全 文 ：!世纪，洋兰将成为未来花卉发展的主流，是
世界花卉产业化中最典型的花卉品类。为了使我
国加入 #$% 之后，洋兰产业在激烈的市场竞争
中，求得生存与发展，必须必须重视所选择洋兰的
品种和品质。蝴蝶石斛兰，作为世界洋兰四大名花
之一，由于它的花朵鲜艳夺目，花期长，深受消费
者的青睐。但是长期以来，蝴蝶石斛兰的种苗大多
是从外国或台湾省进口，费用高。国内只有少量的
种苗供应市场，品种单调。对从外国引进的优良单
株，靠常规分株繁殖方法远远不能满足快速发展
的需要。利用现代生物离体培养技术进行工厂化
育苗，是“花卉工业”必不可少的环节。为此，我们
文章编号：&&’()’’*（!&&!）&+(&&!!(&* ,,,中图分类号：-.’!/+,,,,,,,,,,,,,,, 文献标识号：0
蝴蝶石斛兰工厂化育苗技术的研究
黄志明 ,，林庆良 !,，佘慧敏 +
1,/,莆田学院 资源环境系，福建 莆田 +*&&；!/,福建农林大学 园艺学院，福建 福州 +*&&!；
+/,莆田市园林管理处，福建 莆田 +*&&,2
关键词：蝴蝶石斛兰；工厂化育苗；离体培养；原球茎
摘 要：研究蝴蝶石斛兰工厂化育苗技术，实验结果表明：茎尖诱导的最适宜培养基为 3#450,67894:00;
6789；原球茎增殖培养基以 3#450,!/*67894:00,6789 为佳；降低培养基 50 浓度至 6789 可以明显提高
芽苗的质量；芽苗生根壮苗培养基以 3#4 香蕉汁 &<为佳，试管苗移栽成活率达 =&<以上。还对蝴蝶石斛兰离
体快速繁殖技术的应用价值进行讨论。
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收稿日期：!&&!(&.(!f
作者简介：黄志明（=*!(;），男，福建莆田人，讲师。
第 = 卷 第 + 期 ! # $ # % 3OH/=;;:O/+
!&&! 年 =;月 !#$%&’ ( )#* +&% ,%+-.$/+*0 -MV/;;!&&!
第 !期 黄志明，等：蝴蝶石斛兰工厂化育苗技术的研究
对蝴蝶石斛兰茎尖离体培养和工厂化生产进行了
探索性研究。
###材料与方法
供 试 材 料 为 蝴 蝶 石 斛 兰 $!#$%&’()*
+,-.-#&/0(0%未展叶的嫩芽（见图 ），先用肥皂
水泡洗后，自来水冲洗 &’—!’ 分钟，消毒方法采
用一次法或两次法。材料用消毒剂消毒后，无菌水
冲洗三次，用解剖刀和镊子，剥去外层的苞叶(二
次法即再用消毒剂消毒、无菌水冲洗三次%，切取
带有基部的茎尖，接种在预先配制好的培养基中。
基本培养基采用 )*、+,、)-，附加不同浓度的
./、0//和有机物。每升加 &’1 的砂糖 、1 的活
性碳、琼脂 ’234、56728。培养室光照 &9，光照强
度为 ’’’:;<、温度控制在 &7—&8!之间。试管苗
移栽基质用水草、细树皮、椰子块。穴盘种植，每穴
一株，二个月后统计成活率。
图 =##蝴蝶石斛兰的母株
（)>?@AB>:==C:>B?==DE==F@BGADHI;J==C9>:>@BDCIK）
&===结果与分析
&2==不同消毒方法的比较
为了取得无菌材料，材料的消毒是第一关。消
毒时间太长、会引起材料坏死；消毒时间太短，又
会引起材料污染。由于优良单株的嫩芽数量有限，
寻找合适的消毒方法是至关重要的。所以，我们设
计了几种消毒方法进行比较，接种 &7 天后，茎尖
已经开始萌动（见图 &）时，统计污染情况，其结果
见表 。
图 &===从茎尖诱导出来的小芽
（LI??:@==H;G==H@IB1==IBG;M@G==EADJ==IKD:>?@G==K9DD?==?IC）
表 ==不同消毒方法对蝴蝶石斛兰嫩芽的影响 N
#N+,O./#J1PL#O0//#J1PL(下同%
######从表 可以看出，用 ’24升汞比 ’4次氯酸
钠消毒效果好。二次消毒法比一次消毒法效果更
好。最好的成活率可以达到 8’4。
&2&###不同基本培养基对芽的诱导的效应
我们设计 )*、+,、)- 三种不同的基本培养
基，附加 ./&O0//’27，对外植体诱导的无菌球胚进
行培养，每个球胚切割后放在一起，作为一个外植
体 Q7天后，统计生长情况，结果见表 &。
表 &###不同基本培养基对芽诱导的效应
从表 & 可以看出，三种基本培养基对增殖倍
数无显著性差异。但是，从球胚长势及大小来看
+, 比 )* 和 )- 略好些，加上 +, 的成份相对
简单成本低。所以，我们认为用 +, 作为基本培养
消毒方法
外植体
数（个）
成活数
（个）
坏死数
（个）
污染数
（个）
成活率
(#4#%第一次 第二次
’24升汞
7 分钟
’24升汞
! 分钟
’ 8 8’
’4次氯酸
钠 ’ 分钟
’4次氯酸
钠 7 分钟
’ ! ’ 3 !’
’4次氯酸
钠 ’ 分钟
’# 24升 汞
!#分钟
’ 3 ’ ! 3’
’24升汞
!#分钟
’ 7 ’ 7 7’
基本
培养基
外植体数 球胚个数 增殖倍数
R’2’7## 备注
! ! ! S
)* !’ !’ T! &’’ U2Q! U2U3 U277 > 球胚小
)- !’ !’ 8T TQ U2!’ U2Q3 U2!8 > 球胚小
+, !’ !’ T& 8Q U2Q’ U2! U2&3 >
球胚大并
形成芽苗
&!
莆 田 学 院 学 报 !!年 #月
基比较合适。
!$%&&&不同附加物对芽增殖的影响
采用无菌的小球胚进行切割后，每个小球胚
切片接种在一起，为一个外植体每个处理组合重
复一次，培养 ’( 天后，进行统计生长情况，其结果
见表 %。
表 %&&&不同附加物对球胚增殖和芽苗生长的影响
)!#$!% *+
根据表 % 的试验结果，对不同附加物对球胚
增殖倍数的影响，进行 , 测验，其结果见表 ’。
表 ’-&&不同附加物对球胚增殖的方差分析表
从表 ’ 看，重复间无显著性差异，处理间有着
明显的差异，其中以 .// 和 0/ 最为明显，.//
与 0/的交互作用不大。为此，我们对 .// 和 0/
分别进行了新复极差测验，其结果见表 (和表 1-。
从表 ( 看，增殖倍数与 0/ 浓度成正相关，浓
度越高、增殖倍数也越高。0/!$(比 0/!和 0/2均
达到极显著水平。0/!和 0/2只达到显著水平。
从表 1 看，.//2-与 .//$( 在增殖倍数上的
差异达到极显著水平。
表 (---不同 0/ 浓度的显著性测验
表 1---不同 .// 浓度的显著性测验
从芽苗的生长情况进行方差分析见表 3。
表 3---不同附加物对芽苗的生长情况的方差分析表
从表 3 可以看出，重复间显著差异，处理间达
到显著水平。其中以 0/ 的浓度影响最大达显著
性水平，.// 和 0/).// 均达不到显著性差异。
为此我们对 0/ 的不同浓度用新复极差测验，其
结果见表 4。
表 4---不同 0/ 浓度的显著性测验
从表 4 来看，基本符合随 0/ 随着浓度降低，
成苗率提高的规律。这与诱导分化需要相对较高
激素。而幼苗生长需要相对较低激素的论点相一
致526。从表 4中还可以看出，0/2与 0/!和 0/&!$(之
间的差异均达到显著性水平。0/2与 0/!$(的差异
达到极显著水平，0/!与 0/!$(无显著性差异。
附加物种
类与浓度
（!789&
外植体 球胚个数 增殖倍数 2以上的苗数
! ! ! : ! :
0/2&
;.//$(
% % 241 2#2 1$! 1$%3 1$!4 2! 2%( 2!3$(
0/2&
;.//2
% % !3 !! 1$# 3$%% 3$2! 2(% 2!2 2%3$
0/!&
;.//$(
% % 2#% !1 1$’% 1$43 1$1( 2! 22% 23$(
0/!&
;.//2
% % !!% !%4 3$’% 3$#% 3$14 2( #4 22$(
0/!$(&
;.//$(
% % !! !2’ 3$%% 3$2% 3$!% 4% 42 &4!
0/!$(&
;.//2
% % !’( !(% 4$23 4$’% 4$% # 3# &4’$(
变异来源 <, == >= , ,$(
重复间 2 $!2 $!2 1$(1 1$1
处理间 ( ($2# 2$’ %!$(? ($(
.// 2 !$44 !$44 #$? 1$1
0/ ! !$!4 2$2’ %($1%? ($3#
.//?0/ ! $% $2( $’3 ($3#
误差 ( $21 $%!
总变异 22 ($(1
0/@AB789 平均增殖倍数
显著性测验
(C 2C
!$( 3$33 D /
! 3$23 E 0
2 1$3 F G
.// 平均增殖倍数
显著性测验
(C 2C
2 3$3 D /
$( 1$3! E 0
变异来源 <, == >= , ,$(
重复间 2 (1$%’ (1$%’ $%# 1$1
处理间 ( ’#1!$13 ##!$(% 1$#%? ($(
0/ ! ’4%$23 !’2($# 21$43? ($3#
.// 2 2!$ 2!$ $4 1$1
.//?0/ ! 2!$( 1$!( $’! ($3#
误差 ( 32($11 2’%$2%
总变异 22 (3%’$13
0/HAB7I9 苗数（2JA 以上）
差异显著性
(C 2C
2 2%!$% D /
! 2’$( E /0
% 4%$% E 0
!’
第 !期 黄志明，等：蝴蝶石斛兰工厂化育苗技术的研究
#$%%不同培养基对壮苗的影响
对试管移栽苗来说，苗长势的好坏、壮、弱，直
接影响到移苗的成活率。为此，我们设计了几种壮
苗培养基，其结果见表 &。
表 &%%%不同培养基对试管苗生长的影响
备注：’ 级为苗高 () 以上，有点假球茎。
%* 级为 () 以下，无假球茎。
从表 &来看：以 +,- 香蕉 ./0为最好，’级
比率占 1!#234。在 56 和 +, 分别加上马铃薯
./4，两者 ’ 级比率很接近，这说明 56 和 +, 两
种基本培养基对壮苗影响不大。而 56-*’.-7
8’’/#9培养基中，’级比率只达到 $3#234。可见
用马铃薯汁或香蕉汁对蝴蝶石斛兰壮苗有明显的
促进作用。
#9%%%试管苗移栽
当试管苗长至 ()以上，即可将瓶苗搬到大
棚内，利用自然光进行练苗 ./—.9 天。用镊子轻
轻地将苗取出，放在水中清洗掉根部的培养基，再
用 ./// 倍的代森锰锌消毒 9 分钟，取出后，凉干。
为了寻找合适的移栽基质，我们作了几种不同基
质对比实验，个月后，观察其生长情况，统计成活
率，其结果见表 ./。
表 ./%%%不同基质对蝴蝶石斛兰瓶苗移栽成活率的影响
从表 ./ 可以看出、基质用水草相对比细树皮
和椰子块来的好，不但成活率高，而且，苗的长势
好。细树皮次之，椰子块最差。
!%%%%讨论
去年:蝴蝶石斛兰在年花市场上，开花株每棵
批发价 $/—9/ 元，由于数量有限供不应求。 近几
年，在国内发展蝴蝶石斛兰将是商家的明智选择。
为了迎接蝴蝶石斛兰发展高潮的到来，首先必须
培育大量的优良种苗供应市场。为此，我们通过对
蝴蝶石斛兰茎尖离体培养的研究结果认为，要做
好蝴蝶石斛兰工厂化育苗，必须注意以下几个方
面：.;材料必须选择优良单株的嫩芽<9() 以下;为
好。;外植体消毒采用 /#.4癉汞的二次消毒法最
理想，成活率可达 1/4。!;三种基本培养基对球胚
增殖倍数无显著性差异。但是，从球胚长势、芽苗
的生长情况以及培养基的成本核算 进行综合分
析，我们认为，以 +, 作为基本培养较理想。$;在
+, 附加不同的激素组合来看，以 *’#9-8’’. 对
增殖倍数最好，平均达到 1#! 倍（见图 !），但是，从
苗数<.() 以上;来看，又以 *’.-8’’.为最好。所
以，我们认为，在增殖初期，以 *’#9-8’’.作为增
殖培养基为好。瓶苗达到一定数量，增殖系数不是
主要问题时，可采用 *’.-8’’.作为增殖培养基
为好:这可以为下一步的生根壮苗提供良好的芽苗
（见图 $）。9;从不同附加物对芽苗的生根壮苗的情
况来看，以 +,- 香蕉汁 ./4对壮苗最为理想，
() 以上的瓶苗可达 1!#234。加与不加天然有机
物，对壮苗有着明显的差异。2;从不同基质的对比
试验看，以水草为好，成活率可达 &$#94。而且苗
的长势好<见图 9;。不过移苗的成活率除了基质之
外，还应该注意瓶苗的质量，移栽的季节和条件，
以及移栽后的栽培管理。在有控温条件的地方，一
年四季均可移栽。在没有条件的地方，靠自然气
候，以 9—2月和 &—..月移栽为好。
图 !%%%原球茎的增殖
（=>?77@AB@CDCEFBG77BH77@ABEB(BA)IJFK?7LBMF?N）
培养基
接种数
（株）
苗质量 ’级占
<4;
*级占
<4;’级 *级
+,- 马铃薯 ./4 2// $$1 .9 3$#23 9#!!
+,- 香蕉汁 ./4 2// 9/ &1 1!#23 .2#!!
56- 马铃薯 ./4 2// $99 .$9 39#1! $#.3
56-*’-8’’/#9 2// 12 !.$ $3#23 9#!!
基 质 移栽株数 成活株数 成活率<4; 苗长势
水 草 // .1& &$#9 壮
细树皮 // .13 &!#9 中
椰子块 // .3/ 19#/ 弱
9
莆 田 学 院 学 报 !!年 #月
图 $%%%芽苗的增殖（&’(%%)*+),-,./+0%%+1%%2’++.2）
图 3%%%移栽成活的蝴蝶石斛兰瓶苗
（&’(%%24*5/5,6%%.47(%%)6,0.6(.2%%+1
%!#$%&’()* +,-.-#&+/(/）
通过离体培育蝴蝶石斛兰试管苗的方法，从
报道的材料看，大多数是经过愈伤组织、拟原球
茎、芽、植株四个步骤89:$;。但是对优良品种或单株
而言，要保持母本性状，采用以上四个环节是不可
取的。 通过诱导愈伤组织再分化，往往会产生变
异83:<;。本研究是不经过愈伤组织，直接诱导植株或
拟原球茎，通过拟原球茎或芽增芽方式扩大增殖，
这样可以减少变异，保持优良品种的特性，这在生
产上具有现实的应用价值。
参考文献：
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速繁殖的研究8>;=%浙江农业学报，9##9，?@9A：?$:?B=
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8?;% C4F46JP,0F,%%%%CE%%Q+RJ/(J’+H2F,%%%S=%% T*+),-,./+0%%% +1%%
.H+% !#$%&’()* /+0(/ 7U (# 1(2%& J46.4*( 8>;=%
KJ.J%%%%V+*./J46.4*(,%%% (# 1(2%& %J46.4*(， 9#B?，9?9：
93:99=
8$;% G,-,H,%%%%% I% E%%%% G’+R/%%%% &% =%%% W6+0,6%%%% )*+),-,./+0%%%% +1
!#$%&’()* .’*+4-’%% 2’++.%% D(*/2.(D%% J,6.4*( 8>;=%
KD(*%%%L*J’/M%%%%G+J%%N466%E%9#X
志，!，!3YXA：?!?:?!X=
8X;%曾宋君E%程式君=五种石斛兰的胚培养及其快速繁殖研
究8>;=%园艺学报，9##B，!3Y9A：<3:B=
8<;%陈振光 =%园艺植物离体培养 8Z;=%北京：中国农业出版
社，9##X=%9B!:9B<=
8%责任编辑 林振梅 ;%%%%%%%%%
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