province
were used as explants. The establishment of rapid propagation system and seedlings transplant was carried out in
the study. The results indicated that the best season for explant selection was spring; the best medium for the cal-
lus induction and the adventitious buds differentiation was MS+6-BA2.0+NAA0.3; the suitable medium for the
propagation of adventitious buds was MS+6-BA3.0+NAA0.1; the best medium for rooting was 1/2 MS+NAA0.3.
The transplanting survival rate was highest, and the tissue culture seedlings grew well when the transplant me-
dium was composed of pearlite and humus (3:1), in which the survival rate and growth vigour of the seedlings
were remarkably better than those of the other three treatments.
Key words: Hosta ventricosa; establishment of rapid propagation system; transplant

紫萼玉簪(Hosta ventricosa)是百合科玉簪属多
年生草本植物,又称紫萼、紫玉簪,为我国原产玉
簪属 4个品种之一。主要分布在我国的华东、西南
等地。安徽省主要分布在祁门、石台、休宁、歙县、
黄山等地[1]。由于其花、叶均可欣赏,具有较高的
观赏价值及耐阴性强等特点,逐渐成为优秀的林下
地被植物[2]。此外,紫萼玉簪还具有一定的食用和
药用价值[3]。
目前紫萼玉簪在我省原产地的野生种较少,而
且紫萼玉簪的童龄期长,从播种到开花需 3年以上
时间,且形成种子很少,一般不用种子繁殖[4]。采
用组织培养技术扩大繁殖是紫萼玉簪商业化大量生
产的一种有效途径之一。现在对紫萼玉簪组织培养
研究报道很少,王春婷等[4]、张红娣等[5]分别以未
成熟胚芽和根为外植体对紫萼玉簪的组织培养和快
速繁殖进行了研究,以紫萼玉簪叶片作为外植体的
研究在国内外尚未见报道。由于叶片取材更广更容
易,因此,本研究以黄山产野生紫萼玉簪叶片为外
植体,对外植体取材季节、适合愈伤组织诱导、不
定芽分化增殖、生根的培养基和移栽基质进行研究,
筛选出外植体最佳取材季节,适宜诱导愈伤组织、
不定芽分化增殖及生根的培养基和最适的移栽基
质,旨在为紫萼玉簪快繁体系建立和工厂化育苗提
供理论依据和技术方法。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料为安徽省黄山产野生紫萼玉簪(Hosta
DOI:10.13610/j.cnki.1672-352x.2014.01.017
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ventricosa)。分别于春季 4月份和秋季 10月份选取
生长健壮、无病虫害的植株上的幼叶作为外植体。
1.2 试验方法
1.2.1 材料的处理 取幼叶于自来水下冲洗干净,
在超净工作台上用 0.1% 升汞加 2 滴吐温浸泡 8
min,用无菌水漂洗 5~6次,用滤纸吸干,剪成 1 cm2
大小备用。
1.2.2 培养基 初代和继代选用 MS 为基本培养
基,添加不同浓度的 6-BA和 NAA,生根基本培养
基分别选择MS培养基和 1/2 MS培养基,添加不同
浓度 NAA,每种培养基中植物生长调节物质的浓度
为 mg·L-1,均添加蔗糖 30 g·L-1,琼脂 6.5 g·L-1,pH
调整为 5.8,配成不同初代、继代增殖和生根培养基。
1.2.3 培养条件 培养温度为(25±1)℃,光照强
度为 20~25 µmol·m-2·s-1,光照时间 12 h·d-1。
1.2.4 炼苗与移栽 当生根培养中的幼苗长至 4~5
cm,根长达 3~4 cm时进行驯化移栽。出瓶前,将
培养瓶从培养箱中取出放入室温下适应 2 d,将瓶盖
松开 1 d,最后将瓶盖打开 1 d,进行炼苗。炼苗后
将苗从培养瓶中取出,洗净根部培养基,移栽到珍
珠岩、珍珠岩+腐殖土、细沙、细沙+腐殖土等各种
基质中(表 5),栽培容器选用营养钵,各基质采用
高压灭菌法进行消毒,栽后用塑料薄膜覆盖,保持
一定的温度和湿度,一周后移去薄膜,且前 3周每
周用 1000倍液的多菌灵进行消毒。
1.2.5 统计和计算方法 初代培养30 d统计愈伤组
织块数,45 d统计不定芽分化数,继代增殖 30 d统
计新增芽数,生根培养 30 d统计生根情况,移栽 15
d后统计其成活率,30 d后记录其生长状况。
愈伤诱导率%=形成愈伤组织块数/接种总块数×100
芽分化率%=发生芽分化块数/愈伤组织分化块
数×100
每块平均分化芽数=芽分化总数/愈伤组织块数
芽增殖倍数=新增芽数/接种芽数
生根率%=生根数/接种数×100
移栽成活率%=移栽成活株数/移栽株数×100
2 结果与分析
2.1 取材季节对紫萼玉簪愈伤组织诱导的影响
试验分别于春季和秋季采取紫萼玉簪的幼叶作
为外植体进行接种(表 1)。


表 1 不同取材季节对紫萼玉簪愈伤组织诱导的影响
Table 1 Effects of different seasons on the callus induction of Hosta ventricosa
取材季节
Sampling
season
接种块数/块
Inoculation
number
形成愈伤块数/块
Calli formation
number
愈伤组织诱导率/%
Induction ratio
of calli
生长状况
Growth stituation
春季 Spring 30 23±2.65 76.7±8.82 外植体边缘膨大,形成大量绿色略透明愈伤组织
秋季 Autumn 30 2±1.00 6.7±3.3 外植体边缘略增厚,有少许颗粒状愈伤组织

表 2 不同培养基对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响
Table 2 Effects of different mediums on callus induction and differentiation of adventitious buds
激素配比 编号
6-BA NAA
接种块
数/块
形成愈伤组
织块数/块
愈伤组织
诱导率/% 芽分化率/%
平均每块分
化芽数/个 生长状况
1 1.0 0.1 30 0 0 0 0 外植体边缘褐化,无愈伤组织形成
2 1.0 0.3 30 11±1.00 36.7±3.33 27.3±7.96 2.8±0.12 形成愈伤,有少量不定芽形成
3 1.0 0.5 30 13±1.73 53.7±5.77 0 0 形成愈伤,但无不定芽形成
4 2.0 0.1 30 0 0 0 0 外植体边缘略有增厚
5 2.0 0.3 30 23±2.65 76.7±8.82 95.7±4.00 6.8±0.30 形成绿色略透明愈伤组织,不定芽分化多,且芽饱满
6 2.0 0.5 30 20±1.00 66.7±3.33 45±1.00 3.6±0.11 形成白色透明愈伤,但不定芽分化少
培养基编号Code for medium;激素配比Hormone combination;接种块数 Inoculation number;形成愈伤块数Calli formation
number;愈伤组织诱导率 Induction ratio of calli;芽分化率 Differentiation of adventitious buds;平均每块分化芽数 Average
number of adventitious bud differentiation;生长状况 Growth situation.

表 1结果表明,春季选取的外植体材料形成的
愈伤组织多,质量好,诱导率高,达 76.4%;秋季
选取的外植体材料形成的愈伤组织少,质量差,诱
导率低,仅为 6.4%。且在培养过程中,于春季取材
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接种的叶片即使未形成愈伤组织,叶片仍保持绿色,
而于秋季取材接种的未形成愈伤组织叶片,均黄化、
衰老、死亡。这主要原因可能是紫萼玉簪为多年生
落叶宿根花卉,春季属于其旺盛生长阶段,体内积
累大量促进生长的内源激素,到了秋季虽呈幼叶,
但受整株影响,植株体内营养物质下降,促进生长
的激素下降,衰老激素含量增加,影响其分化。



图 1 紫萼玉簪愈伤组织的诱导和不定芽的分化
Figure 1 Callus induction and adventitious buds differentiation
of Hosta ventricosa

2.2 不同培养基对愈伤组织诱导及不定芽分化的
影响
由表 2可以看出,不同激素配比的培养基对诱
导紫萼玉簪愈伤组织和不定芽分化的影响不同,培
养基 1号与 4号均无愈伤组织和芽的分化,培养基
3号有愈伤组织的形成但无不定芽的分化,培养基 5
号愈伤组织诱导率与不定芽分化率最高,分别为
76.7%和 95.7%,且其平均每块分化的不定芽数最
多,为 6.8,不定芽生长状况最好(图 1)。培养基 6
号,愈伤组织诱导率虽较高,但不定芽分化率较低。
培养基 2号有愈伤组织和不定芽的分化,但其愈伤
诱导率和不定芽分化率均较低。综合分析表明,以
紫萼玉簪幼叶为外植体,诱导愈伤组织诱导和不定
芽分化最佳培养基为 5 号培养基 MS+6-BA2.0+
NAA0.3。
2.3 不同培养基对紫萼玉簪不定芽增殖的影响
将不定芽切分接种到不同的增殖培养基上(每
瓶接 1个芽),30 d后观察记录不定芽的增殖和生长
情况。结果表明(表 3),不同培养基上不定芽的生
长与增殖数存在差异,培养基 2中不定芽增殖倍数
最高,增殖倍数为 5.2,且不定芽生长最好(图 2)。
由表 3还可以看出,6-BA在一定浓度范围内,随其
浓度的增加芽的增殖数增加,但当 6-BA 浓度过高
时,抑制芽的形成。同时当 6-BA浓度一定时,NAA
浓度也影响其分化。对于紫萼玉簪叶片,当 NAA
浓度为 0.1mg·L-1时有利于不定芽的形成,当 NAA
浓度为 0.3 mg·L-1时,不利于芽的形成,在基部形
成愈伤组织。因此,适于紫萼玉簪继代培养不定芽
增殖的培养基为2号MS+6-BA3.0+NAA0.1培养基。

表 3 不同培养基对不定芽增殖的影响
Table 3 Effects of different mediums on propagation of adventitious buds
激素配比
Hormone combination编号
No. 6-BA NAA
接种不定芽数/个
Inoculated adventitions
bud number
培养 30 d后芽数/个
Bud number
after 30 days
增殖倍数/倍
Proliferation rate
不定芽生长状况
Growth situation of
adventitions bud
1 2.0 0.1 30 99±4.36 3.3±0.15 芽较饱满,绿色
2 3.0 0.1 30 156±6.08 5.2±0.20 芽饱满、深绿色
3 4.0 0.1 30 87±4.00 2.9±0.13 芽细弱、黄绿色
4 2.0 0.3 30 51±3.60 1.7±0.12 芽细弱、黄绿色
5 3.0 0.3 30 72±4.58 2.4±0.15 芽较饱满,绿色
6 4.0 0.3 30 48±2.65 1.6±0.09 芽细弱、黄绿色



图 2 紫萼玉簪不定芽的增殖
Figure 2 Propagation of adventitious buds of Hosta ventricosa
2.4 不同培养基对紫萼玉簪生根的影响
选择生长健壮的紫萼玉簪组培苗,切取长 2~3
cm 高小苗转接入不同生根培养基,每瓶接 1 株。
结果表明(表 4),在同等 NAA浓度下,基本培养
基为MS的培养基生根率低,且植株长势相对较弱,
在 1/2 MS培养基中生根率高,植株长势相对较好。
因此紫萼玉簪的生根基本培养基选择 1/2 MS为佳。
由表 4 还可以看出,不同 NAA 浓度对紫萼玉簪生
根影响差异显著。NAA浓度低时,诱导生根率低,
根生长不好,NAA浓度过高时,茎基部形成愈伤组
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织,不利于根的分化和生长,当 NAA 浓度为 0. 3
mg·L-1时,紫萼玉簪组培苗生根率最高,根系多而
粗壮,且植株长势健壮(图 3)。综合以上分析,诱
导紫萼玉簪生根的最佳培养基为 6 号培养基 1/2
MS+NAA0.3。

表 4 不同培养基对紫萼玉簪生根的影响
Table 4 Effects of different mediums on rooting of Hosta ventricosa
编号
No.
培养基配方
Medium component NAA
接种株数/株
Inoculation plant
生根株数/株
Rooting plant
生根率/%
Rooting rate
生长状况
Growth stituation
1 MS 0.1 30 0 0 茎基部无变化,植株形态正常
2 MS 0.3 30 8±2.00 26.7±6.67 根少而细,植株形态正常
3 MS 0.5 30 2±1.00 6.7±3.33 根少而细,植株叶色黄、叶片小
4 MS 0.7 30 0 0 茎基部膨大,无根,植株叶色黄、叶片小
5 1/2 MS 0.1 30 5±1.00 16.7±3.33 茎基部膨大,根少,植株形态正常
6 1/2 MS 0.3 30 30±0.00 100±0.00 根多而粗壮,植株叶色浓绿
7 1/2 MS 0.5 30 12±2.65 40±8.81 根多而细,植株叶绿色
8 1/2 MS 0.7 30 0 0 茎基部有大量愈伤组织,无根,植株叶色黄



图 3 紫萼玉簪组培苗生根情况
Figure 3 Rooting situation of tissue seedling of Hosta ventricosa
2.5 紫萼玉簪的炼苗与移栽
由表 5可以看出,移栽基质对紫萼玉簪组培苗
移栽成活率和生长状况有较大的影响。用珍珠岩+
腐殖土(1:3)作为紫萼玉簪的移栽基质成活率最高,
达 94%,且叶色浓绿,苗生长旺盛(图 4),明显优
于另外 3种配方的基质。以珍珠岩为基质成活率相
对也较高,达 84%,但苗长势一般,新生叶少,根
毛少,以细沙+腐殖土(1:3)为基质虽然苗长势良
好,新生叶较多,根粗多根毛,但其成活率低。而
以细沙作为移栽基质成活率最低,且苗长势差,叶
黄绿色,根细弱,苗瘦,表明细沙不适宜作为紫萼
玉簪的移栽基质。比较起来,紫萼玉簪组培苗适宜
的移栽基质为珍珠岩+腐殖土(1:3)。

表 5 不同基质对紫萼玉簪组培苗移栽的影响
Table 5 Effects of different transplantmediums on tissue culture seedling transplanting of Hosta ventricosa
栽培基质
Culture medium
移栽株数/株
Transplanting plant
成活株数/株
Survival plant
成活率/%
Survival rate
植株生长状况
Plant growth situation
珍珠岩 Perlite 50 42±2.00 84±4.00 叶绿色,新生叶 1片,根较粗,根毛少
细沙 Fine sand 50 26±1.73 52±3.46 叶黄绿色,根细弱,无新生叶,苗瘦弱
珍珠岩+腐殖土(1:3)
Perlite + humus
50 47±2.00 94±4.00 叶浓绿色,新生叶 3片,根粗多根毛
细沙+腐殖土(1:3)
Fine sand + humus
50 34±2.65 68±5.29 叶绿色,新生叶 2片,根较粗多根毛

3 小结与讨论
本试验研究表明以紫萼玉簪叶片作为外植体进
行组织培养,叶片取材季节影响其愈伤组织的诱导
和生长状况,研究表明取材季节以春季为佳。而陈
必胜等[6]以玉簪基部幼芽为外植体进行组织培养研
究表明冬芽比春芽效果好。这说明以不同外植体进
行组织培养取材的最佳时间存在差异。
诱导紫萼玉簪叶片愈伤组织的形成和不定芽分
化的最佳培养基为 MS+6-BA2.0+NAA0.3,愈伤组
织和不定芽分化多,且芽生长健壮饱满。不定芽增
殖的最适培养基为MS+6-BA3.0+NAA0.1,培养 30 d
41卷 1期 李 玲等: 紫萼玉簪快繁体系建立和移栽初步研究 159


后增殖倍数最高为 5.2。这说明在MS培养基上加入
不同比例的 6-BA和 NAA对愈伤组织的诱导、不定
芽分化和增殖具有促进作用。这与周青[7]、顾德峰[8]
等研究一致。主要原因是 NAA 可以诱导受伤的组
织表面一至数层细胞恢复分裂能力,形成愈伤组织,
与一定量的 6-BA 共同可以诱导不定芽的分化、侧
芽萌发与生长。



图 4 紫萼玉簪组培苗移栽生长情况
Figure 4 Growth situation of tissue culture seedling transplanting
of Hosta ventricosa

有利于诱导紫萼玉簪生根的基本培养基为
1/2MS 培养基,因为矿物质元素浓度过高时有利于
发展茎叶,而较低时有利于生根[9]。这与王春婷等[4]
研究相一致。在培养基中添加 NAA 可诱导根的形
成[9]。本试验研究结果认为在 1/2MS培养基中添加
0.3 mg·L-1NAA对诱导紫萼玉簪生根的效果最佳。
组培苗出瓶移栽是组培的最后一个环节,移栽
过程中除了控制环境条件外,移栽基质也尤为重要。
本试验选择的 4 种常用栽培基质配方中以珍珠岩+
腐殖土(1:3)成活率最高,长势最好。原因可能是
珍珠岩透气保水性好,腐殖土不仅透气保水还可提
供养分。以珍珠岩作为基质成活率也较高,但植株
长势一般,主要原因可能是珍珠岩透气保水性好,
有利于植株的成活,但不能提供养分。如以珍珠岩
作基质,在植株生长过程中浇灌营养液,是否可促
进植株生长,有待进一步研究。以细沙为基质,植
株成活率和长势均不好,主要原因可能是细沙保水
保肥力差,易板结,通气状况不良,从而不利于组
培苗根部的呼吸,降低成活率和生长。
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