全 文 :第 31 卷 第 12 期
2 0 1 3年 1 2 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 31 No. 12
Dec. 2 0 1 3
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江蓠残渣琼胶提取的方法研究
王平1,张俊杰2,谢捷1
(1.浙江工业大学药学院,浙江 杭州 310014;2.浙江中医药大学基础医学院,浙江 杭州 310053)
摘 要:目的:分别对新鲜江蓠及其浸提后残渣进行琼胶提取,通过比较,确定琼胶的制备方法。方法:琼胶
提取采用高温稀碱法。通过碱处理、漂白常压提胶、冻结、脱水和干燥过程系统地研究琼胶提取的工艺条件。结
果:实验数据表明,受到甲醇的影响,湿品的得胶率约为 5. 5%,比新鲜江蓠的提胶率 8. 5%要低。另外,色素几乎
被全部浸出,因此,只需漂白 1 次,甚至省略漂白步骤。结论:提胶的最佳碱处理条件是 6% NaOH、温度 80 ℃、处
理 1 h。漂白的条件是先用 0. 1%的次氯酸钠溶液中处理 10 min,然后用 0. 14%的草酸溶液处理 5 min,最后,水
洗至中性。
关键词:江蓠;残渣;琼胶;提取
中图分类号:R284. 3 文献标志码:A 文章编号:1673 - 7717(2013)12 - 2767 - 02
Research on Methods of Extracting Agar from Gracilari Residue
WANG Ping1,ZHANG Junjie2,XIE Jie1
(1. College of Pharmaceutical Sciences,Zhejiang University of Technology,Hangzhou 310014,Zhejiang,China;
2. College of Basic Medical Science,Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310053,Zhejiang,China)
Abstract:Objective:To respectively compare fresh Gracilaria and its residue for agar extraction to determine prepara-
tion method of Agar. Methods:Agar was extracted by alkali treatment,bleached plastic,atmospheric pressure,freezing,de-
hydration and drying. Result:Experimental data showed that under the influence of methanol,wet glue rate was about
5. 5%,lower than fresh gel rate of Gracilaria tenuistipitata 8. 5% . In addition,pigment was almost leaching,bleaching
only once,or even omitting the bleaching step. Conclusion:6% NaOH is the best alkaline treatment condition,temperature
of 80 ℃,1h. Bleaching conditions are using 0. 1% in sodium hypochlorite solution process 10 min and 0. 14% of oxalic
acid 5 min,and finally,washing to neutral.
Key words:Gracilaria;residue;agar;extraction
收稿日期:2013 - 07 - 10
基金项目:浙江省经贸委中药现代化专项资助项目(20040383) ;浙
江工业大学重中之重学科开放研究基金资助项目
(20060617)
作者简介:王平(1969 -) ,女,浙江金华人,教授,博士研究生导师,
博士,研究方向:天然产物化学。
通讯作者:张俊杰(1970 -) ,女,江苏连云港人,副教授,硕士研究
生导师,博士,研究方向:消化系统疾病的中医药临床与
实验研究。
江蓠属(Gracilaria)是大型底栖海藻,以“龙须菜”、“鹿
角菜”、“凤尾菜”等名称入药。古代药著描述该药生于东
南海边石上,味甘性寒,有软坚化痰、清热利水的功效[1]。
江蓠干重的 20% ~30%是琼胶[2],现在世界上约 60%的琼
胶是从江蓠中提取的。琼胶或其衍生物可作生物医学材
料、保健食品,并具抗病毒活性。但琼胶生产遗留的残渣量
十分惊人,平均每处理 1 t 江蓠就产生 1. 2 ~ 2. 0 t 的凝胶
状残渣,严重污染环境[3]。随着环保要求的日益严格,江
蓠琼胶生产中废渣排放量大的问题更为突出,因此,利用好
琼胶生产残渣不但可以减少其对环境的污染,还可以进一
步提高江蓠的利用价值。
我们通过研究江蓠不同萃取物对大鼠离体子宫平滑肌
的作用,发现乙酸乙酯萃取相对大鼠离体子宫平滑肌具有
明显的收缩作用(已另文发表)。同时对江蓠残渣进行二
次利用,从中提取琼胶,以期开发海洋药物或保健食品。
1 实验材料
1. 1 原料
宁波近海采集的新鲜江蓠,低温(- 20℃)储藏备用;
经甲醇浸提的江蓠残渣。
1. 2 试剂
甲醇、NaOH、NaClO、草酸(A. R.浙江永进化工有限公
司) ,均为化学纯。
1. 3 仪器设备
YY91037 -99型数显恒温水浴锅(金坛市岸头良友实验
仪器厂) ;SCD -229GA卧式透明门冷藏冷冻柜(上海岭御制
冷设备有限公司) ;TD21001天平(淄博森源电气有限公司) ;
TD2102天平(淄博森源电气有限公司) ;JB90 - D 型强力搅
拌器(上海隆拓仪器设备有限公司) ;GZX - 9240MBE 数显
鼓风干燥箱(上海沪粤明科学仪器有限公司)。
2 实验方法
2. 1 新鲜江蓠琼胶的提取
琼胶提取采用高温稀碱法[4 - 6],实验流程如下。
碱处理:碱处理的目的是使硫琼胶中的 L -半乳糖 - 6
-硫酸酯转化为 3,6 -内醚 - L -半乳糖,即脱去硫琼胶中
DOI:10.13193/j.issn.1673-7717.2013.12.058
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的硫酸基,增强凝胶的强度;另一方面,碱处理可引起琼胶
分子的降解,使部分琼胶溶于碱液而造成胶质的损失。因
此,碱浓度、处理温度和时间对江蓠琼胶的出胶率和凝胶强
度有较大影响。为了探讨江蓠琼胶最佳的碱处理工艺,本
文采用正交法探讨上述 3 个因素对琼胶产量和质量的影
响,各因素及水平见表 1。
表 1 碱浓度、温度和处理时间的正交设计
水平 A(碱浓度) B(温度) C(处理时间)
1 6% 80 ℃ 1 h
2 8% 85 ℃ 2 h
3 4% 90 ℃ 3 h
漂白:先将水洗至中性的江蓠放入 0. 1%的次氯酸钠
溶液中处理 10 min,然后,置于浓度为 0. 14%的草酸溶液
中处理 5 min,取出后再放入浓度为 0. 08%的草酸溶液中
处理 5 min,操作过程中江蓠从黄褐色逐渐漂洗成白色。最
后,将江蓠充分水洗近中性。
提胶:采用常压提胶法。温度设定为 100 ℃,分 3 次提
取,每次用水量为 10 倍江蓠体积。提胶过程中保持溶液的
轻度沸腾,第 1 次提胶时间为 2 h,后两次提胶时间为 1 h。
每次的提取液均用 2 层纱布过滤,合并滤液并将其平铺
于搪瓷盘中冷却、凝固。
冻结、脱水和干燥:滤液装搪瓷盘中冷却凝固后,置
于 4 ℃预冷 4 h,然后再放置 - 20 ℃冰箱冻结。待完全
冻透后取出,室温下解冻脱水。然后,胶质用 95%乙醇
浸洗 1 h,取出挤干,放置 40 ℃干燥箱干燥 4 h。称重,
计算湿品产率。
2. 2 江蓠残渣琼胶的提取
以甲醇浸提过的江蓠为原料进行提胶,碱处理的条件
不变:6% NaOH、温度 80℃、处理 1h。
3 实验结果
3. 1 碱浓度、温度和处理时间对江蓠出胶率的影响
结果表明,A3B3C2组合的琼胶产率虽然更高,但透明度
却很差,因此提胶的较好条件组合是 A1B1C1。在该条件下,
以湿重计算,新鲜江蓠的出胶率约 8. 5%。结果见表 2。
表 2 碱浓度、温度和处理时间对江蓠出胶率的影响
项目 A B C 琼胶产量(g) 产率(%)
1 1 1 1 1. 69 8. 45
2 1 2 2 1. 34 6. 70
3 1 3 3 1. 40 7. 00
4 2 1 2 藻体与琼胶难以分离 -
5 2 2 3 藻体与琼胶难以分离 -
6 2 3 1 藻体与琼胶难以分离 -
7 3 1 3 1. 45 7. 25
8 3 2 1 1. 50 7. 50
9 3 3 2 2. 00 10. 00
注:产率以江蓠湿重计算。
3. 2 江蓠残渣的出胶率
以甲醇浸提过的江蓠为原料进行提胶,碱处理的条件
不变:6% NaOH、温度 80℃、处理 1h。如表所示,江蓠残渣
的得胶率约为 5. 5%。出胶率见表 3。
4 讨 论
江蓠的养殖能缓解鱼饲料问题,促进沿海地区经济的
表 3 江蓠残渣的出胶率
江蓠残渣湿重(g) 琼胶产量(g) 得胶率(%) 纤维残渣(g)
20 1. 03 5. 15 1. 85
20 1. 17 5. 82 1. 43
20 1. 12 5. 56 1. 64
发展,另一方面,也能解决海水富营养化问题[7]。我们前
期的研究将江蓠醇提浸膏经醇沉和乙酸乙酯及正丁醇的连
续萃取,获得醇不溶部分、醇溶部分及 4 种不同的萃取部
位。从江蓠中分离到的活性成分对离体子宫平滑肌的收缩
具有明显的兴奋作用,提示其具有抗早孕功效,可用于相关
海洋药物的研制[8]。
此次实验分别对新鲜江蓠及其浸提后残渣进行了琼胶
提取,由于检测条件的有限,我们通过估计琼胶的产量和观
察外观透明度来确定提胶条件的最佳组合。从正交表可得
以下结论。
①碱浓度是一个很重要的影响因素。用 8%的碱浓度
提胶,不仅胶质返黄,更重要的是江蓠藻体与琼胶液很难过
滤分离,分析原因可能是 8%的碱浓度相对于常压提胶来
说太高了,易造成藻体碎烂,过滤操作困难。因此,可尝试
蒸汽压力提胶后,藻体和胶质是否比较容易过滤,如果藻体
与胶质易分离,可再考察该浓度条件下的出胶率和胶质强
度。
②常压提胶条件下,以碱浓度 6%、温度 80℃和时
间 1h的条件进行处理,其结果比较理想。A3B3C2 组合
的琼胶产率虽然更高,但透明度却很差,因此提胶的较
好条件组合是 A1B1C1。实验数据表明,在该条件下,以
湿重计算,新鲜江蓠的出胶率约 8. 5%。受到甲醇的影
响,湿品的得胶率约为 5. 5%,比新鲜江蓠的提胶率要
低。此外,在实验过程中发现,由于江蓠在甲醇溶液中
已浸出大量的色素,因此,残渣颜色很浅,只需漂白 1
次,甚至省略漂白步骤,以减少氯气的污染和节约成本。
最后剩余的藻体残渣可用于制备各种纤维食品,从而使
江蓠得到一个良好的综合利用。
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